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檢測(cè)原理詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)優(yōu)選檢測(cè)原理目前二頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)XE-SERIES血液分析儀器基本性能機(jī)型XE-2100XT-1800iXS-800iSF-3000速度150t/h80t/h60t/h80t/h閉蓋全血200ul150ul------270ul開蓋全血130ul85ul20ul170ul預(yù)稀釋40ul40ul20ul40ulCBC全血/預(yù)稀釋全血/預(yù)稀釋全血/預(yù)稀釋全血/預(yù)稀釋DIFF全血全血全血/預(yù)稀釋全血IMI全血---------------NRBC全血---------------RET全血/預(yù)稀釋(113t/h)---------------目前三頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)檢測(cè)原理---標(biāo)本檢測(cè)流程WBC/BASO:流式原理;NRBC、4DIFF、RET:

流式細(xì)胞技術(shù)和核酸熒光染色技術(shù);IMI:使用射頻/直流電技術(shù)和流式細(xì)胞技術(shù);RBC/PLT利用液流聚焦電阻抗技術(shù);HGB:SLS原理。目前四頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)核酸熒光染色技術(shù):SYSMEX公司采用聚次甲基和堊嗪作為核酸熒光染料,細(xì)胞經(jīng)過特殊溶血素的處理,熒光染料可以快速進(jìn)入胞漿和胞核對(duì)核酸染色,細(xì)胞內(nèi)的熒光染料在633nm激光的激發(fā)下產(chǎn)生一定的熒光強(qiáng)度,這種熒光強(qiáng)度與細(xì)胞的核酸含量成正相關(guān),熒光染色后,熒光強(qiáng)度大小依次排列順序?yàn)椋寒愋土馨图?xì)胞>原始細(xì)胞/幼稚粒細(xì)胞>單核細(xì)胞>淋巴細(xì)胞>粒細(xì)胞/晚幼紅細(xì)胞>網(wǎng)織紅細(xì)胞/網(wǎng)織血小板/聚集血小板>成熟紅細(xì)胞/成熟血小板。目前五頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)流式細(xì)胞技術(shù)

待測(cè)血樣稀釋成單個(gè)細(xì)胞懸液,細(xì)胞經(jīng)過快速特異性核酸熒光染色,在鞘液的約束下,排成單列由流動(dòng)室的噴嘴噴出,通過測(cè)量區(qū)的細(xì)胞在垂直入射的激光束照射和激發(fā)下,產(chǎn)生前向散射光(FSC)、側(cè)向散射光(SSC)、側(cè)向熒光(SFL)。FSC主要反映細(xì)胞的大小,SSC主要反映細(xì)胞內(nèi)顆粒物質(zhì)的大小和多少,SFL主要反映細(xì)胞的核酸含量的多少。目前六頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)射頻(RF)/直流(DC)電技術(shù)RF/DC檢測(cè)技術(shù),通過直流電阻的變化測(cè)定血細(xì)胞的大小,并通過射頻電阻測(cè)定血細(xì)胞內(nèi)的密度。圖四顯示的是一個(gè)白細(xì)胞的RF/DC信號(hào)。在IMI通道中,RF/DC技術(shù)主要用來檢測(cè)幼稚髓細(xì)胞,越幼稚的細(xì)胞密度越小。

