動物實驗設(shè)計及影響因素演示文稿

動物實驗設(shè)計及影響因素演示文稿本文檔共47頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期六\0點2分優(yōu)選動物實驗設(shè)計及影響因素本文檔共47頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期六\0點2分特點相似的實驗動物的原則實驗動物越高等，進化程度越高，其功能、代謝、結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，反應(yīng)就越接近人類、猴、猩猩、長臂猿等靈長類動物是最近似于人類的理想動物。有些動物的進化程度并不一定很高，但是某些組織器官的結(jié)構(gòu)或疾病特點與人類相似。豬的皮膚組織學(xué)結(jié)構(gòu)與人相似，選用小豬作燒傷實驗研究是較理想的實驗動物。本文檔共47頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期六\0點2分遺傳背景癥狀顯著的動物的原則實驗研究為了得到有規(guī)律且正確可靠的實驗結(jié)果，應(yīng)選用經(jīng)微生物學(xué)、營養(yǎng)學(xué)環(huán)境衛(wèi)生學(xué)的控制而培育出的標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物。近交系動物，這樣可以排除遺傳上不均質(zhì)、個體反應(yīng)不一致對實驗結(jié)果的影響。突變品系動物具有與人類相似的疾病譜或缺損，是研究人類相關(guān)疾病譜的重要模型。本文檔共47頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期六\0點2分符合實驗?zāi)康囊蟮膭游锏脑瓌t實驗動物具有獨特的解剖生理特點，只是選用解剖生理特點符合實驗?zāi)康牡囊蟮膶嶒瀯游镒鰧嶒?，才能減少操作難度，確保實驗的成功。家犬的甲狀腺位于甲狀腺的表面，位置比較固定，大多數(shù)在兩個甲狀腺相對應(yīng)的兩斷上。兔的甲狀腺分布得比較分散，位置不固定，除甲狀腺周圍外，喲的甚至主動脈弓附近，因此做甲狀腺摘除實驗，應(yīng)選用家犬而不能選用家兔。大鼠沒有膽囊，不能做膽囊功能的研究，卻適合膽管插管，從而可收集膽汁，進行消化功能等方面的研究。

本文檔共47頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期六\0點2分選擇對實驗因素最敏感的動物原則不同種系實驗動物對同一因素的反應(yīng)往往會出現(xiàn)特殊反應(yīng)，實驗研究中應(yīng)選用那些對實驗因素最敏感的動物作為實驗對象。不同種類實驗動物有著各自的生物學(xué)特征，與人類相比其功能代謝、形態(tài)結(jié)構(gòu)、疾病的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸點、對施加因素的反應(yīng)等方面存在著差異。

同一種實驗動物，去不同品種、品系的特性往往也存在很大差別。本文檔共47頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期六\0點2分藥物毒性實驗的動物選擇

確保病人用藥安全，新藥或者已用藥物但改變了配伍、劑量或用法時，在臨床試用前必須進行較系統(tǒng)的毒性試驗，以了解藥物的毒性和不良反應(yīng)、中毒和致死劑量等特點，為臨床使劑量和注意事項提供參考和科學(xué)依據(jù)。做毒性試驗時，選擇何種實驗動物取決于該動物對藥物的反應(yīng)以及藥物在該種動物體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄與人類異同的程度。

不同種屬動物對藥物作用的反應(yīng)有質(zhì)與量的區(qū)別。演技不同藥物時應(yīng)選擇其相應(yīng)的動物為對象。本文檔共47頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期六\0點2分注意事項

動物的進化程度越高，對藥物毒性的敏感性越好。選用未成年的實驗動物較為合適，因在動物迅速生長時期，可以發(fā)現(xiàn)藥物對生長及各器官，包括對性器官成熟的影響。選擇做毒習(xí)慣內(nèi)實驗時，動物應(yīng)雌雄各半，因它們對毒性物質(zhì)反應(yīng)有差異，而且動物數(shù)量不宜太少，要滿足統(tǒng)計學(xué)處理的要求。實驗要求至少采用兩種不同種屬的動物。本文檔共47頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期六\0點2分消化、呼吸系統(tǒng)實驗的動物的選擇

草食動物的消化系統(tǒng)與人的截然不同，不能選擇此類動物作為研究消化系統(tǒng)疾病的模型。犬有發(fā)達(dá)的消化系統(tǒng)和與人類極為相似的消化器官，它不僅可用來做消化系統(tǒng)的慢性實驗，也可以進行齒、部分小腸移植等研究。猴的其噶黏膜上腺體數(shù)量較多，且至三級支氣管中部仍有存在，選用該動物做慢性支氣管炎研究和祛痰平喘藥物療效實驗研究很合適。

