藥學(xué)教學(xué)講解課件

快速方便，可在數(shù)分鐘內(nèi)完成一個試樣的分析靈敏度高，離子色譜分析的濃度范圍為μg／L至mg／L可同時分析多種離子化合物分離柱的穩(wěn)定性好、容量高選擇性好，分析不同離子，可選擇不同色譜柱、分離方式和檢測方式。離子色譜的優(yōu)點(diǎn)1離子色譜的基本流程圖淋洗液

泵色譜柱檢測器

泵液分離檢測記錄F-NO3-SO42-Cl-NO2-Br-HPO42-進(jìn)樣閥抑制器檢測池進(jìn)樣2色譜分離示意圖淋洗液離子型物質(zhì)3前言結(jié)論4離子色譜的組成前言色譜柱1洗脫液2檢測器3結(jié)論結(jié)論4填充劑的載體一般為苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、乙基乙烯基苯-二乙烯基苯共聚物、聚甲基丙烯酸醋或聚乙烯聚合物等有機(jī)聚合物。載體的表面通過離子鍵附聚了大量具有陰離子交換功能基（如烷基季銨基、烷醇季銨基等）或陽離子交換功能基（如磺酸、羧酸、羧酸-膦酸和羧酸一膦酸冠醚等）的乳膠微粒。一般以硅膠為載體，在硅膠表面的硅醇基通過化學(xué)鍵合季銨基等陰離子交換功能基或磺酸基、羧酸基等陽離子交換功能基，可分別用于陰離子或陽離子的交換分離。（硅膠載體填充劑在pH2～8的洗脫液中穩(wěn)定，一般適用于陽離子樣品的分離。）有機(jī)聚合物載體填充劑填充劑分類無機(jī)載體填充劑色譜柱5洗脫液分離陰離子-----稀堿溶液、碳酸鹽緩沖液等；分離陽離子-----稀鹽酸、稀硝酸、稀甲烷磺酸溶液等；

可通過改變洗脫液中酸堿溶液的濃度、PH和鹽離子的種類等，來改變洗脫液的洗脫能力，提高分離的選擇性。制備洗脫液的去離子水應(yīng)經(jīng)過純化處理，電導(dǎo)率一般小于0.056μS/cm。使用的洗脫液需經(jīng)脫氣處理，常采用氦氣在線脫氣的方法，也可采用超聲、減壓過濾或冷凍的方式進(jìn)行離線脫氣。

離子交換色譜法大都用水緩沖溶液作流動相，有時也用甲醇、乙醇等有機(jī)溶劑與水緩沖液混合使用，以改善試樣的溶解度。6通用型，通過檢測通過電導(dǎo)池溶液電導(dǎo)信號來做出檢測，主要用于無機(jī)陰陽離子和部分有機(jī)酸的分析。檢測器安培檢測器電導(dǎo)檢測器紫外檢測器用于分析解離度低，但具有氧化或還原性質(zhì)的化合物.適用于在高濃度氯等存在下痕量的溴離子（Br-）、亞硝酸根離子（NO2-）、硝酸根離子（NO3-）以及其他具有強(qiáng)紫外吸收成分的測定。7離子色譜的定性和定量定性方法：通常在相同的色譜條件下，通過與標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時間對照來定性，如果保留時間一致，則可能是同一種離子。當(dāng)在樣品中加標(biāo)后峰高增加，調(diào)整淋洗液比例后，兩者保留時間變化一致，基本可確定是同一種離子在離子色譜中還可以根據(jù)某些離子的保留特性，憑經(jīng)驗(yàn)來定性。如PO43-，在不同的pH值，分別以1價(jià)、2價(jià)、3價(jià)存在。其保留行為也發(fā)生變化。pH增加時保留時間加長，pH縮小時保留時間縮短，其出峰時間變化大。定量方法：檢測離子的濃度與峰面積或峰高成正比，所以通常以峰面積或峰高為定量依據(jù)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。使用較多的是以面積為依據(jù)的多點(diǎn)外標(biāo)法。8外標(biāo)法面積歸一法標(biāo)準(zhǔn)曲線法內(nèi)標(biāo)法測定法9按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密量取對照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，精密量取各適量配成校正因子測定用的對照溶液。取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測量對照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰高或峰面積，按下式計(jì)算校正因子：校正因子（f）=式中As為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高

AR為對照品的峰高或峰面積

Cs為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度

CR為對照品的濃度再取各品種項(xiàng)下含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，注入儀器記錄色譜圖，測量供試品中待測成分內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計(jì)算含量：含量（Cx）=式中Ax為供試品的峰面積或峰高

