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ABO血型和亞型檢查北京佰利申公司市場部張松2009-9-24本文檔共40頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分討論內(nèi)容ABO血型及遺傳血型試劑的現(xiàn)狀和發(fā)展ABO血型檢查和亞型診斷和案例ABO亞型輸血原則本文檔共40頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分發(fā)現(xiàn)血型1900年奧地利醫(yī)生Landsteiner發(fā)現(xiàn)了ABO血型系統(tǒng),成為血型血清學(xué)的奠基人。1932年獲諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。被國際醫(yī)學(xué)界稱為“血型之父”血型血清學(xué):應(yīng)用血清學(xué)的方法研究血液中抗原、抗體及其反應(yīng)的科學(xué)。本文檔共40頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分血型與遺傳基因是遺傳的基本單位。一個個體所帶的基因總和,稱為基因型,血型抗原通常是共顯性性狀。血型血清學(xué)方法直接檢測出的基因產(chǎn)物,稱為表型。本文檔共40頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分ABO血型的遺傳共由3個等位基因IA,IB和i控制的,通常為共顯性。
血型的遺傳是十分穩(wěn)定的,但也有一些特殊的情況人類ABO系統(tǒng)血型表血型表型基因型抗原(在細(xì)胞膜上)抗體基因和產(chǎn)物AIAIA,IAiAβ(抗B)IA(9q34)N-乙酰半乳糖轉(zhuǎn)移酶BIBIB,IBiBα(抗A)IB(9q34)半乳糖轉(zhuǎn)移酶ABIAIBAB-Oii-αβ(抗A抗B)i(9q34)無相應(yīng)產(chǎn)物本文檔共40頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分血型系統(tǒng)是指一系列等位基因產(chǎn)生的,可使用血清學(xué)方法或免疫學(xué)檢出化學(xué)上有關(guān)的抗原。本文檔共40頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分血型在醫(yī)學(xué)、法醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用器官移植輸血治療疾病診斷(HDN等)疾病相關(guān)親子鑒定個體識別本文檔共40頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分8ABO抗體性質(zhì):多數(shù)為IgM,或有少量IgG,IgA天然抗體:沒有明顯抗原刺激而產(chǎn)生的抗體。免疫抗體:通過輸血、妊娠等免疫刺激獲得的抗體A型人——抗BB型人——抗A 多為IgMO型人——除具有抗A,抗B外,還有抗AB,為IgG,IgM或IgA混合物,IgG型抗A或抗B可通過胎盤。B型人抗A效價高于A型人抗B效價O型人抗A,抗B或抗AB效價高于B型或A型人相應(yīng)抗A或抗B。完全缺乏抗A、抗B者,﹤0.01%。本文檔共40頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分配血步入基因時代為了預(yù)防輸血不良反應(yīng)和挽救生命,歐州學(xué)者們正在呼吁用DNA檢測替代血清學(xué)方法來鑒定血型?;蚍中湍芨鼫?zhǔn)確地完成供受者間的血型配型,從而防止同種免疫和其它免疫相關(guān)的輸血反應(yīng)。100多年來血清學(xué)方法面臨挑戰(zhàn)。本文檔共40頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分血型試劑的現(xiàn)狀與展望抗A抗B血型定型試劑:《中國生物制品規(guī)程》2000版:能檢測A2、A2B2010版藥典(正在修訂)不能低于中檢所的標(biāo)準(zhǔn)品。ISBT對定型試劑要求,既不能“漏檢”A3、B3,理想的是能識別Ax、Bx,血凝效價至少在1:128。本文檔共40頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分我國抗A抗B血型試劑標(biāo)準(zhǔn)特異性:抗-A,只凝集含A抗原紅細(xì)胞,包括A1、A2、A1B、A2B;可不凝集Ax、Bx細(xì)胞。