醫(yī)學(xué)動物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)

醫(yī)學(xué)動物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五動物實(shí)驗(yàn)：動物實(shí)驗(yàn)是用實(shí)驗(yàn)動物作為人的替身進(jìn)行各種生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)的過程。動物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)：是實(shí)施動物實(shí)驗(yàn)的重要手段，在不同的研究領(lǐng)域有其不同的目的和應(yīng)用，一些基本操作技術(shù)是共同的，基本的動物實(shí)驗(yàn)技術(shù)需要訓(xùn)練。

內(nèi)容：動物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備、動物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)、動物實(shí)驗(yàn)后的管理技術(shù)以及應(yīng)該注意的影響動物實(shí)驗(yàn)效果的因素等第二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果ByChenMin-li動物的反應(yīng)

：R＝(A+B+C)×D±E式中：R——實(shí)驗(yàn)動物的總反應(yīng)

A——實(shí)驗(yàn)動物種的共同反應(yīng)

B——動物品種及品系特有的反應(yīng)

C——動物個體反應(yīng)（個體差異）

D——環(huán)境的影響（包括實(shí)驗(yàn)處理）

E——實(shí)驗(yàn)誤差(實(shí)驗(yàn)操作相關(guān))第三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第一節(jié)動物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備一、動物實(shí)驗(yàn)相關(guān)的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿鞔_（課題設(shè)計(jì)）：研究、申報(bào)新藥資料動物實(shí)驗(yàn)相配套設(shè)備、儀器、試劑標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)設(shè)施第四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五二、實(shí)驗(yàn)動物相關(guān)的準(zhǔn)備

實(shí)驗(yàn)動物的質(zhì)量合格證明適量的飼料和墊料（高脂等特殊飼料）運(yùn)輸中的各種因素對實(shí)驗(yàn)動物的影響，并應(yīng)查看運(yùn)輸檢疫證明動物需要隔離觀察（一般3～7d的適應(yīng)觀察）

第五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五三、實(shí)驗(yàn)動物的分組隨機(jī)化原則：樣本具有極好的代表性，非實(shí)驗(yàn)因素方面具有極好的均衡性,提高實(shí)驗(yàn)資料的可比性與結(jié)論的說服力。完全隨機(jī)化的效果是否永遠(yuǎn)最好?不一定。關(guān)鍵取決于樣本含量的大小。若樣本含量很大,完全隨機(jī)化的效果比較理想;若樣本含量比較小,有時完全隨機(jī)化的結(jié)果可能會出現(xiàn)某些偏差。例如：24只小鼠,其中16只雌性,8只雄性,若采用完全隨機(jī)化方式均分成2組,則有可能一組中的12只小鼠全是雌性的,另一組中有4只雌性、8只雄性小鼠?！靶詣e”這個重要的非實(shí)驗(yàn)因素就嚴(yán)重地影響實(shí)驗(yàn)。此時,宜采用“分層隨機(jī)化”。隨機(jī)化的方法有多種,可以查“隨機(jī)數(shù)字表”、“隨機(jī)排列表”或查“用計(jì)算機(jī)產(chǎn)生的偽隨機(jī)數(shù)字表”第六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五實(shí)驗(yàn)單位隨機(jī)分為三組分組情況動物號碼123456789101112131415隨機(jī)數(shù)字186240191240839534194491690330余數(shù)321131221121333歸組CBAACABBAABACCCA組346910B組2781112C組15131415第七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五動情前期可見大量有核上皮細(xì)胞第九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五動情期可見大量角化上皮細(xì)胞第十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五交配后的大鼠陰道分泌物，可見精子第十一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五四、實(shí)驗(yàn)動物的編號與標(biāo)記1、染色法：用化學(xué)試劑或藥品在實(shí)驗(yàn)動物體表的不同部位進(jìn)行涂染，并用不同顏色區(qū)別各組動物。編號原則是先左后右，從前到后，從上到下。有時用兩種顏色一個代表十位、一個代表個位。常用的染色劑有3%~5%的苦味酸（黃色）、2%的硝酸銀溶液（咖啡色）、0.5%的中性品紅溶液（紅色）和煤焦油酒精溶液（黑色）。第十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第十三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五2、耳緣剪孔法：是在動物的耳邊緣剪出不同的缺口或打成不同的小孔進(jìn)行標(biāo)記的方法。為防止孔、口愈合，一般在打孔后用消毒的滑石粉涂抹在孔、口局部。由打孔或剪切的位置和孔數(shù)代表編號，一般在耳內(nèi)按上、中、下打孔，分別代表1、2、3，在相應(yīng)位置剪缺口代表4、5、6，剪兩個缺口代表7、8、9，無孔或缺口為10。一般左耳代表個位數(shù)、右耳代表十位數(shù)。3、烙印法：用烙印鉗或刺針將號碼刺在或烙印在動物無體毛或明顯部位，如耳、面、鼻部及四肢等，然后用溶在酒精中的黑墨在針刺處涂抹。這種方法適用于大中型實(shí)驗(yàn)動物，操作時要注意防止感染。第十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五（四）號牌法：用特制的金屬號牌固定在實(shí)驗(yàn)動物的耳上或頸項(xiàng)部，掛牌時要注意避開血管。此法適用于小動物,特別是轉(zhuǎn)基因動物的培育和實(shí)驗(yàn)。（五）籠子編號法：不在動物身體上作標(biāo)記而把裝動物的籠子進(jìn)行編號，也叫替代法。第十六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第一節(jié)、實(shí)驗(yàn)動物的抓取與固定第十七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第二節(jié)實(shí)驗(yàn)動物的抓取和固定第十八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

