動物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課件

第一頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五動物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的要求遵守學(xué)習(xí)紀(jì)律，準(zhǔn)時上、下課。實(shí)驗(yàn)期間不得無故外出或早退。特殊情況下，應(yīng)向教師請假。愛護(hù)公共財物，注意節(jié)約各種實(shí)驗(yàn)用品。實(shí)驗(yàn)動物按組發(fā)給，如需補(bǔ)充使用，須經(jīng)教師同意才能補(bǔ)領(lǐng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在固定的盤上，每組上課時記住帶一張盤，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即將結(jié)果拷出。切勿在電腦上設(shè)置密碼，帶的盤要干凈，免得電腦被感染病毒。保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊，隨時清除污物。實(shí)驗(yàn)完畢后，應(yīng)將實(shí)驗(yàn)器材、用品收拾妥當(dāng)；將手術(shù)器械擦洗干凈，清點(diǎn)數(shù)量，放回原處。經(jīng)教師檢查后才能離開實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)前必須仔細(xì)預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，了解實(shí)驗(yàn)的目的要求、基本原理以及簡要的操作步驟。復(fù)習(xí)有關(guān)理論，以便提高實(shí)驗(yàn)過程中的主動性和效率，并進(jìn)一步鞏固有關(guān)理論知識實(shí)驗(yàn)報告第二頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五動物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)一、常用手術(shù)器械蛙類實(shí)驗(yàn)手術(shù)器械：剪刀、鑷子、金屬探針、玻璃分針、銅鋅弓、蛙心夾、蛙板等。哺乳動物手術(shù)器械：

手術(shù)刀、止血鉗、咬骨鉗、動脈夾、氣管插管、血管插管（包括靜脈插管和動脈插管）等。第三頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五止血鉗第四頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五手術(shù)刀第五頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五手術(shù)剪和手術(shù)鑷第六頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五二、手術(shù)器械的消毒方法煮沸消毒法：一般用蒸餾水加熱，水沸3~5min后，將器械放入消毒鍋內(nèi)，等第二次水沸后15min，對懷疑有芽孢感染的，必須煮沸60min以上高壓蒸汽滅菌法：高壓滅菌鍋，蒸汽壓15~20lb/in2，溫度121.6~126.6C，30min左右。不宜于橡膠制品和銳利器械的滅菌?；瘜W(xué)藥品消毒法：常用消毒劑有：LJ-強(qiáng)化戊二醛、70%乙醇（不適于金屬器械的消毒）、0.1%新潔爾滅、酶皂溶液、甲醛溶液等，金屬器械應(yīng)浸泡30min以上。（見下表）燒灼滅菌法，適用于金屬器械第七頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五第八頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五三、常用實(shí)驗(yàn)動物青蛙和蟾蜍家兔大白鼠和小白鼠魚類鳥類等第九頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五實(shí)驗(yàn)動物的抓取固定方法

