中藥制劑的含量測(cè)定技術(shù)高效液相色譜法操作通法 中藥制劑檢測(cè)技術(shù)課件

項(xiàng)

目

六評(píng)價(jià)優(yōu)劣-中藥制劑的含量測(cè)定技術(shù)全面檢測(cè)和控制中藥制劑質(zhì)量CONTENTS目錄任務(wù)一

分析方法驗(yàn)證任務(wù)二

紫外-可見分光光度法任務(wù)三高效液相色譜法任務(wù)四

氣相色譜法高效液相色譜法操作通法藥品安全，重于泰山（一）泵的操作1.用流動(dòng)相沖洗濾器，再把濾器浸入流動(dòng)相中，啟動(dòng)泵。2.打開泵的排放閥，用專用注射器從閥口抽出流動(dòng)相約20ml，設(shè)置高流速（如9ml/min）或用沖洗鍵（PURGE）進(jìn)行泵排氣，出口處流動(dòng)相連續(xù)液流后，將流速逐步回零或停止沖洗，關(guān)閉排放閥。3.將流速調(diào)節(jié)至分析用流速，對(duì)色譜柱進(jìn)行平衡，同時(shí)觀察壓力指示應(yīng)穩(wěn)定，用干燥濾紙片的邊緣檢查柱管各連接處應(yīng)無(wú)滲漏。初始平衡時(shí)間一般需約30分鐘。如為梯度洗脫，應(yīng)在程序器上設(shè)置梯度狀態(tài)，用初始比例的流動(dòng)相對(duì)色譜柱進(jìn)行平衡。高效液相色譜法操作通法1.開啟檢測(cè)器電源開關(guān)，選擇光源（鎢燈或氘燈），選定檢測(cè)波長(zhǎng)，待穩(wěn)定后，測(cè)試參比和供試品光路的信號(hào)應(yīng)符合要求，設(shè)置吸收度方式和檢測(cè)響應(yīng)時(shí)間（一般不大于1秒），設(shè)置滿刻度吸收值（適用于記錄儀）。2.開啟色譜處理機(jī)，設(shè)定處理方法，初步設(shè)定衰減、紙速、記錄時(shí)間、最小峰面積等參數(shù)，或設(shè)定記錄儀的紙速或衰減。3.進(jìn)行檢測(cè)器回零操作，檢查處理機(jī)的電平（LEVEL），應(yīng)符合要求，或檢查記錄儀的筆應(yīng)處在設(shè)定的起始位置，如有變動(dòng)，可繼續(xù)回零操作直至符合要求。4.記錄基線，待穩(wěn)定后，進(jìn)行處理機(jī)斜率測(cè)試，符合要求后方能進(jìn)行操作。（二）紫外-可見檢測(cè)器和色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)的操作高效液相色譜法操作通法

1.六通閥式進(jìn)樣器（1）進(jìn)樣手柄置采樣位置（LOAD）。（2）用供試品溶液清洗配套的注射器，再抽取適量，如用定量環(huán)（LOOP）載樣，則注射器抽取量應(yīng)不少于定量環(huán)容積的5倍，用微量注射器定容進(jìn)樣時(shí)，進(jìn)樣量不得多于環(huán)容積的50%。在排除氣泡后方能向進(jìn)樣器中注入供試品溶液。（3）把注射器的平頭針直插至進(jìn)樣器底部，注入供試品溶液，除另有規(guī)定外，注射器不應(yīng)取下。（4）將手柄轉(zhuǎn)至進(jìn)樣位置（INJECT），供試品被流動(dòng)相帶入色譜柱。（三）進(jìn)樣操作高效液相色譜法操作通法

2.自動(dòng)進(jìn)樣器：自動(dòng)進(jìn)樣裝置有圓盤式自動(dòng)進(jìn)樣器、鏈?zhǔn)阶詣?dòng)進(jìn)樣器、坐標(biāo)式自動(dòng)進(jìn)樣器等。（1）將供試品溶液用0.45μm濾膜濾過，取續(xù)濾液至進(jìn)樣瓶中，蓋上帶有墊片的瓶蓋，順時(shí)針方向旋緊。為避免堵塞進(jìn)樣器及損傷進(jìn)樣器，一般應(yīng)選擇與自動(dòng)進(jìn)樣器型號(hào)相配套的進(jìn)樣瓶。（2）將進(jìn)樣瓶依次放入貯樣室內(nèi)，記錄瓶位置號(hào)（VIAL）。如果自動(dòng)進(jìn)樣器有控溫裝置，設(shè)置溫度參數(shù)。（3）對(duì)自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)行校正，使自動(dòng)進(jìn)樣器為默認(rèn)位置、進(jìn)樣針沖洗系統(tǒng)正常、管內(nèi)無(wú)氣泡、有足夠的沖洗液和流動(dòng)相。（4）設(shè)定自動(dòng)進(jìn)樣參數(shù)。即設(shè)定供試品溶液自動(dòng)進(jìn)樣的起始位置、進(jìn)樣體積、稀釋倍數(shù)、數(shù)據(jù)文件名等，用START進(jìn)樣。高效液相色譜法操作通法（四）色譜數(shù)據(jù)的收集和處理1.注樣同時(shí)啟動(dòng)數(shù)據(jù)處理機(jī)，采集和處理色譜信息，如系記錄儀，則注樣同時(shí)按下記號(hào)鍵作起始記號(hào)。2.最后一峰出完后應(yīng)繼續(xù)走一段基線，確認(rèn)無(wú)組分流出后結(jié)束記錄。3.根據(jù)第一張預(yù)試的色譜圖，調(diào)整衰減、紙速、記錄時(shí)間等參數(shù)，使色譜峰信號(hào)在色譜圖上有一定強(qiáng)度。定量時(shí)，一般峰頂不超過記錄滿量程。再按正式分析操作。

4.含量測(cè)定的對(duì)照品溶液和供試品溶液每份至少進(jìn)樣2次，由全部進(jìn)樣結(jié)果（n≥4）求得平均值，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）不應(yīng)大于1.5%。5.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)應(yīng)符合《中國(guó)藥典》的規(guī)定。高效液相色譜法操作通法1.分析完畢，先關(guān)檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理機(jī)，再用經(jīng)濾過和脫氣的適當(dāng)溶劑清洗色譜系統(tǒng)，正相柱用正己烷，反相柱如使用過含鹽流動(dòng)相，則先用水，然后用甲醇-水沖洗，沖洗前先按上述操作通法操作，再用分析流速?zèng)_洗，各種沖洗劑一般沖洗15～30分鐘，特殊情況可延長(zhǎng)沖洗時(shí)間，尤其是用過含鹽流動(dòng)相的柱子，有時(shí)需沖洗數(shù)小時(shí)甚至更長(zhǎng)時(shí)間。

2.沖洗完畢后逐步降低流速至0，關(guān)泵。進(jìn)樣器也應(yīng)用相應(yīng)溶劑沖洗，可