1、小鼠的抓取保定：

器材：小鼠飼養(yǎng)盒+面罩1套。

方法步驟：

1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部將小鼠提起，放在飼養(yǎng)合的面罩上。

2、用左手拇指和食指迅速、準(zhǔn)確地捏住小鼠的兩耳后、頸背部的皮膚，將小鼠提起。第十九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

3、翻轉(zhuǎn)左手掌，以左手掌心和中指夾小鼠背部的皮膚，使小鼠整個呈一條直線。

4、用左手無名指壓住小鼠背部的皮膚，小指壓住小鼠的尾巴根部。

5、松開捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。第二十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第二十一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五手術(shù)固定法：用乙醚等麻醉藥品麻醉后，用長20~30cm的線繩分別系在四肢上，再把四肢的線繩分別系在固定板四角的釘子上，并且在頭部上顎切齒的地方牽一根線繩達(dá)到完全固定。在靜脈給藥時，先根據(jù)小鼠的大小選擇合適的固定器，打開鼠筒蓋，把小鼠放在里面，只露出尾巴；或者用倒放的燒杯將鼠扣住，只露出尾巴并壓住。第二十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五二、大鼠的抓取與固定2、大鼠的抓取與固定抓取方法：4~5周齡以內(nèi)的大鼠同小鼠；周齡較大的大鼠其尾部皮膚容易被剝脫，所以用左手從背部中央到胸部捏起來抓住。抓取時最好帶防護(hù)手套，但手套不宜過厚。手固定法：同小鼠。手術(shù)固定法：同小鼠。靜脈給藥或采血時同小鼠。第二十三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第二十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第二十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五三、豚鼠的抓取與固定抓取方法：抓取幼小豚鼠時，用手捧起來；成熟的大豚鼠，用手大把抓起胸肋部即可。注意不能粗野，更不能抓取腰腹部，這樣容易造成肝破裂而死亡。手固定法：⑴將左手的食指和中指放在豚鼠頸背部兩側(cè)，拇指和無名指放在肋部，分別用手指夾住左右前肢抓起來。⑵反轉(zhuǎn)左手，用右手的拇指和食指夾住右后肢，用中指和無名指夾住左后肢是豚鼠整體伸直成一條直線。⑶一個人固定操作時，坐在椅子上，用右手拿著豚鼠的后肢夾在兩腿之間，用大腿代替右手夾住。手術(shù)固定法：同大、小鼠。第二十六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

