2023年高考生物二輪復(fù)習(xí)講義江蘇專版：第一部分 七 生物技術(shù)實(shí)踐

專題七I生物技術(shù)實(shí)踐

點(diǎn)清二線明;；面廣三專題主干知識(shí)整合

［建議］學(xué)前理一理，平時(shí)翻一翻，考前憶一憶

［理清——知識(shí)聯(lián)系］

果酒和果醋的制作原理、流程傳統(tǒng)發(fā)DNA的粗提取與鑒定

酵技術(shù)專

微生

腐乳的制作原理、流程的應(yīng)用專生題

生物探究加施洗衣粉的洗滌效果

題物的學(xué)

物

學(xué)利用什

技術(shù)

什和生么

技酵母細(xì)胞的固定化

培養(yǎng)其、無菌技術(shù)微生物么物技在其

術(shù)

的培養(yǎng)術(shù)在他方

平板劃線法、稀和涂布平板法

與應(yīng)用食品

實(shí)面的

加工

中的踐應(yīng)用DNA的粗提取與鑒定

微生.物的培養(yǎng)、分需與計(jì)數(shù)應(yīng)用高考考什么

高考考什么牌的應(yīng)用

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

［記清——主干術(shù)語］

1.制作果酒、果醋、腐乳、泡菜利用的微生物分別是酵母菌、

醋酸菌、毛霉（主要）和乳酸菌，異化作用類型分別是兼性厭氧型、需

氧型、需氧型、厭氧型。

2.制作果酒和果醋的實(shí)驗(yàn)流程：挑選葡萄一沖洗一榨汁一酒精

發(fā)酵一醋酸發(fā)酵。

3.制作果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口的作用是在醋酸發(fā)酵時(shí)

連接充氣泵進(jìn)行充氣，排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)排出JCQz,出料口用

來取柱。

4.制作果酒時(shí)溫度一般控制在比洛S，時(shí)間為1也;114,

前期需氧后期丕需氧;制作果醋時(shí)溫度控制在3。?35℃，時(shí)間為h

8d,始終需氧。

5.毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分

子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

6.腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉一加鹽腌制一加鹵

湯裝瓶一密封腌制。

7.加鹽腌制時(shí)間約為左右，配制鹵湯中的酒的含量一般控

制在12%左右。

8.用鹽腌制時(shí)，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過低，缺乏以抑

制微生物的生長(zhǎng),可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會(huì)影響腐乳

的口味。食鹽的作用：抑制微生物的生長(zhǎng)，防止腐敗變質(zhì)；析出水分,

使豆腐變硬，在后期制作過程中不易酥爛；調(diào)味作用，給腐乳以必要

的咸味；浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。

9.配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒

及各種香辛料配制而成的。酒的作用：防止雜菌污染以防腐；與有機(jī)

酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳風(fēng)味；酒精含量的上下與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間

的長(zhǎng)短有很大關(guān)系，酒精含量越高，對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大，使

腐乳成熟期延長(zhǎng)；酒精含量過低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水

解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。

10.微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及生

長(zhǎng)因子等。

11.消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體外表或內(nèi)部

的局部微生物（不包括芽抱和抱子）。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素

殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽胞和泡子。

12.制備固體培養(yǎng)基的步驟包括計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平

板等。

13.純化微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布堊板

法，平板劃線法可以別離微生物但不能對(duì)微生物進(jìn)行讓數(shù)，稀釋涂布

平板法既可別離微生物也可以對(duì)微生物進(jìn)任計(jì)數(shù)。

14.平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基外表連續(xù)劃線的

操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的外表。在數(shù)次劃線后培

養(yǎng)，可以別離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就

是菌落。

15.稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不

同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表，進(jìn)行培養(yǎng)。分為

系列稀費(fèi)操作和涂布里板操作兩步。

16.對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法。對(duì)于需要

長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。

17.DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在濃度0JL4

取皿&的NaCl溶液中溶解度最低。

18.DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒精,

可利用冷卻的酒精對(duì)提取的DNA進(jìn)行純化。

19.在雞血細(xì)胞液中參加一定量蒸儲(chǔ)水并用玻璃棒攪拌，過濾后

收集濾液，可獲取含DNA的濾液；切碎洋蔥，參加一定量洗滌劑和

食鹽，攪拌研磨，過濾后收集濾液，可獲取含DNA的濾液。

20.處理植物組織時(shí)需要進(jìn)行研磨，其目的是破碎細(xì)胞壁，使核

物質(zhì)容易溶解在NaCL溶液中；研磨不充分會(huì)使DNA的提取量減少,

影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二差胺鑒定不顯示藍(lán)色等。

21.用二苯胺鑒定DNA,在沸水浴的條件下呈現(xiàn)藍(lán)色。

22.目前常用的加酶洗衣粉的酶制劑有四類：蛋自醒、崩肪醵、

淀粉酶和纖維素酶，其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋自醵

和堿性脂肪蹶

23.探究加酶洗衣粉與普通洗衣粉洗滌效果的實(shí)驗(yàn)自變量是洗衣

粉的種類;探究加酶洗衣粉洗滌的最正確溫度條件實(shí)驗(yàn)的自變量是水

的溫度。

24.一般來說，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定，而細(xì)

胞多采用包埋法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大，而酶分子很小；個(gè)大的

難以被吸附或結(jié)合，而個(gè)小的酶容易從包埋材料中漏出。

25.酵母細(xì)胞固定化的步驟：酵母菌的活化一配制CaCL溶液一

配制海藻酸鈉溶液一海藻酸鈉溶液與酵母菌細(xì)胞混合f固定化酵母

細(xì)胞。

26.如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度

偏低，固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓

形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試。

［澄清——思維誤區(qū)］

關(guān)注點(diǎn)1誤認(rèn)為兼性厭氧與“有氧、無氧〃都一樣

［澄清］酵母菌在有氧條件下進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖；在無氧

條件下，進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2,產(chǎn)生的酒精對(duì)其他微生物