本文檔共47頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期六\0點2分泌尿、生殖系統(tǒng)實驗的動物選擇糖尿病實驗：選擇犬、大鼠、兔等實驗動物可用人工摘除胰腺的方法來復(fù)制糖尿病。猴類的自發(fā)性糖尿病的臨床特征與人類的十分相似，是進一步研究異常糖類代謝的有價值的動物。BBWstar大鼠與人的糖尿病極為相似，研究糖尿病廣泛使用它。本文檔共47頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期六\0點2分生殖生理實驗雌激素能中止大鼠和小鼠妊娠，卻不能中止人早期妊娠，因而具有雌激素活性的化合物用于動物實驗觀察中止妊娠作用時，就不要選擇大鼠和小鼠。兔由于是刺激性排卵的動物，利用這一特點，可進行生殖生理和避孕藥的研究。猴的月經(jīng)周期為28d生殖生理與人非常接近，是人類避孕藥物研究極為理性的實驗動物。本文檔共47頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期六\0點2分心血管系統(tǒng)實驗的動物選擇

微循環(huán)實驗：犬的血液環(huán)系統(tǒng)退發(fā)達(dá)，適合做這方面的實驗研究，如失血性體克、實驗性彌散性血管內(nèi)凝血等。猴、豬有與人相似的循環(huán)系統(tǒng)，且較發(fā)達(dá)，血壓穩(wěn)定，血管壁較堅韌，對藥物有與人一致的靈敏反應(yīng)，便于手術(shù)操作和適于分析藥物對循環(huán)系統(tǒng)的作用機制、而且貓還有較強的心搏力，能描繪完好的血壓曲線，更適合藥物對循環(huán)系統(tǒng)作用機制分析。內(nèi)臟微循環(huán)實驗觀察，常選用青蛙的腸系膜、大網(wǎng)膜和腸壁。本文檔共47頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期六\0點2分心血管疾病實驗心血管系統(tǒng)的疾病，在人類普遍發(fā)生，給人類帶來嚴(yán)重后果。1、動脈粥樣硬化癥：小型豬可自發(fā)產(chǎn)生動脈粥樣硬化，也可用高脂飼料誘發(fā)并加速動脈樣硬化的形成。鴿具有與人類相似的自發(fā)性粥樣硬化癥，且在短期喂飼膽固醇后，可在主動脈的可預(yù)測區(qū)域發(fā)生病變，可用來研究與病變發(fā)生有關(guān)的早期代謝變化，故鴿是研究該病的重要動物模型。

本文檔共47頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期六\0點2分高血壓對于高血壓的研究，常選用的動物是和犬。根據(jù)實驗?zāi)康牡牟煌ǔ＿x擇以刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)反射性引起實驗性高血壓，或注射加壓物質(zhì)以及分次手術(shù)結(jié)扎腎動脈來誘發(fā)腎源性高血壓。培育了各種高血壓大模型，如遺傳性高血壓犬（CH）、自發(fā)性高血壓犬（SHR）、易卒中自發(fā)性高血壓犬大（SHRSP）、自發(fā)性血栓形成犬（STR）、米蘭種高血壓犬（MHS）、里昂種高血壓犬（LH）。本文檔共47頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期六\0點2分心肌缺血試驗豬、貓、兔和犬都可做冠狀動阻塞試驗。由于的心臟解剖特點與人的相似：占體重的比例較大，冠狀血管容易操作，心臟抗心律失常能力較強，而且犬容易訓(xùn)服，因此是心肌缺血試驗良好的動物模型。豬心臟的側(cè)支循環(huán)和傳導(dǎo)系統(tǒng)血液供應(yīng)類似于人的心臟，易于形成心肌梗死，室顫發(fā)生率高。貓耐受心肌梗死能力強。本文檔共47頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期六\0點2分神經(jīng)系統(tǒng)實驗的動物選擇神經(jīng)系統(tǒng)實驗的動物選擇，應(yīng)根據(jù)動物神經(jīng)系統(tǒng)方面的特性而進行。C3H/HeN小鼠對脊髓灰質(zhì)炎病毒LanSing株敏感。C57BL/KalWN小鼠有先天性腦積水。大鼠宜作垂體切除術(shù)。腦梗死所呈現(xiàn)的卒中、術(shù)后腦缺血以及腦血流量時。結(jié)扎沙鼠的一側(cè)頸總動脈，數(shù)小時后，就有20%—65%的沙鼠出現(xiàn)腦梗死。本文檔共47頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期六\0點2分實驗設(shè)計的核心實驗動物是指根據(jù)實驗的需要,有目的、有計劃地進行人工飼養(yǎng)、繁殖及科學(xué)培育而成的動物?？蒲泄ぷ髡咴谶M行醫(yī)藥方面的科學(xué)研究之前，需要制定完善的統(tǒng)計研究設(shè)計方案。實驗設(shè)計的要素和原則。本文檔共47頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期六\0點2分實驗設(shè)計的三要素實驗對象：實驗因素：實驗效應(yīng)：本文檔共47頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期六\0點2分實驗對象實驗所用的材料即為實驗對象。實驗對象選擇的合適與否直接關(guān)系到實驗實施的難度，以及別人對實驗新穎性和創(chuàng)新性的評價。完整的實驗設(shè)計中所需實驗材料的總數(shù)稱為樣本含量。最好根據(jù)特定的設(shè)計類型估計出較合適的樣本含量。樣本過大或過小都有弊端。

