2022-2023學(xué)年河北省石家莊市正定中學(xué)高二4月月考生物試題（解析版）

試卷第=page11頁(yè)，共=sectionpages33頁(yè)試卷第=page11頁(yè)，共=sectionpages33頁(yè)河北省石家莊市正定中學(xué)2022-2023學(xué)年高二4月月考生物試題學(xué)校:___________姓名：___________班級(jí)：___________考號(hào)：___________一、單選題1．某研究小組為測(cè)定某種藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞（甲）和正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，通常要通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸B．培養(yǎng)液需含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素和動(dòng)物血清等C．為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的細(xì)菌污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素D．甲、乙細(xì)胞在持續(xù)傳代培養(yǎng)過(guò)程中，均會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象【答案】C【分析】1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）溫度和pH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。【詳解】A、通入5%的CO2的目的主要是維持培養(yǎng)液的pH，A錯(cuò)誤；B、生長(zhǎng)素屬于植物激素，培養(yǎng)液中不需要加入生長(zhǎng)素，需含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽和動(dòng)物血清等，B錯(cuò)誤；C、為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的細(xì)菌污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素，C正確；D、肝腫瘤細(xì)胞屬于癌細(xì)胞，癌細(xì)胞可一直增殖，不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制等停止增殖的現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。故選C。2．下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基與植物細(xì)胞培養(yǎng)基的成分有所不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，而植物組織培養(yǎng)需要C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可發(fā)生遺傳物質(zhì)改變，而植物組織培養(yǎng)不能D．植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性【答案】A【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和pH：哺乳動(dòng)物多以36.5℃為宜，最適pH為7.2-7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH。）【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，其中通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等；植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，其中通常含有蔗糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽和植物激素等，A正確；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)都需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，B錯(cuò)誤；C、由于基因突變等原因，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)都可以發(fā)生遺傳物質(zhì)改變，C錯(cuò)誤；D、植物組織培養(yǎng)的結(jié)果是植物體，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是細(xì)胞株、細(xì)胞系，原理是細(xì)胞增殖，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，D錯(cuò)誤。故選A。3．如下圖所示，a表示現(xiàn)代生物工程技術(shù)，b表示其結(jié)果，下面說(shuō)法正確的是（

）A．如果a是核移植技術(shù)，得到b的繁殖方式屬于有性生殖B．如果a是體外受精技術(shù)，則形成的b屬于克隆動(dòng)物C．如果a是胚胎分割技術(shù)，b中個(gè)體的基因型和表型一定相同D．如果a是基因工程，b是乳腺生物反應(yīng)器，則需對(duì)移植的胚胎進(jìn)行性別選擇【答案】D【分析】體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是：將供體體細(xì)胞核導(dǎo)入受體去核卵母細(xì)胞，形成重組細(xì)胞，用電脈沖刺激形成早期胚胎，導(dǎo)入代孕母羊的子宮，妊娠、出生后即克隆動(dòng)物。胚胎移植概念：是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體叫供體（遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀），接受胚胎的個(gè)體叫受體（有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力）?！驹斀狻緼、如果a是核移植技術(shù)，得到b的繁殖方式屬于無(wú)性生殖，A錯(cuò)誤；B、如果a是體外受精技術(shù)，則形成的b屬于有性生殖產(chǎn)生的動(dòng)物，不屬于克隆動(dòng)物，B錯(cuò)誤；C、如果a是胚胎分割技術(shù)，b中個(gè)體的基因型一定相同，表型由于受到環(huán)境影響不一定相同，C錯(cuò)誤；D、如果a是基因工程，b是乳腺生物反應(yīng)器，目的基因表達(dá)的產(chǎn)物在雌性動(dòng)物的乳汁中提取，則需對(duì)移植的胚胎進(jìn)行性別選擇，D正確。