藥物分析與生物藥物分析

藥物分析與生物藥物分析第一頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三課程安排兩門課合起來安排學(xué)時，分別考試。授課17-18周，5學(xué)時/周講授內(nèi)容:

遵循教學(xué)大綱，以課本內(nèi)容為主，盡量全面講解。授課方式：講授-自學(xué)相結(jié)合成績評定：平時20%(作業(yè)及paper)，期末80%實驗課安排:兩門課同時開第二頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三緒論一．藥物分析的性質(zhì)

藥物分析是以藥品質(zhì)量控制為研究目的一門學(xué)科。主要運用化學(xué)、物理學(xué)或生物學(xué)等學(xué)科的方法和技術(shù)研究各種藥物及其制劑（合成藥物、天然藥物、生物藥物及其制劑，中藥制劑）的質(zhì)量控制方法。1．綜合性

常規(guī)化學(xué)分析；儀器分析；計算藥物分析；

X-射線衍射，熱分析；

DNA、蛋白質(zhì)、基因分析，免疫分析，細胞分析，體內(nèi)藥物分析。第三頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三2．指導(dǎo)性

眼睛學(xué)科，先峰學(xué)科我國中藥制劑目前存在的問題：缺乏明確的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，不能很好地打入國際市場。二．藥物分析的主要任務(wù)1．常規(guī)藥品檢驗藥物分析的主體、核心。分析對象主要是各藥廠生產(chǎn)的常規(guī)制劑（已用于臨床）及原料藥、醫(yī)院制劑。2．為新藥研究服務(wù)如新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定藥物動力學(xué)研究新原料藥的合成，天然產(chǎn)物的研究：結(jié)構(gòu)鑒定，藥物與雜質(zhì)的分離第四頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三3．研究藥物分析新方法、新技術(shù)分析手段的發(fā)展：化學(xué)分析

紙色譜、TLC

GC（填充柱、毛細管柱）HPLCCE、CEC

各種聯(lián)用技術(shù)分析狀態(tài)的發(fā)展：靜態(tài)分析實時動態(tài)分析分析對象的發(fā)展：血漿

多細胞

單細胞、單分子手性藥物分析的發(fā)展：外消旋體

左、右旋體分別分析研究目的：以新方法、新技術(shù)本身為主要目的---基礎(chǔ)理論研究以分析對象為主要目的---應(yīng)用研究4．與藥物分析有關(guān)的其它工作第五頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三三．藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是國家對藥品質(zhì)量規(guī)格及檢驗方法所作的技術(shù)規(guī)定，是藥品生產(chǎn)、供應(yīng)、使用、檢驗和管理部門共同遵循的法定依據(jù)。包括：國家藥品標(biāo)準(zhǔn)：藥典、中國生物制品規(guī)程等部頒標(biāo)準(zhǔn)：如中國醫(yī)院制劑規(guī)范地方標(biāo)準(zhǔn)第六頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三四．藥典pharmacopoeia是記載藥品標(biāo)準(zhǔn)的法典。凡是藥典收錄的藥品，其質(zhì)量不符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)的均不得出廠，不得銷售，不得使用。（一）中國藥典1．沿革：已出版：1953，1963，1977，1985，1990，1995，2000年版2．基本結(jié)構(gòu)和主要內(nèi)容ChP由凡例、正文、附錄和索引四部分組成。第七頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三（1）凡例

1）標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：對有關(guān)規(guī)定、要求和含義等所作的說明。如避光是指用不透光的容器包裝；陰涼處系指不超過20oC等

2）檢驗方法和限度

ChP收載的原料藥及制劑均應(yīng)按規(guī)定方法進行檢驗；或?qū)⑵渌椒ㄅc規(guī)定方法對照。限度不是真實含量。若未規(guī)定上限，系指不超過101.0%。

3）標(biāo)準(zhǔn)品和對照品

指用于鑒別、檢查和含量測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。不包括色譜用的內(nèi)標(biāo)。標(biāo)準(zhǔn)品：是指用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或效價測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按效價單位或μg計。對照品：除另有規(guī)定外，均按干燥品或無水物計算后使用。