和酵母菌本身都具有毒害作用，所以在無氧條件下酵母菌不能大量繁

殖。

關(guān)注點(diǎn)2誤認(rèn)為釀酒和釀醋所利用的微生物相同

［澄清］釀酒和釀醋所利用的微生物不同，前者為酵母菌——真

核生物；后者為醋酸菌——原核生物。二者本質(zhì)區(qū)別是有無以核膜為

界限的細(xì)胞核。

關(guān)注點(diǎn)3不明確腐乳前期發(fā)酵和后期發(fā)酵的作用

［澄清］前期發(fā)酵的主要作用是創(chuàng)造條件讓毛霉生長(zhǎng)，使毛酶形

成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生

化反響的過程，即通過各種輔料與腐乳的緩慢水解作用，生成腐乳的

香氣。

關(guān)注點(diǎn)4誤認(rèn)為腐乳制作中食鹽的作用只是調(diào)節(jié)風(fēng)味

［澄清］食鹽在腐乳制作中的作用有：①析出豆腐中的水分，有

利于豆腐塊成形；②抑制雜菌；③形成腐乳的風(fēng)味；

④殺死毛霉等微生物，有利于菌體內(nèi)蛋白酶、脂肪酶等發(fā)揮作用。

關(guān)注點(diǎn)5不明確影響腐乳口味的因素有哪些

［澄清］影響腐乳口味的因素有：①豆腐的含水量；②鹽的用量;

③酒的用量；④香辛料的種類和用量；⑤其他輔料的種類；⑥發(fā)酵溫

度和時(shí)間。

關(guān)注點(diǎn)6不能區(qū)分選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基

［澄清］按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒別

培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中參加某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需

要的微生物生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)。如在某培養(yǎng)基中參加

青霉素，則能抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，對(duì)真菌的生長(zhǎng)無影響。鑒別培養(yǎng)基是

根據(jù)微生物的特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中參加某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成

的，用以鑒別不同類別的微生物。如伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基能指示大腸桿菌

的存在。

關(guān)注點(diǎn)7平板冷凝后，不明確平板倒置的目的

［澄清］平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基外表

的濕度也比擬高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]

發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

關(guān)注點(diǎn)8不了解影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素

［澄清］影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有水溫、水量、水質(zhì)、

洗衣粉的用量，衣物的質(zhì)料、大小及浸泡時(shí)間和洗滌的時(shí)間等。在實(shí)

驗(yàn)中應(yīng)控制好自變量之外的無關(guān)變量。

關(guān)注點(diǎn)9不明確酵母細(xì)胞固定化實(shí)驗(yàn)中，海藻酸鈉和氯化鈣的

作用

［澄清］海藻酸鈉作為酵母菌的包埋劑。氯化鈣能與海藻酸鈉反

響，形成凝膠珠。

關(guān)注點(diǎn)10不明確DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)中，兩次使用蒸儲(chǔ)水

的作用

［澄清］第一次加蒸儲(chǔ)水，使雞血細(xì)胞吸水漲碳；第二次加蒸館

水，使含DNA的NaCl溶液濃度降低，析出DNA分子。

專題復(fù)習(xí)2?

主攻點(diǎn)之（一）

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物的利用

且基礎(chǔ)主干知識(shí)⑥一網(wǎng)打盡（基穩(wěn)才能樓高）

1.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用（填圖）

⑴果酒和果醋的制作：

i挑選一一一m沖洗一榨汁一團(tuán)酒精發(fā)酵一醋酸發(fā)酵：

實(shí)驗(yàn)流程

條件控制1計(jì)條件控制

果

果國(guó)18?25C溫度⑷30?35匕

醋

酒

制

制先通氣，后國(guó)密封空氣全程⑹通氣

作

作

肉10?12d時(shí)間?8d

⑵腐乳的制作:

①制作原理：

空氣中的一些真菌.［1^］—起主要作用的是由毛霉

蛋白質(zhì)蕓，子的迦，咽蟠

②實(shí)驗(yàn)流程及影響因素:

證復(fù)腐E而連應(yīng)二遍遍i二加面拓痂二i國(guó)城;

二一

口驗(yàn)流至）

I70%|~~|含水量J一）雨T毛坯:鹽=Q"I

|四5?18式1溫度匕［---------1團(tuán)12%|

I發(fā)酵時(shí)間I希痂

2.圖解識(shí)記微生物的培養(yǎng)、別離與計(jì)數(shù)（填圖）

|在平板劃線法L——―X釋稀涂布平板平］

汨

種

微消H酒精等化學(xué)藥物I

生

pH、02等物

的毒

無菌U②紫外線消毒一

培

養(yǎng)

怛碳源M犯源、水、T灼燒滅菌

|無腌N長(zhǎng)因子U1

滅I干熱滅菌

菌

應(yīng)

利用⑹選擇培養(yǎng)用微生物實(shí)例「I分解尿素的細(xì)菌|

基對(duì)微生物篩選的分離分解纖維素的細(xì)菌I

|顯微鏡直接計(jì)藪｝微生物的?!圖稀釋涂布平藤

計(jì)數(shù)方法

研考占

高頻考點(diǎn)⑥一包在內(nèi)（方向比努力更重要）

［考什么考點(diǎn)?考法探究］

考點(diǎn)（一）果酒'果醋和腐乳的制作

1.（2017?江蘇高考）（多項(xiàng)選擇）如圖是探究果酒與氣體喝簪腮

果醋發(fā)酵的裝置示意圖。以下相關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是

）

A.改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型

對(duì)發(fā)酵的影響

果酒發(fā)酵中期通入氮?dú)?，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼

吸

C.果醋的發(fā)酵周期與實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度密切相關(guān)

