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PAGEPAGE6特訓13基因工程的應用1.(2018·廣東四校聯(lián)考)如圖所示的質(zhì)粒中,Tetr為四環(huán)素抗性基因,LacZ′基因的表達產(chǎn)物能使白色的大腸桿菌菌落變成藍色?,F(xiàn)用EcoRⅠ切割目的基因及質(zhì)粒載體并進行連接,將得到的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,以對目的基因進行保存和擴增。請回答下列問題:(1)將目的基因和質(zhì)粒載體連接需使用的工具酶是________________。為將載體導入大腸桿菌,常用Ca2+處理使之處于________________。(2)LacZ′基因在基因工程中起__________基因的作用。為篩選導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應在培養(yǎng)基中加入________,篩選________(填“藍色”或“白色”)菌落。(3)若需要將這個質(zhì)粒改造成基因工程表達載體,還需要插入________和________部分。將改造后的表達載體和目的基因經(jīng)EcoRⅠ酶切連接,并成功導入受體細胞后,發(fā)現(xiàn)仍有部分細胞不能表達出目的蛋白,最可能的原因是____________________________________。為了避免上述情況發(fā)生,最好用________________切割目的基因和表達載體。(4)我國對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實施標識制度,比如由轉(zhuǎn)基因大豆加工制成的大豆油,標注為“本產(chǎn)品加工原料中含有轉(zhuǎn)基因大豆,但本產(chǎn)品已不再含有轉(zhuǎn)基因成分”,其相關的生物學依據(jù)是________________________________________________________________________。答案(1)DNA連接酶感受態(tài)(2)標記四環(huán)素白色(3)啟動子終止子目的基因與質(zhì)粒載體反向連接兩種限制酶(4)大豆油屬于脂肪,不含目的基因編碼的蛋白質(zhì)解析(1)將目的基因和質(zhì)粒載體連接需要使用的工具酶是DNA連接酶;為將載體導入大腸桿菌,常用Ca2+處理使之處于感受態(tài)。(2)LacZ′基因在基因工程中起標記基因的作用;為篩選導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素;由于構建重組表達載體過程中LacZ′基因已經(jīng)被破壞,因此應該篩選白色菌落。(3)基因表達載體的組成包括目的基因、啟動子、標記基因、終止子、復制原點等;將改造后的表達載體和目的基因經(jīng)EcoRⅠ酶切連接,并成功導入受體細胞后,發(fā)現(xiàn)仍有部分細胞不能表達出目的蛋白,最可能的原因是目的基因與質(zhì)粒載體反向連接,為了避免上述情況發(fā)生,最好用兩種限制酶切割目的基因和表達載體。(4)我國對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實施標識制度,比如由轉(zhuǎn)基因大豆加工制成的大豆油,標注為“本產(chǎn)品加工原料中含有轉(zhuǎn)基因大豆,但本產(chǎn)品已不再含有轉(zhuǎn)基因成分”,其相關的生物學依據(jù)是大豆油屬于脂肪,不含目的基因編碼的蛋白質(zhì)。2.(2018·東北五校聯(lián)考)透明質(zhì)酸酶臨床常用作藥物滲透劑,目前市場上出售的透明質(zhì)酸酶主要從動物組織中提取,成本高且提純困難,科研人員嘗試將透明質(zhì)酸酶基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使其高效表達。部分過程如圖所示,請回答下列問題:(1)步驟①代表的是基因工程操作程序中的________________________,由圖可知,此步驟中,選擇用限制酶______________去切割DNA分子中的____________鍵。(2)基因工程一般選擇大腸桿菌作為受體,這是因為大腸桿菌具有________________________________________________________________________的特點。(3)透明質(zhì)酸酶基因進入大腸桿菌,并且____________________的過程,稱為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化時,首先需要用________處理大腸桿菌,使其處于感受態(tài)。(4)透明質(zhì)酸酶基因?qū)胧荏w細胞后,需通過_______________技術檢測其是否成功轉(zhuǎn)錄。