故選D。4．科學(xué)家在研究基因定位時(shí)，將人的不能利用次黃嘌呤的突變細(xì)胞株(HGPRT-)和小鼠不能利用胸腺脫氧核苷的突變細(xì)胞株(TK-)進(jìn)行融合，然后利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，得到3株能在選擇培養(yǎng)基上增殖的穩(wěn)定的細(xì)胞株（如下表）。據(jù)此分析下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）細(xì)胞株編號(hào)123所含人染色體編號(hào)11，14，17，227，11，14，175，7，17，21A．可用PEG誘導(dǎo)人和小鼠細(xì)胞融合B．在選擇培養(yǎng)基上增殖的細(xì)胞株1中最多有4條人的染色體C．該選擇培養(yǎng)基中應(yīng)該添加次黃嘌呤和胸腺脫氧核苷D．由表中信息可推測(cè)人的TK基因可能位于17號(hào)染色體上【答案】B【分析】誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法、化學(xué)法（PEG，又稱聚乙二醇）、滅活的病毒誘導(dǎo)?！驹斀狻緼、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法、化學(xué)法（PEG，又稱聚乙二醇）、滅活的病毒誘導(dǎo)，A正確；B、在選擇培養(yǎng)基上增殖的細(xì)胞株1中，如果細(xì)胞處于有絲分裂后期，則一個(gè)細(xì)胞中含有8條染色體，B錯(cuò)誤；C、結(jié)合題干“將人的不能利用次黃嘌呤的突變細(xì)胞株(HGPRT-)和小鼠不能利用胸腺脫氧核苷的突變細(xì)胞株(TK-)進(jìn)行融合，然后利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，得到3株能在選擇培養(yǎng)基上增殖的穩(wěn)定的細(xì)胞株”可知該選擇培養(yǎng)基上應(yīng)添加次黃嘌呤和胸腺脫氧核苷以篩選出成功融合的細(xì)胞，C正確；D、分析表格數(shù)據(jù)可知，細(xì)胞株1、2、3均含有人的17號(hào)染色體，結(jié)合題干“與小鼠不能利用胸腺脫氧核苷的突變細(xì)胞株(TK-)進(jìn)行融合”可推測(cè)人的TK基因可能位于17號(hào)染色體上，D正確。故選B。5．我國(guó)科學(xué)家利用體細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），并將其注射到無(wú)法發(fā)育到成體階段的四倍體囊胚中，最終獲得克隆鼠，經(jīng)鑒定證實(shí)克隆鼠確實(shí)從iPS細(xì)胞發(fā)育而來(lái)，并可繁殖后代。實(shí)驗(yàn)流程見(jiàn)下圖，下列分析正確的是（）A．克隆鼠的遺傳物質(zhì)來(lái)自于黑鼠和灰鼠B．為避免胚胎移植帶來(lái)的免疫排斥，應(yīng)對(duì)白鼠使用免疫抑制劑C．本實(shí)驗(yàn)使用到體外受精和胚胎分割移植等技術(shù)D．誘導(dǎo)多能干細(xì)胞技術(shù)可應(yīng)用于組織器官移植【答案】D【分析】胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體叫“受體”?！驹斀狻緼、分析圖可知，克隆鼠的遺傳物質(zhì)來(lái)自于黑鼠，A錯(cuò)誤；B、大量的研究證明，一般來(lái)說(shuō)受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能，B錯(cuò)誤；C、本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植，沒(méi)有使用到體外受精和胚胎分割移植等技術(shù)，C錯(cuò)誤；D、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞技術(shù)可增殖分化形成特定的組織和器官，應(yīng)用于組織器官移植，減少免疫排斥反應(yīng)，D正確。故選D。6．北方白犀牛曾經(jīng)廣泛分布于非洲中部，因盜獵和棲息地破壞而瀕臨滅絕。2018年3月，北方白犀牛僅剩下最后兩頭雌性個(gè)體。此前，科學(xué)家保存了北方白犀牛的精子，欲通過(guò)胚胎工程方法繁育北方白犀牛。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．可以從雌性北方白犀牛體內(nèi)取出卵母細(xì)胞進(jìn)行體外受精B．可以使用雌性南方白犀牛作為受體，進(jìn)行胚胎移植C．此過(guò)程和克隆技術(shù)相同，將會(huì)得到遺傳背景一致的后代D．可以通過(guò)胚胎分割技術(shù)得到更多遺傳物質(zhì)相同的后代【答案】C【分析】試管動(dòng)物技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)，可見(jiàn)試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)?！驹斀狻緼、為了繁育北方白犀牛，由于已經(jīng)保存了北方白犀牛的精子，因此需要從雌性體內(nèi)取出卵母細(xì)胞進(jìn)行體外受精，以便獲得較多的胚胎，A正確；B、因?yàn)槭荏w子宮對(duì)移入的胚胎基本無(wú)免疫排斥反應(yīng)，因此，可以使用雌性南方白犀牛作為受體，進(jìn)行胚胎移植，B正確；C、此過(guò)程采用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植的技術(shù)手段，為有性生殖的過(guò)程，而克隆技術(shù)為無(wú)性繁殖，顯然二者有差別，不會(huì)得到遺傳背景一致的后代，C錯(cuò)誤；D、為了得到更多遺傳性狀相同的后代，可以通過(guò)胚胎分割技術(shù)，該過(guò)程中需要對(duì)胚胎進(jìn)行均等分割，通常選擇桑椹胚和囊胚進(jìn)行分割，選擇囊胚時(shí)注意對(duì)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，D正確。故選C。7．科學(xué)家將螢火蟲的熒光素和熒光酶基因轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)。長(zhǎng)成的植物通體光亮，堪稱自然界的奇跡。這一研究成果表明（