1、先用左手輕輕扣、按住豚鼠背部。

2、順勢抓緊其肩胛上方皮膚，拇指和食指環(huán)箍其頸部。

3、用右手輕輕托住其臀部，即可將豚鼠抓取保定。第二十七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五四、家兔的抓取與固定抓取方法：用一只手大把抓住頸背部皮膚提起來，另一只手托住其臀部，讓其重心落在托其臀部的手上，運(yùn)送時，還要抓住頸肩部皮膚抱著兔子運(yùn)送。手固定法：在灌胃給藥時，人坐在椅子上，用一只手抓住頸背部皮膚，另一只手抓住兩后肢放在兩腿之間，大腿夾住兔子的下半身，用空著的手抓住兩前肢固定之，抓住頸背部的手同時捏著兩只耳朵，不讓頭部轉(zhuǎn)動。第二十八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五固定器固定法：耳靜脈給藥或采血時用盒式固定法；從頸動脈采血或手術(shù)實(shí)驗(yàn)時用臺式固定法。盒式固定法：把兔子放在盒子里，只露出頭部，用轉(zhuǎn)扭擰固定器固定家兔。臺式固定法：將麻醉的兔子仰臥，用紗布條依次將四肢捆綁固定于固定臺的兩側(cè)，然后把頭部放在金屬制的首伽和咀環(huán)上固定。第二十九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五兔的抓取保定方法1：步驟：

1、用右手把兔的兩耳拿在手心并抓住頸后部皮膚，把兔提起。

2、然后用左手托住兔的臀部。第三十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五方法2：器材：兔保定架步驟：1、打開保定架的上蓋，抓取并將兔放進(jìn)架內(nèi)，迅速關(guān)上保定架的上蓋。2、右手抓住兔耳朵將頭部拉過保定架的卡栓，將兔的脖子保定。3、如果兔掙扎，可用手在它的背上輕輕撫摸，使其安靜。第三十一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五五、犬的抓取與固定抓取方法：先給犬帶上系有鐵鏈條的脖套，對于性情兇猛的犬，要用特制的鉗式長柄犬夾夾住犬頸部將犬按倒后，再系脖套和鏈條。手固定法：首先綁住犬嘴，方法是飼養(yǎng)員或犬主人從側(cè)面靠近并輕輕撫摸其頸部皮毛，然后迅速用布帶綁住犬嘴，布帶從下頜繞到上頜打一個結(jié)，再繞到下頜打一個結(jié)，然后將布帶繞到頭后頸，在頸后部再打一個結(jié)，最后打一個活結(jié)，對于未經(jīng)馴服的犬，可用長柄犬夾夾住犬頸部按倒后強(qiáng)制綁嘴。手術(shù)臺固定法：麻醉后，松開布帶，將犬仰臥在手術(shù)臺上，先固定四肢，再固定頭部。第三十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第三十三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五六、猴的抓取與固定抓取方法：從籠內(nèi)抓取時，飼養(yǎng)人員應(yīng)右手持短柄網(wǎng)罩，左臂緊靠門側(cè)，以防止籠門敞開時猴逃出。右手將網(wǎng)罩塞入籠內(nèi)，由上而下罩捕。當(dāng)猴被罩住后，應(yīng)立即將網(wǎng)罩翻轉(zhuǎn)取出籠外，罩猴在地，由罩外抓住猴的頸部，清掀網(wǎng)罩，再提取猴的手臂反背握住。固定方法：1.徒手固定：將猴兩前肢反背其背后，操作者用一只手握著，用另一只手將猴兩后肢捉住即可固定。2.固定架固定：使用“猴限制椅”或“猴固定架”進(jìn)行固定第三十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第三十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五七、豬的抓取與固定抓取方法：小豬常采用雙手提起后肢，兩膝夾住豬背倒立固定；成豬可采用站立固定。固定方法：可將豬仰放在“V”字型槽內(nèi)固定，也可用木制三角固定架和帆布吊兜固定（挖四個孔使其四肢下伸）。如沒有三腳架，也可以用犬固定臺。第三十六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五一、常用的麻醉劑（一）揮發(fā)性麻醉劑包括乙醚、氯仿、異氟烷（Isoflurane）。（二）非揮發(fā)性麻醉劑包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉(Pentobarbitol)、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙脂、水合氯醛、氯胺胴（Ketamine）、噻啦嗪（Xylazine）、速眠新、烏拉坦。（三）中藥麻醉劑包括洋金花、氫溴酸東莨菪堿等。第三節(jié)、實(shí)驗(yàn)動物的麻醉第三十七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五二、動物的麻醉方法（一）全身麻醉1.吸入麻醉：多采用乙醚做麻醉藥。把帶有乙醚的棉球放入玻璃容器內(nèi)，揮發(fā)后將動物放入容器內(nèi)4~6分鐘，動物失去運(yùn)動力后立即取出動物以避免麻醉過深致死。此法多用于短期操作性實(shí)驗(yàn)，乙醚麻醉的優(yōu)點(diǎn)是蘇醒快，但是對呼吸道刺激性大，長時間容易窒息死亡。2.注射麻醉：大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法進(jìn)行全身麻醉，犬、貓、兔等既可腹腔注射也可靜脈注射給藥。注射時，先用麻醉藥總量的2/3，密切觀察動物生命體征的變化，如已經(jīng)達(dá)到所需麻醉的程度，余下的麻醉藥則不用，避免麻醉過深抑制大腦呼吸中樞導(dǎo)致動物死亡第三十八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

