第十單元第2課時微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用課件-2023屆高三生物一輪復(fù)習(xí)

微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第2課時課標(biāo)要求1.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是發(fā)酵工程的基礎(chǔ)。2.闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的基礎(chǔ)。3.闡明無菌技術(shù)是在操作過程中，保持無菌物品和無菌區(qū)域不被微生物污染的

技術(shù)。4.舉例說明通過調(diào)整培養(yǎng)基的配方可有目的的培養(yǎng)某種微生物。5.概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進行微生物分離和純化的常用

方法。6.概述稀釋涂布平板法和顯微鏡計數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法?？键c一微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用考點二微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)內(nèi)容索引重溫高考

真題演練微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用考點一

1.培養(yǎng)基的配制(1)概念：人們按照微生物對

的不同需求，配制出供其________的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)用途：用以

。梳理歸納

夯實必備知識營養(yǎng)物質(zhì)生長繁殖培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物培養(yǎng)基種類特點用途

培養(yǎng)基不含

，呈

狀態(tài)工業(yè)生產(chǎn)

培養(yǎng)基含

，呈__

狀態(tài)微生物的分離、鑒定，活菌計數(shù)，菌種保藏(3)類型：按物理狀態(tài)分類液體固體凝固劑液體凝固劑(如瓊脂)體固(4)成分成分含義作用來源碳源________________構(gòu)成生物體的細胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些也是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機碳源：CO2、NaHCO3等；有機碳源：糖類、牛肉膏等氮源______________________________________無機氮源：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機氮源：蛋白胨等提供碳元素的物質(zhì)提供氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)無機鹽為微生物提供除碳、氮之外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素為微生物提供無機營養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH等無機化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等水生物體含量最高的無機化合物良好的溶劑，參與化學(xué)反應(yīng)等培養(yǎng)基、代謝產(chǎn)物提醒除了上述主要營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足微生物生長對_________________

的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加_____

；在培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；在培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；在培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供_____的條件。pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣素酸性中性或弱堿性無氧維生2.無菌技術(shù)(1)目的：獲得

。(2)關(guān)鍵：

。(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較比較項目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的______

或生物等方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物煮沸消毒法日常用品__________不耐高溫的液體_______________操作空間、操作者的衣物和手等紫外線消毒法接種室、接種箱或超凈工作臺純凈的培養(yǎng)物防止雜菌污染物理、化學(xué)巴氏消毒法化學(xué)藥物消毒法滅菌強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子__________培養(yǎng)基、容器等__________玻璃器皿、金屬用具等___________接種工具等濕熱滅菌法干熱滅菌法灼燒滅菌法提醒選擇無菌技術(shù)的原則：一要考慮無菌技術(shù)的效果，滅菌的效果比消毒要好；二要考慮操作對象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。(4)其他操作①做好消毒和滅菌工作后，要注意避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與_____

接觸。②為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接下來的許多操作都應(yīng)在超凈工作臺上并在

附近進行。周圍的物品酒精燈火焰

源于選擇性必修3P10“相關(guān)信息”：生物消毒法是指利用生物或其

除去環(huán)境中的部分微生物的方法。代謝物3.微生物的純培養(yǎng)(1)概念辨析固體培養(yǎng)基一定形態(tài)結(jié)構(gòu)(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟15～20g瓊脂濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)法干熱滅菌酒精燈火焰灼燒滅菌平板劃線法恒溫培養(yǎng)箱中28請思考以下問題：①平板冷凝后，要將平板倒置的原因是什么？提示因為平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過快地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。②在接種前隨機取若干個滅菌后的未接種的平板，先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是

。檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格(3)平板劃線法操作步驟據(jù)圖思考以下問題：a.第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，這樣做的目的是什么？提示能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。b.操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的填寫下表：項目第一次操作每次劃線之前劃線結(jié)束目的_________________________殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于____________

，使每次劃線菌種數(shù)目減少_________________________________________________________殺死接種環(huán)上原有的微生物上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者c.平板劃線時最后一次劃線為何不能與第一次劃線相連？提示最后一次劃線已經(jīng)將酵母菌稀釋成單個細胞，如果與第一次劃線相連，則增加了酵母菌數(shù)目，得不到純化的效果?？枷蛞慌囵B(yǎng)基與無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)包括以下幾個方面的敘述，其中正確的是A.紫外線照射前，適量噴灑石炭酸等消毒液，可以加強消毒效果B.牛奶的消毒常用紫外線消毒法C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.在微生物接種的實驗中，用95%酒精對實驗者的雙手和超凈工作臺進

