免疫細(xì)胞及亞群高立芬

免疫細(xì)胞及亞群高立芬山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系Tel：2014-9-281當(dāng)前第1頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)PlasmaCellAb(HI)

ExposuretoAntigen(Naturally-acquiredorartificial)VirginlymphocyterepertoirePRIMARYRESPONSESECONDARYRESPONSEeffectorcells

memorycellpooleffectorcells

memorycellpool

ActivatedTlymphocytesActivatedBlymphocytesCKsCytotoxicity(CMI)抗原—免疫系統(tǒng)—免疫應(yīng)答2當(dāng)前第2頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)免疫系統(tǒng)當(dāng)前第3頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)免疫細(xì)胞免疫細(xì)胞是指參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答相關(guān)的細(xì)胞。免疫細(xì)胞可以分為多種，包括淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等。4當(dāng)前第4頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)ICC當(dāng)前第5頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)6當(dāng)前第6頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)7當(dāng)前第7頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)免疫活性細(xì)胞（immunocompetentcell,ICC）：具有特異性抗原受體，接受抗原刺激后能發(fā)生活化、增殖和分化，產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的細(xì)胞，包括T細(xì)胞、B細(xì)胞。適應(yīng)性免疫細(xì)胞當(dāng)前第8頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)固有免疫細(xì)胞9當(dāng)前第9頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)免疫細(xì)胞及亞群一、T淋巴細(xì)胞及亞群二、B淋巴細(xì)胞及亞群三、巨噬細(xì)胞及亞群四、DC及亞群五、固有淋巴細(xì)胞六、其他10當(dāng)前第10頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)

CellsinthymusThymusstromacells(TSC):Thymusepithelialcells(Nursecells),Macrophages,Dendriticcells,fibroblastThymocytes:Thecellsmigratefromthebonemarrowtothethymusandthenbecomethymocytes

當(dāng)前第11頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)1.祖T細(xì)胞

CD3-TCR-CD4-CD8-

TCRβ鏈開始重排TCR重排胸腺選擇T細(xì)胞成熟的分期雙陰性雙陽性單陽性2.前T細(xì)胞

CD3+

TCRpTα:β

CD4+CD8+3.未成熟T細(xì)胞

TCRα鏈重排

CD3+

TCRαβ+

CD4+CD8+

4.成熟T細(xì)胞

CD3+

TCRαβ+

CD4+或

CD3+

TCRαβ+

CD8+12當(dāng)前第12頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)T細(xì)胞成熟過程中的主要事件

1.TCR基因重排

2.胸腺選擇：陰性選擇和陽性選擇13當(dāng)前第13頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)GeneRearrangmentThymusSelection14當(dāng)前第14頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)胸腺選擇：陽性選擇和陰性選擇1）陽性選擇----MHC限制性2）陰性選擇----自身耐受

15當(dāng)前第15頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)

在胸腺皮質(zhì)中，與胸腺上皮細(xì)胞表達(dá)的自身MHCⅠ類或Ⅱ類分子進(jìn)行特異結(jié)合的DP細(xì)胞，可繼續(xù)分化為單陽性（SP）細(xì)胞；不能與自身MHC分子發(fā)生有效結(jié)合的DP細(xì)胞，在胸腺皮質(zhì)中發(fā)生凋亡(占95%以上)。約5％的DP細(xì)胞經(jīng)選擇而存活，此過程稱為胸腺的陽性選擇（positiveselection）。1）陽性選擇16當(dāng)前第16頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)DP細(xì)胞TCR能夠識(shí)別、結(jié)合自身MHC---繼續(xù)發(fā)育、分化---SP細(xì)胞DP細(xì)胞TCR不能夠識(shí)別、結(jié)合自身MHC---凋亡獲得MHC限制性MHC分子在陽性選擇中發(fā)揮重要作用:MHC-I------CD8+表達(dá)