）①螢火蟲與煙草的DNA結(jié)構(gòu)基本相同②螢火蟲與煙草共用一套遺傳密碼子③煙草體內(nèi)合成了熒光素和熒光酶④螢火蟲和煙草合成蛋白質(zhì)的方式基本相同A．①和③ B．②和③ C．①和④ D．①②③④【答案】D【分析】1、基因工程又叫DNA重組技術(shù)，是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程技術(shù)的原理是基因重組。2、不同生物的基因之所以能拼接，基礎(chǔ)是生物的基因都具有相同的結(jié)構(gòu)，都是具有雙螺旋結(jié)構(gòu)的DNA?！驹斀狻竣?、科學(xué)家將螢火蟲的熒光素和熒光酶基因轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞后，相關(guān)基因需整合到煙草細(xì)胞的染色體的DNA上才能在植物體不同細(xì)胞得以表達(dá)，使植物通體光亮，說(shuō)明螢火蟲與煙草的DNA結(jié)構(gòu)基本相同，①正確；②③④、熒光素和熒光酶基因轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞后能成功表達(dá)，說(shuō)明螢火蟲和煙草合成蛋白質(zhì)的方式基本相同，這兩種生物共用一套遺傳密碼子，在煙草體內(nèi)合成了熒光素和熒光酶，②③④正確。綜上所述，ABC錯(cuò)誤，D正確。故選D。8．采用CTAB法可獲得高純度的DNA，CTAB是陽(yáng)離子去污劑，可溶解細(xì)胞膜，與核酸形成復(fù)合物，溶于乙醇。具體步驟∶將植物葉片研磨成粉末，加入CTAB提取液（含CTAB、2mol/LNaCl），離心后，取上清液；上清液中加入氯仿、異戊醇混合液，充分混勻，離心取上清液，加入異丙醇于-20℃沉淀，再用RNA酶、95%的乙醇沉淀DNA；自然干燥后，加緩沖液溶解DNA后備用。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．CTAB-核酸復(fù)合物溶于高鹽溶液中，可通過(guò)加乙醇使核酸沉淀并去除CTABB．推測(cè)氯仿和異戊醇抽提可除去蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì)，異丙醇或乙醇可將DNA沉淀分離C．CTAB可通過(guò)加速解聚核蛋白用于提取葉綠體DNA和質(zhì)粒DNAD．提取的DNA可在一定溫度下利用二苯胺溶液鑒定【答案】C【分析】染色體由DNA與蛋白質(zhì)組成，線粒體中DNA與葉綠體中DNA是裸露的，不與蛋白質(zhì)結(jié)合。DNA在一定溫度水浴條件下，與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色，因此可利用二苯胺溶液鑒定DNA?！驹斀狻緼、由題干可知，CTAB-核酸復(fù)合物溶于2mol/LNaCl溶液即高鹽溶液中，DNA不溶于酒精，因此可通過(guò)加乙醇使核酸沉淀并去除CTAB，A正確B、由題干“上清液中加入氯仿、異戊醇混合液”可知，氯仿和異戊醇抽提可除去蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì)；由題干“充分混勻，離心取上清液，加入異丙醇于-20℃沉淀，再用RNA酶、95%的乙醇沉淀DNA”可知，異丙醇或乙醇可將DNA沉淀分離，B正確；C、葉綠體DNA和質(zhì)粒DNA不與核蛋白結(jié)合，因此CTAB不能通過(guò)加速解聚核蛋白來(lái)提取這兩種DNA，C錯(cuò)誤；D、DNA在一定溫度水浴條件下，與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色，因此可利用二苯胺溶液鑒定，D正確。故選C。9．對(duì)乙型肝炎病毒基因組的DNA測(cè)序得知該病毒的核心蛋白和表面抗原蛋白的氨基酸序列。下圖是應(yīng)用生物工程生產(chǎn)乙肝疫苗的示意圖，據(jù)圖分析下列敘述不正確的是（

）A．生產(chǎn)乙肝疫苗的過(guò)程也達(dá)到了定向改造細(xì)菌的目的B．選用細(xì)菌作為受體細(xì)胞是因?yàn)槠浯x旺盛繁殖快C．用于生產(chǎn)疫苗的目的基因能編碼病毒的表面抗原蛋白D．②過(guò)程利用Ca2+處理細(xì)菌，即可將重組表達(dá)載體導(dǎo)入所有的細(xì)菌細(xì)胞【答案】D【分析】分析題圖：圖示是應(yīng)用生物工程生產(chǎn)乙肝疫苗的示意圖。①表示獲取目的基因，即從乙肝病毒中分離出有關(guān)基因（目的基因）；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建和將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；③表示采用微生物工程進(jìn)行發(fā)酵?！驹斀狻緼、生產(chǎn)乙肝疫苗的過(guò)程采用了基因工程技術(shù)，該技術(shù)能定向改造生物的性狀，A正確；B、選用細(xì)菌作為受體細(xì)胞是因?yàn)槠渚哂蟹敝晨?，遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等特點(diǎn)，B正確；C、目的基因是能編碼病毒的表面抗原蛋白，用于生產(chǎn)疫苗，C正確；D、Ca2+處理的細(xì)菌并非都能成為感受態(tài)，因此并非重組表達(dá)載體都能導(dǎo)入所有細(xì)菌細(xì)胞中，D錯(cuò)誤。故選D。10．在胰島B細(xì)胞中，當(dāng)胰島素原向胰島素轉(zhuǎn)變的過(guò)程中，furin酶可以識(shí)別并切除胰島素原分子中特定的氨基酸序列，從而完成胰島素的加工，產(chǎn)生具有生物活性的胰島素。某些糖尿病患者體內(nèi)合成的胰島素原結(jié)構(gòu)異常，不能正常完成上述過(guò)程?；蛑委熢擃惢颊叩姆椒ㄖ皇牵簩⒁葝u素基因?qū)胍葝uB細(xì)胞以外的細(xì)胞，同時(shí)導(dǎo)入一些調(diào)節(jié)因子刺激該細(xì)胞再生，使之成為能分泌具生物活性胰島素的新B細(xì)胞。欲使胰島素基因的表達(dá)產(chǎn)物在新的B細(xì)胞中能被加工，產(chǎn)生生物活性，正確的操作是A．導(dǎo)入胰島素基因時(shí)，同時(shí)導(dǎo)入furin酶基因B．導(dǎo)入胰島素基因后，加入furin酶C．使胰島素基因的表達(dá)產(chǎn)物中含furin酶切位點(diǎn)D．改造furin酶基因，使其喪失識(shí)別和切除功能【答案】C【詳解】真核基因由非編碼區(qū)和編碼區(qū)兩部分組成，編碼區(qū)中又分為外顯子和內(nèi)含子。在非編碼區(qū)有RNA聚合酶的識(shí)別位點(diǎn)，是轉(zhuǎn)錄的起點(diǎn)。轉(zhuǎn)錄生成的mRNA包含了外顯子和內(nèi)含子的遺傳信息。根據(jù)題干信息，翻譯產(chǎn)生的胰島素原需經(jīng)過(guò)furin加工切除特定氨基酸序列后，才能變?yōu)榫哂猩锘钚缘囊葝u素。某些糖尿病患者是因?yàn)橐葝u素原結(jié)構(gòu)異常，缺乏酶切點(diǎn)不能被修飾，而不是缺乏furin酶。所以，治療該類患者重要的是使胰島素基因的表達(dá)產(chǎn)物中含furin酶切位點(diǎn)。綜上分析可知，C正確，ACD錯(cuò)誤。故選C?！军c(diǎn)睛】11．作為基因工程的運(yùn)輸工具——載體，必須具備的條件及理由對(duì)應(yīng)不正確的是（

