微生物基礎(chǔ)知識的培訓(xùn)

引言一、微生物學(xué)及其發(fā)展史二、微生物定義及特性三、微生物的五大共性四、微生物的種類五、微生物的形態(tài)六、微生物的結(jié)構(gòu)七、微生物的污染八、微生物的控制九、生產(chǎn)環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測當(dāng)前第1頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)一、微生物學(xué)及其發(fā)展史微生物學(xué)（mocrobiology）就是研究那些小得必須借助顯微鏡才能看見的活生物體。我們研究微生物的生命活動，達(dá)到控制腐敗微生物和病原微生物的活動，以防止食品、藥品變質(zhì)和杜絕因其引起的病害。當(dāng)前第2頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)一、微生物學(xué)及其發(fā)展史1、公元前二千多年夏禹時代，就有釀酒的記載，釀酒的記載，釀酒就必須有酵母菌參與。2、十七世紀(jì)荷蘭人呂文虎克，用自制顯微鏡首先觀察到微生物（細(xì)菌）。3、十九世紀(jì)，法國科學(xué)家斯德，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵和腐敗是微生物的作用結(jié)果，為了防止酒類變質(zhì)，他創(chuàng)造加溫處理方法“巴氏消毒法”。當(dāng)前第3頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)二、微生物定義微生物(microorganism)是指存在于自然界的一大群形體微小、結(jié)構(gòu)簡單、進(jìn)化低級、肉眼直接看不見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。當(dāng)前第4頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)二、微生物的特征小（形體微小）：μm（微米）級在光學(xué)顯微鏡下可見、nm（納米）級在電子顯微鏡下可見簡（結(jié)構(gòu)簡單）：單細(xì)胞、簡單的多細(xì)胞、非細(xì)胞低（進(jìn)化低級）：原核類、真核類、非細(xì)胞類當(dāng)前第5頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)三、微生物的五大共性1、體積小，面積大為五大共性的基礎(chǔ)。小體積大面積系統(tǒng)必然有一個巨大的營養(yǎng)物吸收面、代謝廢物的排泄面、環(huán)境信息的接收面。2、吸收多，轉(zhuǎn)化快為其高速生長繁殖和產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物提供了充分的物質(zhì)基礎(chǔ)。3、生長旺，繁殖快微生物具有極高的生長和繁殖速度。當(dāng)前第6頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)三、微生物的五大共性4、適應(yīng)強(qiáng)，易變異微生物對環(huán)境條件尤其是惡劣的“極端環(huán)境”有驚人的適應(yīng)能力，堪稱生物界之最。微生物的個體一般都是單細(xì)胞、簡單多細(xì)胞或非細(xì)胞，通常都是單倍體，繁殖快與外界環(huán)境直接接觸，即使變異的頻率特別低，也可在短時間內(nèi)產(chǎn)生大量變異的后代。最常見的變異形式是基因突變。當(dāng)前第7頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)三、微生物的五大共性5、分布廣，種類多地球上除了火山的中心區(qū)域外，從土壤圈、水圈、大氣圈直至巖石圈，到處都有微生物的蹤跡。地球上有200萬種生物，其中微生物有20萬種之多。當(dāng)前第8頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)四、微生物的種類微生物根據(jù)其不同的進(jìn)化水平和性狀上的明顯差別可分為原核微生物、真核微生物和非細(xì)胞微生物三大類群。原核微生物：細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、立克次氏體、支原體、衣原體、螺旋體、蛭弧菌等。真核微生物：霉菌、酵母菌等非細(xì)胞類微生物：病毒(個體微小，可通過細(xì)菌濾器)等當(dāng)前第9頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)五、微生物的形態(tài)細(xì)菌的形態(tài)：球狀、桿狀、螺旋狀酵母菌的形態(tài)：球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱狀或香腸狀等霉菌的形態(tài)：絲狀病毒的形態(tài)：球狀、卵圓形、磚形、桿狀、絲狀、蝌蚪狀等當(dāng)前第10頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)放線桿菌當(dāng)前第11頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)弧狀菌當(dāng)前第12頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)酵母菌當(dāng)前第13頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)葡萄球菌當(dāng)前第14頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)沙門氏菌當(dāng)前第15頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)乳酸桿菌當(dāng)前第16頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)梭狀芽孢桿菌當(dāng)前第17頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)黑曲霉當(dāng)前第18頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)六、微生物的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)：基本結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、芽孢等當(dāng)前第19頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁：位于細(xì)胞表面，是一層較為堅韌、略具彈性的結(jié)構(gòu)。其功能是可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械或滲透壓的破壞，維持細(xì)胞的外形。細(xì)胞壁是多孔性的，具有一定的屏障作用，水和某些化學(xué)物質(zhì)可以通過，但對大分子物質(zhì)有阻攔作用。細(xì)胞膜：是外側(cè)緊貼于細(xì)胞壁而內(nèi)側(cè)包圍細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟而富有彈性的半透性薄膜。它是一個重要的代謝活動中心，具有多種新陳代謝所需的酶。當(dāng)前第20頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)：細(xì)胞質(zhì)：無色透明，呈粘液狀。其內(nèi)含有某些結(jié)構(gòu)和內(nèi)含物。細(xì)胞核：細(xì)菌的核位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，沒有核膜、核仁，沒有固定形態(tài)，結(jié)構(gòu)也很簡單，因而稱之為原核。莢膜：有些細(xì)菌在一定營養(yǎng)條件下，可向細(xì)胞壁表面分泌一層松散透明、粘度極大、粘液狀或膠質(zhì)狀的物質(zhì)稱為莢膜。當(dāng)前第21頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)：芽孢：細(xì)菌在一定環(huán)境條件下或處在一定的生活階段，細(xì)胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)形成一個折光性圓形或橢圓形的個體。其對熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒等理化因素有強(qiáng)大的抵抗力。當(dāng)前第22頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)炭疽桿菌（芽孢形成）當(dāng)前第23頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)七、微生物污染