行消毒考向突破強化關(guān)鍵能力√2.請回答下列與大腸桿菌有關(guān)的問題：(1)下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4顯色劑瓊脂含量10.0g5.0g5.0g2.0g0.2g12.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL該培養(yǎng)基屬于

(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中的氮源是

。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行

(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需要進行清洗和

。固體蛋白胨滅菌消毒(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干支試管扎成一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入

中滅菌，溫度為121℃，時間為15～30min。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到大氣壓時，將試管取出。(4)從一支試管向另一支試管接種時應(yīng)注意，接種環(huán)要在酒精燈__________________(填“火焰的不充分燃燒層”或“火焰的充分燃燒層”)滅菌，并且待接種環(huán)

后蘸取菌種。高壓蒸汽滅菌鍋火焰的充分燃燒層冷卻考向二微生物的純培養(yǎng)3.如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序為1→2→3→4→5，下列說法正確的是A.操作前要將接種環(huán)用酒精消毒B.劃線操作須在酒精燈火焰附近進行C.只有在5區(qū)才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都不需要對接種環(huán)滅菌√在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在酒精燈火焰上灼燒，不能用酒精消毒；在5個區(qū)域中，只要有單個活細菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落；每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，目的是殺死接種環(huán)上原有的微生物(第一次劃線前)和上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)以防止污染環(huán)境和感染操作者。4.(2022·山西高三適應(yīng)考試)自然界里有多種微生物，將其進行合理的篩選、培養(yǎng)和應(yīng)用，能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領(lǐng)域帶來巨大經(jīng)濟效益。回答下列問題：(1)對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取

法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用

法，若要將微生物采用平板劃線法進行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒

次。平板劃線在做第二次及其以后的劃線操作時，要從上次劃線的

開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線

。高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)灼燒滅菌6末端相連(2)將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中____培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中水分的揮發(fā)。其中，培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了

。倒置作為對照組，檢驗培養(yǎng)基是否被雜菌污染微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)考點二

1.區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基梳理歸納

夯實必備知識種類特點用途舉例選擇培養(yǎng)基允許______________________，同時_____________________________從眾多微生物中分離所需的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，進而產(chǎn)生特定的顏色或其他變化鑒別不同種類的微生物用伊紅—亞甲藍培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌特定種類的微生物生長抑制或阻止其他種類微生物生長提醒常見選擇培養(yǎng)基舉例：①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細菌，篩選出真菌。③無有機碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測定(1)稀釋涂布平板法步驟①系列稀釋操作：該操作常用在將細胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細胞數(shù)量減少，細胞得以分散。操作步驟：②涂布平板操作步驟(2)微生物的數(shù)量測定方法①顯微鏡直接計數(shù)法②間接計數(shù)法——活菌計數(shù)法(即稀釋涂布平板法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。根據(jù)圖示問答以下問題：Ⅰ.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在

的平板進行計數(shù)。Ⅱ.為什么用此種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目低？提示因為當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。30～300Ⅲ.某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為234個(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL)，那么稀釋倍數(shù)為106的試管中細菌的濃度是

個/mL，稀釋倍數(shù)為10的錐形瓶中細菌的濃度為

個/mL，所以每克樣品中的細菌數(shù)是

個。2.34×1032.34×1082.34×1093.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)的實驗操作(1)實驗原理脲酶尿素(2)實驗流程3～830～300稀釋涂布平板30～37菌落數(shù)目穩(wěn)定(3)實驗結(jié)果分析與評價對照的培養(yǎng)皿中無菌落生長對照的培養(yǎng)皿中有菌落生長30～300