D.氣體入口與氣體出口可以交換使用

解析：選ABC改變通入氣體的種類，例如分別通入氮?dú)夂脱?/p>

氣，可研究無氧呼吸和有氧呼吸對(duì)發(fā)酵的影響；果酒發(fā)酵中期通入氮

氣，更利于創(chuàng)造無氧條件，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸；果

醋發(fā)酵的菌種是醋酸桿菌，其生長(zhǎng)的適宜溫度是30?35℃,溫度能

影響醋酸桿菌的代謝，從而影響果醋的發(fā)酵周期；氣體的入口必須伸

入培養(yǎng)液中，氣體出口不能伸入培養(yǎng)液中，如果氣體的入口和出口交

換，會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵液噴出。

2.（2016?江然高考）以下關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，表達(dá)正

確的選項(xiàng)是（）

A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分，利于毛霉生長(zhǎng)

B.加料酒主要是為了滅菌，防止腐敗變質(zhì)

C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌

D.實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳不宜直接食用

解析：選D加鹽主要是為了抑制雜菌的生長(zhǎng)，同時(shí)也可析出水

分，有利于腐乳成形，因此加鹽的目的主要是抑制雜菌生長(zhǎng)而不是調(diào)

節(jié)水分；加料酒可以抑制微生物的生長(zhǎng)，同時(shí)能使腐乳具有獨(dú)特的風(fēng)

味，但不能滅菌；在腐乳制作的發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉；實(shí)

驗(yàn)室制作的腐乳因未經(jīng)質(zhì)量鑒定，不宜直接食用。

［聯(lián)知識(shí)1解讀發(fā)酵裝置圖

裝置圖結(jié)構(gòu)或操作目的

醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵

充氣口

進(jìn)行充氣

酒精發(fā)酵時(shí)用來排出

排氣口

由口

CO2

防止空氣中微生物的污

4_.長(zhǎng)而彎曲的膠管

染

制酒時(shí)關(guān)閉充氣口

制醋時(shí)充氣口連接氣泵，輸入無

菌空氣

考點(diǎn)（二）微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和別離

3.（2017?南京二模）某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降

解的有機(jī)化合物A,研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元

素等配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的

菌）。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如以下圖所示。以下有關(guān)表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是

（）

起杏營(yíng)振藩培養(yǎng)若干天后，測(cè)定接種

污罩樣品r各瓶中化合物A的含量廣、用狀

重復(fù)多次，直至獲得目的菌

A.培養(yǎng)基中參加化合物A作為唯一碳源，目的是為了篩選目的

菌

B.實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，可使目的菌和培養(yǎng)液充分接

觸

C.實(shí)驗(yàn)操作過程中，獲得純潔“目的菌〃的關(guān)鍵是防止外來雜

菌污染

D.將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)屢次上述實(shí)驗(yàn)的目的是獲得

大量菌種

解析：選D培養(yǎng)基中化合物A為唯一碳源，可以篩選能高效

降解化合物A的細(xì)菌；實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，既可使目的

菌和培養(yǎng)液充分接觸，又可以增加培養(yǎng)液中溶氧量；微生物培養(yǎng)過程

中要進(jìn)行無菌操作，防止外來雜菌的污染；將固體培養(yǎng)基得到的目的

菌重復(fù)屢次上述實(shí)驗(yàn)是為了純化高效降解化合物A的細(xì)菌。

4.（2015?江蘇高考）人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用

來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果，研究人

員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研

究。請(qǐng)答復(fù)以下問題：

(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，以下選項(xiàng)不需要的是

(填序號(hào))。

①酒精燈②培養(yǎng)皿③顯微鏡④無菌水

(2)在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基外表的菌懸液量不宜過多的原

因是

(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)，若試管口粘附有培養(yǎng)基，

需要用酒精棉球擦凈的原因是

(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解

產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反響。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板

上，篩選到了幾株有透明降解圈的菌落(見以下圖)。圖中降解圈大小

與纖維素酶的有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是

(填圖中序號(hào))。

4^-----降解圈

-----菌落③

(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和北，在不同溫度

和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見以下圖，推測(cè)

菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是

《5o

u里

4o

?