RF信號(hào)大小依次順序是:桿狀核粒細(xì)胞>幼稚粒細(xì)胞>原始髓細(xì)胞>造血干祖細(xì)胞(包括HPC)。目前七頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)液流聚焦電阻抗技術(shù)液流聚焦技術(shù)是流式細(xì)胞術(shù)中的一種技術(shù),利用液體層流將使細(xì)胞排成單列通過檢測(cè)孔,圖五中,前鞘流保證細(xì)胞單個(gè)通過檢測(cè)孔,避免細(xì)胞與細(xì)胞重疊通過檢測(cè)孔;后鞘流避免液體返流,避免細(xì)胞隨著返流液體再次通過檢測(cè)孔。利用液流聚焦技術(shù)可以使細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果更加準(zhǔn)確,重復(fù)性更好。在檢測(cè)孔,細(xì)胞將得到阻抗信號(hào),由于細(xì)胞是一個(gè)不良導(dǎo)體,細(xì)胞越大,阻抗信號(hào)越大,阻抗信號(hào)反映細(xì)胞的大小信息。目前八頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)SLS(十二烷基磺酸鈉)法原理:1,紅細(xì)胞溶解釋放血紅蛋白;2,改變血紅蛋白結(jié)構(gòu);3,氧化二價(jià)鐵為三價(jià)鐵;4,形成SLS-Hb化合物。SLS-Hb在535nm有最大吸收峰,根據(jù)朗伯比爾定律將535nm處SLS-Hb的吸光度換算成血紅蛋白濃度。SLS法具有無毒的優(yōu)點(diǎn),而且與國際參考方法氰化高鐵血紅蛋白法具有很好的相關(guān)性。目前九頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)XE系列試劑英文名稱中文名稱作用CELLPACK稀釋液RBC/PLT/HGB檢測(cè)CELLSHEATH鞘流液前鞘流、后鞘流STROMATOLYSER-FB嗜堿通道溶血素溶解出嗜堿細(xì)胞以外的白細(xì)胞為裸核STROMATOLYSER-4DL白細(xì)胞分類溶血素溶解紅細(xì);在白細(xì)胞膜上打孔STROMATOLYSER-4DS白細(xì)胞分類染液核酸染色STROMATOLYSER-NR(溶血素)有核紅細(xì)胞通道溶血素溶解有核紅細(xì)胞為裸核STROMATOLYSER-NR(染液)有核紅細(xì)胞通道染液核酸染色SULFOLYSER紅細(xì)胞溶血素HGB檢測(cè)STROMATOLYSER-IMIMI通道溶血素溶解成熟白細(xì)胞RETSEARCH(II)(稀釋劑)網(wǎng)織紅細(xì)胞通道稀釋液RET檢測(cè)RETSEARCH(II)(染液)網(wǎng)織紅細(xì)胞通道染液核酸染色目前十頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)白細(xì)胞檢測(cè)原理DIFF通道WBC/BASO通道IMI通道NRBC通道目前十一頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)DIFF通道4DL

完全溶解紅細(xì)胞血小板在白細(xì)胞膜上打孔4DS

對(duì)核酸染色縱坐標(biāo):側(cè)向熒光(SFL)反映核酸含量橫坐標(biāo):側(cè)向散射光(SSC)反映細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度目前十二頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)試劑反應(yīng)(Ⅰ)目前十三頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)試劑反應(yīng)(Ⅱ)目前十四頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)試劑反應(yīng)(Ⅲ)目前十五頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)目前十六頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)DIFF通道的重要信息異常細(xì)胞:幼稚粒細(xì)胞、原始細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、瘧原蟲抗干擾能力強(qiáng),WBC更加準(zhǔn)確:難溶紅細(xì)胞、聚集血小板、脂質(zhì)顆粒目前十七頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)異型淋巴細(xì)胞,原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞異型淋巴細(xì)胞:病毒、原蟲等刺激下,胞體體增大、胞質(zhì)增多、嗜堿性增強(qiáng),細(xì)胞核母細(xì)胞化。散點(diǎn)圖上熒光強(qiáng)度最強(qiáng)幼稚粒細(xì)胞:RNA的合成隨著細(xì)胞的程度而逐漸減少,即細(xì)胞越幼稚,RNA越多,散點(diǎn)圖上熒光強(qiáng)度越高原始細(xì)胞:一般情況下,五種白細(xì)胞不能正常分類,時(shí)OTHER區(qū)域一般為原始細(xì)胞幼稚粒細(xì)胞異常淋巴嗜酸中性單核淋巴嗜堿目前十八頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)瘧原蟲散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖特征:嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏目前十九頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)有核紅細(xì)胞晚幼紅細(xì)胞核固縮,細(xì)胞簡(jiǎn)單,因此在淋巴細(xì)胞的正下方。目前二十頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)難溶紅細(xì)胞和脂質(zhì)顆粒、血小板聚集難溶紅細(xì)胞表現(xiàn)為白細(xì)胞群下方有大量散點(diǎn)出現(xiàn),并且部分顯示為淡蘭色(和白細(xì)胞相同的顏色)脂質(zhì)顆粒在散點(diǎn)圖上表現(xiàn)為胡須狀當(dāng)出現(xiàn)難溶紅細(xì)胞和脂質(zhì)顆粒的時(shí)候,WBC-BASO受到干擾,不準(zhǔn)確。此時(shí)WBC-DIFF利用核酸熒光染色技術(shù)可以排除這些干擾,因此比較準(zhǔn)確聚集的血小板在兩個(gè)通道內(nèi)都顯示在GOHST區(qū)域,不會(huì)影響WBC目前二十一頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)WBC/BASO通道STROMATOLYSER-FB