選擇性必修3P19“探究·實踐”：本活動初步篩選了能分解尿素的細菌，請進一步借助于生物化學(xué)的方法來鑒定所分離的菌種：_______________________________________________________________________________________________________________________________________________。分解尿素的細菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細菌，若指示劑變紅，可確定該細菌能夠分解尿素考向一微生物的選擇培養(yǎng)5.(2021·江蘇1月適應(yīng)性考試，14)稀釋涂布平板法是分離菌種常用的方法，下列相關(guān)敘述不恰當(dāng)?shù)氖茿.固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至50℃左右時倒平板B.倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影響菌的生長C.稀釋涂布平板分離到的單菌落需進一步劃線純化D.稀釋涂布平板法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計數(shù)考向突破強化關(guān)鍵能力√培養(yǎng)基滅菌后需要冷卻至50°C左右時才能用來倒平板，避免溫度過高，A正確；倒好的平板需要放置一段時間，用以觀察培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B錯誤；稀釋涂布平板法分離的單菌落需要用平板劃線法進行純化培養(yǎng)，C正確；稀釋涂布平板法可以計數(shù)，也可觀察菌落特征進行菌種分離，D正確。6.營養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種成長因子的能力，只能在補充了相應(yīng)的生長因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種(不改變菌落位置)到乙、丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。下列分析正確的是A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是平板劃線法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.甲、乙、丙三個培養(yǎng)皿都可能存在營養(yǎng)缺陷型菌落√甲培養(yǎng)皿的菌落均勻分布，接種方法應(yīng)為稀釋涂布平板法，A項錯誤；甲、丙培養(yǎng)基菌落數(shù)目多，包括野生型酵母菌菌株和某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，乙培養(yǎng)皿沒有生長的菌株是某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，故乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，甲和丙生長了同樣的菌株，則甲和丙是加入了同種生長因子的培養(yǎng)基，B項錯誤；由于基因突變具有不定向性，接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營養(yǎng)缺陷型菌株，且有些菌落不一定由一個酵母菌形成，所以，甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少，C項正確；乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，形成的菌落只可能是野生型菌落，D項錯誤。歸納總結(jié)兩種純化方法的比較項目平板劃線法稀釋涂布平板法分離結(jié)果

關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋；②涂布平板操作接種用具接種環(huán)涂布器歸納總結(jié)兩種純化方法的比較優(yōu)點可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離可以計數(shù)，可以觀察菌落特征缺點不能計數(shù)操作復(fù)雜，需要涂布多個平板共同點都要用到固體培養(yǎng)基；都需進行無菌操作；都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落；都可用于觀察菌落特征考向二微生物的分離和計數(shù)7.(2020·全國Ⅰ，37)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機物)難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉栴}：(1)實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用

的方法進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是

。甲、乙培養(yǎng)基均屬于_____培養(yǎng)基。高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)瓊脂選擇乙培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基中加入的是可使液體培養(yǎng)基凝固的瓊脂。甲、乙兩種培養(yǎng)基都是為了分離出可降解S的細菌，因此是選擇培養(yǎng)基。(2)實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2×107個/mL，若要在每個平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋

倍。104設(shè)稀釋倍數(shù)為A,1mL＝1000μL，套用計算式：A×

＝2×107(個/mL)，計算出A＝104。(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是____________________________

(答出1點即可)。S的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長在篩選降解S物質(zhì)的細菌的過程中，如果培養(yǎng)基中的S濃度過高，會導(dǎo)致細菌培養(yǎng)基的滲透壓增大，細菌失水而代謝活性降低，對S的降解量反而下降(或者S改變了培養(yǎng)基的pH，導(dǎo)致細菌代謝活性降低)。(4)若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟：_____________________________________________________________。取淤泥加入無菌水中，涂布(或稀釋涂布)到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計數(shù)測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)的主要步驟是①淤泥取樣，即取少量的淤泥加入無菌水中；②用稀釋涂布平板法涂布到乙培養(yǎng)基上；③微生物培養(yǎng)與觀察計數(shù)。(5)上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即

