自然殺傷細胞

自然殺傷細胞血液細胞01簡介細胞表型細胞來源活化途徑目錄03020405細胞功能其他相關(guān)活性測定目錄0706基本信息自然殺傷細胞(naturalkillercell，NK)是機體重要的免疫細胞，不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生，能夠識別靶細胞、殺傷介質(zhì)。簡介簡介自然殺傷細胞(naturalkillercell,NK細胞)來源于骨髓淋巴樣干細胞，其分化、發(fā)育依賴于骨髓及胸腺微環(huán)境，主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴結(jié)。NK細胞不同于T、B細胞，是一類無需預(yù)先致敏就能非特異性殺傷腫瘤細胞和病毒感染細胞的淋巴細胞

。細胞來源細胞來源NK細胞確切的來源還不十分清楚，一般認(rèn)為直接從骨髓中衍生，其發(fā)育成熟依賴于骨髓的微環(huán)境。小鼠和人的體外實驗表明，胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養(yǎng)也可誘導(dǎo)出NK細胞。小鼠脾臟在體內(nèi)IL-3誘導(dǎo)下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中，占PBMC5～10%，淋巴結(jié)和骨髓中也有NK活性，但水平較外周血低。自然殺傷細胞（NK細胞）由于NK細胞具有部分T細胞分化抗原，如80～90%NK細胞CD2+，20～30%NK細胞CD3+（表達CD3ζ鏈），30%NK細胞CD8+（α/α）和75～90%NK細胞CD38+，而且NK細胞具有IL-2中親和性受體，在IL-2刺激下可發(fā)生增殖反應(yīng)，活化NK細胞可產(chǎn)生IFN-γ，因此一般認(rèn)為NK細胞與T細胞在發(fā)育上關(guān)系更為密切。細胞表型細胞表型與T細胞、B細胞相比，NK細胞表面標(biāo)志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-，部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體β鏈（P75,CD122），CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標(biāo)記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一種穩(wěn)定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子，120kDa，NK細胞在IL-2條件下培養(yǎng)20天LAK-1仍為陽性，而HNK-1（CD57）和CD16部分消失。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1McAb所抑制。活化途徑活化途徑通過CD3分子的ζ鏈NK細胞不表達TCR/CD3復(fù)合物，但部分NK細胞表達CD3ζ鏈，當(dāng)用CD16抗體刺激NK細胞活化時，ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化，引起胞漿內(nèi)Ca2+濃度升高，IP3水平增加，促進細胞因子合成和ADCC作用。通過CD2分子CD2與CD58相互作用或用CD2McAb刺激可活化NK細胞，CD3ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化。自然殺傷細胞刺激因子自然殺傷細胞刺激因子（naturalkillercellstimulatoryfactor,NKSF）對NK細胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細胞調(diào)節(jié)素(leukoregulin,LR)對NK細胞的活化和分化有正調(diào)節(jié)作用，體外培養(yǎng)時加入上述細胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。前列腺素(PG)E1、E2、D2和腎上腺皮質(zhì)激素等對NK細胞的活性有抑制作用。NK細胞表面具有IL-2中親和性受體，IL-2誘導(dǎo)NK的殺傷活性約需18～24小時。