g濡

*躲3o

p-

or建2o

et

i1O

}n

解析：（1）在樣品稀釋和涂布平板過程中，需要在酒精燈火焰附

近進(jìn)行操作，培養(yǎng)皿用于盛放培養(yǎng)基并培養(yǎng)細(xì)菌，無菌水做稀釋的溶

劑，此處唯一用不到的是顯微鏡。（2）在涂布平板時(shí)，要取少量菌懸

液滴加到培養(yǎng)基外表，因?yàn)槿绻渭泳鷳乙毫窟^多，菌懸液就會(huì)堆積

在培養(yǎng)基外表影響別離效果。（3）在向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí),

如果試管口粘附有培養(yǎng)基，就很容易使棉塞受到污染，因此，需要用

無菌的酒精棉球?qū)⒃嚬芸诓潦酶蓛?。?）因?yàn)閯偣t可以與纖維素形

成紅色復(fù)合物，且不與纖維素降解產(chǎn)物反響。所以在剛果紅培養(yǎng)基平

板上，菌落周圍有透明降解圈是纖維素被降解的結(jié)果，降解圈大小由

纖維素酶的活性和量決定。圖中菌落①周圍的降解圈最大，因此其降

解纖維素的能力最強(qiáng)。（5）考慮到人工瘤胃的發(fā)酵過程會(huì)使發(fā)酵液酸

性增加，溫度升高，在這個(gè)前提下觀察在不同溫度和pH條件下測(cè)得

的發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果圖，從圖中可以看出，在高溫和低pH條件

下都是北菌株中的纖維素酶的活性較高，因而該菌株更適合用于人

工瘤胃發(fā)酵。

答案：⑴③（2）培養(yǎng)基外表的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆

積，影響別離效果（3）防止培養(yǎng)基污染棉塞

（4）量與活性①⑸J4發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較

高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高

［聯(lián)知識(shí)1微生物純化方法的比擬

方

平板劃線法稀釋涂布平板法

法

平板劃線法

圖

示

稀釋涂布平板法

⑴接種環(huán)的灼燒：⑴稀釋操作時(shí)，每支試管及其

①第一次劃線前：殺死接種環(huán)上中的9mL水、移液管等均需

的微生物，防止污染培養(yǎng)物滅菌；操作時(shí)，試管口和移液

②之后每次劃線前：殺死殘留菌管應(yīng)在離火焰1?2cm處

操種，保證每次劃線菌種來自上次(2)涂布平板時(shí)：

作劃線末端①涂布器用體積分?jǐn)?shù)為70%

注③劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，的酒精消毒，取出時(shí)讓多余酒

意防止污染環(huán)境和感染操作者精在燒杯中滴盡，然后將沾有

事⑵灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再少量酒精的涂布器在酒精燈

項(xiàng)進(jìn)行操作，以免溫度太高殺死菌火焰上引燃

種②不要將過熱的涂布器放在

(3)劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第盛放酒精的燒杯中，以免引燃

一區(qū)域相連其中的酒精

(4)劃線用力要大小適當(dāng)，防止用③酒精燈與培養(yǎng)皿距離要適

力過大將培養(yǎng)基劃破宜，移液管管頭不要接觸任何

物體

優(yōu)可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)既可以計(jì)數(shù)，乂可以觀察曲落

點(diǎn)行別離特征

缺吸收量較少，較麻煩，平板不

不能計(jì)數(shù)

點(diǎn)枯燥效果不顯著，容易蔓延

適

用

適用于好氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌

范

圍

目

在培養(yǎng)基上形成由單個(gè)菌種繁殖而來的子細(xì)胞群體——菌落

的

培平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]發(fā)，防止

養(yǎng)皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染

［怎樣考--------------考題?考情分析］

1.（2015?江茅高考）關(guān)于“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，以下表達(dá)錯(cuò)誤的

選項(xiàng)是（）

A.將腐乳坯堆積起來會(huì)導(dǎo)致堆內(nèi)溫度升高，影響毛霉生長(zhǎng)

B.腐乳坯若被細(xì)菌污染，則腐乳坯外表會(huì)出現(xiàn)黏性物

C.勤向腐乳坯外表噴水，有利于毛霉菌絲的生長(zhǎng)

D.裝壇階段參加料酒，可有效防止雜菌污染

解析：選C毛霉有氧呼吸能釋放大量能量，大局部以熱能形式

散失，堆內(nèi)溫度過高會(huì)影響毛霉生長(zhǎng)。毛霉是絲狀真菌，若腐乳坯外

表出現(xiàn)黏性物，可能是被其他雜菌污染。毛霉是好氧真菌，經(jīng)常向腐

乳坯外表噴水，不利于毛霉菌絲的生長(zhǎng)。料酒能抑制微生物的生長(zhǎng),

故能有效防止雜菌污染。

2.（2015?江琰高考）做“微生物的別離與培養(yǎng)〃實(shí)驗(yàn)時(shí)，以下表

達(dá)正確的選項(xiàng)是（）

A.高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，翻開放氣閥使壓力表指針回到零后，

開啟鍋蓋

B.倒平板時(shí)，應(yīng)將翻開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋

上

C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落

D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上

解析：選D在高壓滅菌的操作過程中，加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋

內(nèi)溫度自然下降，待壓力表的壓力降到零時(shí)，翻開放氣閥，旋松螺栓,

翻開蓋子。倒平板時(shí)，用左手將培養(yǎng)皿翻開一條稍大于瓶口的縫隙，

而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻

后，再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中，一般將培養(yǎng)皿倒置，在皿

底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。

3.（2015?江蘇高考）（多項(xiàng)選擇）右圖為蘋果酒的

發(fā)酵裝置示意圖，以下表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是（）

A.發(fā)酵過程中酒精的產(chǎn)生速率越來越快

B.集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的CO2

C.發(fā)酵過程中酵母種群呈“J〃型增長(zhǎng)

D.若發(fā)酵液外表出現(xiàn)菌膜，最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣

解析：選ABC酵母菌發(fā)酵過程中因營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗、pH的變

化等，酒精的產(chǎn)生速率會(huì)越來越慢。集氣管收集的氣體除酵母菌無氧

呼吸產(chǎn)生的CO2外，還有有氧呼吸產(chǎn)生的CO2。發(fā)酵過程中，隨著

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗pH降低等，酵母菌的繁殖速度會(huì)變慢，其種群不會(huì)呈

"J”型增長(zhǎng)。發(fā)酵液外表出現(xiàn)的菌膜可能是醋酸菌在有氧條件下繁殖

產(chǎn)生的，說明發(fā)酵瓶可能漏氣。

4.（2016?江蘇高考）（多項(xiàng)選擇）漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類，在環(huán)

境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。以下圖是別離、純化和保存

漆酶菌株的過程，相關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是（）

A.生活污水中含有大量微生物，是別離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品

B.篩選培養(yǎng)基中需要參加漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆

酶的菌落

C.在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過劃線進(jìn)一步純化

D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株

解析：選BC生活污水中含木質(zhì)素的物質(zhì)相對(duì)較少，產(chǎn)漆酶菌

株也較少，不宜作為別離產(chǎn)漆酶菌株的樣品；產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)

素，在篩選培養(yǎng)基中參加木質(zhì)素可篩選產(chǎn)漆酶的菌株，篩選時(shí)可通過

菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落;在涂布平板上生長(zhǎng)的菌落可能還有其他

雜菌，可再通過平板劃線法進(jìn)一步純化；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，

可以采用甘油管藏的方法，即在一20℃的冷凍箱中保存。

5.（2017?江班高考）以下關(guān)于“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，表達(dá)正確的

選項(xiàng)是（）

A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味

B.腐乳制作后期參加香辛料和料酒有防腐作用

C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉

D.成品腐乳外表的粘性物質(zhì)主要由細(xì)菌產(chǎn)生

解析：選B控制發(fā)酵溫度主要目的是利于菌種繁殖和代謝；腐

乳制作后期參加香辛料和料酒有防腐作用；毛霉的作用主要是分解蛋

白質(zhì)和脂肪；成品腐乳外表的粘性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的菌絲。

6.(2017?江蘇高考)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對(duì)

環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)如圖操作步驟，從處理廢水的活

性污泥中別離篩選酚降解高效菌株。請(qǐng)答復(fù)以下問題：

，芯匕：：：^：^??