）A．能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定保存并大量復(fù)制，以便提供大量的目的基因B．具有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，以便于目的基因的插入C．具有某些標(biāo)記基因，以便目的基因能夠準(zhǔn)確定位與其結(jié)合D．對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)傷害，以不影響宿主細(xì)胞的正常生命活動(dòng)【答案】C【分析】為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)，以便于目的基因的插入；②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)。【詳解】A、作為運(yùn)載體必須具備的條件之一是能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來(lái)并大量復(fù)制，以便提供大量的目的基因，A正確；B、作為運(yùn)載體必須具備的條件之一是具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便于目的基因的插入，B正確；C、作為運(yùn)載體必須具備的條件之一是具有某些標(biāo)記基因，以便于重組后進(jìn)行重組DNA分子的篩選，C錯(cuò)誤；D、攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后，停留在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，或整合到染色體DNA上，隨著染色體DNA進(jìn)行同步復(fù)制，同時(shí)運(yùn)載體對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)傷害，以使目的基因在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，D正確。故選C。12．為利用鏈霉菌生產(chǎn)藥物A，研究者構(gòu)建重組DNA并導(dǎo)入鏈霉菌。重組DNA含啟動(dòng)子P、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）。培養(yǎng)和篩選過(guò)程如下圖所示。下列敘述不正確的是（

）A．導(dǎo)入成功的鏈霉菌細(xì)胞內(nèi)可能發(fā)生基因重組B．誘變處理使培養(yǎng)液中的鏈霉菌產(chǎn)生不同突變C．卡那霉素抗性強(qiáng)弱可反映藥物A基因的表達(dá)量D．生產(chǎn)藥物A最適合選用培養(yǎng)基b上的菌株【答案】D【分析】基因工程的原理是基因重組，基因工程的基本操作程序?yàn)椋耗康幕虻暮Y選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測(cè)與鑒定。【詳解】A、重組DNA含啟動(dòng)子P、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因），導(dǎo)入受體細(xì)胞中，目的基因會(huì)插入到受體細(xì)胞的基因組中，發(fā)生的可遺傳變異類型為基因重組，A正確；B、誘變處理所依據(jù)的原理是基因突變，基因突變是不定向的，所以誘變處理使培養(yǎng)液中的鏈霉菌產(chǎn)生不同突變，B正確；C、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）共用一個(gè)啟動(dòng)子，二者共表達(dá)，所以卡那霉素抗性強(qiáng)弱可反映藥物A基因的表達(dá)量，C正確；D、誘變處理后將菌液稀釋后涂布，在含不同濃度卡那霉素的培養(yǎng)基上各接種等量同一稀釋度的培養(yǎng)液，應(yīng)該選擇含卡那霉素濃度最高的培養(yǎng)基上所長(zhǎng)出的菌落，其生產(chǎn)藥物A的能力也較強(qiáng)，D錯(cuò)誤。故選D。13．轉(zhuǎn)基因技術(shù)在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)育種中起著重要作用，其中轉(zhuǎn)基因沉默現(xiàn)象不利于這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用，因此該現(xiàn)象是轉(zhuǎn)基因工作者需要考慮的一個(gè)重要問(wèn)題。在中國(guó)科學(xué)院華南植物園研究人員前期獲得的多基因定點(diǎn)疊加的煙草材料中，有1/3存在轉(zhuǎn)基因沉默現(xiàn)象，不能正常使用。如果能使目標(biāo)基因在這些材料重新表達(dá)，將會(huì)提高這項(xiàng)技術(shù)的效率。相關(guān)敘述中正確的是（

）A．正常的生物體細(xì)胞中的每個(gè)基因都會(huì)表達(dá)，不存在基因沉默現(xiàn)象B．轉(zhuǎn)基因技術(shù)利用了基因重組的原理C．轉(zhuǎn)基因技術(shù)中需要用到3種工具酶，即限制酶、DNA連接酶以及載體D．目的基因必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行復(fù)制【答案】B【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)，個(gè)體水平上的鑒定?！驹斀狻緼、正常的生物體細(xì)胞中基因選擇性表達(dá)，依然存在基因沉默現(xiàn)象，A錯(cuò)誤；B、轉(zhuǎn)基因技術(shù)是利用了現(xiàn)有基因的重新組合，屬于基因重組的原理，B正確；C、轉(zhuǎn)基因技術(shù)中需要用到2種工具酶，即限制酶與DNA連接酶，載體不是酶，C錯(cuò)誤；D、目的基因必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選B。二、多選題14．2022年6月10日，世界首例體細(xì)胞克隆北極狼在北京呱呱墜地?？寺”睒O狼的供體細(xì)胞來(lái)自哈爾濱極地公園引進(jìn)的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細(xì)胞來(lái)自一只母犬，代孕母體則是一只比格犬。克隆過(guò)程如圖所示，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．