MHC-II------CD4+表達(dá)陽性選擇的特點(diǎn)：17當(dāng)前第17頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)MHC-I→DP細(xì)胞表面CD8分子結(jié)合導(dǎo)致CD4分子表達(dá)關(guān)閉CD4-CD8+細(xì)胞MHC-II→DP細(xì)胞表面CD4分子結(jié)合導(dǎo)致CD8分子表達(dá)關(guān)閉CD4+CD8-細(xì)胞18當(dāng)前第18頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)DP細(xì)胞CD8+SP細(xì)胞19當(dāng)前第19頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)DP細(xì)胞CD4+SP細(xì)胞20當(dāng)前第20頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)陰性選擇（negativeselection）：經(jīng)過陽性選擇的胸腺細(xì)胞，在皮質(zhì)區(qū)、皮髓質(zhì)交界處及髓質(zhì)區(qū)，與胸腺DC、巨噬細(xì)胞表達(dá)的自身肽：MHCI類或Ⅱ類分子發(fā)生高親和力結(jié)合的而被消除，或成為無能狀態(tài)，從而獲得自身耐受。2）陰性選擇21當(dāng)前第21頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)陰性選擇的特點(diǎn)：SP細(xì)胞TCR不能結(jié)合自身抗原-MHC復(fù)合物---繼續(xù)發(fā)育、分化SP細(xì)胞TCR能結(jié)合自身抗原-MHC復(fù)合物---凋亡獲得自身耐受22當(dāng)前第22頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)23當(dāng)前第23頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)陽性選擇（獲得MHC限制性）·凡能與胸腺上皮細(xì)胞MHC結(jié)合的T為陽性反應(yīng)細(xì)胞→被選擇出來繼續(xù)發(fā)育，故稱為陽性選擇。陰性選擇(獲得自身耐受)

凡能與自身共同抗原結(jié)合的T細(xì)胞凋亡；不能與自身共同抗原結(jié)合的T細(xì)胞被選擇，繼續(xù)發(fā)育成熟。24當(dāng)前第24頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)T細(xì)胞亞群和功能分類（一）、根據(jù)TCR種類：

1)T細(xì)胞

2)T細(xì)胞25當(dāng)前第25頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)（二）、根據(jù)T細(xì)胞活化階段初始T細(xì)胞活化T細(xì)胞效應(yīng)T細(xì)胞記憶T細(xì)胞26當(dāng)前第26頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)初始T：參與淋巴細(xì)胞再循環(huán)，存活短；效應(yīng)T：不參與再循環(huán)，向外周免疫組織遷 移，介導(dǎo)免疫效應(yīng)，存活短；記憶T：向外周免疫組織遷移，介導(dǎo)免疫效 應(yīng)，存活長，參與再次免疫應(yīng)答。27當(dāng)前第27頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)CD4+T細(xì)胞:

CD4+CD8-ThCD8+T細(xì)胞:CD4-CD8+Tc（三）、根據(jù)CD4或CD8的表達(dá)情況28當(dāng)前第28頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)輔助性T細(xì)胞

(Th1,Th2)----CD4+殺傷性T細(xì)胞

(Tc1,Tc2)----CD8+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞

(CD4+CD25+FoxP3+)（四）、根據(jù)T細(xì)胞功能29當(dāng)前第29頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Morethantwodecadesago,weviewedhelperTcellsashavingtwomajorfates,Th1andTh2cells.ButnowwerecognizethenewdiversityofhelperTcellsincludingTh17,Th9,Th22,TfhanddifferenttypesofregulatoryTcells.

當(dāng)前第30頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)

Celldeath

TNFandIFN-(minorpathway)當(dāng)前第31頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)CTLcellTargetcell當(dāng)前第32頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第33頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第34頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Th1：IL-2，IFN-rTh2：IL-4,IL-10Th17：IL-17Treg：IL-10，TGF-bTh9：IL-9Th22：IL-22，TNF-aTfh:IL-21,IL-6（五）、CD4T細(xì)胞根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞因子35當(dāng)前第35頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)MetabolicRegulationofTLymphocytes36當(dāng)前第36頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)MetabolicRegulationofTLymphocytesCellularmetabolismplaysrolesinTcelldevelopment,activation,differentiation,andfunction37當(dāng)前第37頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)CD25＋

