體液免疫球蛋白測定

免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）：是由漿細胞合成和分泌的一組具有抗體活性的蛋白質(zhì)。本文檔共40頁；當前第1頁；編輯于星期一\23點45分重鏈性質(zhì)，Ig分5類：IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε)輕鏈性質(zhì)，Ig分2型：κ、λIg占血漿蛋白總量：20%檢測意義：反應(yīng)機體的免疫功能、診斷疾病Ig含量：血清IgG、IgA、IgM：g/L、IgD、IgE：mg/L體液IgG、IgA、IgM：mg/L

本文檔共40頁；當前第2頁；編輯于星期一\23點45分本文檔共40頁；當前第3頁；編輯于星期一\23點45分本文檔共40頁；當前第4頁；編輯于星期一\23點45分第一節(jié)血清IgG、IgA、IgM測定本文檔共40頁；當前第5頁；編輯于星期一\23點45分IgG的特性和功能IgG于出生后3個月開始合成，是血清中含量最高的免疫球蛋白IgG多為單體，半衰期約為23天，占血清免疫球蛋白總量的75%～80%大多數(shù)抗感染抗體與自身抗體均為IgG類IgG是唯一能通過胎盤的抗體有四個亞型（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）本文檔共40頁；當前第6頁；編輯于星期一\23點45分本文檔共40頁；當前第7頁；編輯于星期一\23點45分本文檔共40頁；當前第8頁；編輯于星期一\23點45分IgM的特性和功能為五聚體，是分子量最大的Ig，稱巨球蛋白。IgM激活補體能力比IgG強天然血型抗體是IgMIgM是個體發(fā)育過程最早能產(chǎn)生的抗體，胚胎晚期已能合成，新生兒臍帶血中若IgM水平升高，表示該兒曾有宮內(nèi)感染IgM是抗原刺激后出現(xiàn)最早的抗體，故檢測IgM水平可用于傳染病的早期診斷有2個亞型（IgM1、IgM2）本文檔共40頁；當前第9頁；編輯于星期一\23點45分IgA的特性和功能分為血清型和分泌型兩種，血清型IgA主要由腸系膜淋巴組織中的漿細胞產(chǎn)生。而分泌型IgA（SIgA）是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等處的固有層中漿細胞產(chǎn)生。主要存在于初乳、唾液、淚液，以及呼吸道消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。分泌型IgA的合成和主要作用部位在黏膜分2個亞型：（IgA1、IgA2）本文檔共40頁；當前第10頁；編輯于星期一\23點45分本文檔共40頁；當前第11頁；編輯于星期一\23點45分一、血清IgG、IgA、IgM測定測定方法

單向環(huán)狀免疫擴散法免疫濁度法本文檔共40頁；當前第12頁；編輯于星期一\23點45分原理誤差主要原因評價

單向環(huán)狀免疫擴散法本文檔共40頁；當前第13頁；編輯于星期一\23點45分免疫濁度法直接透射比濁法速率散射比濁法注意點評價本文檔共40頁；當前第14頁；編輯于星期一\23點45分二、血清IgG、IgA、IgM測定的臨床意義年齡年齡與血中Ig含量有一定關(guān)系高Ig血癥:多克隆Ig增高（感染）；單克隆Ig增高（免疫增殖病）低Ig血癥:

先天性低Ig血癥（免疫缺陷?。?；獲得性低Ig血癥(蛋白丟失).本文檔共40頁；當前第15頁；編輯于星期一\23點45分第二節(jié)血清IgD、IgE測定

正常人血清中IgD含量很低，半衰期2.8天。膜結(jié)合型IgD(mIgD)構(gòu)成BCR，是B細胞分化發(fā)育成熟的標志。未成熟B細胞僅表達mIgM成熟B細胞表達mIgM和mIgD活化的B細胞或記憶B細胞mIgD逐漸消失

本文檔共40頁；當前第16頁；編輯于星期一\23點45分

IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴組織中的漿細胞分泌，為親細胞抗體，引起I型超敏反應(yīng)；與機體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)。本文檔共40頁；當前第17頁；編輯于星期一\23點45分一、血清IgD測定及臨床意義測定方法：

放射免疫分析法化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法

酶聯(lián)免疫吸附法本文檔共40頁；當前第18頁；編輯于星期一\23點45分IgD：生物功能不詳

增高：類風濕性關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)性疾病、敗血癥、新生兒溶血病

降低：意義不大本文檔共40頁；當前第19頁；編輯于星期一\23點45分二、血清IgE測定及臨床意義測定方法總IgE測定：放射免疫分析法

化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測定：免疫斑點法酶聯(lián)免疫吸附法本文檔共40頁；當前第20頁；編輯于星期一\23點45分IgE臨床意義：

增高：變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。

降低：意義不大本文檔共40頁；當前第21頁；編輯于星期一\23點45分第三節(jié)尿液及腦脊液Ig測定

正常人尿液中的Ig含量甚微，當機體的免疫功能異常或炎癥反應(yīng)引起腎臟疾病時，可導(dǎo)致腎小球濾過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損，從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。生理情況下，Ig根據(jù)其分子量大小，通過血腦屏障的難易度不同，IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時，腦脊液組分發(fā)生改變。本文檔共40頁；當前第22頁；編輯于星期一\23點45分本文檔共40頁；當前第23頁；編輯于星期一\23點45分分子屏障：腎小球濾過屏障本文檔共40頁；當前第24頁；編輯于星期一\23點45分電荷屏障：1上皮細胞2基底膜3內(nèi)皮細胞4被濾過物質(zhì)本文檔共40頁；當前第25頁；編輯于星期一\23點45分一、尿液Ig測定及臨床意義尿液：