為什么要對食品生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？1、致病：引起人及動植物病害。我們不能讓我們的顧客有感染致病微生物的潛在危險。2、致腐、致霉：導(dǎo)致產(chǎn)品變質(zhì)當(dāng)前第24頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)污染就是指當(dāng)某物與不潔凈的或腐壞物接觸或混合在一起使該物變的不純凈或不適用時，即受污染。簡單的說當(dāng)一個產(chǎn)品中存在不需要的物質(zhì)時，他即受到了污染當(dāng)前第25頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)污染的形式和載體:污染的形式:塵埃粒子微生物污染的載體:空氣、水、表面、人。當(dāng)前第26頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)微生物的污染途徑

自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染。接觸污染：由于和非無菌的用具、器械或人的接觸而污染?？諝馕廴荆河捎诳諝庵兴⑸锏某两?、附著或被吸入而污染。其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染。當(dāng)前第27頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)控制微生物的污染途徑

有效地阻止室外的污染侵入室內(nèi)。迅速有效地排除室內(nèi)已發(fā)生的污染。控制污染源，減少污染發(fā)生量。當(dāng)前第28頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)防止交叉污染？有需要時要洗手及消毒盡量減少直接以雙手接觸原輔料接觸原輔料的表面及用具用后清洗轉(zhuǎn)換產(chǎn)品時清洗當(dāng)前第29頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)手的衛(wèi)生每只手可攜帶40萬個細(xì)菌；剛洗過的手，每平方厘米也可檢驗出3200個細(xì)菌。1～10萬個細(xì)菌/1cm2皮膚表面!當(dāng)前第30頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)洗手的重要性:用流水（如自來水）洗手，能使手上的致病微生物減少80%；用皂液充分洗手，再用自來水沖洗能使致病微生物減少95%。洗手后正確使用消毒劑能使致病微生物減少99%。當(dāng)前第31頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)洗手的正確方法當(dāng)前第32頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)正確洗手的步驟當(dāng)前第33頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)更衣當(dāng)前第34頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)更衣標(biāo)準(zhǔn)更衣程序：一更：脫衣→換鞋→洗手二更：穿潔凈服/戴帽子/戴口罩緩沖：消毒雙手→潔凈區(qū)...