蟾蜍蛙類抓取方法宜用左手將動物背部貼緊手掌固定，以中指、無名指、小指壓住其左腹側(cè)和后肢，拇指和食指分別壓住左、右前肢、右手進(jìn)行操作。在抓取是蟾蜍時，注意勿擠壓其兩則耳部突起之毒腺，以免毒液射進(jìn)眼中。實(shí)驗(yàn)如需長時間觀察，可破壞其腦脊髓（觀察神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)時不應(yīng)破壞腦脊髓）或麻醉后用大頭針固定在蛙板上。依實(shí)驗(yàn)需要采取俯臥位或仰臥位固定。第十頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五家兔抓?。簩?shí)驗(yàn)家兔多數(shù)飼養(yǎng)在籠內(nèi)，所以抓取較為方便，一般以右手抓住兔頸部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，讓其體重重量的大部分集中在左手上，這樣就避免了抓取過程中的動物損傷。不能采用抓雙耳或抓提腹部。(1、2、3均為不正確的抓取方法（1．可損傷兩腎，2．可造成皮下出血，3．可傷兩耳），4、5為正確的抓取方法。頸后部的皮厚可以抓，并用手托兔體)第十一頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五臺式固定：做血壓測量、呼吸等實(shí)驗(yàn)和手術(shù)時，則需將兔固定在兔臺上，四肢用粗棉繩活結(jié)綁住，拉直四肢，將繩綁在兔臺四周的固定木塊上，頭以固定夾固定或用一根粗棉繩挑過兔門齒綁在兔臺鐵柱上。第十二頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五幾種常用生理鹽溶液的配制生理性溶液為代替液，用于維持離體的組織、器官及細(xì)胞的正常生命活動。它必須具備下列條件：⑴滲透壓與組織也相等；⑵應(yīng)含有組織、器官維持正常機(jī)能所必需的比例適宜的各種鹽類離子；⑶酸堿度應(yīng)與血漿相同，并具有充分的緩沖能力；⑷應(yīng)含有氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)。動物實(shí)驗(yàn)中常用的生理鹽溶液有生理鹽水、任氏（Ringer）溶液、樂氏（Locke）溶液和臺氏（Tyrode）溶液四種，其成分各異，如下表所示。第十三頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五第十四頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五各種生理鹽溶液的用途

生理鹽水：即與血清等滲之NaCl溶液，在冷血動物應(yīng)用0.6%-0.65%，在溫血動物應(yīng)用0.85%-0.9%。任氏溶液：用于青蛙及其他冷血動物。樂氏溶液：用于溫血動物之心臟、子宮及其它離體臟器。用作灌注液者須于用前通入氧氣泡15分鐘。低鈣樂氏液（含無水氯化鈣0.05g）用于離體小腸及豚鼠的離體支氣管灌注。臺氏溶液：用于溫血動物之離體小腸。第十五頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五動物的麻醉在急、慢性動物實(shí)驗(yàn)中，手術(shù)前均應(yīng)將動物麻醉，以減輕或消除動物的痛苦，保持安靜狀態(tài),從而保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。理想的麻醉藥品應(yīng)當(dāng)是對動物麻醉完善，其毒性和對生理功能干擾最小，使用方便。1．常用麻醉劑的種類和用法局部麻醉劑：0.5%-1.0%鹽酸普魯卡因或2%鹽酸可卡因用作皮膚或黏膜表面麻醉。全身麻醉劑：發(fā)揮性的乙醚，非揮發(fā)性的巴比妥類、氨基甲酸乙酯等，在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中，多采用全身麻醉劑。第十六頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五2.麻醉前的準(zhǔn)備工作熟悉麻醉藥品的特點(diǎn)

根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容合理選用麻醉藥。麻醉前應(yīng)核對藥物名稱；檢查藥品有無變質(zhì)或過期失效。狗、貓等手術(shù)前應(yīng)禁食12小時，以減輕嘔吐反應(yīng)。需在全麻下進(jìn)行手術(shù)的慢性實(shí)驗(yàn)動物，可適當(dāng)給予麻醉輔助藥。例如，皮下注射嗎啡鎮(zhèn)靜止痛，注射阿托品減少呼吸道分泌物的產(chǎn)生等。