IL-10＋Foxp3＋

nTreg(CD4+CD25+Foxp3+)iTreg(CD4+CD25+Foxp3+IL-10+

)Tr1（aTreg）(CD4+CD25-Foxp3-IL-10+)三類主要的CD4

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞

38當(dāng)前第38頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Th17andTregCellsTh17(CD4+,FoxP3-)IL-17isapro-inflammatorycytokinePromotessecretionofpro-inflammatorycytokines(IL-6)fromfibroblasts,epithelialandendothelialcells.Th17cellsarecriticaltoanti-bacterialimmunity.OverexpressionofIL-17isassociatedwithrheumatoidarthritis,SLE,MSandasthmaTreg(CD4+,Foxp3+)Natural(developinthethymus)PreventeffectorTcelldevelopmentinLNInduced(developintheperiphery)DevelopundertheinfluenceofTGF-?InhibiteffectorTcellfunctioninperiphery.39當(dāng)前第39頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)CellularsourceofIL-17CD4+

αβTh17cells----AdaptiveimmunityphaseλδTcellsMacrophagesNeutrophilsNKTcellsLTi-likecellsNKcellsUnknowncellsInnateimmunityphase40當(dāng)前第40頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)1.VeldhoenM,UyttenhoveC,vanSnickJetal.Transforminggrowthfactor-beta‘reprograms’thedifferentiationofThelper2cellsandpromotesaninterleukin-9producingsubset.NatImmunol2008;9:1341–6.2.DardalhonV,AwasthiA,KwonHetal.IL-4inhibitsTGF-betainducedFoxp3+Tcellsand,togetherwithTGF-beta,generatesIL-9+IL-10+Foxp3(-)effectorTcells.NatImmunol2008;9:1347–55.41當(dāng)前第41頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)asubsetofhumanThcellsthatinfiltratestheepidermisinindividualswithinflammatoryskindisordersandischaracterizedbythesecretionofIL-22andTNF-α,butnotIFN-γ,IL-4,orIL-17.42當(dāng)前第42頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Tfh細(xì)胞濾泡輔助性T細(xì)胞（Tfollicularhelper）通過IL-6和IL-21來調(diào)節(jié)B細(xì)胞的功能。在Tfh發(fā)揮調(diào)節(jié)功能的過程中，Bcl6轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮了重要的作用。Bcl6轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)受IL-6和IL-21的調(diào)控，Bcl6過度表達(dá)可誘導(dǎo)Tfh相關(guān)的基因表達(dá)并抑制其他類型的輔助性T細(xì)胞的分化。43當(dāng)前第43頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)FollicularhelperTcellsnormallypresentinthelightzoneofreactivegerminalcenter(upperleftpanel,immunostainingwithanti-CD57)

當(dāng)前第44頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)45當(dāng)前第45頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第46頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Tcellanergy,exhaustion,senescence,andstemnessinthetumormicroenvironment47當(dāng)前第47頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Cross-talk48當(dāng)前第48頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)免疫細(xì)胞及亞群一、T淋巴細(xì)胞及亞群二、B淋巴細(xì)胞及亞群三、巨噬細(xì)胞及亞群四、DC及亞群五、固有淋巴細(xì)胞六、其他49當(dāng)前第49頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Bcellsdevelopinthebonemarrowandthenmovetosecondarylymphoidtissues.B細(xì)胞在骨髓內(nèi)的發(fā)育成熟50當(dāng)前第50頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)一）骨髓內(nèi)成熟過程

二）骨髓外成熟過程

三）Ig（BCR或抗體）多樣性產(chǎn)生機(jī)制51當(dāng)前第51頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)52當(dāng)前第52頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)1.骨髓微環(huán)境和B細(xì)胞成熟骨髓基質(zhì)細(xì)胞（上皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、巨噬細(xì)胞）與B細(xì)胞直接接觸或分泌細(xì)胞因子多種黏附分子和細(xì)胞因子發(fā)揮作用（如：基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的SCF等）一）B細(xì)胞在骨髓內(nèi)的成熟過程

------不依賴于抗原53當(dāng)前第53頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)祖B細(xì)胞骨髓基質(zhì)細(xì)胞SCFCD117(c-Kit)黏附分子細(xì)胞因子(IL-7等)VCAM-1VLA-454當(dāng)前第54頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌生長因子（如IL-7）刺激B細(xì)胞分裂、增殖stromalcell祖B細(xì)胞55當(dāng)前第55頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)2.B細(xì)胞成熟的分期：造血干細(xì)胞淋巴系干細(xì)胞

祖B細(xì)胞(pro-B,B220/CD45R,重鏈基因重排,胞漿鏈)

前B細(xì)胞(pre-B,替代輕鏈+鏈)未成熟B細(xì)胞(κ鏈或λ鏈+鏈mIgM)