此外，IL-2還可誘導(dǎo)NK細胞的增殖，一般在刺激后3～4天開始發(fā)生增殖，其機理為IL-2可誘導(dǎo)NK細胞表達IL-2Rα鏈，新表達的α鏈與原先細胞表面的β鏈和γ鏈結(jié)合形成高親和性受體，在IL-2存在下刺激NK細胞發(fā)生增殖。細胞功能細胞功能自然殺傷活性由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制，不依賴抗體，因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富，含有較大的嗜天青顆粒，顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關(guān)。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現(xiàn)早，在體外1小時、體內(nèi)4小時即可見到殺傷效應(yīng)。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞（包括部分細胞系）、病毒感染細胞、某些自身組織細胞（如血細胞）、寄生蟲等，因此NK細胞是機體抗腫瘤、抗感染的重要免疫因素，也參與第Ⅱ型超敏反應(yīng)和移植物抗宿主反應(yīng)。⒈識別靶細胞NK細胞識別靶細胞是非特異性的，這與CTL識別靶細胞機理不同，但確切的機理尚未明了。現(xiàn)已知淋巴細胞功能相關(guān)抗原-1（LFA-1）與靶細胞表面的細胞間粘附分子-1（ICAM-1）的作用參與NK細胞的識別過程，抗LFA-1或抗ICAM-1McAb可抑制NK細胞的殺傷活性。此外CD2與LFA-3（CD58）結(jié)合以及CD56也可能介導(dǎo)NK細胞與靶細胞的結(jié)合。有關(guān)白細胞分化抗原和粘附分子分別參見第一章和第二章。⒉殺傷介質(zhì)主要有穿孔素、NK細胞毒因子和TNF等。⑴穿孔素：穿孔素是一種由NK、CTL、LAK等殺傷細胞胞漿顆粒釋放的殺傷靶細胞的介質(zhì)，有關(guān)穿孔素的結(jié)構(gòu)和功能參見本章第二節(jié)。從胞漿顆粒中純化的穿孔素在體外能溶解多種腫瘤細胞，抗穿孔素抗體可抑制殺傷活性。IL-2可提高穿孔素基因的轉(zhuǎn)錄。IL-6可以促進IL-2對穿孔素基因轉(zhuǎn)錄的誘導(dǎo)作用。活性測定活性測定【中文名稱】自然殺傷細胞活性測定【概述】自然殺傷細胞（NK）介導(dǎo)天然免疫應(yīng)答，它不依賴抗體和補體，即能直接殺傷靶細胞，如腫瘤細胞或受病毒感染的細胞等；此外，尚有免疫調(diào)節(jié)功能，也參與移植排斥反應(yīng)和某些自身免疫病的發(fā)生發(fā)展。【參考值】51Cr釋放法：自然釋放率<10%～15%；自然殺傷率為47.6%～76.8%；51Cr利用率為6.5%～47.8%。酶釋放法：細胞毒指數(shù)為27.5%～52.5%。流式細胞術(shù)法為13.8%±5.9%。【臨床意義】NK細胞活性可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染的指標(biāo)之一。在血液系統(tǒng)腫瘤、實體瘤、免疫缺陷病、艾滋病和某些病毒感染患者，NK活性減低；宿主抗移植物反應(yīng)者，NK活性升高。其他相關(guān)其他相關(guān)圣祖德兒童研究醫(yī)院的坎帕納博士等人在新一期《血液》雜志絡(luò)版上發(fā)表論文說，此前用自然殺傷細胞治療白血病的研究進展不快，主要是因為自然殺傷細胞對白血病細胞不敏感，也難以在實驗室大量培養(yǎng)，而他們在這兩個方面都取得了進展。研究人員首先使用了含有各種免疫細胞的血樣，將其與經(jīng)過轉(zhuǎn)基因處理的K562人類白血病細胞混合培養(yǎng)。這種白血病細胞經(jīng)轉(zhuǎn)基因處理后，表面帶有“4－1BBL”和“IL－15”兩種蛋白質(zhì)。研究人員發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因白血病細胞能刺激血樣中自然殺傷細胞大量生長，其數(shù)量很快達到原先的1萬倍，這使得自然殺傷細胞能提純出來。此后，研究人員對自然殺傷細胞進行轉(zhuǎn)基因處理，使其表面生成能識別白血病細胞的受體蛋白。這種受體蛋白能與白血病細胞表面的蛋白質(zhì)“CD19”結(jié)合，促使自然殺傷細胞溶解白血病細胞?？才良{等人在論文中說，他們的方法能從少量血樣中培養(yǎng)大量自然殺傷細胞，從而使自然殺傷細胞能實際應(yīng)用于白血病治療，這尤其適用于