本文檔共47頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期六\0點2分實驗因素所有影響實驗結(jié)果的條件都稱為影響因素，實驗研究的目的不同，對實驗的要求也不同。影響因素有客觀與主觀，主要與次要因素之分。通過研究設(shè)計進行有計劃的安排，從而能夠科學(xué)地考察其作用大小的因素稱為實驗因素；對評價實驗因素作用大小有一定干擾性且研究者并不想考察的因素稱為區(qū)組因素或稱重要的非實驗因素；其他未加控制的許多因素的綜合作用統(tǒng)稱為實驗誤差。初步篩選實驗因素并確定取哪些水平較合適，以免實驗設(shè)計過于復(fù)雜，實驗難以完成。

本文檔共47頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期六\0點2分實驗效應(yīng)實驗因素取不同水平時在實驗單位上所產(chǎn)生的反應(yīng)稱為實驗效應(yīng)。實驗效應(yīng)是反映實驗因素作用強弱的標(biāo)志，它必須通過具體的指標(biāo)來體現(xiàn)。要結(jié)合專業(yè)知識，盡可能多地選用客觀性強的指標(biāo)，應(yīng)盡可能多選用特異性強、靈敏度高、準(zhǔn)確可靠的客觀指標(biāo)。對一些半客觀或主觀指標(biāo)，一定要事先規(guī)定讀取數(shù)值的嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)，只有這樣才能準(zhǔn)確地分析自己的實驗結(jié)果，從而也大大提高了自己實驗結(jié)果的可信度。

本文檔共47頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期六\0點2分實驗設(shè)計的六原則隨機原則：對照原則：重復(fù)原則：平衡原則：彈性原則：最經(jīng)濟原則：本文檔共47頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期六\0點2分隨機、對照原則即運用隨機數(shù)字表實現(xiàn)隨機化；運用計算機產(chǎn)生偽隨機數(shù)實現(xiàn)隨機化。盡量運用統(tǒng)計學(xué)知識來設(shè)計自己的實驗，減少外在因素和人為因素的干擾。對照組的設(shè)立——只有通過對照的設(shè)立我們才能清楚地看出實驗因素在當(dāng)中所起的作用。當(dāng)處理本身夾雜著重要的非處理因素時，還需設(shè)立僅含該非處理因素的實驗組為實驗對照組；這種對照形式應(yīng)慎用，其對比的結(jié)果僅供參考，不能作為推理的依據(jù)；多種對照形式同時并存。

本文檔共47頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期六\0點2分重復(fù)、平衡原則所謂重復(fù)原則，就是在相同實驗條件下必須做多次獨立重復(fù)實驗。一般認(rèn)為重復(fù)5次以上的實驗才具有較高的可信度。實驗設(shè)計方案的均衡性好壞，關(guān)系到實驗研究的成敗。發(fā)揮具有各種知識結(jié)構(gòu)和背景的人的作用，群策群力，方可有效地提高實驗設(shè)計方案的均衡性。在實驗設(shè)計的過程中要注意時間上的分配，才不會出現(xiàn)一段時間特別忙而一段時間特別閑的情況。本文檔共47頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期六\0點2分彈性、最經(jīng)濟原則所謂空缺：指的是在時間分配圖上留有空缺。適當(dāng)?shù)目杖笔欠浅１匾模挥羞@樣才能富有彈性的實施實驗計劃，并不斷地調(diào)整好自己的實驗進度。不論什么實驗，都有它的最優(yōu)選擇方案，這包括在資金的使用上，也包括人力時間的損耗上，必要時可以預(yù)測一下自己實驗的產(chǎn)出和投入的比值，這個比值越大越好，當(dāng)然是以你所擁有的實驗條件作基礎(chǔ)的。