完全溶解紅細(xì)胞血小板除嗜堿細(xì)胞以外的白細(xì)胞溶解為裸核嗜堿細(xì)胞保持原狀縱坐標(biāo):前向散射光(FSC)反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo):側(cè)向散射光(SSC)反映細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度嗜堿其他白細(xì)胞目前二十二頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)IMI(Theimmaturemyeloidinformation)通道STROMATOLYSER-IM

溶解紅細(xì)胞血小板、成熟白細(xì)胞粒系幼稚細(xì)胞保持原狀縱坐標(biāo):射頻(RF)反映細(xì)胞密度橫坐標(biāo):直流電(DC)反映細(xì)胞大小中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核目前二十三頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)紅細(xì)胞檢測(cè)原理RBC/PLT通道RET通道NRBC通道目前二十四頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)RBC/PLT通道雙鞘流阻抗法浮動(dòng)界標(biāo)RDW-SD

假設(shè)峰值高度為100%,在20%頻率水平上的分布寬度即為RDW-SD。單位用fL表示。RDW-CV

點(diǎn)L1和L2在總分布區(qū)域中的出現(xiàn)頻率為68.26%,使用下列方程計(jì)算

RDW-CV=(L2-L1)/(L2+L1)目前二十五頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)RET/PLT-O通道RETSEARCH(II)稀釋劑稀釋標(biāo)本RETSEARCH(II)染液對(duì)核酸染色縱坐標(biāo):前向散射光(FSC)反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo):側(cè)向熒光(SFL)反映核酸含量LFRMFRHFRWBCRBCPLT目前二十六頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)瘧原蟲核酸含量略少于低熒光強(qiáng)度的網(wǎng)織紅細(xì)胞目前二十七頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)NRBC通道NR溶血素完全溶解紅細(xì)胞血小板白細(xì)胞保持原狀有核紅細(xì)胞溶解為裸核NR染液對(duì)核酸染色縱坐標(biāo):前向散射光(FSC)反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo):側(cè)向熒光(SFL)反映核酸含量NRBCWBC目前二十八頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)修正WBCEoBaMoNeLyNRBCNRBC扣除扣除修正WBC修正分類扣除目前二十九頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)血小板檢測(cè)原理RBC/PLT通道RET通道目前三十頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)RBC/PLT通道雙鞘流阻抗法浮動(dòng)界標(biāo)PDW