各種動物常用的全身麻醉劑的劑量及途徑劑量(mg/kg體重)動物注射戊巴比巴比苯巴比硫噴異戊巴氯胺酮氯醛糖烏拉坦途徑妥鈉妥鈉妥鈉妥鈉妥鈉比妥鈉(20%~25%)(1%~3%)(1%~2%)(5%~10%)(10%)小鼠i.p50~80200/15~20100100~200//i.m///////1350大鼠i.p40~50200/40~100100100~200550/i.m///////1350s.c//100~110////800~1000豚鼠i.p30~50100//100///i.m///20~50///1350兔i.p25~40///80~120///i.v20~30225~300/15~2040~50/80~100750~1000犬i.p30//20~5080~10010~40//i.v3022550~10015~2040~50/60750~1000

口服/350////1001500注:i.p指腹腔注射,i.m指肌肉注射,s.c指皮下注射,i.v指靜脈注射第三十九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五（二）局部麻醉1.表面麻醉:利用局部麻醉藥的組織穿透作用，透過粘膜，阻滯淺表的神經(jīng)末梢，稱為表面麻醉。常用利多卡因，眼部用藥點(diǎn)滴、鼻內(nèi)用要涂敷、咽喉氣管用藥噴霧、尿道灌注給藥。2.區(qū)域阻滯麻醉：在手術(shù)區(qū)內(nèi)四周和底部注射麻醉藥阻斷疼痛的向心傳導(dǎo)，稱為區(qū)域阻滯麻醉。常用普魯卡因。3.神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉：在神經(jīng)干(叢)的四周注射麻醉藥，阻滯其傳導(dǎo)，使其所支配的區(qū)域疼痛感覺消失，稱為神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉。常用利多卡因。4.局部浸潤麻醉：沿手術(shù)切口逐層注射局部麻醉藥，阻滯組織中的神經(jīng)末梢，稱為局部浸潤麻醉。常用普魯卡因。第四十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五三、麻醉注意事項(xiàng)1.有些麻醉藥，如乙醚揮發(fā)性很強(qiáng)，易燃，使用時應(yīng)遠(yuǎn)離火源，平時應(yīng)妥善保存。2.應(yīng)特別注意各種麻醉藥的劑量和給藥途徑，切莫因藥量過大而引起中毒或死亡。3.注射時，一般要求緩慢注入，并隨時觀察動物肌肉的緊張性、角膜反射、呼吸頻率、疼痛反射等指標(biāo)。4.注意保溫，采取實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈、電褥、臺燈照射等。5.萬一麻醉過量，根據(jù)不同情況采取措施，如施行人工呼吸、給予蘇醒劑或注射強(qiáng)心劑、咖啡因、腎上腺素、可拉明等，也可以靜脈注射5%溫?zé)岬钠咸烟侨芤?。第四十一頁，共一百零九頁，編輯?023年，星期五一、小鼠的給藥方法：