親和力:抗-A對A1細(xì)胞開始凝集的時間為15秒,對A2為30秒,對A2B為45秒;抗-B對B紅細(xì)胞為15秒。效價:抗-A11:128,抗-A2B1:16、抗-B1:128本文檔共40頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分正確檢查方法和高質(zhì)量試劑缺一不可從理論到實(shí)際可以說明,不可能絕對避免亞型紅細(xì)胞“漏檢現(xiàn)象”。應(yīng)用高質(zhì)量的血型試劑,應(yīng)達(dá)到ISBT標(biāo)準(zhǔn)。正確的血型檢定方法:輸血規(guī)范要求,即”供受”必須做正反定型,才能正確判斷血型。確保安全輸血。本文檔共40頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分13ABO亞型A亞型1911年,vonDungern發(fā)現(xiàn)A型有2種,A1,A2
A2與A1有量的差別,A2抗原位點(diǎn)數(shù)比A1少得多,糖基轉(zhuǎn)移酶活性也低A2與A1也有質(zhì)的差別,1-8%A2有抗A1A1細(xì)胞上有A及A1抗原A2細(xì)胞上只有A抗原A1,A2亞型實(shí)際上是由H抗原結(jié)構(gòu)造成的,H1,H2是非分支直鏈,而H3,H4為分支鏈,A1酶可將H1-4轉(zhuǎn)化為Aa-d,而A2酶只能轉(zhuǎn)化H1,H2為Aa,Ab,抗A1可能是針對Ac,Ad決定簇的。本文檔共40頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分與抗A反應(yīng)的相對凝集力
以及每個紅細(xì)胞上A位點(diǎn)的密度表現(xiàn)型凝集力抗原位點(diǎn)密度(每個紅細(xì)胞上的A位點(diǎn)X105)A1A2A3AxAendAm,AyAel10096±263±1033±1010±50010.5(7.95~14.56)2.21(1.29~3.53)0.35(0.07~1.0)0.048(0.014~0.10)0.035(0.011~0.044)0.012(0.001~0.019)0.007(0.001~0.014)本文檔共40頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分亞型頻率分布獻(xiàn)血者檢測確定其它亞型66/440617份(除A214例,A2B35例)A亞型22份AxB11例,AelB3例,Ax3例,Ael2例,Amh2例,A31例B亞型41份Bx11例,B39例,ABx7例,AB35例,Bel3例,Bm2例,ABel1例,ABend1例,ABm1例,Bend1例。CisAB2例,B(A)1例B亞型多于A亞型。最常見亞型為AxB和Bx。有不規(guī)則抗體54例引自中國輸血雜志2006,19(1):25本文檔共40頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分血源“漏檢”亞型A3,B3漏檢:微孔板法,正反定型相符,忽略混合視野。AxB漏檢:誤定為B型,醫(yī)院配血次側(cè)不合退回。Bx漏檢:誤定為O型,輸注給O型,出現(xiàn)明顯輸血反應(yīng)。A亞型的不規(guī)則抗體通常很弱,屬冷抗體,配血很容易漏檢。亞型受血者漏檢,又未查出抗體,很容易導(dǎo)致輸血反應(yīng)。本文檔共40頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分血型正定型試驗(yàn)型物質(zhì)抗原數(shù)/細(xì)胞(×103)血清中抗-A1抗A、抗AB、抗H、抗A1A14+4+W+4+A,H810-1170無A24+4+3+0A,H240-2904%A32+mf2+mf4+0A,H35很少Ax0/w+1-2+4+0H4幾乎全部Am0/±0/±4+0A,H0.2-1.9無AendWkmfWkmf4+0H200(10%凝集)無Ael004+0H0.1-1.4經(jīng)常A亞型血清學(xué)反應(yīng)特征本文檔共40頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分主要A亞型:A1、A2亞型抗原數(shù)和分泌物質(zhì)量區(qū)別。與抗A試劑血清均可直接凝集。與抗A1試劑凝集:為A1、A1B紅細(xì)胞,占80%。與抗A1試劑不凝集:為A2、A2B紅細(xì)胞,占20%。A2、A2B紅細(xì)胞:10%,25%有抗A1抗體。