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文檔簡介
化膿性球菌及厭氧性細菌第一頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五化膿性球菌及厭氧性細菌2009.05.19第二頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五實驗內(nèi)容錄像:化膿性球菌示教:
示教片:葡萄球菌、鏈球菌、肺鏈、淋球菌產(chǎn)氣莢膜、破傷風、肉毒(各一張)
培養(yǎng)板:血平板:金葡、白葡、鏈球(甲、乙、丙)、肺鏈血平板:靶樣溶血(產(chǎn)氣莢膜)
試管培養(yǎng):皰肉培養(yǎng)基(破傷風、產(chǎn)氣莢膜)、高層瓊脂斷裂、洶涌發(fā)酵操作:抗酸染色第三頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五化膿球菌分類:革蘭氏陽性菌和陰性菌大部分為G+菌
G-菌為:奈瑟球菌屬{腦膜炎球菌
淋球菌第四頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五葡萄球菌金黃色葡萄球菌具有血漿凝固酶
{金黃色葡萄球菌:周圍有透明溶血環(huán)β溶血環(huán)白色葡萄球菌:無溶血環(huán)第五頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五葡萄球菌G+第六頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五血平板:金葡、白葡第七頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五鏈球菌甲型鏈球菌:形成針尖大小菌落,周圍有草綠色溶血環(huán),是不完全溶血。乙型鏈球菌:周圍形成空白溶血環(huán),是完全性溶血。丙型鏈球菌:無溶血環(huán)。
第八頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五鏈球菌G+第九頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五Alpha溶血第十頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五Beta溶血第十一頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五肺炎鏈球菌:周圍形成草綠色溶血環(huán),是不完全溶血。需要和甲型鏈球菌相區(qū)別。鑒別方法為膽汁溶菌實驗:在膽汁中肺炎鏈球菌被膽汁溶解,因此培養(yǎng)基澄清而甲型鏈球菌則不會被溶解,培養(yǎng)基成渾濁狀。第十二頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五肺炎鏈球菌第十三頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五奈瑟菌屬:
使用巧克力培養(yǎng)板。
加入紅細胞后再加入鐵,破壞紅細胞使培養(yǎng)板呈黑色。
菌落很小很細,為露滴狀。第十四頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五奈瑟氏菌和巧克力平板第十五頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五厭氧菌共同特點:
都是革蘭氏染色陽性菌都可生成芽孢,可根據(jù)其位置和大小來判斷菌種。破傷風桿菌:鼓槌樣產(chǎn)氣莢膜桿菌:中間中空狀肉毒桿菌:網(wǎng)球拍狀或湯勺狀
第十六頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五1、破傷風:G+;芽胞位于菌體頂端,大于菌體,使細菌呈鼓槌狀;菌體細長,有周身鞭毛第十七頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五厭氧菌的培養(yǎng)焦性沒食子酸法:原理:焦性沒食子酸和氫氧化鈉或者氫氧化鉀反應消耗氧氣,從而使環(huán)境中的氧被消耗掉,生成無氧環(huán)境。第十八頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五孢肉培養(yǎng)基新鮮牛肉絞碎煮熟取下部殘渣即可制成孢肉。其中含有不飽和脂肪酸,在密閉環(huán)境下會消耗氧氣而生成飽和脂肪酸,從而使密閉環(huán)境形成無氧環(huán)境。剛?cè)〕鰰r為醬紫色。第十九頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五厭氧血平板上的羽毛狀菌落庖肉培養(yǎng)基破傷風梭菌培養(yǎng)基第二十頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五醬紫色破傷風桿菌黑色醬紫色產(chǎn)氣莢膜桿菌鮮紅色第二十一頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五產(chǎn)氣莢膜桿菌的三個培養(yǎng)特點:
高層瓊脂斷裂洶涌發(fā)酵:使新鮮牛奶成奶酪狀靶樣溶血:完全溶血+不完全溶血原因為該菌含有幾種不同的溶血素第二十二頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五2、產(chǎn)氣莢膜梭菌:兩端幾乎平切的G+粗大桿菌;芽胞位于次極端,呈橢圓形,不大于菌體;在體內(nèi)有明顯的莢膜;無鞭毛第二十三頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五庖肉培養(yǎng)基牛乳培養(yǎng)基-洶涌發(fā)酵第二十四頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五肉毒桿菌:毒素可用于生物戰(zhàn)。第二十五頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五3、肉毒梭菌:G+;芽胞呈橢圓形,粗于菌體,位于次極端,使細胞呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀;有鞭毛,無莢膜。肉毒梭菌第二十六頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五抗酸染色結(jié)核分枝桿菌細胞壁因含大量的脂類,因此一般的革蘭氏染色不能使之著色,需用抗酸染色法。鏡下觀察:菌體為紅色,常數(shù)個成團排列背景為藍色第二十七頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五步驟:石炭酸復紅(2-3滴)加熱3-5min水洗3%鹽酸酒精脫色(1-2滴)30-50sec
水洗
美蘭染色一分鐘(2-3滴)水洗吸干油鏡觀察注意:石炭酸復紅加熱過程中以剛冒熱氣為宜,不要干掉。
鹽酸酒精脫色不要超過一分鐘。第二十八頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五TheoptochintestNotoptochinsensitiveoptochinsensitive肺炎鏈球菌第二十九頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五生化反應:血瓊脂平板上,雙層溶血環(huán)(θ、α毒素),“靶樣溶血”血平板(雙層溶血環(huán))第三十頁,共三十三頁,編輯于2023年,星期五結(jié)核桿菌:細長略帶彎曲,細胞壁脂質(zhì)含量較高;“三無”;抗酸染色陽性。齊-尼抗酸染色第三十一頁,共三十三頁,編輯于2023年
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