(一)灌胃給藥（經(jīng)口給藥）原理：將藥液直接注入小鼠的胃內(nèi)。器材：小鼠灌胃針1支、注射器1支、小鼠飼養(yǎng)盒+面罩1套、生理鹽水、燒杯。第四節(jié)給藥方法第四十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：1、將灌胃針連接在注射器上，吸入一定量的藥液。2、左手捉持小鼠，使小鼠頭部向上。3、右手將灌胃針頭尖端從小鼠口角處進(jìn)針放進(jìn)小鼠口咽部，順咽后壁輕輕往下推，灌胃針會順著食管滑入小鼠的胃內(nèi)。灌胃針插入約3cm.4、用右手食指將針?biāo)聣?，將注射器中的藥液灌入小鼠的胃中。第四十三頁，共一百零九頁，編輯?023年，星期五最大劑量：0.4ml／10g體重。注意：在灌胃過程中，避免誤插入氣管。第四十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五（二）注射給藥1、皮下注射給藥：原理：將藥液注入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。器材：1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。第四十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)注射部位：選小鼠項(xiàng)背部的皮下。(2)常規(guī)消毒注射部位的皮膚，用注射針頭取一銳角角度刺入皮下，

(3)將針頭輕輕向左右擺動，易擺動則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無回血，可緩慢地將藥物注入皮下。注射量：0.01ml—0.03ml／g體重。第四十六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五2、肌肉注射給藥

原理：將藥液注入動物的肌肉組織，經(jīng)毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

器材：1ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。第四十七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五方法步驟：(1)操作時1人先將小鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住小鼠的1條后肢，右手拿注射器，常規(guī)消毒注射部位的皮膚。(3)將注射器針頭在動物后肢大腿外側(cè)肌肉豐富處呈60度角迅速刺入后注入藥液。注射量：0.01m1／g體重。第四十八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五3、靜脈注射給藥

原理：將藥液注入小鼠的尾靜脈。

器材：1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、金屬籠或小鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。第四十九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)將小鼠放在金屬籠或小鼠固定器中，通過金屬籠或小鼠固定器的孔拉出小鼠尾巴。(2)用左手捏住小鼠尾巴中部，用75％酒精棉球反復(fù)擦拭尾部。

(3)注射時，以左手拇指和中指捏住鼠尾兩側(cè)，用食指從下面托起尾巴，以無名指夾住尾巴的末梢。(4)右手持4號針頭的注射器，使針頭與靜脈平行（小于30度角）。第五十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五(5)從小鼠尾巴下1／4處進(jìn)針，仔細(xì)觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現(xiàn)，說明已刺入血管，即可注入藥物。(6)拔出針頭后，用干棉球壓住注射部位約l、2min，防止出血。

注射量：

0.05m1—0.025m1／g體重。

第五十一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

4、腹腔注射給藥

原理：將藥液注入小鼠的腹腔。

器材：注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。

第五十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)用左手將小鼠捉持保定，使鼠腹部朝上，鼠頭略低于尾部。

(2)右手持注射器將針頭在下腹部靠近腹白線的兩側(cè)進(jìn)行穿刺。第五十三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五(3)針頭刺入皮下后進(jìn)針3mm左右，接著使注射針頭與皮膚呈45度角刺入腹肌，穿過腹肌進(jìn)入腹膜腔，當(dāng)針尖穿過腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定針頭，保持針尖不動，回抽針?biāo)?，如無回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量：

0.5m1—1m1／只。

第五十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五二、大鼠的給藥方法：

(一)灌胃給藥

原理：將藥液直接注入大鼠的胃內(nèi)。

器材：大鼠灌胃針1支、注射器1支、大鼠飼養(yǎng)盒+面罩l套、生理鹽水、燒杯。

第五十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五方法步驟：

1、將灌胃針連接在注射器上，吸入一定量的藥液。2、左手捉持保定大鼠，右手將灌胃針頭尖端放進(jìn)大鼠口咽部，順咽后壁輕輕往下推，灌胃針會順著食管滑入大鼠的胃內(nèi)。灌胃針插入約5cm.第五十六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