成熟B細(xì)胞(mIgM,mIgD)B細(xì)胞庫

陰性選擇56當(dāng)前第56頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)μ57當(dāng)前第57頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)ThebonemarrowisthesiteofBcellmaturation基因重排陰性選擇BCR58當(dāng)前第58頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)3.B細(xì)胞骨髓內(nèi)成熟過程的主要事件1)陰性選擇---自身耐受

2)Ig基因重排----抗體多樣性59當(dāng)前第59頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)陰性選擇---自身耐受

未成熟B細(xì)胞mIgM---自身抗原mIgM---

自身抗原凋亡或無能繼續(xù)發(fā)育成熟B細(xì)胞×60當(dāng)前第60頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)未成熟B細(xì)胞與多價(jià)自身抗原結(jié)合，導(dǎo)致自身凋亡，稱為克隆清除(clonaldeletion)。61當(dāng)前第61頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)未成熟B細(xì)胞與單價(jià)可溶性自身抗原結(jié)合，引起自身反應(yīng)性B細(xì)胞無能/不活化(anergy)。62當(dāng)前第62頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)不能與自身抗原結(jié)合的未成熟B細(xì)胞，繼續(xù)發(fā)育，同時(shí)表達(dá)IgD和IgM，分化為成熟B細(xì)胞63當(dāng)前第63頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)2）Ig基因重排特異性/克隆水平多樣性/個(gè)體水平B細(xì)胞多樣性庫（109~1012）BcellrepertoireT細(xì)胞多樣性庫（1015~1018）Tcellrepertoire64當(dāng)前第64頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)①Ig基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)3個(gè)基因家族：重鏈:

14號(hào)染色體輕鏈:

:2號(hào)染色體

:22號(hào)染色體65當(dāng)前第65頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)重鏈:14號(hào)染色體CμV區(qū)編碼基因:

VH(可變區(qū))-----65

DH(多樣性區(qū))-----27

JH(連接區(qū))-----6C區(qū)編碼基因:

CH(恒定區(qū)):Cμ,Cδ,Cγ等66當(dāng)前第66頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)輕鏈(--2號(hào)染色體,--22染色體)V區(qū)編碼基因:

----V,J---40,5

----V,J---30,4C區(qū)編碼基因:

C(1);C(4)67當(dāng)前第67頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)重鏈編碼基因中,V、D、J基因片段編碼可變區(qū)，C基因片段編碼恒定區(qū)輕鏈編碼基因中,V、J基因片段編碼可變區(qū)，C基因片段編碼恒定區(qū)68當(dāng)前第68頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)祖B細(xì)胞CD45R前B細(xì)胞重鏈基因重排

鏈+替代輕鏈輕鏈基因重排未成熟B細(xì)胞sIgM陰性選擇成熟B細(xì)胞sIgM、sIgD②Ig基因重排過程69當(dāng)前第69頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)CμCμCμCμCμCμCμμA.重鏈:VDJ基因重排和C基因類別轉(zhuǎn)換70當(dāng)前第70頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)B.輕鏈V-J重排71當(dāng)前第71頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)未成熟B細(xì)胞:VJCVJ-CRNApre-B細(xì)胞:V-JVJDNApre-B細(xì)胞:

VDJCμ

VDJ-Cμ-CδRNA祖B細(xì)胞:D-JV-DJVDJDNA重鏈VDJ重排轉(zhuǎn)錄mRNA剪切mRNA剪切輕鏈VJ重排轉(zhuǎn)錄72當(dāng)前第72頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)③Ig基因重排機(jī)制重組酶RAG1,2:特異性表達(dá)在早期T、B淋巴細(xì)胞RSS(recognitionsignalsequence,識(shí)別信號(hào)序列)12/23原則環(huán)出(loopingout)73當(dāng)前第73頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)RSS:7mer----spacer------9merRAG識(shí)別位點(diǎn)D71297129VH7239JH7239Spacer:間隔序列