第八頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三4）計量：法定計量單位

5）精確度精密稱定：準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。稱定：準(zhǔn)確至所取重量的百分之一。取用量約若干：指該量不得超過規(guī)定量的±10%。精密量?。褐噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合該體積移液管的精密度要求。稱取、量?。浩渚_度可根據(jù)數(shù)值的有效數(shù)位來確定。如稱取0.1g，指稱取重量可在0.06-0.14g范圍內(nèi)；2g-----1.5-2.5g；2.0g----1.95-2.05g;2.00g---1.995g-2.005g第九頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三恒重：小于0.3mg按干燥品（或無水物，或無溶劑）計算：除另有規(guī)定外，應(yīng)取未經(jīng)干燥（或未去水或未去溶劑）的供試品進行試驗，測得干燥失重后，再在計算時從取用量中扣除．空白試驗：不加供試品或以等量溶劑替代供試液，同法操作所得結(jié)果。試驗溫度：如不說明，系指室溫，通常以25±2℃為準(zhǔn)。

6）包裝、標(biāo)簽第十頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三（2）正文

收載不同藥品、制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

藥品名稱包括：中文名（中國藥品通用名稱），漢語拼音名稱和英文名稱。*中藥材不使用英文名稱，而采用拉丁名稱。（3）附錄主要內(nèi)容：制劑通則，生物制品通則，通用檢測方法，生物檢定法，試藥與試液，溶液配制，原子量表等（4）索引：中（按漢語拼音順序排列）、英文第十一頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三（二）常用外國藥典１．美國藥典USP與美國國家處方集NF(Nationalformulation)合并出版；從2002年起，USP-NF將原來的每5年一版改為每年出一版，最新版為USP26-NF21。同時還發(fā)行了亞洲版。２．英國藥典BP也有《英國國家處方集》配套出版。３．日本藥局方JP４．歐洲藥典Ph.Eur.有英文和法文兩種文本。第十二頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三五．藥品檢驗工作的基本程序1．取樣從大量樣品中取出少量樣品，應(yīng)考慮取樣的科學(xué)性、真實性和代表性。取樣基本原則：均勻、合理。2．藥物的鑒別：判斷藥品的真?zhèn)胃鶕?jù)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進行某些化學(xué)反應(yīng)，根據(jù)反應(yīng)現(xiàn)象判斷；或測定理化常數(shù)或光譜特征，來判斷。其它包括藥品的外觀、顏色、氣味等的鑒別。應(yīng)結(jié)合多個鑒別試驗結(jié)果進行判斷，而不能以單個鑒別試驗判斷，否則會誤判。第十三頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三3．藥物的檢查

主要指純度檢查：是限度檢查4．藥物的含量測定測定主要有效成分的含量。**第3和第4項可用來判斷藥品質(zhì)量的優(yōu)劣。5．檢驗報告的書寫完整、清楚地記錄原始資料，并寫出檢驗報告（給出結(jié)論）。第十四頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三六．全面控制藥品質(zhì)量的科學(xué)管理良好藥品實驗研究規(guī)范（goodlaboratorypractice,GLP）即藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范?？茖W(xué)、可靠的研究方法才能得出有效、可靠的實驗數(shù)據(jù)，故需對新藥研究條件作嚴(yán)格規(guī)定。良好藥品臨床試驗規(guī)范（goodClinicalpractice,GCP）

GCP可保護受試者的安全和權(quán)利，有助于保證提供有價值的臨床研究資料。良好藥品生產(chǎn)規(guī)范（goodmanufacturepractice,GMP）即藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范良好藥品供應(yīng)規(guī)范（goodsupplypractice,GSP）保證藥品在運輸、貯存和銷售過程中的質(zhì)量第十五頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三SomeJournalsor→電子資源→ElsvierSDOSJournalofPharmaceuticalandBiomedicalAnalysisJournalofChromatographyAJournalofChromatographyBAnalyticalChimicaActaTalantaTrendsinAnalyticalChemistryJournalofElectroanalyticalChemistry第十六頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三AnalyticalChemistryJournalofMedicinalChemistryMolecularPharmaceuticsBiomacromoleculesBiochemistry第十七頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三Analyst

ElectrophoresisJournalofPharmaceuticalScienceJournalofSeparationScienceChiralityJournalofMicrocolumnSeparationJournalofMassSpectrosmetryLuminescenceBiomedicalChromatographyBiopharmaceuticsanddrugDispositionDrugdevelopmentResearchElectroanalysisJournalofBioluminescenceandChemiluminescenceSingleMolecules第十八頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三藥學(xué)學(xué)報中國藥學(xué)雜志藥物分析雜志藥學(xué)通報國外醫(yī)學(xué)-藥學(xué)分冊藥學(xué)進展化學(xué)學(xué)報分析化學(xué)高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報色譜化學(xué)進展各主要大學(xué)學(xué)報第十九頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三第一章藥物的鑒別試驗