日目目目目平板

活性污泥富集培養(yǎng)10-,10210310"105

(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白陳、K2HPO4、MgSO4＞苯酚和

水，其中可作為碳源的有o

(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐

漸，以到達(dá)富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密

集，應(yīng)進(jìn)一步,以便于菌落計(jì)數(shù)與別離。制備平板培養(yǎng)

基時(shí)除了需要水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加o

(3)右圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中(填圖中序號(hào))

區(qū)域更易獲得單菌落。

(4)采用比色測(cè)定法(使用苯酚顯色劑)檢測(cè)降解后的廢水中苯酚

殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反響，下表中1?5號(hào)比色

管的苯酚濃度應(yīng)分別為o

|1|2|3|4|5|6

苯酚濃度

1

(mg/L)

如果廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，

則需將殘留液稀釋（填序號(hào)：①5②10③20）倍后，再進(jìn)

行比色。

解析：（1）富集培養(yǎng)基中蛋白陳、苯酚都是含碳的有機(jī)物，可作

為碳源。（2）欲富集酚降解菌，隨轉(zhuǎn)接次數(shù)的增加，應(yīng)逐漸增加培養(yǎng)

基中苯酚的含量；若接種培養(yǎng)后平板上菌落過于密集，則應(yīng)進(jìn)一步稀

釋后再進(jìn)行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落計(jì)數(shù)與別離；平

板培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，除含有水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（碳源、氮源、無機(jī)鹽

等）外，還需添加瓊脂作為凝固劑。（3）利用連續(xù)劃線法接種時(shí)，最后

的劃線區(qū)域（③）中，菌體的密度較小，容易獲得單菌落。（4）因系列濃

度梯度中6號(hào)比色管中苯酚濃度為1mg/L,故1~5號(hào)比色管中的苯

酚濃度應(yīng)分別為0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L;

根據(jù)題意，廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，

要使稀釋后的苯酚殘留液濃度介于0?1mg/L,需將殘留液稀釋20

倍左右。

答案：⑴蛋白陳、苯酚（2）增加稀釋涂布凝固劑（3）（3）

（4）0、0.2、0.4、0.6、0.8③

I江蘇卷命題分析I

本節(jié)內(nèi)容在近三年高考中幾乎年年考。以選擇題的形式考查傳統(tǒng)

發(fā)酵技術(shù)，以選擇題或非選擇題的形式考查微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用，因

此微生物的培養(yǎng)和利用是考查的重點(diǎn)。復(fù)習(xí)備考時(shí)，在抓雙基的基礎(chǔ)

上，注意知識(shí)間的橫向聯(lián)系，提高綜合分析問題和解決問題的能力。

練好題典題精選⑥一站通關(guān)（題貴在精而不在多）

.IANHAOTI***

一、選擇題

1.（2017?蘇州一模）以下有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)及其在食品生產(chǎn)中應(yīng)

用的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是（）

A.釀酒過程中密封的時(shí)間越長(zhǎng)，產(chǎn)生的酒精量就越多

B.釀制果醋所需酵母菌和醋酸菌的發(fā)酵底物、條件相同

C.制作腐乳時(shí)需利用毛霉產(chǎn)生的酶分解豆腐中的蛋白質(zhì)等物質(zhì)

D.制作果酒、果醋的微生物須在無菌條件下才能發(fā)酵

解析：選C酒精是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的，在一定的時(shí)間內(nèi)，

密封的時(shí)間越長(zhǎng)，產(chǎn)生的酒精量就越多，但酒精到達(dá)一定濃度會(huì)抑制

無氧呼吸，導(dǎo)致酒精量不再增加；釀制果醋的過程是先使酵母菌通過

無氧呼吸產(chǎn)生果酒，再利用醋酸菌把果酒發(fā)酵成果醋，前者的發(fā)酵底

物是糖類，條件是18?25℃、無氧，后者的發(fā)酵底物是酒精，條件

是30?35°C,需氧；制作腐乳主要利用的是毛霉分泌的蛋白酶和脂

肪酶，它們能夠分解豆腐中的蛋白質(zhì)、脂肪等物質(zhì)；自然發(fā)酵時(shí)，葡

萄汁等沒有嚴(yán)格滅菌，酵母菌、醋酸菌也能發(fā)酵。

2.（2017?揚(yáng)州一模）以下有關(guān)制作果酒、果醋和腐乳的表達(dá)，錯(cuò)

誤的選項(xiàng)是（）

A.果酒的制作過程中既涉及有氧呼吸又涉及無氧呼吸

B.果醋發(fā)酵溫度較高，且發(fā)酵過程要特別注意氧氣的供給

C.變酸的酒外表的菌膜含醋酸菌，腐乳的“皮”為毛霉菌絲

D.發(fā)酵過程中所有的相關(guān)反響都是在微生物的細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的

解析：選D腐乳制作過程中，蛋白質(zhì)和脂肪的水解反響發(fā)生在

毛霉的細(xì)胞外。

3.以下關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是（)

A.一般用含糖量較高的水果來制作果酒

B.果醋發(fā)酵包括有氧發(fā)酵和無氧發(fā)酵

C.制作腐乳時(shí)，應(yīng)防止毛霉以外的其他微生物生長(zhǎng)