體細(xì)胞核移植技術(shù)比胚胎干細(xì)胞核移植技術(shù)更易成功B．克隆北極狼的成功說(shuō)明已分化的動(dòng)物體細(xì)胞具有全能性C．圖中細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過(guò)程中發(fā)生了基因重組D．體細(xì)胞核移植技術(shù)有望用于增加瀕危動(dòng)物的種群數(shù)量【答案】ABC【分析】克隆是指生物體通過(guò)體細(xì)胞進(jìn)行的無(wú)性繁殖，以及由無(wú)性繁殖形成的基因型完全相同的后代個(gè)體。通常是利用生物技術(shù)由無(wú)性生殖產(chǎn)生與原個(gè)體有完全相同基因的個(gè)體或種群?！驹斀狻緼、體細(xì)胞的分化程度比胚胎干細(xì)胞的分化程度高，與體細(xì)胞核移植技術(shù)相比，胚胎干細(xì)胞核移植技術(shù)更易成功，A錯(cuò)誤；B、克隆北極狼的成功說(shuō)明已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞分裂、分化的過(guò)程一般不會(huì)發(fā)生基因重組，基因重組一般發(fā)生在有性生殖的生物進(jìn)行減數(shù)分裂過(guò)程中，C錯(cuò)誤；D、體細(xì)胞核移植技術(shù)是無(wú)性繁殖，有望用于增加瀕危動(dòng)物的種群數(shù)量，D正確。故選ABC。15．如圖表示某學(xué)習(xí)小組利用正常的小鼠細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程，①～④表示相關(guān)過(guò)程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．過(guò)程①可以使用機(jī)械法或酶解法改變細(xì)胞的通透性B．過(guò)程②為原代培養(yǎng)，培養(yǎng)細(xì)胞1一般會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象C．培養(yǎng)細(xì)胞2需要貼附于基質(zhì)表面生長(zhǎng)，直接用離心法進(jìn)行收集D．進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中，不會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá)【答案】ACD【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。【詳解】A、在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要對(duì)新鮮取材的動(dòng)物組織進(jìn)行處理，或用機(jī)械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間，將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程②為原代培養(yǎng)，培養(yǎng)細(xì)胞1分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，B正確；C、培養(yǎng)細(xì)胞2需要重新用胰蛋白酶處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再用離心法收集，C錯(cuò)誤；D、進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中，也存在基因的選擇性表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選ACD。16．EV71是引發(fā)手足口病的一種人腸道病毒。為制備抗EV71的單克隆抗體，科研人員用小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1和VP2作為抗原分別注射到3組小鼠體內(nèi)，引發(fā)小鼠機(jī)體的體液免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。多次免疫后，分別取上述3組小鼠的血清和未免疫小鼠血清，測(cè)定抗體與抗原的結(jié)合強(qiáng)度，結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原B．制備抗EV71單克隆抗體時(shí)，選用VP2免疫的小鼠脾臟細(xì)胞效果最佳C．測(cè)定各組小鼠血清與非EV71蛋白結(jié)合強(qiáng)度，目的是排除抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響D．取小鼠的體細(xì)胞，用滅活的病毒誘導(dǎo)與骨髓瘤細(xì)胞融合【答案】BD【分析】單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。【詳解】A據(jù)圖可知，EV71免疫的小鼠血清與EV71、VP1和VP2三種抗原結(jié)合強(qiáng)度都有一定的相對(duì)值，說(shuō)明EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原，A正確；B、制備抗EV71單克隆抗體時(shí)，選用VP1免疫的小鼠脾臟細(xì)胞效果最佳，依據(jù)是第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒（和VP1蛋白），而第3組（VP2免疫）血清抗體無(wú)法特異性結(jié)合EV71病毒，僅能結(jié)合VP2，B錯(cuò)誤；C、血清中存在抗體，能與相應(yīng)的抗原結(jié)合，測(cè)定各組小鼠血清與非EV71蛋白結(jié)合強(qiáng)度，目的是排除抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，C正確；D、取小鼠的脾臟中相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，用滅活的病毒誘導(dǎo)與骨髓瘤細(xì)胞融合，能篩選獲得雜交瘤細(xì)胞株，D錯(cuò)誤。故選BD。17．圖1表示限制酶甲和限制酶乙的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，圖2表示兩個(gè)DNA分子及其酶切位點(diǎn)。下列說(shuō)法中錯(cuò)誤的是（