A2、A2B紅細(xì)胞:血樣中不含抗A1抗體,則不必用抗A1確定其亞型。本文檔共40頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分亞型有意外抗體2007某院輸血科、男、輸血前檢查,不同試劑出現(xiàn)不同結(jié)果。長春博德標(biāo)清:-A(-)、-B(4+)。北京血站鑒定:A亞B。本文檔共40頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分輔助檢查和吸收放散試驗(yàn)進(jìn)口試劑:-A(w+)、-B(4+)、-A1(-)、-H(2+w)、Ac(3+)、Bc(-)、Oc(-)、自身(W+)國產(chǎn)長春:-A(-)、-B(4+)吸收試驗(yàn):抗-A(進(jìn)口)+3洗病人紅細(xì)胞各6滴混勻,放4℃冰箱1小時(混勻/15分鐘)。放散試驗(yàn):6洗吸收后紅細(xì)胞56℃/10分鐘,放散液+Ac離心→3+(效價1:8)。診斷:A亞B。建議輸B型洗滌紅細(xì)胞或O型洗滌紅細(xì)胞比較安全。本文檔共40頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分B亞型案例2009年02月25日、某醫(yī)院正常體檢血型檢測B孔雙群,經(jīng)正反定進(jìn)一步確證,報告B型。本文檔共40頁;當(dāng)前第21頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分亞型有意外抗體2004年,某院、女、子宮肌瘤、術(shù)前輸血科血型檢查。戴安娜卡:正定:AB、反定:B,正反不符。長春博德標(biāo)清:正定:B、反定:B,正反相符。對卡的血型結(jié)果提出疑問?經(jīng)北京血站鑒定:A亞B、血清中有抗A1抗體。報告發(fā)回數(shù)天后,用戶回電質(zhì)疑:其夫是B型,能生出O型孩子嗎?答案:?本文檔共40頁;當(dāng)前第22頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分亞型有意外抗體2008某院、男、輸血前檢查,漏檢弱A,會誤判B型。北京血站鑒定:B(A)型、血清中有抗A1抗體。并做基因檢查(其基因型應(yīng)為B(A)/O型)。家系調(diào)查:待查。本文檔共40頁;當(dāng)前第23頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分亞型有意外抗體本文檔共40頁;當(dāng)前第24頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分順式遺傳和B(A)順式AB指從父母的一方同時得到A和B基因,在一條染色體上,而另一條染色體上是從父母中另一方來的O基因。B(A)血型是一種罕見的ABO亞型,其A和B抗原的傳遞呈順式遺傳方式,同cisAB血型有相似之處。cisAB和B(A)表型的抗原含量各有偏重(其基因型應(yīng)為B(A)/O型)。注意的是:含有不規(guī)則抗體的cisAB型、B(A)型,不宜作為普通供血者。若為受血者,除輸同型的cisAB型、B(A)型外,還可輸O型洗滌紅細(xì)胞及AB型血漿。本文檔共40頁;當(dāng)前第25頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分正反定型不一致,則需要附加試劑進(jìn)一步鑒定正定型中增加抗-A1、抗-H、抗-AB???AB用來確認(rèn)弱A、弱B抗原??笰1用于鑒定A亞型???H用于鑒定亞型及孟買型。反定型試驗(yàn)中增加O細(xì)胞,用于鑒定是否存在ABO系統(tǒng)以外的同種抗體對定型的影響。吸收試驗(yàn)、放散試驗(yàn)證實(shí)抗原存在。本文檔共40頁;當(dāng)前第26頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分ABO以外的同種抗體對定型的影響影響反定型的血型抗體,抗-M抗體多見試管法用O細(xì)胞與病人血漿離心看結(jié)果有凝集,即ABO以外抗體本文檔共40頁;當(dāng)前第27頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分Am亞型及家系調(diào)查正定型:抗A(-)抗B(-)抗A1(-)抗AB(w+)反定型:Ac(-)Bc(3+)Oc(-)自身(-)血型物質(zhì)測定:A、H物質(zhì)吸收放散:證實(shí):A家系:其父A其母O,子代:2個Am2個A推斷其父血型基因是A/Am,其母血型基因是O/O本文檔共40頁;當(dāng)前第28頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分A3型特征:與抗-A試劑血清出現(xiàn)混合視野與抗-AB試劑血清出現(xiàn)混合視野與抗A1不凝集與抗-H反應(yīng)偶爾血清中有抗-A1抗體。