本文檔共47頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期六\0點2分動物實驗意外事故的處理

在實驗中由于手術(shù)時的操作不慎、動物生理狀態(tài)不佳或一些無法預(yù)測的因素造成動物窒息，大出血等事故。確定造成意外情況原因，再采取措施，防止情況進一步惡化。本文檔共47頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期六\0點2分麻醉過量和窒息

麻醉是動物手術(shù)中必不可少的過程。由于動物的生理狀態(tài)不同，有時會產(chǎn)生麻醉過量現(xiàn)象，造成呼吸或循環(huán)系統(tǒng)異常情況，此時應(yīng)根據(jù)過量的程度，采用不同的方式處理。如動物呼吸極慢而不規(guī)則，但血壓和心搏仍照常時，可施行人工呼吸，并給蘇醒劑。

本文檔共47頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期六\0點2分麻醉過量和窒息的處理動物呼吸停止，血壓下降，但仍有心搏時，應(yīng)迅速施行人工呼吸，同時注射50%的溫?zé)崞咸烟侨芤骸?:10，000腎上腺素及蘇醒劑。動物呼吸停止，而且心搏極弱或剛停止時，應(yīng)用5%CO2和95%O2的混合氣體人工呼吸，進行心臟按摩，注射溫?zé)岬纳睇}水和心臟按摩。心搏恢復(fù)后，注射50%葡萄糖及蘇醒劑。

本文檔共47頁；當(dāng)前第28頁；編輯于星期六\0點2分常用蘇醒劑的種類咖啡因（1mg?(kg體重)-1）可拉明（2～5mg?(kg體重)-1）山梗菜（0.1～1mg?(kg體重)-1）