）A．限制酶主要是從原核生物中分離純化來(lái)的，只能識(shí)別和切割雙鏈DNAB．雖然限制酶甲和乙的識(shí)別序列不同，但能切割出相同的黏性末端C．限制酶甲在切割DNAⅠ時(shí)需切斷兩個(gè)磷酸二酯鍵，新形成四個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D．產(chǎn)物Ⅰ和產(chǎn)物Ⅱ經(jīng)DNA連接酶連接后的產(chǎn)物，仍能被酶甲和酶乙識(shí)別【答案】CD【分析】限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子中的特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中的特定部位的磷酸二酯鍵斷開，作用的結(jié)果是產(chǎn)生黏性末端或者平末端?！驹斀狻緼、限制酶主要是從原核生物中分離純化來(lái)的，具有專一性，只能識(shí)別雙鏈DNA分子中特定的核苷酸序列并進(jìn)行切割，A正確；B、雖然限制酶甲和乙的識(shí)別序列不同，但能切割出的黏性末端均為GATC—，B正確；C、限制酶甲在切割DNAⅠ時(shí)需切斷兩條鏈中GA之間的磷酸二酯鍵，共兩個(gè)，新2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，C錯(cuò)誤；D、產(chǎn)物Ⅰ和產(chǎn)物Ⅱ經(jīng)DNA連接酶連接后的產(chǎn)物為—AGATCC—，這樣的序列不能被酶甲和酶乙識(shí)別，D錯(cuò)誤。故選CD。18．實(shí)時(shí)熒光RT-PCR用于RNA病毒的核酸檢測(cè)，其原理是：在PCR性過(guò)程中探針和引物一起與模板結(jié)合，探針兩側(cè)分別帶有熒光基團(tuán)和抑制熒光發(fā)出的淬滅基團(tuán)，新鏈延伸過(guò)程中，DNA聚合酶會(huì)破壞探針，導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離而發(fā)出熒光，如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的有（）A．與細(xì)胞內(nèi)DNA制相比，該技術(shù)用的DNA聚合酶最適溫度較高B．通過(guò)溫度變化的控制為變性、復(fù)性和延伸等過(guò)程提供能量C．該過(guò)程中消耗引物的量與發(fā)出的熒光強(qiáng)度之間呈負(fù)相關(guān)D．與抗體檢測(cè)相比，核酸檢測(cè)能更早發(fā)現(xiàn)患者并及時(shí)治療【答案】AD【分析】PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種游離的脫氧核苷酸，一對(duì)引物，熱穩(wěn)定DNA聚合酶?！驹斀狻緼、酶作用的發(fā)揮需要適宜的條件，實(shí)時(shí)熒光RT-PCR過(guò)程溫度要高于體溫，所以與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比，該技術(shù)用的DNA聚合酶最適溫度較高，A正確；B、溫度不能為變性、復(fù)性和延伸等過(guò)程提供能量，B錯(cuò)誤；C、復(fù)性過(guò)程中探針和引物一起與模板結(jié)合，故消耗引物的量與發(fā)出的熒光強(qiáng)度之間呈正相關(guān)，C錯(cuò)誤；D、從感染到病毒到抗體產(chǎn)生，需要一定的免疫時(shí)間，所以與抗體檢測(cè)相比，核酸檢測(cè)能更早發(fā)現(xiàn)患者并及時(shí)治療，D正確。故選AD。三、綜合題19．2019年7月21日代孕貓?jiān)谂咛ヒ浦?6天后順利分娩，我國(guó)首例完全自主培育的克隆貓“大蒜”誕生?！按笏狻笔且恢环浅？蓯?ài)的短毛貓，小貓現(xiàn)在健康狀況良好。這次成功培育克隆貓是世界為數(shù)不多的成功案例之一，標(biāo)志著我國(guó)在克隆領(lǐng)域又邁進(jìn)了一大步。下圖為克隆貓“大蒜”培育過(guò)程的示意圖，請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：(1)進(jìn)行過(guò)程①和③時(shí)，通常將細(xì)胞置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中O2的作用是___________，CO2主要作用是__________。需要為培養(yǎng)細(xì)胞提供無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，其具體操作有_________________（答出1點(diǎn)）。(2)核移植前需將采集到的卵母細(xì)胞培養(yǎng)至_______期。為了避免取核過(guò)程對(duì)細(xì)胞核造成損傷，在核移植過(guò)程中通常采用_____________________的做法。(3)圖中過(guò)程③稱為_________，過(guò)程④稱為__________，進(jìn)行過(guò)程④前，應(yīng)用激素對(duì)代孕貓和供體貓做同期發(fā)情處理，目的是________________?！敬鸢浮?1)滿足動(dòng)物細(xì)胞的呼吸CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH定期更換培養(yǎng)液（對(duì)培養(yǎng)皿和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素）(2)MⅡ期/減數(shù)第二次分裂中接將貓“大蒜”的體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞(3)核移植早期胚胎培養(yǎng)使供、受體生殖器官的生理變化相同，為供體的胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：即對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。（2）營(yíng)養(yǎng)條件：例如，需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素以及添加血清或血漿。（3）溫度和pH：適宜的溫度和pH。（4）95%空氣和5%二氧化碳的混合氣體的培養(yǎng)箱中，其中95%的空氣用于呼吸作用，5%的二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH值?！驹斀狻浚?）進(jìn)行過(guò)程①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和③早期胚胎培養(yǎng)時(shí)，通常將細(xì)胞置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中該混合氣體的作用是：O2滿足動(dòng)物細(xì)胞的呼吸，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，為了保證無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境的具體操作有：對(duì)培養(yǎng)皿和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液。