（identificationtest）第一節(jié)概述

ChP和其它各國藥典所收載的藥物項下的鑒別試驗方法，僅適用于貯臧在有標(biāo)簽容器中的藥物，用以證實是否為所標(biāo)示的藥物。這些方法不能用于鑒別未知物。第二十頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三一．鑒別項目（一）性狀：包括外觀、色澤、臭、味、溶解度及一些物理常數(shù)。（二）一般鑒別試驗（generalidentificationtest,GIT）GIT僅適用于確認(rèn)單一的化學(xué)藥物，對多種化學(xué)藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時，除另有規(guī)定外，不適用。GIT只能證實藥物的類別，將藥物與其它類別的藥物區(qū)分開，不能證實是哪一種藥物。（三）專屬鑒別試驗（specificidentification,SIT)在GIT的基礎(chǔ)上進行，可證實藥物屬于某類藥物的哪一種。SIT根據(jù)每種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性的差異，采用靈敏、選擇性強的定性反應(yīng)進行。第二十一頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三二．鑒別試驗條件1．溶液的濃度：主要指被鑒別藥物的濃度，但其他試劑的濃度也應(yīng)注意控制，特別是以化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的化學(xué)現(xiàn)象為依據(jù)進行鑒別的情況。藥物+試劑產(chǎn)物（顏色、沉淀等）2．溶液的溫度影響化學(xué)反應(yīng)的快慢。一般溫度每升高10℃，可使反應(yīng)速度增加2-4倍。3．溶液的酸堿度溶液的酸堿度應(yīng)能使各反應(yīng)物有足夠的濃度處于反應(yīng)活化狀態(tài)，并使反應(yīng)生成物處于穩(wěn)定、易于觀測的狀態(tài)。第二十二頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三4．干擾成分采用專屬性更高的鑒別反應(yīng)或?qū)⒏蓴_成分分離除去，以消除干擾。５．試驗時間對有機化合物的化學(xué)反應(yīng)影響較大。因為有機反應(yīng)能否進行，取決于舊共價鍵斷裂和新共價鍵形成的難易，而這些共價鍵的更替需要一定時間。第二十三頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三三．鑒別試驗的靈敏度sensitivity

１．反應(yīng)靈敏度最低檢出量（minimumdetectablequantity,mmin）：應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定反應(yīng)條件下，能觀測出反應(yīng)結(jié)果所需的供試品的最小量。最低檢出濃度（minimumdetectableconcentration,Cmin）：應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定反應(yīng)條件下，能觀測出反應(yīng)結(jié)果所需的供試品的最小濃度。**檢測限（limitofdetection,LOD）zeptomole:10-21zmol；attomole:10-18amolfemtomole:10-15fmol；picomole:10-12pmolnanomole:10-9nmol第二十四頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三2.空白試驗blanktest消除試劑和器皿可能帶來的影響。在與供試品鑒別試驗完全相同的條件下，除不加供試品外（或以等量溶劑替代供試液），其他試劑同樣加入進行的試驗。3．提高反應(yīng)靈敏度的方法1）消除干擾：如熒光法需濾出天然光和激發(fā)光的干擾。2）改進觀測方法：如將目視觀測溶液的顏色改為可見分光光度法。3）加入與水互不相溶的有機溶劑：濃集有色生成物（脂溶性）于有機溶劑中→顏色加深，易觀察。第二十五頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三第二節(jié)藥物的一般鑒別試驗一．鑒別方法（一）化學(xué)鑒別法

1．干法：無溶劑參與反應(yīng)焰色試驗：鑒別鹽的類型氣體產(chǎn)生法：在適當(dāng)溫度條件下，加熱使供試品分解，生成有特殊氣味的氣體。第二十六頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三２．濕法：鑒別反應(yīng)在適當(dāng)溶劑中進行，發(fā)生易于觀測的化學(xué)變化，如顏色、沉淀、氣體、熒光等。１）呈色反應(yīng)鑒別法：常用反應(yīng)有：三氯化鐵呈色反應(yīng)：適用于含Ar-OH或可產(chǎn)生Ar-OH的藥物。異羥肟酸鐵反應(yīng)：多適用于芳酸及其酯類、酰胺類。印三酮呈色反應(yīng)：多適用于含脂肪胺基的藥物。重氮化-偶合顯色反應(yīng)：適用于含Ar-NH2或能產(chǎn)生Ar-NH2的藥物。氧化還原顯色反應(yīng)第二十七頁，共三十頁，編輯于2023年，星期三２）沉淀生成反應(yīng)鑒別法與重金屬離子的沉淀反應(yīng)：重金屬指比重