D.都是利用微生物胞內(nèi)酶催化獲得最終產(chǎn)品

解析:選A醋酸菌是嚴(yán)格好氧菌，所以果醋發(fā)酵只有有氧發(fā)酵;

參與腐乳發(fā)酵的微生物有青霉、毛霉、曲霉、酵母，其中主要是毛霉;

果酒、果醋是利用微生物胞內(nèi)酶催化獲得最終產(chǎn)眩為

品，腐乳制作是利用毛霉分泌的蛋白酶和脂肪酶，nT

痣3a小虻

屬于胞外酶。甲乙

4.（2017?南京二樓）如圖裝置可用于生物技術(shù)實(shí)踐的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

以下有關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是（）

A.制作果酒、果醋或腐乳時(shí)，所需控制的溫度都是相同的

B.乙裝置可以先用于果酒的制作，后用于果醋的制作

C.用裝置甲制作腐乳時(shí)，自下而上隨著豆腐塊加高逐漸減少用

鹽量

D.裝置乙中b為排氣口，c為充氣口，可防止空氣中微生物的

污染

解析：選B制作果酒、果醋或腐乳時(shí)，控制的溫度分別是18~

25℃、30?35°C、15~18℃;用裝置甲制作腐乳時(shí)，越接近瓶口微

生物感染時(shí)機(jī)越多，所以加鹽量應(yīng)增大；裝置乙中b為充氣口，c為

排氣口，排氣口長(zhǎng)而彎曲可防止空氣中微生物的污染。

5.以下有關(guān)“微生物的別離與培養(yǎng)〃實(shí)驗(yàn)的表達(dá)，正確的選項(xiàng)

是（）

A.利用平板劃線法可對(duì)微生物進(jìn)行接種、純化、別離和計(jì)數(shù)

B.對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行編號(hào)或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時(shí)，應(yīng)使用記號(hào)筆在皿

底標(biāo)記

C.倒平板時(shí)，應(yīng)將翻開的培養(yǎng)皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到

皿蓋上

D.將好氧型菌株接種到培養(yǎng)液中需靜置培養(yǎng)，防止培養(yǎng)液沾染

試管壁引發(fā)污染

解析：選B利用平板劃線法可對(duì)微生物進(jìn)行接種、純化和別離,

但不能計(jì)數(shù)；在微生物的培養(yǎng)中，一般將培養(yǎng)皿倒置，在皿底上用記

號(hào)筆做標(biāo)記；倒平板時(shí)左手拿培養(yǎng)皿，右手拿錐形瓶，左手將培養(yǎng)皿

翻開一條稍大于瓶口的縫隙，倒入培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿皿蓋；將

好氧型菌株接種到培養(yǎng)液中需振蕩培養(yǎng)，以增加溶液的溶氧量。

6.（2017?南通一模）養(yǎng)殖池中存在的有毒物質(zhì)主要是氨及亞硝酸,

這兩種物質(zhì)可被硝化細(xì)菌吸收利用。若要對(duì)養(yǎng)殖池底泥中硝化細(xì)菌別

離與計(jì)數(shù)，貝!1（）

A.需要配制添加一定濃度氨鹽的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基，以篩選

硝化細(xì)菌

B.應(yīng)對(duì)采集底泥使用的工具進(jìn)行滅菌，全部接種過程均需在酒

精燈火焰旁進(jìn)行

C.可以采用平板劃線法進(jìn)行計(jì)數(shù)，還需與未接種的空白培養(yǎng)基

同時(shí)培養(yǎng)

D.應(yīng)將培養(yǎng)基置于30°C恒溫下培養(yǎng)12h后，統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中全

部菌落數(shù)

解析：選B牛肉膏蛋白陳本身含有氮源，無法篩選硝化細(xì)菌；

平板劃線法可以別離菌種，但不能用于計(jì)數(shù)；培養(yǎng)過程中應(yīng)每隔一段

時(shí)間觀察，直到菌落穩(wěn)定開始計(jì)數(shù)。

7.以下有關(guān)生物技術(shù)應(yīng)用的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是（）

A.腐乳制作中酒精含量過高會(huì)延長(zhǎng)腐乳成熟時(shí)間

B.制作果醋時(shí)中斷通氧會(huì)引起醋酸菌死亡

C.若固定化酵母細(xì)胞時(shí)CaCb溶液濃度過低，將很難形成凝膠

珠

D.加酶洗衣粉中的酶制劑的作用是直接洗去衣服上的污垢

解析：選D腐乳制作中酒精含量過高，抑制酶的活性，故會(huì)延

長(zhǎng)腐乳成熟時(shí)間；醋酸菌是好氧菌，中斷通氧會(huì)引起醋酸菌死亡；

CaCb溶液的作用是使膠體聚沉，濃度過低，不易形成凝膠珠；加酶

洗衣粉中的酶制劑有的是將大分子污垢分解成小分子，從衣物上脫落

下來，有的本身不能去除衣物上的污垢，而是使纖維的結(jié)構(gòu)變得蓬松,

如纖維素酶。

8.（2017?南通二模）在別離、純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)，叔

中，劃線接種（甲）、培養(yǎng)結(jié)果（乙）如右圖。有關(guān)表一野繆

甲乙

達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是（）

A.接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B.連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落

C.接種過程中至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次

D.甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置

解析：選D在別離、純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)中，接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基

進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落；接

種過程中，接種前要灼燒，每次劃線后均需灼燒，至少需要對(duì)接種環(huán)

灼燒5次；據(jù)甲和乙比照，甲中d區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置。

9.（2017?揚(yáng)州一模）（多項(xiàng)選擇）以下有關(guān)“微生物的別離與培

養(yǎng)〃實(shí)驗(yàn)的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是（）

A.高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時(shí)應(yīng)按順時(shí)針方向依次旋緊螺栓