當(dāng)前第35頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)更衣

著衣種類測定日期細(xì)菌數(shù)/100CM上衣內(nèi)側(cè)使用五日后300外側(cè)使用五日后200褲子內(nèi)側(cè)使用五日后450外側(cè)使用五日后70帽子內(nèi)側(cè)使用五日后100外側(cè)使用五日后150口罩內(nèi)側(cè)使用一日后22000外側(cè)使用一日后100襪子內(nèi)側(cè)使用一日后30000外側(cè)使用一日后2800當(dāng)前第36頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)更衣的目的：想混進(jìn)去，沒門！當(dāng)前第37頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)主要的微生物污染源

空氣水設(shè)備原輔料人員當(dāng)前第38頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)主要的微生物污染源-空氣灰塵——“微生物的飛行器”。進(jìn)入潔凈室（區(qū)）的空氣要經(jīng)過空氣凈化系統(tǒng)的處理。潔凈室（區(qū)）要定期消毒。使用的消毒劑不得對設(shè)備、物料和成品產(chǎn)生污染。消毒劑品種應(yīng)定期更換，防止產(chǎn)生耐藥菌株。

當(dāng)前第39頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)主要的微生物污染源-水水體是微生物廣泛分布的第二個天然環(huán)境。水中的細(xì)菌來自土壤、塵埃、污水、人畜排泄物及垃圾等?！端幤飞a(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》第四章《設(shè)備》第三十四條中明確規(guī)定：純化水、注射用水的制備、儲存和分配應(yīng)能防止微生物的滋生和污染。儲罐和輸送管道所用材料應(yīng)無毒、耐腐蝕。管道的設(shè)計和安裝應(yīng)避免死角、盲管。儲罐和管道要規(guī)定清洗、滅菌周期。

當(dāng)前第40頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)主要的微生物污染源-設(shè)備幾乎沒有細(xì)菌不“吃”的東西設(shè)備和器具與食品直接接觸

設(shè)備和器具的清洗清潔程序必須經(jīng)過驗證按清洗周期清洗清洗和存放設(shè)備、器具處應(yīng)與生產(chǎn)區(qū)域潔凈等級相同當(dāng)前第41頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)主要的微生物污染源-原輔料

包括厡輔料、內(nèi)包裝材料。-厡輔料微生物的限度標(biāo)準(zhǔn)？-內(nèi)包裝材料微生物的限度標(biāo)準(zhǔn)？符合藥典或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)厡輔料、內(nèi)包裝材料的貯存：-包裝嚴(yán)密，不得破損，污染。-清潔貯存。當(dāng)前第42頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)主要的微生物污染源-人員人體內(nèi)外微生物的分布1、皮膚2、口腔3、上呼吸道4、下呼吸道5、胃腸道6、泌尿生殖道人是潔凈室中最大的污染源1、人在代謝過程中會釋放和分泌污染物。2、人體表面、衣服能沾染、攜帶污染物。3、人在潔凈室內(nèi)的各種動作也會產(chǎn)生微粒和微生物。當(dāng)前第43頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)主要的微生物污染源-人員

NoYes…………當(dāng)前第44頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)人體散發(fā)的塵粒數(shù):