假設(shè)峰值高度為100%,在20%頻率水平上的分布寬度即為PDW。單位用fL表示。P-LCR

由12fL界標(biāo)得到的巨型血小板的比值。計(jì)算時(shí),將固定界標(biāo)與高界標(biāo)之間的粒子數(shù),同低界標(biāo)與高界標(biāo)之間的粒子數(shù)相比而得到一個(gè)比值。目前三十一頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)RET/PLT-O通道PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT計(jì)數(shù)無效PLT-I報(bào)告PLT-O報(bào)告NoNoYesYes目前三十二頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)PLT-I向PLT-O轉(zhuǎn)換規(guī)則PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT計(jì)數(shù)無效PLT-I報(bào)告PLT-O報(bào)告NoNoYesYesPLT-I由PLT直方圖獲得PLT-O由RET散點(diǎn)圖獲得目前三十三頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)(2)PL(%)>9%(3)PU(%)>39%(4)PU<23fLandPU>20%(1)RL(%)>10%目前三十四頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)(5)出現(xiàn)“Fragments?”報(bào)警(6)出現(xiàn)“RBCAgglutination?”報(bào)警(7)PU%>13%andPLT35fL>45%andPLT-I#>=80x109/L(8)PLT-I<50x109/L(9)PLT-I/PLT-O>115%如果WBC碎片在PLT-O計(jì)數(shù)中出現(xiàn),PLT計(jì)數(shù)無效:PLT“----”目前三十五頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)報(bào)警原理復(fù)檢規(guī)則Suspectabnormal目前三十六頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)IP信息的來源散點(diǎn)圖直方圖SFLSSCFSCSSCRFDCFSCSFLFSCSFL目前三十七頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)DIFFWBC/BAIMINRBCWBC報(bào)警懷疑/異常RETRBC_DCRBC/RET報(bào)警懷疑/異常DIFFPLT_DCRBC_DCIMIRET(Plt-O)PLT報(bào)警懷疑/異常目前三十八頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)IP信息解釋白細(xì)胞<Abnormal>報(bào)警項(xiàng)目中文信息來源WBCAbnScattergramNRBCAbnScattergramNeutropeniaNeutrophiliaLymphopeniaLymphocytosisMonocytosisEosinophiliaBasophiliaLeukocytopeniaLeukocytosisNRBCpresent白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常有核紅細(xì)胞散點(diǎn)圖異常中性粒細(xì)胞減少中性粒細(xì)胞增多淋巴細(xì)胞減少淋巴細(xì)胞增多單核細(xì)胞增多嗜酸細(xì)胞增多嗜堿細(xì)胞增多白細(xì)胞總數(shù)減少白細(xì)胞總數(shù)增多出現(xiàn)有核紅細(xì)胞DIFF/BASO散點(diǎn)圖NRBC散點(diǎn)圖NEUT#<1.00x109/L(or%setting)NEUT#>11.00x109/L(or%setting)LYMPH#<0.80x109/L(or%setting)LYMPH#>4.00x109/L(or%setting)MONO#>1.00x109/L(or%setting)EO#>0.70x109/L(or%setting)BASO#>0.20x109/L(or%setting)WBC<2.50x109/LWBC>18.00x109/LNRBC%>2%目前三十九頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)Ne/EoLy/Ne2Lym/GstLy/Mo2Ly/Mo2Ly/BaMo/Ne1Ne/GstMo/Eo白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常細(xì)胞族群之間邊界不清邊界顆粒達(dá)到一定數(shù)量觸發(fā)規(guī)則Gst/NLMEBas/NLMENLME:不包括BASO目前四十頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)有核紅細(xì)胞散點(diǎn)圖異常NRBCWBCGOST1Pltclumps細(xì)胞族群之間邊界不清邊界顆粒達(dá)到一定數(shù)量觸發(fā)規(guī)則目前四十一頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)IP信息解釋白細(xì)胞<Suspect>報(bào)警項(xiàng)目中文信息來源Blasts?ImmatureGran?LeftShift?AtypicalLympho?AbnLympho/L-Blasts?NRBC?RBCLyseresistance?原始細(xì)胞?幼稚粒細(xì)胞?核左移?異型淋巴細(xì)胞?異常淋巴/原始淋巴細(xì)胞?有核紅細(xì)胞?紅細(xì)胞溶解不全?DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF散點(diǎn)圖DIFF,WBC/BASO散點(diǎn)圖目前四十二頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)原始細(xì)胞?觸發(fā)規(guī)則:在散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量。原始細(xì)胞中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核目前四十三頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)幼稚粒細(xì)胞?觸發(fā)規(guī)則:在散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量。幼稚粒細(xì)胞中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核目前四十四頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)核左移?觸發(fā)規(guī)則:在散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量桿核中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核目前四十五頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)異型淋巴細(xì)胞?觸發(fā)規(guī)則:在DIFF散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量and