第十七頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五3.給藥方法1）全身性麻醉：吸入麻醉：乙醚注射麻醉：常用烏拉坦、戊巴比妥鈉及氯醛糖等。主要給藥途徑有：靜脈注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射、皮下淋巴囊注射等2）局部麻醉：表面麻醉：藥物通過點(diǎn)眼、噴霧或涂布作用于粘膜表面，轉(zhuǎn)而透過粘膜接觸粘膜下神經(jīng)末梢而發(fā)揮作用。該藥物除具有麻醉作用外，還有較強(qiáng)的穿透力，如的卡因、利多卡因；浸潤麻醉：用注射的方法將藥物送到神經(jīng)纖維旁。此類藥物只需有局部麻醉作用，不一定要求有強(qiáng)大的穿透力，如普魯卡因(對氨苯甲酸酯)、可卡因、利多卡因（其效力是普魯卡因的2倍）。用作局部麻醉的藥物的濃度一般為1%～2%，通常用0.5%～1%.第十八頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五4.麻醉效果的觀察呼吸：深慢而平穩(wěn)角膜反射：明顯遲鈍肌張力：全身肌肉松弛皮膚夾捏反射消失。第十九頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五5.兔耳緣靜脈注射時的注意事項(xiàng)麻醉前應(yīng)正確選用麻醉藥品、用藥劑量及給藥途徑；進(jìn)行靜脈麻醉時，先將總用藥量的三分之一快速注入，使動物迅速渡過興奮期，余下的三分之二量則應(yīng)緩慢注射，并密切觀察動物麻醉狀態(tài)及反應(yīng)，以便準(zhǔn)確判斷麻醉深度；如麻醉較淺，動物出現(xiàn)掙扎或呼吸急促等，需補(bǔ)充麻醉藥以維持適當(dāng)?shù)穆樽?。一次補(bǔ)充藥量不宜超過原總用藥量的五分之一；麻醉過程中，應(yīng)隨時保持呼吸道通暢，并注意保溫；第二十頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五止血采血方法手術(shù)中，若遇到出血，常用的止血方法有:

鉗夾止血法，壓迫止血法，結(jié)扎止血法，燒烙止血法兔的采（?。┭椒ㄓ卸醒雱用}取血，股動脈取血，耳緣靜脈取血，心臟穿刺取血。第二十一頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五實(shí)驗(yàn)一生理機(jī)能系統(tǒng)的使用與

血型測定第二十二頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五一、生理機(jī)能系統(tǒng)的使用開機(jī)順序：貴重儀器先關(guān)后開熟悉系統(tǒng)操作儀器使用操作示教操作訓(xùn)練第二十三頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五二、血型測定實(shí)驗(yàn)原理一、血型

血型：指的是紅細(xì)胞膜上特異性抗原的類型。所謂的血型，主要指紅細(xì)胞血型。紅細(xì)胞凝集：若不同血型的血液混合，會出現(xiàn)紅細(xì)胞彼此聚集在一起，成為一簇簇的細(xì)胞團(tuán)，這種現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞凝集反應(yīng)。紅細(xì)胞凝集反應(yīng)是一種抗原—抗體反應(yīng)，它是免疫反應(yīng)的一種形式。凝集原（agglutinogen）：紅細(xì)胞膜上存在著特異的抗原。凝集素（agglutinogen）：血液中與紅細(xì)胞膜上的凝集原起反應(yīng)的特異抗體。第二十四頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五血型的分類:目前已知人類的RBC除ABO血型系統(tǒng)外,還有Rh、P等23個血型系統(tǒng)。ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞表面存在的凝集原（A或B）決定的，分為A、B、AB、O四型。第二十五頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五二、人類的Rh血型紅細(xì)胞中含Rh因子的為Rh陽性，無為陰性我國漢人99%陽性，少數(shù)人民陰性占一定比例。白種人陰性多于陽性抗Rh抗體:為后天獲得的免疫性抗體。是一種IgG(分子較小),能透過胎盤。*臨床意義:

1.再次輸血時，可能導(dǎo)致凝集反應(yīng)

2.再次懷孕可能會出現(xiàn)死胎第二十六頁，共二十八頁，編輯于2023年，星期五1.輸血型相合的血液,最好成分輸血;2.輸血前必須進(jìn)行血型交叉配血試驗(yàn)三、輸血的原則給血者受血者紅細(xì)胞血清紅細(xì)胞血清主側(cè)次側(cè)*兩側(cè)均不凝:配血相合,可以輸血;*主側(cè)凝集,配血不合,絕對不能輸！*主側(cè)不凝次側(cè)凝集,配血基本相合，緊