12mer或23mer74當(dāng)前第74頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)“12-23”原則---只有具有23merRSS間隔序列的基因片段與12merRSS間隔序列的基因片段之間可能發(fā)生重組VDJ或VJ基因重排的分子基礎(chǔ)VH7239D71297129JH7239VHDJHRAGRAG75當(dāng)前第75頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)LV1V2V3V4V5VnJ1J2J3J4J5J6C區(qū)RAG1/2RAG1/2C區(qū)連接酶LV1V2J4J5J6LV1V2J4J5J6Loopingout76當(dāng)前第76頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)rag1、rag2是一個(gè)復(fù)合物（transposase)的組成成分，二者對(duì)于VDJ重組活性是必須的，任何一個(gè)rag的突變都導(dǎo)致同樣SCID樣表型（缺乏成熟T，B細(xì)胞）。Rag1-/-小鼠和Rag2-/-小鼠缺乏成熟T、B細(xì)胞。Rag-/-小鼠，一般指Rag1-/-小鼠，Rag-/-小鼠里有NK和NKT。TCR基因敲除小鼠（TCRɑβ-γδ-），NK應(yīng)該正常；Rag2-/-γ-/-（doubleknockout）小鼠沒有T、B也沒有NK和NKT。當(dāng)前第77頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)A.等位排斥(Allelicexclusion):

兩條同源染色體上的兩個(gè)等位基因只有一個(gè)能夠表達(dá)。④Ig基因重排特點(diǎn)78當(dāng)前第78頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)B.同種型排斥（Isotypicexclusion）：

一個(gè)B細(xì)胞中，κ鏈基因和λ鏈基因兩種基因中只有其中的一種能表達(dá)。79當(dāng)前第79頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)細(xì)胞核內(nèi):

DNA重組：

----V區(qū)編碼基因(VDJ或VJ)轉(zhuǎn)錄和剪切

----信號(hào)肽基因+V區(qū)編碼基因+C區(qū)編碼基因⑤Ig的表達(dá)胞漿:

翻譯------信號(hào)肽+V區(qū)+C區(qū)內(nèi)質(zhì)網(wǎng):

組裝------重鏈和輕鏈組裝(IgM或IgD)高爾基復(fù)合體:

轉(zhuǎn)運(yùn)------BCR(膜型Ig,mIg)80當(dāng)前第80頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)81當(dāng)前第81頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)二）骨髓外成熟過程----依賴抗原

1.過程

成熟B細(xì)胞

漿細(xì)胞記憶性B細(xì)胞

抗原刺激82當(dāng)前第82頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)83當(dāng)前第83頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)84當(dāng)前第84頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)B細(xì)胞骨髓外成熟的主要事件

1)體細(xì)胞高頻突變(發(fā)生在成熟淋巴細(xì)胞)：

抗原

活化B細(xì)胞增殖

V區(qū)基因隨機(jī)點(diǎn)突變

親和力成熟(affinitymaturation)

85當(dāng)前第85頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)親和力成熟(affinitymaturation)：

在初次免疫應(yīng)答后期和再次免疫應(yīng)答，B細(xì)胞的輕鏈和重鏈V基因發(fā)生隨機(jī)點(diǎn)突變，使得產(chǎn)生抗體的親和力普遍提高的現(xiàn)象，稱為抗體親和力的成熟。86當(dāng)前第86頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)87當(dāng)前第87頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)抗原

活化B細(xì)胞增殖

VDJ與其他C區(qū)基因重組

類別轉(zhuǎn)換

IgMIgG,IgA,IgE

2)重鏈轉(zhuǎn)類88當(dāng)前第88頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)類別轉(zhuǎn)換（classswitching)：

B細(xì)胞受抗原刺激后，最先總是產(chǎn)生IgM，然后再轉(zhuǎn)成產(chǎn)生其他類別的Ig，這種現(xiàn)象稱為Ig的類別轉(zhuǎn)換。89當(dāng)前第89頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)IgM轉(zhuǎn)換成IgG3轉(zhuǎn)類調(diào)控序列IgM轉(zhuǎn)換成IgA190當(dāng)前第90頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)

類別轉(zhuǎn)換發(fā)生在B細(xì)胞受抗原活化、與Th細(xì)胞相互作用的過程中----依賴于Th產(chǎn)生的細(xì)胞因子。91當(dāng)前第91頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)L92當(dāng)前第92頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)3.膜型Ig(BCR)和分泌型Ig93當(dāng)前第93頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)4.mIgM、mIgD共同表達(dá)BmIgMmIgD94當(dāng)前第94頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)醫(yī)學(xué)免疫學(xué)上海第二醫(yī)科大學(xué)免疫教研室95當(dāng)前第95頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)1.重組多樣性

