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實(shí)驗(yàn)六植物抗氧化酶活性的測定第一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二POD、SOD、CAT（AOX）（PPO）第二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二抗氧化酶與植物抗逆性關(guān)系第三頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二JournalofExperimentalBotany,2009，60（2）：377–390H2O2H2O2第四頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二李忠光，2009.10第五頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二POD一、實(shí)驗(yàn)原理Peroxidase,POD第六頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二（ROS,H2O2）第七頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二PPOPolyphennoloxidase,PPO第八頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二抗氧化酶動力學(xué)曲線第九頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二植物抗氧化酶提取和測定參考文獻(xiàn)第十頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二二、實(shí)驗(yàn)方法1、提?。悍謩e取0.5g實(shí)驗(yàn)材料→加入少許石英砂和3ml提取液（50mmol/LPBS,pH5.8,內(nèi)含0.１mmol/LEDTA,1%PVP）→充分研磨→轉(zhuǎn)入離心管中→用2ml提取液洗研缽→5000rpm離心10min→上清液定容至5ml→用于測定POD和PPO酶活性或分裝后轉(zhuǎn)至-20或-80℃保存。

第十一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二2、POD測定：取POD反應(yīng)混合液（10mmol/L愈創(chuàng)木酚，5mmol/LH2O2,用PBS溶解）2.90ml，25℃水浴5min，加入酶液100ml（空白調(diào)零用提取液取代），立即記時，搖勻，讀出反應(yīng)30s和3min時的A470。用ε計算POD活性。3、PPO測定：取PPO反應(yīng)混合液（20mmol/L鄰苯二酚，用PBS溶解）2.8ml，25℃水浴5min，加入酶液0.2ml（空白調(diào)零用提取液取代），立即記時，搖勻，讀出反應(yīng)

30s和2min時的A410。以每分鐘A值變化0.01所需要的酶液的量為一個活力單位（U），則：第十二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二PODactivities=

(mmol.g-1FWmin-1)PPOactivities=

(U.g-1FW)4、計算第十三頁，共十四頁，編輯于2023年，星期二5、思考題5.1簡述

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