3、用右手食指將針?biāo)聣?，將注射器中的生理鹽水灌入大鼠的胃中。劑量：2ml／100g體重。注意：在灌胃過程中，避免誤插入氣管。

第五十七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五(二)注射給藥

1、皮下注射給藥

原理：將藥液注入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

器材：5ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。第五十八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)注射部位：選大鼠的項(xiàng)背部的皮下。(2)常規(guī)消毒注射部位的皮膚，用注射針頭取一銳角角度刺入皮下。(3)將針頭輕輕向左右擺動，易擺動則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無回血，可緩慢地將藥物注入皮下。注射量：0.01ml／g體重。

第五十九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五2、肌肉注射給藥

原理：將藥液注入動物的肌肉組織，經(jīng)毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

器材：1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。

第六十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)操作時1人先將大鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住大鼠的1條后肢，右手拿注射器，常規(guī)消毒注射部位的皮膚。(3)將注射器針頭在動物后肢大腿內(nèi)側(cè)肌肉豐富處呈90度角，迅速刺入后注入藥液。注射量：0.5m1-1m1。第六十一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

3、靜脈注射給藥

原理：將藥液注入大鼠的尾靜脈。

器材：

1ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、金屬籠或大鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。第六十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)將大鼠放在金屬籠或大鼠固定器中，通過金屬籠或鼠夾的孔拉出大鼠尾巴。

(2)用左手捏住大鼠尾巴中部，用75％酒精棉球反復(fù)擦拭尾部。

(3)注射時，以左手拇指和中指捏住鼠尾兩側(cè)，用食指從下面托起尾巴。

第六十三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

(4)右手持4號針頭的注射器，使針頭與靜脈平行(小于30度角)。（5)從大鼠尾巴下1／4或1／3處進(jìn)針，仔細(xì)觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現(xiàn)，說明已刺入血管，即可注入藥物。注射量：0.05—0.25ml／10g體重。

第六十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

4、腹腔注射給藥

原理：將藥液注入大鼠的腹腔。

器材：注射器1支、生理鹽水、燒杯。

第六十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)用左手將大鼠捉持保定，使鼠腹部朝上，鼠頭略低于尾部。

(2)右手持注射器將針頭在下腹部靠近腹白線的兩側(cè)進(jìn)行穿刺。第六十六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五(3)針頭刺入皮下后進(jìn)針3mm左右，接著使注射針頭與皮膚呈45度角刺入腹肌，穿過腹肌進(jìn)入腹膜腔，當(dāng)針尖穿過腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定針頭，保持針尖不動，回抽針?biāo)?，如無回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量：0.01—0.02m1／g體重。

第六十七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第六十八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第六十九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五第七十八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五三、豚鼠的給藥方法：

(一)灌胃給藥

原理：將藥液直接注入豚鼠的胃內(nèi)。

器材：灌胃針1支、注射器1支、生理鹽水、燒杯。第七十九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

1、將灌胃針連接在注射器上，吸入一定量的生理鹽水。

2、左手捉持保定豚鼠，右手將灌胃針頭尖端放進(jìn)豚鼠口咽部，順咽后壁輕輕往下推，灌胃針會順著食管滑入大鼠的胃內(nèi)。灌胃針插入約5cm。第八十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五3、用右手食指將針?biāo)聣?，將注射器中的生理鹽水注入豚鼠的胃中。

劑量：1—5ml。

注意：在灌胃過程中，避免誤插入氣管。

第八十一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

(二)注射給藥

1、皮下注射給藥原理：將藥液注入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。器材：

1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。第八十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)注射部位：選豚鼠的項(xiàng)背部的皮下。(2)常規(guī)消毒注射部位的皮膚，注射針頭取一銳角角度刺入皮下。(3)將針頭輕輕向左右擺動，易擺動則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無回血，可緩慢地將藥物注入皮下。注射量：0.01ml／g。第八十三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