（萬個/每分鐘）

1050100-250當(dāng)前第45頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)人員不良行為所產(chǎn)生的污染:當(dāng)有如下行為時將相應(yīng)增加微粒的產(chǎn)生量:-吸煙者的呼吸500%噴嚏2000%搓手200%行走200%跺腳5000%當(dāng)前第46頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)極端環(huán)境下的微生物在自然界中，存在著一些可在絕大多數(shù)微生物所不能生長的高溫、低溫、高酸、高堿、高鹽、高壓和高輻射強(qiáng)度等極端環(huán)境下生活的微生物，如嗜熱菌、嗜冷菌、嗜酸菌、嗜堿菌、嗜鹽菌、嗜壓菌、耐輻射菌等，它們被稱為極端環(huán)境微生物。當(dāng)前第47頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)八、微生物的控制（一）5個基本概念（二）消毒劑的種類（三）常用的消毒劑（四）四種滅菌的方法當(dāng)前第48頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（一）5個基本概念⑴抑菌：抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長繁殖。⑵防腐：防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法。細(xì)菌一般不死亡。使用同一種化學(xué)藥品在低濃度時為防腐劑，在高濃度時為消毒劑。當(dāng)前第49頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（一）5個基本概念⑶消毒：殺滅物體上病原微生物的方法。并不一定殺死含芽孢的細(xì)菌或非病原微生物。用來消毒的藥品叫消毒劑。一般消毒劑在常用濃度下只對細(xì)菌的繁殖體有效，對其芽孢則需提高消毒劑的濃度和延長作用時間。當(dāng)前第50頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（一）5個基本概念⑷無菌：不存在活菌。⑸滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。比消毒要求高，它殺滅了包括細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。當(dāng)前第51頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（一）5個基本概念滅菌和消毒的比較：共性：殺滅微生物以控制其污染和防止傳染。區(qū)別：1、殺滅微生物完全性的差異。滅菌要求完全殺滅微生物，滅菌后的藥品不應(yīng)含有活的微生物。而消毒不完全殺滅微生物，只能殺滅一部分微生物即病原微生物。這是相對的。因為強(qiáng)效消毒劑在適宜條件下可能達(dá)到滅菌效果；在不適宜條件下滅菌，有不完全殺滅微生物的可能。2、方法上的差異：滅菌方法具有多樣性，消毒常借助化學(xué)物質(zhì)。3、效果檢查的差異：滅菌效果用無菌檢查法檢測，而消毒效果以消毒劑的效價來評定。當(dāng)前第52頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（二）消毒劑的種類1、重金屬及其化合物2、有機(jī)化合物3、鹵族元素及其化合物4、表面活性劑5、染料當(dāng)前第53頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（三）常用的消毒劑潔凈室（區(qū)）常用的消毒劑甲醛薰蒸（作用機(jī)制：阻抑菌細(xì)胞核蛋白質(zhì)合成)甲醛有揮發(fā)性，對眼睛、皮膚有刺激性，引起皮膚硬化或皺褶，不宜做皮膚消毒用。）0.1%新潔爾滅溶液(作用機(jī)制：使蛋白質(zhì)變性，破壞細(xì)胞膜。)75%酒精溶液（常用于皮膚消毒。能迅速殺死細(xì)菌繁殖體，對一般病毒有一定的消毒作用。）5%來蘇水(甲酚皂)溶液（作用機(jī)制：損傷細(xì)胞膜）當(dāng)前第54頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法1、熱力滅菌2、氣體滅菌3、輻射滅菌4、過濾滅菌當(dāng)前第55頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法1、熱力滅菌：主要是利用高溫的致死作用，使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等重要生物高分子發(fā)生變性、破壞，而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。分為干熱滅菌與濕熱滅菌當(dāng)前第56頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法(1)干熱滅菌：灼燒與火焰滅菌、干烤滅菌灼燒主要用于接種工具滅菌，如接種針、接種環(huán)、刀、剪等在火焰上燒灼即可達(dá)到徹底滅菌?；鹧鏈缇窃跓o菌操作中，將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復(fù)通過火焰數(shù)次，利用火焰對管口等進(jìn)行滅菌，防止管口污染，作為無菌操作過程中的輔助滅菌手段。干烤滅菌是利用熱輻射及干熱空氣進(jìn)行滅菌。當(dāng)前第57頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法(2)濕熱滅菌法：通過熱蒸汽或沸水使細(xì)菌蛋白質(zhì)變性而殺滅微生物的方法。包括：煮沸滅菌、流通蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌煮沸滅菌：加熱使水至沸而殺滅細(xì)菌的方法。凡不適于高壓蒸汽滅菌的物品可常壓下在水中煮沸一段時間達(dá)到滅菌目的。流通蒸汽滅菌：常壓下，用蒸籠、蒸鍋等在100℃滅菌。僅可殺死細(xì)菌繁殖體，不能完全殺滅芽孢。當(dāng)前第58頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法高壓蒸汽滅菌：通過加壓提高蒸汽溫度，穿透力強(qiáng)、溫度高、滅菌效果最好。是最可靠最適用最廣泛的滅菌方法，凡耐高溫和潮濕的物品可應(yīng)用本法滅菌。注意事項：完全排出高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣。（冷空氣存在時，同一表壓下所達(dá)到的溫度值偏低，不符合規(guī)定的要求，滅菌就不徹底?！钞?dāng)前第59頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法2、氣體滅菌：利用化學(xué)消毒劑形成的氣體來殺滅微生物。臭氧殺菌消毒廣泛存在于自然界中，雷雨過后的空氣有一種清新的感覺，是因為空中放電產(chǎn)生臭氧，消滅了空氣中的微生物，凈化了空氣。臭氧具有強(qiáng)烈的殺菌消毒作用。其殺菌消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧和單個氧分子，后者具有很強(qiáng)的活性，對細(xì)菌具有很強(qiáng)的氧化作用，臭氧氧化