重鏈VDJ和輕鏈VJ基因片段隨機(jī)重組

人類Ig:

65VH×27DH×6JH=10530V

40V×5J=200V

30V×4J=120V三）Ig（BCR或抗體）多樣性產(chǎn)生機(jī)制96當(dāng)前第96頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)2.連接多樣性

V-J,V-DJ或D-J連接過程中,幾個(gè)核苷酸的丟失或新核苷酸的插入增加Ig的多樣性。97當(dāng)前第97頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)98當(dāng)前第98頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)TdT(末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶)Dt/A/C/GTPDt/A/C/GTPAGCTAGCTAG連接酶AGCTAGCTAG隨機(jī)核苷酸加減新核苷酸插入：99當(dāng)前第99頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)3.體細(xì)胞高頻突變和類別轉(zhuǎn)換100當(dāng)前第100頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)101當(dāng)前第101頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)102當(dāng)前第102頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)103當(dāng)前第103頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)B細(xì)胞亞群B1和B2細(xì)胞的比較---------------------------------------------------------------------------

B1B2CD5+-BCRmIgMmIgM和mIgD再生自我更新來自骨髓中的前B細(xì)胞識(shí)別抗原類型TI抗原和自身抗原TD抗原再次免疫應(yīng)答無有--------------------------------------------------------------------------------104當(dāng)前第104頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Breg(B10cell):CD1dhighCD5105當(dāng)前第105頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)106當(dāng)前第106頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)107當(dāng)前第107頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)IL-21inducesregulatoryB10-cellfunction108當(dāng)前第108頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)IL-35-producingBcellsarecriticalregulatorsofimmunityduringautoimmuneandinfectiousdiseases.Nature.2014Mar20;507(7492):366-70.109當(dāng)前第109頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)YYYYYYYBYTYTProliferationandantibodyproductionNoproliferationNocytokinereleaseCross-linkingofsurfacemembraneIgYBYBYBYBYBYBYBYYB110當(dāng)前第110頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)CellsurfacepeptidesofAgYT

TcellresponseNoTcellresponseNoTcellresponseNoTcellresponseNoTcellresponseSolublenativeAgCellsurfacenativeAgSolublepeptidesofAgCellsurfacepeptidesofAgpresentedbycellsthatexpressMHCmoleculesANTIGENPROCESSINGAPC111當(dāng)前第111頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)AgB細(xì)胞漿細(xì)胞AbAPCTh細(xì)胞Ag肽-MHC分子T細(xì)胞Tc細(xì)胞當(dāng)前第112頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)113當(dāng)前第113頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)ThethreekindsofprofessionalAPC114當(dāng)前第114頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)免疫細(xì)胞及亞群一、T淋巴細(xì)胞及亞群二、B淋巴細(xì)胞及亞群三、巨噬細(xì)胞及亞群四、DC及亞群五、固有淋巴細(xì)胞六、其他115當(dāng)前第115頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)巨噬細(xì)胞

(Macrophage,Mφ)當(dāng)前第116頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)單核細(xì)胞體積較大，蹄狀核（左，普通光鏡）透射電鏡顯示其高爾基體發(fā)達(dá)、線粒體豐富、胞漿顆粒明顯（中）掃描電鏡顯示腹腔巨噬細(xì)胞粘附于玻璃表面（右）單核巨噬細(xì)胞當(dāng)前第117頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)來源、分布前單核細(xì)胞（骨髓）單核細(xì)胞（血液）巨噬細(xì)胞（組織器官）當(dāng)前第118頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)macrophageTissuesBlood當(dāng)前第119頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)單核巨噬細(xì)胞的識(shí)別機(jī)制甘露糖受體（Mannosereceptor,MR）Toll樣受體（Toll-likereceptor,TLR）清道夫受體（Scavengerreceptor,SR）調(diào)理性受體（Opsonicreceptor）IgGFc受體（FcγR）補(bǔ)體受體（C3bR/C4bR）當(dāng)前第120頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)FcγRC3bR/C4bRTLRs（Mac-1）當(dāng)前第121頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)1）巨噬細(xì)胞的氧依賴性殺菌系統(tǒng)