在IMI通道IG和BLAST區(qū)域無散點(diǎn)異型淋巴細(xì)胞中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核目前四十六頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)異常淋巴/原始淋巴細(xì)胞?觸發(fā)規(guī)則:在DIFF散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量and在IMI通道IG和BLAST區(qū)域無散點(diǎn)異常淋巴中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核目前四十七頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)有核紅細(xì)胞?觸發(fā)規(guī)則:在DIFF散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量有核紅細(xì)胞目前四十八頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)紅細(xì)胞溶解不全?觸發(fā)規(guī)則:在DIFF散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量orWBC-BASO/WBC-DIFF比例大于閾值難溶紅細(xì)胞WBC-BASOWBC-DIFF目前四十九頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)IP信息解釋紅細(xì)胞<Abnormal>報(bào)警項(xiàng)目中文信息來源RBCAbnDistributionDimorphicPopulationRETAbnScattergramReticulocytosisAnisocytosisMicrocytosisMacrocytosisHypochromiaAnemiaErythrocytosis紅細(xì)胞分布異常雙峰網(wǎng)織紅細(xì)胞散點(diǎn)圖異常網(wǎng)織紅細(xì)胞增多紅細(xì)胞大小不均小紅細(xì)胞癥巨紅細(xì)胞癥血紅蛋白減少貧血紅細(xì)胞增多紅細(xì)胞直方圖紅細(xì)胞直方圖RET散點(diǎn)圖RET%>0.05orRET#>200x109/LRDW-SD>65fLorRDW-CV>0.20MCV<70fLMCV>110fLMCHC<290g/LHGB<100g/LRBC>6.50x1012/L目前五十頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)紅細(xì)胞分布異常觸發(fā)規(guī)則:

RL(%)>10%orRU(%)>5%orRDW-SD無法計(jì)算or多峰or

RU<225fl或WBC#>50x109/L雙峰觸發(fā)規(guī)則:紅細(xì)胞直方圖不止出現(xiàn)一個(gè)峰

RBC100200250fl100%5%RLRU100200250fl100%20%RLRUSL目前五十一頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)網(wǎng)織紅細(xì)胞散點(diǎn)圖異常觸發(fā)規(guī)則:

RET_UPP區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量orRET_THR-H區(qū)域,散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量UPP交界區(qū)域有核紅細(xì)胞目前五十二頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)IP信息解釋

紅細(xì)胞<Suspect>報(bào)警項(xiàng)目中文信息來源RBCAgglutination?Turbidity/HGBInterference?IronDeficiency?HGBDefect?Fragments?紅細(xì)胞聚集?脂血干擾血紅蛋白?缺鐵?血紅蛋白減低?紅細(xì)胞碎片?MCHC、MCH、RBC直方圖MCHC>365g/LMCHC,MCV,RDW-CVRDW-CV<15%&MCV<75flRET散點(diǎn)圖、血小板紅細(xì)胞直方圖目前五十三頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)紅細(xì)胞聚集?觸發(fā)規(guī)則:MCHC>40.0g/dL&

MCH>40pg&RBC<3.50x1012/LorMCHC>40.0g/dL&MCH>40pg&RU%>4%目前五十四頁\總數(shù)六十頁\編于二點(diǎn)缺鐵?觸發(fā)規(guī)則:MCHC<3

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