答案(1)基因表達載體的構建NcoⅠ和XhoⅠ磷酸二酯(2)繁殖快、單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少(3)維持穩(wěn)定和表達Ca2+(4)RNA-DNA分子雜交解析(1)步驟①代表將目的基因即透明質(zhì)酸酶基因和作為載體的質(zhì)粒連接,完成基因表達載體的構建;據(jù)圖可知,要用限制酶NcoⅠ和XhoⅠ去切割DNA,斷開磷酸二酯鍵,便于目的基因和質(zhì)粒連接。(2)基因工程中一般選擇大腸桿菌作為載體的原因是大腸桿菌屬于單細胞生物,繁殖速度快,容易培養(yǎng),遺傳物質(zhì)相對較少,容易對遺傳物質(zhì)進行改造。(3)透明質(zhì)酸酶基因?qū)氪竽c桿菌,并且能維持穩(wěn)定,在大腸桿菌細胞內(nèi)能表達,控制合成透明質(zhì)酸酶,這個過程稱作轉(zhuǎn)化;轉(zhuǎn)化時,需要用Ca2+(氯化鈣)處理大腸桿菌,使其處于感受態(tài),即能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)。(4)透明質(zhì)酸酶基因?qū)氪竽c桿菌后,需要通過RNA-DNA分子雜交技術來檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA。3.(2018·廣州畢業(yè)班測試)現(xiàn)有重組質(zhì)粒甲(共含2686個堿基對,不含T-DNA)和乙,為避免基因反接,研究人員用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重組質(zhì)粒甲、乙,再利用所得片段構建了重組質(zhì)粒丙(如圖所示),然后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將丙導入胡蘿卜愈傷組織細胞。培養(yǎng)后得到轉(zhuǎn)VP1基因胡蘿卜植株。請回答下列問題:貯存在一個受體菌克隆子群體中;基因組文庫含有某種生物的全部基因,基因中含有啟動子和內(nèi)含子,只有部分基因可以在物種間交流。,針對大一的學生上大學之后存在一段的迷茫期,他們之所以迷茫,是因為他們沒有奮斗的目標,是因為沒有班主任在每天的早自習對他們進行了教育,以往他們的學習目標性都十分的明確,小學目的就是升入一個比較好的高中,上初中是為了上比較好的高中,上高中為了去一個比較好的大學??烧娴牡酱髮W了,他們究竟應該怎么辦不知道了?他們?nèi)鄙僖欢ǖ膴^斗目標,在這個特殊的心理時期,我給他們開了主題班團會,給他們專題講授職業(yè)生活規(guī)劃,幫他們一起確定自己在大學的奮斗目標。讓他們覺得原來的那個愛嘮叨的班主任還在,還是有人管他們的。我個人覺得,大一時期是大學四年非常重要的一個時期,也是基礎,是需要認真對待的,所以在每天固定課室的早讀、晚修我都非常重視,除找同學談心外,更有重點的進行主題教育活動,使大家盡量避免懶散,養(yǎng)成良好的個人學習、生活、工作習慣。所以大一,我主要是從養(yǎng)成教育入手,有針對性的對大一新生進行養(yǎng)成教育、校情校貌教育、安全教育、心理教育、適應性教育、為人處世教育等。
(二)談心工作
大學生心理問題一直都是輔導員工作的重中之重,大學生的整合程度相對來說較低,他們個人與班級并沒有聯(lián)系起來的紐帶,對于大學生日常生活最重要之一的教室是一個流動是場所,就像一個臨時??空疽粯?,在這停兩站,明天又在不同的地方上課。沒有固定的教室就沒有一個家,個人永遠是個人,他們和集體之間沒有聯(lián)系,更不要說紐帶了,由此可以看出,缺乏一定的社會整合使大學生感覺自己沒有歸屬感,沒有集體責任感,沒有了學生人人向往的家,向往的那份信念,他們沒有一個統(tǒng)一的思想。雖然他們現(xiàn)在有固定的課室,但也只是相對穩(wěn)定而已。
為此我以寢室、班級、特殊學生等為單位在我的學生中進行了談心工作,和學生們聊學習,聊生活,聊興趣愛好,在大家發(fā)言中留意每一個學生的狀況,一旦發(fā)現(xiàn)問題及時解決。在談心過程中我也會和大家分享我的大學寢室生活,講講發(fā)生在我身邊的故事,讓每一名同學在寢室中首先找到自己的家,讓他們覺得自己不再孤單。在開展班級團日活動、主題班會的過程中,又讓同學以寢室為單位出節(jié)目,通過這一形式,讓每一個寢室在班級這個集體中找到自己的歸屬。
(三)深入溝通
堅持“三個深入”和“兩個溝通”的工作理念。三個深入”即經(jīng)常深入到課堂、經(jīng)常深入到寢室、經(jīng)常深入到班級?!皟蓚€溝通”,即經(jīng)常和學生溝通,經(jīng)常和學生家長溝通。利用自己住校的便利條件,經(jīng)常深入寢室,與學生進行溝通,及時發(fā)現(xiàn)學生在寢室生活中出現(xiàn)的問題,和各位班委一同解決。定期與學生家長進行電話溝通,將學生在校各方面情況向家長進行反饋,與家長一起把小孩教育好,使小孩在各方面得到很好的發(fā)展。
管理學家說:“高級管理者,引導人的思想。低級管理者,管理人的行為?!弊鳛橐幻o導員,十分注重學生思想政治教育工作。主要從以下三個方面開展工作。
(一)班委帶頭,學生跟進
作為一
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