反應(yīng)性氧中間物（ROIs，reactiveoxygenintermediates）系統(tǒng):O2-OH-H2O2

1O2反應(yīng)性氮中間物（RNIs，reactivenitricoxideintermediates）作用系統(tǒng):NO（一氧化氮）單核巨噬細(xì)胞的殺傷機(jī)制當(dāng)前第122頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Toxiccompounds–Superoxideanion(O2

-),Hydrogenperoxide(H2O2),Singletoxygen(1O2)andHydroxylradical(OH*)RespiratoryBurstOxygen-DependentMyeloperoxidase-IndependentReactionsPentose-P+NADPHG-6-P-dehydrogenaseGlucose+NADP+NADPHoxidaseCytochromeb558NADP++O2-NADPH+O2SuperoxidedismutaseH2O2+1O22O2-+2H+2O2-+H2O2OH-+OH-+1O2當(dāng)前第123頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)Nitricoxide-dependentkillingRNIs當(dāng)前第124頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)2）巨噬細(xì)胞氧非依賴殺菌系統(tǒng)

指不需氧分子參與的殺菌系統(tǒng)。主要包括：①酸性pH：乳酸累積使pH降至3.5～4.0。②溶菌酶：在酸性條件下，溶酶體內(nèi)的溶菌酶能使革蘭陽性菌的胞壁糖破壞而產(chǎn)生殺菌作用。當(dāng)前第125頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)吞噬和殺傷病原微生物及自身衰老凋亡細(xì)胞抗原提呈作用（APC）誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)：IL-1、IL-6、TNF-a、MCP-1單核巨噬細(xì)胞的生物學(xué)活性當(dāng)前第126頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第127頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)MΦ攝取抗原途徑胞吞作用吞噬吞飲受體介導(dǎo)內(nèi)吞當(dāng)前第128頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)巨噬細(xì)胞吞噬機(jī)制模式識(shí)別受體

調(diào)理性受體當(dāng)前第129頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)巨噬細(xì)胞亞群巨噬細(xì)胞按照表型及分泌細(xì)胞因子分為兩種極化類型：經(jīng)典活化型（M1)，選擇性活化型（M2)M1為促炎作用，M2為抑炎作用。IFN-γ及LPS將骨髓來源巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)成M1型巨噬細(xì)胞,以IL-4誘導(dǎo)出M2型巨噬細(xì)胞。當(dāng)前第130頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第131頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第132頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第133頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第134頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)免疫細(xì)胞及亞群一、T淋巴細(xì)胞及亞群二、B淋巴細(xì)胞及亞群三、巨噬細(xì)胞及亞群四、DC及亞群五、固有淋巴細(xì)胞六、其他135當(dāng)前第135頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)樹突狀細(xì)胞

（dendriticcell,DC）典型樹突狀形態(tài)功能最強(qiáng)的APC當(dāng)前第136頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)無特異性分子標(biāo)志形態(tài)、綜合標(biāo)志、功能當(dāng)前第137頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)DC分類根據(jù)起源：髓樣DC（MDC）----DC1郎格漢斯細(xì)胞(LC)并指狀DC(IDC)淋巴樣DC（LDC）或漿細(xì)胞樣DC（PDC）----DC2濾泡DC(FDC)當(dāng)前第138頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)并指狀樹突細(xì)胞濾泡狀樹突細(xì)胞B細(xì)胞當(dāng)前第139頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)未成熟DC和成熟DC未成熟DC(ImmatureDC)皮膚、胃腸道、呼吸道等上皮內(nèi)及實(shí)質(zhì)器官間質(zhì)內(nèi)攝取抗原并遷移至引流淋巴器官胞飲（吞飲）受體介導(dǎo)內(nèi)吞吞噬弱表達(dá)低水平的MHC分子、協(xié)同刺激分子和粘附分子當(dāng)前第140頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)成熟過程中的重要變化:表達(dá)趨化因子受體，獲得向引流淋巴結(jié)遷移的能力加工提呈抗原，表達(dá)大量肽-MHC復(fù)合物協(xié)同刺激分子和粘附分子表達(dá)上調(diào)成熟DC(MatureDC)淋巴結(jié)，脾及派氏集合淋巴管高表達(dá)MHC分子、協(xié)同刺激分子及粘附分子很強(qiáng)的抗原提呈能力當(dāng)前第141頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)上皮組織中的LC捕捉外來抗原后即進(jìn)入引流淋巴結(jié)的T細(xì)胞區(qū)，成為IDC當(dāng)前第142頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)DC亞群當(dāng)前第143頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)免疫細(xì)胞及亞群一、T淋巴細(xì)胞及亞群二、B淋巴細(xì)胞及亞群三、APC功能四、巨噬細(xì)胞及亞群五、DC及亞群六、固有淋巴細(xì)胞七、其他144當(dāng)前第144頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)145當(dāng)前第145頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)MontaldoE,VaccaP,MorettaL,MingariMC.Developmentofhumannaturalkillercellsandotherinnatelymphoidcells.SeminImmunol.2014Feb18.pii:S1044-5323(14)00007-4.146當(dāng)前第146頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)（1）ILC1（NK細(xì)胞）NK細(xì)胞（NaturalKillerCell）又稱自然殺傷細(xì)胞，屬于大顆粒淋巴細(xì)胞，來源于骨髓，占外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)的5％-10％，是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，具有廣譜抗腫瘤作用，不依賴于抗原刺激作用就可以非特異性殺傷腫瘤細(xì)胞和病毒感染的靶細(xì)胞。147當(dāng)前第147頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)NK細(xì)胞（Naturalkillercells）形態(tài)：胞漿內(nèi)含大量嗜天青顆粒標(biāo)志：CD3-CD16+CD56+殺傷特點(diǎn)：無需抗原致敏，直接殺傷靶細(xì)胞，非特異性，非MHC限制性當(dāng)前第148頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)NK細(xì)胞的識(shí)別機(jī)制IgG的FcγRⅢ（CD16）活化性受體（NKcell