B.選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類

C.待培養(yǎng)基冷卻至室溫時(shí)倒平板

D.統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)量時(shí)，接種方法可采用稀釋涂布平板法

解析：選ABC高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時(shí)，將蓋上的排氣軟管插

入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)，再以兩兩對(duì)稱的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)

螺栓，使螺栓松緊一致；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定培養(yǎng)基中某種微生物的

種類；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)倒平板；稀釋涂布平板法可用于

活菌數(shù)量的計(jì)數(shù)。

10.（2017?南通二模）（多項(xiàng)選擇）以下有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作

的比擬，正確的選項(xiàng)是（）

A.主要菌種不一定是真核生物

B.溫度控制必須保證微生物繁殖最快

C.發(fā)酵過程會(huì)釋放熱量

D.可通過色、香、味等對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行評(píng)價(jià)

解析：選ACD果醋制作利用的菌種是醋酸菌，是原核生物；

發(fā)酵溫度和微生物繁殖最快的溫度不一定相同，如腐乳制作的發(fā)酵溫

度為15?18°C,此溫度并不是毛霉繁殖最快的溫度；三種發(fā)酵過程

中，菌種都會(huì)進(jìn)行細(xì)胞呼吸釋放熱量。

二、非選擇題

11.某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)答復(fù)與

此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題：

（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白陳、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了

和O

（2）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣本

的平板置于中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37要使該

實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種作為對(duì)照

進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

（3）培養(yǎng)20h后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的,

這說明湖水樣品中有多種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受

細(xì)菌污染的程度越_______（填“高"或"低〃）。

（4）如以下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)

的效果圖，請(qǐng)分析接種的具體方法。

AB

獲得圖A效果的接種方法是,獲得圖B效果

的接種方法是o某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)

現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是

應(yīng)當(dāng)怎樣操作？

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

（5）如果在培養(yǎng)基中參加青霉素，可以用于篩選耐的真

菌，這種培養(yǎng)基（按功能分）被稱為。

解析：（1）蛋白陳富含蛋白質(zhì)，主要為微生物提供氮源，淀粉作

為微生物的碳源。（2）微生物的培養(yǎng)在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。要使該實(shí)

驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即同時(shí)在另一平板上接種無菌

水作為對(duì)照，以判斷培養(yǎng)基制作是否合格。（3）培養(yǎng)20h后，不同微

生物在平板培養(yǎng)基上會(huì)形成形態(tài)和顏色不同的菌落。菌落總數(shù)越多，

說明湖水中的微生物數(shù)量越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越高。（4）

根據(jù)圖中菌落的分布可以判斷接種方法。圖A中菌落均勻分布，則

獲得圖A效果的接種方法是稀釋涂布平板法。圖B中菌落分布在不

同區(qū)域的平行線上，則獲得圖B效果的接種方法是平板劃線法。培

養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高或培養(yǎng)過程被

雜菌污染，可以通過增大稀釋倍數(shù)或嚴(yán)格無菌操作的方法解決。（5）

參加青霉素的培養(yǎng)基可作為篩選真菌的選擇培養(yǎng)基。

答案：（1）氮源碳源⑵恒溫培養(yǎng)箱無菌水

（3）菌落高（4）稀釋涂布平板法平板劃線法菌液濃度過高

（或培養(yǎng)過程被雜菌污染）增大稀釋倍數(shù)（或嚴(yán)格無菌操

作，原因與操作要對(duì)應(yīng)）（5）青霉素選擇培養(yǎng)基行氣］

12.如圖是某細(xì)菌純化培養(yǎng)過程中劃線接種的培養(yǎng)結(jié)

果。答復(fù)以下問題：

（1）在（填圖中編號(hào)）區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落，產(chǎn)生每個(gè)菌落

的最初細(xì)菌數(shù)目是個(gè)。據(jù)圖分析，在培養(yǎng)基上劃線接種時(shí),

劃線的順序依次是（用編號(hào)表示）。

⑵下表是某微生物培養(yǎng)基成分:

編

編號(hào)成分含量成分含量

號(hào)

(NH4)2S

①粉狀硫10g②0.4g

04

9.25

③④

K2HPO44gMgSO4

g

⑤⑥

FeSO40.5gCaCk0.5g

⑦H2O100mL————

①若培養(yǎng)從土壤中別離出來的自生固氮菌，該培養(yǎng)基應(yīng)添加

,去除O

②若要鑒別纖維素分解菌，可用法，若要鑒別

尿素分解菌可在培養(yǎng)液中參加

解析：(1)從圖中可知，②號(hào)區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落；1個(gè)菌落由1

個(gè)細(xì)菌繁殖形成；根據(jù)①③②區(qū)域菌落數(shù)越來越少，所以劃線的順序

依次是①f③f②。(2)①自生固氮菌是異養(yǎng)生物，需參加有機(jī)碳，

不需要氮源，它可固定大氣中的N2,因而培養(yǎng)基中應(yīng)添加碳源去掉

氮源。②鑒別纖維素分解菌可用剛果紅染色法，要鑒別尿素分解菌，

可在培養(yǎng)液中參加酚紅指示劑。

答案：⑴②1①一③f②⑵①碳源氮源

②剛果紅染色酚紅指示劑

13.以下圖為果酒、果醋工廠化生產(chǎn)流程。請(qǐng)據(jù)圖答復(fù)以下問題:

候選菌A候選菌B

I接種I接種

葡萄果汁

I接痛、前錨

純化一果酒

I接種I接種

乙A--擴(kuò)大培養(yǎng)—A

《---A

加工I接種I接種

葡錮一果汁一發(fā)酵罐一?果酒一?發(fā)酵罐

II

果泗產(chǎn)品果醋產(chǎn)品

(1)家庭自制葡萄酒所用菌種常來自，圖中的候

選菌A、B經(jīng)篩選和純化分別獲取和_______菌種。

(2)圖中所用的培養(yǎng)基都需要在接種前用法進(jìn)行滅

菌。

(3)在純化菌種A時(shí)接種了5個(gè)平板，每個(gè)平板均接種0.1mL樣

品并培養(yǎng)。其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是

，推測(cè)出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是

o其余的甲、丙、丁、戊平板操作正常，其菌落數(shù)