（2）根據(jù)核移植的操作過(guò)程，核移植前需將來(lái)自供體貓的卵母細(xì)胞培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期，為了避免取核過(guò)程對(duì)細(xì)胞核造成損傷，在核移植過(guò)程中可直接將貓“大蒜”的體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞。（3）識(shí)圖分析可知，圖中①為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、②為核移植、③早期胚胎培養(yǎng)、④為胚胎移植。胚胎移植前要用激素處理，讓代孕貓與供體貓進(jìn)行同期發(fā)情處理，使其生殖器官的生理變化相同，為供體的胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境。20．科學(xué)家將小鼠多能干細(xì)胞的4種基因Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4，同時(shí)導(dǎo)入已分化的小鼠成纖維細(xì)胞中，結(jié)果后者被誘導(dǎo)成為多能干細(xì)胞，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPScell），此類細(xì)胞能分裂并產(chǎn)生皮膚細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞以及可以搏動(dòng)的心肌細(xì)胞等。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：(1)人體干細(xì)胞可以分為__________兩大類。(2)④過(guò)程表示細(xì)胞發(fā)生了分化，原因是D、E和F細(xì)胞中的__________（填2種化合物名稱）種類不完全相同。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是__________。(3)艾弗里在證明DNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)分別向不同實(shí)驗(yàn)組加入各類酶來(lái)確認(rèn)“轉(zhuǎn)化因子”的化學(xué)本質(zhì)，利用了自變量控制的___________原理。參考此方法，如果要了解Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因在誘導(dǎo)iPS細(xì)胞時(shí)，每個(gè)基因作用的相對(duì)大小，該如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?請(qǐng)你給出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的思路：__________?！敬鸢浮?1)胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞(2)mRNA、蛋白質(zhì)基因的選擇性表達(dá)(3)減法依次去掉1個(gè)基因，將其他3個(gè)基因轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，通過(guò)與轉(zhuǎn)入4個(gè)基因的小鼠成纖維細(xì)胞的誘導(dǎo)情況進(jìn)行比較，來(lái)推測(cè)缺失的基因?qū)φT導(dǎo)iPS細(xì)胞的影響，進(jìn)而判斷每個(gè)基因作用的相對(duì)大小【分析】細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程；細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)：基因的選擇性表達(dá)；細(xì)胞分化的結(jié)果：細(xì)胞的種類增多，細(xì)胞中細(xì)胞器的種類和數(shù)量發(fā)生改變，細(xì)胞功能趨于專門化?！驹斀狻浚?）人體干細(xì)胞根據(jù)分化程度可以分為胚胎干細(xì)胞與成體干細(xì)胞。（2）④過(guò)程表示細(xì)胞分化，細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞D與細(xì)胞E、F中選擇性表達(dá)了其中某些特定基因，產(chǎn)生的蛋白質(zhì)與mRNA種類不完全相同，使細(xì)胞的功能趨于專門化。（3）艾弗里在證明DNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中，分別向不同實(shí)驗(yàn)組加入各類酶以除去相應(yīng)某種物質(zhì)，以研究該物質(zhì)的作用，這一方法利用的是減法原理。若采用減法原理了解Oct3/4、Sox2，c-Myc和Klf4基因在誘導(dǎo)iPS細(xì)胞時(shí)，每個(gè)基因作用的相對(duì)大小，實(shí)驗(yàn)思路是依次去掉1個(gè)基因，將其他3個(gè)基因轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，通過(guò)與轉(zhuǎn)入4個(gè)基因的小鼠成纖維細(xì)胞的誘導(dǎo)情況進(jìn)行比較，來(lái)推測(cè)缺失的基因?qū)φT導(dǎo)iPS細(xì)胞的影響，進(jìn)而判斷每個(gè)基因作用的相對(duì)大小。21．埃博拉病毒（EBOV）是一種能導(dǎo)致人類出血熱的致死性病毒，對(duì)公共衛(wèi)生具有較嚴(yán)重的危害。EBOV的NP蛋白在病毒復(fù)制中具有重要作用，也是檢測(cè)EBOV的重要靶蛋白。實(shí)驗(yàn)人員用NP蛋白免疫小鼠來(lái)制備抗EBOV單克隆抗體，過(guò)程如下圖所示。回答下列問(wèn)題：(1)制備抗EBOV單克隆抗體過(guò)程中，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是__________。(2)選擇骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合，原因是骨髓瘤細(xì)胞具有__________的特征。體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞時(shí)，應(yīng)該在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加__________等天然成分。與植物細(xì)胞融合相比，誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合特有的方法是__________。