分泌型有A和H物質(zhì)。本文檔共40頁;當(dāng)前第29頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分血站對亞型結(jié)果判斷血站對某些血型鑒定結(jié)果為:“暫定”或“初定”疑問:由于病人有過輸血或治療。某些疾病或治療影響抗體減弱或抗原生成、減弱。一般亞型可以用抗A1檢查,若陰性可以定為亞型。但新生兒本身抗原就弱,用抗A1確定亞型時,最好用正常的新生兒紅細(xì)胞用抗A1對照后,再確定結(jié)果(保證抗A1抗體的準(zhǔn)確性)。本文檔共40頁;當(dāng)前第30頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分Ax型特征:填空與抗-A試劑血清出現(xiàn)()與抗-AB試劑血清出現(xiàn)()與抗A1試劑血清()與抗-H試劑血清反應(yīng)()其血清中是否有抗-A1抗體()。分泌型有A()H()物質(zhì)。簡述吸收放散試驗(yàn)?如何輸血?本文檔共40頁;當(dāng)前第31頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分Oh(孟買)型特征:血型檢定:正定:-A(-)、-B(-)、-AB(-)、-H(-),反定:Ac+、Bc+、Oc+抗篩:Ⅰ(+)、Ⅱ(+)、Ⅲ(+)、自身(-)鑒別Oh型、O型?Oh型輸血?本文檔共40頁;當(dāng)前第32頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分總結(jié):亞型鑒定試驗(yàn)紅細(xì)胞與抗A及抗A1的凝集強(qiáng)度。紅細(xì)胞與抗AB的凝集強(qiáng)度。紅細(xì)胞上H抗原活性強(qiáng)弱血清中是否存在抗A1抗體。分泌型人唾液中A及H物質(zhì)的存在。吸收放散試驗(yàn)證明A抗原的存在。家系調(diào)查DNA本文檔共40頁;當(dāng)前第33頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分臨床輸血技術(shù)規(guī)范[2000]
184號衛(wèi)生部關(guān)于《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》第十五條
輸血科(血庫)要逐項(xiàng)核對輸血申請單、受血者和供血者血樣,復(fù)查受血者和供血者ABO血型(正、反定型)除新生兒外,ABO血型檢測必須做正反定型ABO正反定型不一致時重復(fù)試驗(yàn),排除技術(shù)原因詢問患者病史,包括診斷、輸血史等不可根據(jù)自己經(jīng)驗(yàn),隨意下結(jié)論本文檔共40頁;當(dāng)前第34頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》輸血前檢查“三保險”ABO血型:相合99.4%,RHD:相合99.8%抗體篩查:相合99.94%交叉配血:相合99.95%本文檔共40頁;當(dāng)前第35頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分疑難血型/配血,緊急輸血怎么辦?輸血前檢查(血型、抗篩、配血)與常規(guī)血液血檢查不同,如:Hb、WBC、PT可直接報結(jié)果。血型報告是綜合分析結(jié)果(診斷?)不是直接報告結(jié)果。如:正定(AB)、反定(O)→直接結(jié)果幾分鐘可報告。分析結(jié)果(到底是什么血型)?許多補(bǔ)充試驗(yàn)→幾小時→幾天→外送。輸血科與醫(yī)生溝通:血型報告O/A/B?相當(dāng)于臨床診斷休克/原因待查(?)疑似非典。政策依據(jù)《臨床技術(shù)規(guī)范》第10條,對稀有血型患者(疑難必稀有)輸血原則:自身輸血、同型輸血、配合型輸血。配合性輸血(沒有要求供受同型),不必為糾纏血型而耽誤輸血搶救。本文檔共40頁;當(dāng)前第36頁;編輯于星期一\3點(diǎn)3分疑難血型/配血,緊急輸血怎么辦?例:血液病、亞型(疑難)血型:A?O?→進(jìn)一步確定血型:吸收、放散、血型物質(zhì)、抗-H、家系、DNA
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