分別是210、230、470、190,則樣品中菌種A的數(shù)量為個(gè)?mL

(4)果酒發(fā)酵罐與果醋發(fā)酵罐需要控制的溫度條件差異是

解析：(1)家庭自制葡萄酒所用菌種常來自葡萄皮外表的酵母菌。

候選菌A、B篩選和她化后可以分別用于制作果酒和果醋，所以分別

獲取的是酵母菌和醋酸菌。(2)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。

(3)分析圖乙中培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果，可推知采用的純化菌種的接種方法

是稀釋涂布平板法。出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻。平板

上菌落數(shù)量在30?300之間可以用于計(jì)算,所以有效的菌落數(shù)是210、

230、190,平均值為210。因?yàn)榻臃N了0.1mL,所以菌種A的數(shù)量

為2100個(gè)?1111—1。(4)果酒發(fā)酵的適宜溫度是18?25°C,果醋發(fā)酵

的適宜溫度是30?35

答案：(1)葡萄皮外表的酵母菌酵母菌醋酸菌

(2)高壓蒸汽滅菌(3)稀釋涂布平板法涂布不均勻

2100(4)前者18?25°C,后者30?35℃

14.生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用十分廣泛，如果酒、果醋制作

是常見的例子。請(qǐng)答復(fù)以下有關(guān)果酒、果醋制作的問題：

(1)果酒、果醋制作中，都需要大量純種發(fā)酵微生物，所以首先

要對(duì)發(fā)酵微生物進(jìn)行培養(yǎng)，在微生物培養(yǎng)過程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外,

還要考慮溫度、、滲透壓等條件；為防止雜菌污染，還需要

對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行(填“消毒〃或"滅菌〃)；操作者的

雙手需要進(jìn)行清洗和;空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其

（填選項(xiàng)）。

A.果酒生成醋酸時(shí)需要氧氣

B.通入空氣可使乙瓶中的鋸末呈松散狀

C.使乙瓶中流出的液體緩慢滴入丙瓶中

D.使甲瓶中流出的液體緩慢滴入乙瓶中

（3）如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置，需要修改的地方是

解析：（1）微生物培養(yǎng)需要同時(shí)考慮溫度、pH、滲透壓等外界條

件，培養(yǎng)涉及的器材和培養(yǎng)基等都需要進(jìn)行滅菌，而對(duì)操作者的雙手

則要進(jìn)行消毒處理，紫外線通過使蛋白質(zhì)變性可以殺滅空氣中的微生

物。（2）圖中的乙瓶為醋酸發(fā)酵瓶，內(nèi)有醋酸菌，若該瓶流出的液體

呈酸性，說明流出液中有醋酸生成。在乙瓶中進(jìn)行的過程需要氧氣，

醋酸菌進(jìn)行的是有氧呼吸。（3）酒精發(fā)酵在無氧條件下才能進(jìn)行，所

以不需要通入空氣。

答案：（l）pH滅菌消毒紫外線能使蛋白質(zhì)變性（2）乙醋

酸菌醋酸A（3）去掉通氣裝置

-u專題復(fù)習(xí)2?

主攻點(diǎn)之（二）

酶的應(yīng)用和DNA的粗提取與鑒定

c“串基礎(chǔ)

主干知識(shí)◎一網(wǎng)打盡（基穩(wěn)才能樓高）

1.DNA粗提取與鑒定（填圖）

在溶有DNA的NaCl溶液中加入

選用［UDNA含量相對(duì)利用DNA在用不同濃度NaCl溶液中溶解度

國(guó)二苯胺試劑,混合均勻后將試管在沸

較高的生物組織不同，通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)

水浴中加熱5min,溶液變成藍(lán)色

I

|材料的選取|——‘破碎細(xì)胞（以雞血為例）|——4去除雜質(zhì)--------JDNA的析出］——，DNA的鑒定"

................'....................'..s,....................znz:.........................

雞血細(xì)胞f加②蒸慵水f用玻璃棒攪拌f用紗::將處理后的溶液過漉，加入與漉液體積相等的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)

布過濾f收集麗.........................n為95%的團(tuán)酒精溶液

2.圖解酶的應(yīng)用與固定化（填圖）

活化酹母細(xì)胞*配制（DCaClz溶液-配制弛藻酸鈉溶液-混合一固定化解母細(xì)胞

過程

國(guó)包埋法、化學(xué)結(jié)合法、團(tuán)物理吸附法固定化幅和aaJ加酶原理

I洗衣粉;酶的國(guó)專一性和高效性

固定化細(xì)胞

研考點(diǎn)

高頻考點(diǎn)⑥一包在內(nèi)（方向比努力更重要）

［考什么^--------------考點(diǎn)?考法探究］

考點(diǎn)（一）酶的應(yīng)用

1.（2017?江蘇高考）為了探究一種新型堿性纖維素酶的去污效能,

研究性學(xué)習(xí)小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖。由圖中實(shí)驗(yàn)結(jié)果能直接

得出的結(jié)論是（）

90

口不加前

口加前

60

30

污布類型1234

洗衣粉類型XYYZ

酶用量（U/L）0I200|300I300I30

A.堿性纖維素酶對(duì)污布類型2的去污力最強(qiáng)

B.不同類型洗衣粉影響堿性纖維素酶的去污力

C.堿性纖維素酶對(duì)污布類型2、3的去污力不同

D.加大酶用量可以顯著提高洗衣粉的去污力

解析：選C對(duì)污布類型2、3處理，洗衣粉類型、酶用量均相

同，二者比擬可以直接說明堿性纖維素酶對(duì)污布類型2、3的去污力

不同。由