(3)獲得的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，原因是__________。(4)抗EBOV單克隆抗體可用于檢測(cè)血漿中EBOV的含量，檢測(cè)原理如下圖所示。①檢測(cè)前，先將抗EBOV單克隆抗體固定在支持物上，然后向檢測(cè)體系中加入一定量含有EBOV的血漿（其NP蛋白稱為待測(cè)抗原）和等量酶標(biāo)記的NP蛋白（酶標(biāo)記抗原），目的是讓待測(cè)抗原、酶標(biāo)記抗原與抗EBOV單克隆抗體__________結(jié)合。②保溫一段時(shí)間后洗滌，再向檢測(cè)體系中加入一定量的白色底物，若檢測(cè)體系藍(lán)色越__________，則說(shuō)明__________?！敬鸢浮?1)刺激小鼠產(chǎn)生更多能分泌抗NP抗體的B淋巴細(xì)胞(2)能無(wú)限增殖血清滅活病毒誘導(dǎo)法(3)和骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞有多種，雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生抗NP蛋白的抗體(4)競(jìng)爭(zhēng)性淺（或少）血漿中NP蛋白（EBOV）含量越高（或越低）【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斀狻浚?）制備抗EBOV單克隆抗體過(guò)程中，需要用免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是：刺激小鼠產(chǎn)生更多能分泌抗NP抗體的B淋巴細(xì)胞。（2）適宜條件下，骨髓瘤細(xì)胞具有能無(wú)限增殖的特點(diǎn)；為保證動(dòng)物細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞時(shí)，應(yīng)該在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加血清等天然成分；與植物細(xì)胞融合相比（有物理方法、化學(xué)方法等），誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合特有的方法是滅活病毒誘導(dǎo)法。（3）經(jīng)過(guò)第一次篩選后，得到的是雜交瘤細(xì)胞，即和骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞有多種，雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生抗NP蛋白的抗體，故獲得的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，以篩選得出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。（4）①根據(jù)圖示反應(yīng)原理，待測(cè)抗原中的目標(biāo)抗原和酶標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合固相抗體。②標(biāo)記抗原的酶可催化白色底物變?yōu)樗{(lán)色產(chǎn)物，所以如果待測(cè)抗原中目標(biāo)抗原越多，則酶標(biāo)記抗原和抗體結(jié)合得越少，催化生成的藍(lán)色產(chǎn)物就越少，檢測(cè)體系藍(lán)色就越淺。22．賴氨酸是人體細(xì)胞不能合成的必需氨基酸?？茖W(xué)家把某種必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因（R）導(dǎo)入玉米中，使玉米中賴氨酸的含量提高30%。據(jù)下圖回答下列問(wèn)題。(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增R基因時(shí)，需要在一定的緩沖液中才能進(jìn)行，其中需要加入酶和激活該酶所需的__________。為了特異性擴(kuò)增R基因序列，需根據(jù)__________設(shè)計(jì)特異性引物，為了使質(zhì)粒和R基因準(zhǔn)確連接，擴(kuò)增R基因時(shí)需選擇的引物是________。(2)隨著轉(zhuǎn)化方法的突破，農(nóng)桿菌侵染玉米這種單子葉植物也取得了成功?？蒲腥藛T從新鮮的玉米葉片上取下的圓形小片與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，當(dāng)農(nóng)桿菌侵染玉米細(xì)胞后，能將__________上的T-DNA轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合到__________。(3)檢測(cè)R基因是否表達(dá)的方法是__________。(4)在基因工程中若要培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因小鼠，將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞常用的方法是__________，常用的受體細(xì)胞是__________?！敬鸢浮?1)Mg2+R基因兩端的堿基序列B、G(2)Ti質(zhì)粒玉米細(xì)胞染色體DNA(3)抗原-抗體雜交(4)顯微注射法受精卵【分析】基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?；蚬こ痰墓ぞ哂邢拗泼?、DNA連接酶、基因的載體。基因工程的基本操作程序：（1）目的基因的獲取。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。（4）目的基因的檢測(cè)和鑒定?！驹斀狻浚?）PCR技術(shù)需要加入耐熱的DNA聚合酶，激活該酶需要Mg2+。為了將R基因從DNA序列中擴(kuò)增出來(lái)，需要根據(jù)R基因兩端的特定堿基序列合成引物，從而將兩個(gè)引物之間的R基因擴(kuò)增出來(lái)。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要用限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，然后用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒。為了避免R基因和質(zhì)粒的自連或反向連接，應(yīng)選擇兩種不同的限制酶去切割質(zhì)粒和目的基因。圖中T-DNA區(qū)域只有PstⅠ、EcoRⅠ兩種限制酶切口，而R基因左邊可被PstⅠ切割、右邊可被EcoRⅠ切割，可以選擇PstⅠ、EcoRⅠ兩種限制酶。PCR過(guò)程需要兩種引物，能分別與目的基因兩條