本文檔共47頁；當(dāng)前第29頁；編輯于星期六\0點2分大出血在生理實驗中，由于操作失誤或無法預(yù)見的原因，有時會出現(xiàn)大出血。首先不用慌張，盡快查明出血原因，用棉球吸去血跡，觀察血的來源。一般大出血由兩種情況造成：一是大血管被剪破、二是滲透性出血。本文檔共47頁；當(dāng)前第30頁；編輯于星期六\0點2分大出血的基本處理方法大血管被剪破：找到出血口后，立即用止血鉗鉗住出血口的兩側(cè)。出血口不是很大，鉗住一段時間后，血液會凝固，此時放開止血鉗后不再會出血；出血口較大，則用止血鉗鉗住后，再需用線將出血口兩側(cè)結(jié)扎，以防進一步出血。出血量非常大，來不及用止血鉗止血，也可用手指夾住出血口，再用止血鉗止血。本文檔共47頁；當(dāng)前第31頁；編輯于星期六\0點2分滲透性出血滲透性出血：滲透性出血是由一些小血管造成的，但很多小血管同時出血，造成的總體出血效應(yīng)還是相當(dāng)嚴(yán)重的。確定出血部位，然后用溫生理鹽水浸過的棉花壓在或明膠海棉覆蓋在出血部位上止血。用上面提到的燒烙止血法燒灼出血部位，此方法雖然對組織有一定傷害，但卻是對付滲透性出血一種較為有效的方法。本文檔共47頁；當(dāng)前第32頁；編輯于星期六\0點2分實驗動物的給藥方法實驗動物的給藥方法有多種：根據(jù)實驗要求及實驗?zāi)康倪x擇適當(dāng)?shù)慕o藥方法。給藥方法可行程度決定及影響實驗的結(jié)果的真實性。給藥劑量可決定動物的麻醉程度及動物實驗的可操作性。本文檔共47頁；當(dāng)前第33頁；編輯于星期六\0點2分經(jīng)口投藥法(1)口服法：口服法是將能溶于水并且在水溶液中較穩(wěn)定的藥物放入動物飲水中，不溶于水的藥物混于動物飼料內(nèi)，由動物自行攝入。該方法技術(shù)簡單，給藥時動物接近自然狀態(tài)，不會引起動物應(yīng)激反應(yīng)，適用于多數(shù)動物慢性藥物干預(yù)實驗，如抗高血壓藥物的藥效、藥物毒性測試等。其缺點是動物飲水和進食過程中，總有部分藥物損失，藥物攝入量計算不準(zhǔn)確，而且由于動物本身狀態(tài)、飲水量和攝食不同，藥物攝入量不易保證，影響藥物作用分析的準(zhǔn)確性。本文檔共47頁；當(dāng)前第34頁；編輯于星期六\0點2分灌服法灌服法是將動物適當(dāng)固定，強迫動物攝入藥物。這種方法能準(zhǔn)確把握給藥時間和劑量，及時觀察動物的反應(yīng)，適合于急性和慢性動物實驗。但經(jīng)常強制性操作易引起動物不良生理反應(yīng)，甚至操作不當(dāng)引起動物死亡。故應(yīng)熟練掌握該項技術(shù)。強制性給藥方法主要有兩種：本文檔共47頁；當(dāng)前第35頁；編輯于星期六\0點2分口服法固體藥物口服：一人操作時用左手從背部抓住動物頭部，同時以拇、食指壓迫動物口角部位使其張口，右手用鑷子夾住藥片放于動物舌根部位，然后讓動物閉口吞咽下藥物。液體藥物灌服：不同動物有不同的給藥方法：小白鼠與大白鼠：左手捏持小白鼠頭、頸、背部皮膚，或握住大白鼠以固定動物，使動物腹部朝向術(shù)者，右手將連接注射器的硬質(zhì)胃管由口角處插入口腔，用胃管將動物頭部稍向背側(cè)壓迫，使口腔與食管成一直線，將胃管沿上顎壁輕輕插入食道，小白鼠一般用3cm，大白鼠一般用5cm的胃管。本文檔共47頁；當(dāng)前第36頁；編輯于星期六\0點2分鼠的口服注意事項插管時應(yīng)注意動物反應(yīng)，如插入順利，動物安靜，呼吸正常，可注入藥物；如動物劇烈掙扎或插入有阻力，應(yīng)拔出胃管重插，如將藥物灌入氣管，可致動物立即死亡。本文檔共47頁；當(dāng)前第37頁；編輯于星期六\0點2分家兔灌服法用兔固定箱或由兩人操作：助手取坐位，用兩腿夾住動物腰腹部，左手抓免雙耳，右手握持前肢，以固定動物；術(shù)者將木制開口器橫插入兔口內(nèi)并壓住舌頭，將胃管經(jīng)開口器中央小孔沿上腭壁插入食道約15cm，將胃管外口置一杯水中，看是否有氣泡冒出，檢測是否插入氣管，確定胃管不在氣管后，即可注入藥物。本文檔共47頁；當(dāng)前第38頁；編輯于星期六\0點2分家兔灌服法示意圖本文檔共47頁；當(dāng)前第39頁；編輯于星期六\0點2分注射給藥

淋巴囊注射：適用于青蛙與蟾蜍。青蛙與蟾蜍皮下有多個淋巴囊，注射藥物易于吸收，適合于該類動物全身給藥。常用注射部位為胸、腹和股淋巴囊。防止注入藥物自針眼處漏出，胸淋巴囊注射時應(yīng)將針頭刺入口腔，由口腔組織穿刺到胸部皮下，注入藥物。股淋巴囊注射時應(yīng)由小腿刺入，經(jīng)膝關(guān)節(jié)穿刺到股部皮下，注射藥液量一般為0.25~0.5ml。本文檔共47頁；當(dāng)前第40頁；編輯于星期六\0點2分淋巴囊注射示意圖本文檔共47頁；當(dāng)前第41頁；編輯于星期六\0點2分皮下注射

皮下注射是將藥物注射于皮膚與肌肉之間，適合于所有哺乳動物。實驗動物皮下注射一般應(yīng)由兩人操作，熟練者也可一人完成。

由助手將動物固定，術(shù)者用左手捏起皮膚，形成皮膚皺褶，右手持注射器刺入皺褶皮下，將針頭輕輕左右擺動，如擺動容易，表示確已刺入皮下，再輕輕抽吸注射器，確定沒有刺入血管后，將藥物注入。拔出針頭后應(yīng)輕輕按壓針刺部位，以防藥液漏出，并可促進藥物吸收。鴿、禽類常