白血病細胞的免疫表達

白血病細胞的免疫表達第一頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一研究方法流式細胞術電鏡熒光顯微鏡免疫組織化學第二頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一流式細胞術(FCM)流式細胞術白血病免疫分型是利用熒光素標記的單克隆抗體（McAb）作分子探針，多參數(shù)分析白血病細胞的細胞膜和細胞漿或細胞核的免疫表型，由此了解被測白血病細胞所屬細胞系列及其分化程度。白血病形成的分化阻斷學說

第三頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一B細胞分化各時期的細胞膜表現(xiàn)型第四頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一第五頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一流式細胞儀免疫分型實驗1.樣本采集、運輸、保存和操作2.樣本制備單細胞懸液的制備

分離靶細胞群體估細胞懸液

細胞染色3.抗體組合的確定4.樣本獲取5.數(shù)據(jù)分析6.數(shù)據(jù)解釋

第六頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一電鏡(EM)電鏡不僅可以根據(jù)細胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)育狀況提示幼稚細胞來源和功能狀態(tài)進行診斷，也常常通過對紅系各階段細胞結(jié)構(gòu)分析判斷紅系病態(tài)造血的原因。

第七頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一急性未分化或微分化型髓系白血病(MO)

A、幼稚細胞外形圓形或卵圓形，直徑10um，核質(zhì)比例高，核卵圓形，異染色質(zhì)較多，核仁明顯，細胞器少，×8000；B、核膜MPO反應陽性，×8000第八頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一急性巨核細胞白血病(AMKL)A、小巨核細胞核不規(guī)則，有深切跡，異染色質(zhì)較多，胞漿中可見sER構(gòu)成管道網(wǎng)狀系統(tǒng)，顆粒少見，×6000；B、核膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)PPO陽性反應，無陽性顆粒，×6000。第九頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一免疫組化(IHC)免疫組織化學(IHC)以其方法簡單、特異性強、設備要求低、形態(tài)學與免疫學結(jié)合等優(yōu)勢，得到各級醫(yī)院尤其是基層醫(yī)院的廣泛認可，成為其它方法不可完全取代的、血液系統(tǒng)腫瘤病理診斷、鑒別診斷與分型的常規(guī)檢測手段。

第十頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一白血病細胞的免疫表達急性T淋巴細胞白血病(T-ALL)急性B淋巴細胞白血病(B-ALL)急性髓系白血病(AML)慢性淋巴細胞白血?。–LL）慢性髓細胞性白血?。–ML）

第十一頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一急性T淋巴細胞白血病(T-ALL)CD7、CD5、CD2為全T細胞抗原，基本表達于T細胞分化的各階段常以CD45Ro和CD3作為檢測T細胞來源腫瘤較好的抗體組合CD4、CD8TCRα、TCRβ基因重排T淋巴細胞來源的腫瘤浸潤性較強，預后較差，并需要多種治療第十二頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一急性B淋巴細胞白血病(B-ALL)CD10(CALLA)——區(qū)別ALL和AML與T細胞分化相同，在淋巴干細胞階段，只表達TDT，CD34等非系抗原；到B系祖細胞，出現(xiàn)CD19、CD79a及胞漿CD10表達；隨著B細胞分化發(fā)育到逐漸成熟，TDT消失，相繼出現(xiàn)CD10、CD22、CD45RA、CD20表達，同時出現(xiàn)膜免疫球蛋白；淋巴細胞發(fā)育到終末漿細胞，除表達漿細胞標記抗體外，還表達胞漿免疫球蛋白。CD19、CD45RA、CD79a。第十三頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一急性非淋巴細胞白血病(AML)根據(jù)FAB分型：MO：有低的SSC和FSC。在CD45－SSC圖上出現(xiàn)在淋巴細胞位置上，至少表達一個特異性標志如CD13或CD116，但MPO比CD13與CD33更靈敏。一般淋系標志陰性，但也可表達CD7或CD4。一般HLA－DR、CD34陽性，有些研究表明CD7與CD34共表達在AML且預后差。

M1：流式上M1與M0相似不易區(qū)分，M1一般CD13＋、CD33＋、HLA－DR－，但CD34表達少于M0，可能表達部分CD15。

M2：M0與M1的主要區(qū)別是成熟度增加，blasts減少，CD15較M1較顯著，CD34弱于M1，CD13有時表達強于CD33，多數(shù)病例HLA－DR（-）。CD45－SSC圖顯示從髓系blast區(qū)至成熟骨髓細胞區(qū)的連續(xù)細胞帶，CD45－SSC圖有助于確定blasts比例。第十四頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一M3、高顆粒性，具較高的SSC，但CD45較成熟C少，多數(shù)情況HLA－DR（-）或表達減少，CD34少于M2、一般CD13弱（＋），可有CD2表達。

M4與M5：兩型表型相似，但M4較M5表達更多的CD34（＋），較之M0、M1，M4與M5有更大的FSS和SSC，CD45－SSC圖上，成熟C出現(xiàn)在單核區(qū)，重要的表型為CD13、CD33、HLA－DR、CD14和CD15，CD33可表達強于CD13，CD33（＋）、CD13（－）、CD34（－）很可能為M5，但只出現(xiàn)在少數(shù)病人中，部分M5可見CD56（＋）。

M6：M6較少見且特征不明顯，一般HLA－DR，CD34、CD13、CD33陽性，CD45－SSC圖顯示主要為紅系成份。

M7：巨核細胞白血病，在AML中少于1％。一般CD61（GpⅢa）和/或CD41（GpⅡb-Ⅲa）陽性，而注意由于血小板粘附在blasts上造成的假陽性，可以用流式雙色分析在EDTA存在下，測GpⅡb/Ⅲa與CD34以減少激活血小板的粘附。

第十五頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一慢性淋巴細胞白血?。–LL）B系抗原為CD19、CD20、CD43、CD79a與CD5共表達CD23、CD13、CD15表達第十六頁，共十七頁，編輯于2023年，星期一慢性髓細胞性白血病（CML）由于慢性期顯著的細胞分化，在CD45－SSC圖上除了髓系細胞占主導外，只顯示一個正常骨髓像，CML可確診，CML起病與發(fā)展相對緩慢，慢性期的持續(xù)1年左右最終發(fā)展為加速期和急