。水、碳源、氮源和無機鹽重溫高考真題演練1.(2021·山東，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯誤的是A.甲菌屬于解脂菌B.實驗中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進行對比D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力√1234根據(jù)題干信息“甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍色”，說明甲可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色，因此甲菌屬于解脂菌，A項正確；乙菌菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍色，說明乙菌不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，但乙菌也可以在培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B項錯誤；1234可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進行對比，更加直觀，C項正確；可以利用該平板來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力，觀察指標(biāo)可以是菌落周圍深藍色圈的大小，D項正確。12342.(2021·山東，20)含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運動能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯誤的是A.乙菌的運動能力比甲菌強B.為不影響菌的運動需選用液體培養(yǎng)基C.該實驗不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染1234√1234從圖中可以看出甲菌在試管中分布范圍小于乙菌，說明了乙菌的運動能力比甲菌強，A正確；為不影響菌的運動需選用半固體培養(yǎng)基，B錯誤；該實驗可以根據(jù)黑色沉淀的多少初步比較細菌產(chǎn)生硫化氫的能力，但不能測定產(chǎn)生硫化氫的量，C正確；微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染，D正確。3.(2020·江蘇，19)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是A.倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該實驗結(jié)果因單菌落太多，不能達到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色1234√1234溫度降低后，培養(yǎng)基易凝固，因此倒平板后要及時輕輕晃動，以保持均一性，A項錯誤；由題圖可見，隨著劃線次數(shù)增多，細菌密度減小，Ⅲ區(qū)開始出現(xiàn)單菌落，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B項正確；菌落是由單個微生物細胞或多個同種細胞繁殖到一定程度后形成的，能得到單菌落即可以達到菌種純化的目的，C項錯誤；剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，菌落周圍的纖維素被降解后紅色消失，出現(xiàn)透明圈，D項錯誤。4.(2020·江蘇，31)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關(guān)研究。請回答下列問題：(1)常規(guī)微生物實驗中，下列物品及其滅菌方法錯誤的是

(填編號)。1234編號①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧④(2)稱取1.0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)_____

后，獲得細胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌

個。1234梯度稀釋4.6×105(或460000)1234利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌數(shù)目時，需要將制備的菌懸液進行梯度稀釋，以獲得細胞密度不同的菌懸液，一般來說，菌落數(shù)在30～300個的平板最適于計數(shù)。0.1mL菌懸液中含有46個酵母菌落，則1mL菌懸液中含有460個酵母菌落；1.0g土壤樣品首先稀釋100倍，然后稀釋10倍，共稀釋了1000倍，因此樣本中每克土壤約含酵母菌460×1000＝4.6×105(個)。(3)為了進一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進行

育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以

為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，按照菌落直徑大小進行初篩，選擇直徑____的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。1234誘變脂肪較大1234采用射線輻照引起酵母菌基因突變，此種方法屬于誘變育種。檢查誘變酵母菌產(chǎn)脂肪酶的能力，需要把酵母菌接種到以脂肪為唯一碳源的培養(yǎng)基上，按照產(chǎn)生菌落直徑大小進行初步篩選，直徑大的說明產(chǎn)酶能力強，利用的脂肪(碳源)多，直徑小的說明產(chǎn)酶能力弱，利用的脂肪(碳源)少。(4)在處理含油廢水的同時，可獲得單細胞蛋白，實現(xiàn)污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關(guān)性能，進行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株

進行后續(xù)相關(guān)研究，理由是________________________________________________________________。1234B該菌株增殖速度快，單細胞蛋白產(chǎn)量高；降解脂肪能力強，凈化效果好1234通過分析題圖可知，相同時間內(nèi)，菌株B細胞密度大，說明該菌株增殖速度快，單細胞蛋白產(chǎn)量高；相同時間內(nèi)，菌株B利用的脂肪多，脂肪剩余量少，說明該菌株降解脂肪的能力強，凈化效果好。一、易錯辨析1.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害(

)2.倒平板就是等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來放置(

)3.倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上(

)4.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落(

)5.分解尿素的細菌在分解尿素時，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低(

)√×五分鐘查落實×××二、填空默寫1.(選擇性必修3P10)培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括

等。2.(選擇性必修3P10)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是

，無菌技術(shù)除了用來

外，還能___

。3.(選擇性必修3P12)菌落是指______________________________________

。采用_____

法和

法能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。水、無機鹽、碳源、氮源防止雜菌污染防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染有效避免操作者自身被微生物感染分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體平板劃線稀釋涂布平板4.(選擇性必修3P16)選擇培養(yǎng)基是指________________________________

。5.(選擇性必修3P12)平板冷凝后，要將平板倒置的原因是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后