當(dāng)前第60頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法分解了細(xì)菌內(nèi)氧化葡萄糖所必需的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會自行重新結(jié)合成為普通氧分子，不存在任何有毒殘留物，故稱為無污染消毒劑。不但對各種細(xì)菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強(qiáng)的殺滅能力，且對殺死霉菌也很有效。當(dāng)前第61頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法3、輻射滅菌（1）電離輻射:用引起電離的X射線、γ射線滅菌。電離輻射對微生物的致死作用，主要是細(xì)胞內(nèi)生物化學(xué)的變化所致。輻射的藥品、食品的安全問題：輻射滅菌用于藥品或食品都應(yīng)經(jīng)過安全試驗，完全有必要進(jìn)行科學(xué)全面的評價，高劑量的輻射更應(yīng)慎重。（2）電磁波輻射（包括紫外線[波長190～350nm]、紅外線[波長0.77～1000μm]、微波[波長1～1000mm]）。當(dāng)前第62頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法紫外線滅菌1、紫外線輻射的穿透力很弱，因此主要用于無菌室、某些工作區(qū)的空氣滅菌、物體表面滅菌。2、實踐工作中在無菌室無菌柜凈化工作臺工作室及車間安裝紫外燈，一般僅起殺死空氣中部分微生物的作用，而不能起到完全滅菌的作用。3、紫外線消毒方法驗證中紫外燈需確認(rèn)的參數(shù)主要有紫外線的波長、紫外線強(qiáng)度、燈管的壽命。4、紫外燈消毒的效果與紫外線強(qiáng)度、照射時間、溫度與濕度等因素有關(guān)，還需通過驗證來確定。5、注意事項：紫外線直射對眼、皮膚有損害。紫外線照射過程中產(chǎn)生臭氧，臭氧過多對眼及鼻腔有刺激，產(chǎn)生頭暈、胸悶、血壓降低，所以無菌室及凈化工作臺紫外線照射停止后，請稍等片刻，讓臭氧消散，方可進(jìn)行實驗操作。當(dāng)前第63頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)（四）滅菌的方法4、過濾滅菌：以物理的方法除去介質(zhì)中的微生物。常將空氣或液體中的微生物及雜質(zhì)用不同材料制成的薄膜濾器過濾得到無菌、無雜質(zhì)的空氣或液體。濾過病毒的濾膜孔徑為25～100nm；濾過細(xì)菌的濾膜孔徑為0.22～0.45μm。當(dāng)前第64頁\共有71頁\編于星期四\17點(diǎn)九、生產(chǎn)環(huán)境的空氣潔凈度監(jiān)測根據(jù)GMP的有關(guān)規(guī)定，潔凈室分為四個等級，即100級、10，000級區(qū)、100，000級和300，000級，各級別的要求如下：潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)≥0.5μm≥5μm浮游菌/立方米沉降菌/皿100級3,50005110,000級350,0002,0001003100,000級3,500,00020,00050010300,000級10,500,00060,0001,00015當(dāng)前第