Cx為供試品的濃度

As為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的面積或峰高

Cs為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度

f為校正因子采用內(nèi)標(biāo)法可避免樣品前處理或進(jìn)樣體積誤差對測定結(jié)果的影響。內(nèi)標(biāo)法10按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密量取對照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，注入儀器，記錄色譜圖，測量對照品溶液和供試品溶液中待測成分的峰面積或峰高，按下式計(jì)算含量：含量（Cx）=式中Cx為樣品的濃度

CR為對照品的濃度

Ax為樣品的峰面積或峰高

AR為對照品的峰面積或峰高由于微量注射器不易精確控制進(jìn)樣量，當(dāng)采用外標(biāo)法測定供試品中成分或雜志含量時，以定量環(huán)或自動進(jìn)樣器進(jìn)樣為好。外標(biāo)法11按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，配制供試品溶液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測量各峰的面積和色譜圖上除溶劑峰外的總色譜峰面積，計(jì)算各峰面積占總峰面積的百分率。用于雜質(zhì)檢查時，由于峰面積歸一化法測定誤差大，因此，通常只用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)含量。除另有規(guī)定外，一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢測。面積歸一法12按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱取對照品適量配制成貯備溶液。分別量取貯備溶液配制成一系列梯度濃度的對照溶液。量取上述梯度濃度的對照品溶液各適量注入儀器，記錄色譜圖，測量對照品溶液中待測組分的峰面積或峰高。以標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積或峰高為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，回歸計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線，其公式為：AR=

+

b式中AR為對照溶液的峰面積或峰高CR為對照溶液的濃度a為標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率b為標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距再取各品種項(xiàng)下供試品溶液，注入色譜儀，記錄色譜圖，測量供試品溶液中待測成分（或其雜質(zhì)）的峰面積或峰高。按下式計(jì)算其濃度：Cs=式中As為供試品溶液的峰面積或峰高Cs為供試品溶液的濃度a、b分別為斜率和截距標(biāo)準(zhǔn)曲線法131陰離子分析:首推和首選的方法。2

陽離子分析:堿金屬堿土金屬，有機(jī)胺和銨多元素同時測定，價(jià)態(tài)形態(tài)分析。3有機(jī)化合物:水溶性和極性化合物，有機(jī)酸，有機(jī)胺，糖類，氨基酸，抗生素。離子色譜制藥中的應(yīng)用14陽離子交換柱：山梨醇及制劑甘油果糖氯化鈉注射液甘露醇及制劑

利巴韋林及其制劑

鹽酸二甲雙胍及制劑陰離子交換柱：肝素鈉及制劑蘋果酸及制劑富馬酸及制劑硫酸軟骨素鈉及制劑氯膦酸二鈉及制劑帕米膦酸二鈉及制劑離子色譜制藥中的應(yīng)用15鹽酸二甲雙胍【檢查】有關(guān)物質(zhì)取本品適量，精密稱定，用流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置200ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。另取雙氰胺對照品適量，精密稱定，用水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液，精密量取適量，用流動相定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，作為雙氰胺對照品溶液。稱取鹽酸二甲雙胍對照品及三聚氰胺適量，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含鹽酸二甲雙胍0.25mg、三聚氰胺0.1mg的溶液，量取1ml，用流動相稀釋至50ml，搖勻，作為系統(tǒng)適用性溶液。照高效液相色譜法（附錄VD）測定，用磺酸基陽離子交換鍵合硅膠為填充劑，以1.7%磷酸二氫銨溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）為流動相，檢測波長為218nm，鹽酸二甲雙胍峰與三聚氰胺峰的分離度應(yīng)大于10。取雙氰胺對照品溶液10ul注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使雙氰胺色譜峰的峰高約為滿量程的20％～25％。再精密量取供試品溶液、對照溶液與雙氰胺對照品溶液各10ul，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至鹽酸二甲雙胍峰保留時間的2倍。供試品溶液的色譜圖中如有與雙氰胺峰保留時間一致的峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，其含量不得過0.02%，其他單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液中鹽酸二甲雙胍峰面積的1/5（0.1%），其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液中鹽酸二甲雙胍峰面積（0.5%）。16利巴韋林

【含量測定】照高效液相色譜法（附錄VD）測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。用磺化的苯乙烯-二乙烯苯交聯(lián)共聚物的氫型陽離子交換樹脂為填充劑；以水（用稀硫酸調(diào)節(jié)pH值至2.5±0.1）為流動相；檢測波長為207nm。理論板數(shù)按利巴韋林峰計(jì)算不低于2000。測定法取本品，加流動相溶解并稀釋制成每1mL中含利巴韋林50μg的溶液，精密量取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取利巴韋林對照品適量，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。17寫在最后成功的基礎(chǔ)在于好的學(xué)習(xí)習(xí)慣Thefoundationof