藥物分析-第九章二氫吡啶類藥物

第九章

二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析Dihydropyridines（DHP）中國(guó)藥典2010版收載：硝苯地平、尼群地平、尼莫地平、尼索地平、非洛地平及制劑17種。SFDA標(biāo)準(zhǔn)收載：苯磺酸氨氯地平、拉西地平、伊拉地平、尼伐地平、鹽酸尼卡地平及制劑。結(jié)構(gòu)(Structure)二氫吡啶類藥物均具有苯基-1,4二氫吡啶的母核DHP特異性最高、作用最強(qiáng)的鈣通道阻滯劑；廣泛應(yīng)用于缺血性心血管疾病，高血壓、腦血管疾病等治療14結(jié)構(gòu)(Structure)典型藥物硝苯地平Nifedipine尼莫地平Nimodipine結(jié)構(gòu)(Structure).苯磺酸氨氯地平AmlodipineBesylate非洛地平Felodipine化學(xué)性質(zhì)(feature)二氫吡啶環(huán)的還原性：二氫吡啶環(huán)具有還原性，可用氧化還原反應(yīng)來(lái)鑒別和含量測(cè)定。硝基的氧化性：苯環(huán)上的硝基具有氧化性，可被還原劑還原為芳伯胺基，可用重氮化-偶合反應(yīng)鑒別。二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性：二氫吡啶環(huán)與堿作用，1,4-位氫可發(fā)生解離，形成ρ-π共軛而產(chǎn)生顏色變化，用于鑒別。穩(wěn)定性差：遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光化學(xué)歧化作用，產(chǎn)生雜質(zhì)。旋光性、UV、IR特征吸收進(jìn)行定性、定量分析。鑒別試驗(yàn)(identification)1.與亞鐵鹽反應(yīng)苯環(huán)硝基有氧化性，將氫氧化亞鐵氧化為紅棕色氫氧化鐵沉淀（Ch.p2010尼莫地平及制劑的鑒別）。一、化學(xué)鑒別法尼莫地平溶解乙醇新制5%硫酸亞鐵銨2ml，1.5mol/L硫酸溶液1滴0.5mol/L氫氧化鉀溶液1ml振搖灰綠色沉淀紅棕色沉淀1min鑒別試驗(yàn)(identification)2.與氫氧化鈉試液反應(yīng)

DHP在丙酮溶液與氫氧化鈉試液反應(yīng)，1,4-位氫發(fā)生解離，產(chǎn)生共軛效應(yīng)，顯橙紅色。（Ch.p2010硝苯地平、尼群地平、尼索地平及制劑的鑒別）。硝苯地平溶解丙酮20%氫氧化鈉溶液3-5滴振搖橙紅色溶液鑒別試驗(yàn)(identification)3.沉淀反應(yīng)

DHP具有1,4-二氫吡啶的結(jié)構(gòu)，可與金屬鹽類形成沉淀。（Ch.p2010尼莫地平注射液的鑒別）。尼莫地平注射液萃取乙醚取乙醚層蒸干，加乙醇2ml振搖白色沉淀分液漏斗1%氯化汞溶液3ml鑒別試驗(yàn)(identification)4.重氮化-偶合反應(yīng)

DHP苯環(huán)上硝基具有氧化性，在酸性條件下被鋅粉還原為芳伯胺基，可用重氮化-偶合反應(yīng)鑒別（JP)用來(lái)鑒別硝苯地平）。硝苯地平濾液鹽酸-水-乙醇(1.5:3.5:5)10ml亞硝酸鈉溶液(10g/L)5ml搖勻顯紅色溫?zé)?，鋅粒0.5g,放置5min，過(guò)濾放置2min氨基磺酸氨溶液(50g/L)2ml鹽酸萘乙二胺溶液(5g/L)2ml鑒別試驗(yàn)(identification)二、分光光度法藥物溶劑濃度(mg/ml)λnm(nm)吸收度(A)尼群地平無(wú)水乙醇1353/303比值2.1-2.32.紅外特征吸收：本類藥物含有苯環(huán)，還可采用紅外吸收光譜進(jìn)行鑒別。1.紫外分光光度法鑒別試驗(yàn)(identification)三、色譜法2.TLC

BP2010：硝苯地平及制劑、非洛地平及制劑、尼莫地平片（注射液）。USP33：硝苯地平膠囊。1.HPLC法Ch.p2010:尼群地平片鑒別。特殊雜質(zhì)檢查

(Detectionofspecificimpurities)DHP藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光學(xué)歧化作用，引入雜質(zhì)，因此各國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)均規(guī)定在避光條件下進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，大多采用HPLC。含量測(cè)定

(Assay)鈰量法、UV、HPLC鈰量法UVHPLC含量測(cè)定

(Assay)1、鈰量法（硫酸鈰法）

基本原理：特點(diǎn)：（1）以Ce(SO4)2為滴定液的氧化還原滴定；（2）酸度低時(shí)Ce4+易水解，故應(yīng)在強(qiáng)酸條件下進(jìn)行；（3）Ce4+自身可作指示劑，但不靈敏，所以用鄰二氮菲做指示劑，過(guò)量Ce4+

可使鄰二氮菲指示劑中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙紅色消失指示終點(diǎn)。（4）硫酸鈰易提純且相當(dāng)穩(wěn)定，遇光、熱不會(huì)引起濃度變化，可長(zhǎng)期放置。（5）Ce4+還原為Ce3+是單電子轉(zhuǎn)移，無(wú)中間價(jià)態(tài)，無(wú)中間產(chǎn)物，反應(yīng)簡(jiǎn)單，副反應(yīng)少，大多數(shù)有機(jī)物不與之作用，所以不受干擾。（6）適合原料及制劑的含量測(cè)定。

Ce4+

（黃色）

C3+（無(wú)色）

含量測(cè)定

(Assay)2、UV法

本類藥物有苯環(huán)，在紫外光區(qū)有特征吸收，可用UV法測(cè)定含量。尼群地平膠囊的含量測(cè)定(Ch.p2010):操作：

10粒100ml100ml吸光度A取對(duì)照品同法測(cè)定，計(jì)算。無(wú)水乙醇取2ml無(wú)水乙醇353nm測(cè)定含量測(cè)定(Assay)3、高效液相色譜法高效分離，高靈敏度和高選擇性－可消除有關(guān)物質(zhì)及制劑中輔料的干擾，準(zhǔn)確測(cè)定藥物含量。各國(guó)藥典測(cè)定這藥物及制劑大多采用此法。例：尼莫地平分散片的含測(cè)（Ch.p2010）：色譜條件：色譜柱：ODS流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水(35:38:27)，流速：1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm理論塔板數(shù)：以尼莫地平峰計(jì)不低于8000，分離度符合要求。測(cè)定方法：避光操作取細(xì)粉（相當(dāng)于10mg）50ml50ml峰面積取對(duì)照品同法測(cè)定，計(jì)算。流動(dòng)相超聲15min離心10min取上清液5ml10ul體內(nèi)藥物分析

DHP類藥物口服劑量小，肝臟首過(guò)作用大，生物利用度低，血液濃度低，定量限要求在0.1ng/ml，大多采用靈敏度高的測(cè)定方法：GC-MS、LC-MS。血液中氨氯地平的含量測(cè)定

臨床主要應(yīng)用左旋氨氯地平，消旋氨氯地平藥效只有左旋體的1/2，血漿濃度測(cè)定主要測(cè)定左旋體。

例：LC-MS/MS測(cè)定人血漿中苯磺酸氨氯地平的濃度（西南民族大學(xué)學(xué)報(bào)，2009,35(4)).