activatingreceptors）識(shí)別結(jié)合配體胞漿區(qū)含ITAMNK活化并產(chǎn)生殺傷活性抑制性受體（NKcellinhibitoryreceptors）識(shí)別結(jié)合自身MHC-Ⅰ類分子胞漿區(qū)含ITIM抑制NK的殺傷活性當(dāng)前第149頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)正常情況自身組織細(xì)胞表面表達(dá)MHC-Ⅰ類分子抑制性受體介導(dǎo)的抑制作用占主導(dǎo)地位NK細(xì)胞處于抑制狀態(tài)，自身組織細(xì)胞不被破壞腫瘤及病毒感染細(xì)胞表面MHCⅠ類分子表達(dá)減少缺失活化性受體的作用占主導(dǎo)地位NK細(xì)胞活化并殺傷病毒感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞當(dāng)前第150頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第151頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第152頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)NK細(xì)胞受體殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體（KIR)活化性受體：KIR2DS、KIR3DS--DAP-12（ITAM）抑制性受體：KIR2DL、KIR3DL（ITIM）殺傷細(xì)胞凝集素樣受體（KLR）活化性受體：CD94/NKG2C--DAP-12（ITAM）抑制性受體：CD94/NKG2A（ITIM）識(shí)別非HLAI類分子的活化性受體NKG2D--DAP-10（ITAM）NCR：NKp30、NKp44、NKp46—ξξ、DAP-12

（ITAM）當(dāng)前第153頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)NK細(xì)胞受體活化性受體抑制性受體

KIR:KIR2DS,KIR3DS

KLR:CD94/NKG2CNKG2DNKp46NKp30NKp44NCRKIR2DL,KIR3DLCD94/NKG2AHLAI類分子配體非HLAI類分子當(dāng)前第154頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)NK細(xì)胞的殺傷機(jī)制活化性受體/抑制性受體IgGFcR（ADCC）穿孔素/顆粒酶FasL/Fas分泌IFN-γ當(dāng)前第155頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)當(dāng)前第156頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)NK細(xì)胞的生物學(xué)活性抗感染、抗腫瘤作用：分泌細(xì)胞因子、直接殺傷免疫調(diào)節(jié)作用當(dāng)前第157頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)TargetcellrecognitionbyNKcells158當(dāng)前第158頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)InhibitoryreceptorsexpressedbyhumanNKcells159當(dāng)前第159頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)NKcellactivationreceptorsandtheirligandsBrycesonetal.(2006)Immunol.Rev.160當(dāng)前第160頁\共有176頁\編于星期五\2點(diǎn)NK細(xì)胞亞群人類約90%的NK細(xì)胞低密度表達(dá)CD56(CD56dim),同時(shí)高水平表達(dá)CD16和殺