2、肌肉注射給藥

原理：將藥液注入動物的肌肉組織，經(jīng)毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

器材：1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。第八十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)操作時1人先將豚鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住豚鼠的1條后肢，右手拿注射器，常規(guī)消毒注射部位。(3)將注射器針頭在動物后肢大腿外側(cè)肌肉豐富處呈60度角，迅速刺入后注入藥液。注射量：0.01ml／g。第八十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

四、兔的給藥方法

(一)灌胃給藥

原理：將藥液直接注入兔的胃內(nèi)。

器材：兔開口器、14號胃管、注射器1支、生理鹽水、燒杯、石蠟油。第八十六頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

步驟：

1、將兔放進(jìn)保定架內(nèi)，助手用手輕輕壓住兔的背部，避免兔的掙扎。

2、灌胃者用在手拇指和中指擠壓兔兩頰，將下頜擠開使兔被動張口。3、右手將開口器從一側(cè)口角插入口腔并固定。4、用泡在石蠟油中的胃管，經(jīng)開口器的孔插入，向前推進(jìn)約15cm，可達(dá)胃內(nèi)。5、在插管時應(yīng)將胃管另一端泡在水中確認(rèn)沒有冒氣泡，即可用注射器經(jīng)胃管注入藥液。

第八十七頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五灌胃量：

80-100ml／只／次。注

意：在灌胃過程中，避免誤插入氣管。

第八十八頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五三、兔耳緣靜脈或兔耳中央動脈穿刺（用于兔的給藥、抽血）：

原理：穿刺兔的耳緣靜脈或耳中央動脈。

器材：兔保定架、注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。第八十九頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

(1)將兔放在保定架內(nèi)保定。

(2)酒精消毒并揉搓血管，使兔的耳緣靜脈或耳中央動脈充盈。

第九十頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五(3)用左手食指和中指夾住兔的耳緣靜脈或耳中央動脈近心端，拇指和小指夾住耳郭邊緣部分，無名指和小指放在耳郭下作墊。(4)右手拿注射器，針尖的斜面朝上，將針頭插入血管，放松對靜脈近心端的壓迫，緩慢把地藥液注射進(jìn)血管，或?qū)⒀撼槌鰜?。注射或采血量?一10ml。

第九十一頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

五、吸入給藥1、氣管內(nèi)滴注法2、經(jīng)口腔和經(jīng)氣管給藥法3、吸入室法大小鼠氣管插管技術(shù)

六、經(jīng)腸給藥1、兔直腸給藥2、麻醉后小腸或十二指腸灌注給藥第九十二頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

一、小鼠的采血——摘除眼球采血法：

原理：將小鼠的眼球摘除后取血液的方法。器材：眼科彎鑷、試管。第五節(jié)樣品采集方法第九十三頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五方法步驟

(1)左手抓住小鼠頸部皮膚，輕壓在實(shí)驗(yàn)臺上，取側(cè)臥位;(2)左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓，使眼球突出。(3)用眼科彎鑷夾去眼球，將鼠倒立，用試管接住流出的血液。(4)采血完畢立即用紗布壓迫止血。采血量：每次0.6-1.0ml/次。

小鼠眼內(nèi)眥取血動畫小鼠眼眶后靜脈叢取血第九十四頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

二、大鼠的采血

眼眶后靜脈叢(竇)取血：器材：毛細(xì)管(玻璃或塑料均可)、

1％肝素溶液、干燥皿、乙醚、試管、干棉球。

第九十五頁，共一百零九頁，編輯于2023年，星期五

方法步驟：

1、先將毛細(xì)管浸泡在1％肝素溶液中數(shù)分鐘，然后取出干燥備用。2、將大鼠進(jìn)行麻醉，使大鼠保持側(cè)臥位。3、左手拇指、食指抓住兩鼠耳之間的頸部頭皮，并輕輕向下壓迫頸部兩側(cè)，致大鼠靜脈血回流障礙，眼球外突，眶后靜脈叢