腎小球濾膜受損程度：選擇性蛋白尿指數(shù)（selectiveproteinuriaindex,SPI）標本：晨尿或隨機尿SPI＝（尿IgG／血清IgG）／（尿TRF／血清TRF）SPI≤0.1選擇性微小病變型腎病SPI≥0.2非選擇性膜性腎病、膜增殖性腎炎、腎病綜合癥

本文檔共40頁；當前第26頁；編輯于星期一\23點45分增高有臨床意義：腎病、免疫增殖病可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類本文檔共40頁；當前第27頁；編輯于星期一\23點45分二、腦脊液Ig測定及臨床意義腦脊液：

血腦屏障受損程度：白蛋白商值白蛋白商值（ALBquotient，QALB）：QALB＝［（AlbCSF／AlbS）×1000］QALB〈9時，提示血腦屏障無明顯受損9－15輕度受損急慢性病毒感染、多發(fā)性硬化、神經(jīng)梅毒、帶狀皰疹神經(jīng)節(jié)炎、腦萎縮15－33中度受損急性神經(jīng)疏螺旋體病、條件致病性腦膜炎、吉蘭－巴雷綜合征33－100重度受損化膿性腦膜炎、單純皰疹性腦炎、結(jié)核性腦膜炎等細菌感染性疾病〉100完全破裂本文檔共40頁；當前第28頁；編輯于星期一\23點45分區(qū)分鞘內(nèi)免疫球蛋白來源：IgG生成指數(shù)和24hIgG合成率IgG生成指數(shù)＝QIgG／Qalb(QIgG=IgGCSF/IgGS,Qalb=AlbCSF/Albs)IgG合成率/24h=[(IgGCSF-IgGS/541)-(AlbCSF-AlbS/243)×(IgGS/AlbS)×0.43×500IgG生成指數(shù)和24hIgG合成升高時，表明CSF中的IgG主要有中樞神經(jīng)系統(tǒng)鞘內(nèi)合成，多見于多發(fā)性硬化癥本文檔共40頁；當前第29頁；編輯于星期一\23點45分第四節(jié)血清IgG亞類測定及臨床意義Ig亞類：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降測定方法：

單向免疫擴散法免疫比濁法（常用）放射免疫分析法酶聯(lián)免疫吸附法本文檔共40頁；當前第30頁；編輯于星期一\23點45分臨床意義：IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化IgG亞類缺陷可表現(xiàn)為：反復(fù)呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、鼻竇炎、支擴以及哮喘等IgA缺乏癥常伴有IgG2缺陷，某些病毒感染IgG1、IgG2、IgG3下降顯著IgG亞類異常增高主要見于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)本文檔共40頁；當前第31頁；編輯于星期一\23點45分第五節(jié)M蛋白測定及臨床意義

M蛋白：B淋巴細胞或漿細胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的異常單克隆免疫球蛋白臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等

本文檔共40頁；當前第32頁；編輯于星期一\23點45分M蛋白測定蛋白區(qū)帶電泳：經(jīng)典方法計算蛋白含量和百分比免疫比濁法：免疫球蛋白定量準確性高、快速免疫電泳：M蛋白分型免疫固定電泳：M蛋白分型及鑒定，分辨率高本文檔共40頁；當前第33頁；編輯于星期一\23點45分GAMκλIgG-κ型M蛋白Marker免疫固定電泳模式圖本文檔共40頁；當前第34頁；編輯于星期一\23點45分第六節(jié)輕鏈測定及臨床意義本周蛋白的檢測

樣本：尿液方法：免疫電泳、加熱沉淀（簡便易行）κ–Ig和λ-Ig定量檢測

樣本：尿液、血液方法：單向免疫擴散法、免疫比濁法（常用，準確、快速）應(yīng)用：M蛋白血癥的分型及鑒定本文檔共40頁；當前第35頁；編輯于星期一\23點45分第七節(jié)冷球蛋白的檢測冷球蛋白：

在低溫下發(fā)生沉淀，加溫后又復(fù)溶的免疫球蛋白在低溫時產(chǎn)生冷沉淀的機制尚不十分明確多數(shù)冷球蛋白為免疫復(fù)合物，其抗原可以是外源性的，也可以是內(nèi)源性的本文檔共40頁；當前第36頁；編輯于星期一\23點45分冷球蛋白的類型及臨床意義

I型：為單克隆冷球蛋白型，占25%～40%;最常見為IgG或IgM。多見于免疫增生性疾病

Ⅱ型：單克隆和多克隆混合型冷球蛋白，占15%～25%;最常見的組合為IgM－IgG。多見于自身免疫性疾病

Ш型：多克隆混合型冷球蛋白，約占50%;最常見的組合為IgM－IgG。多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病本文檔共40頁；當前第37頁；編輯于星期一\23點45分標本：在體溫條件下采集和保存靜脈血4ml，不加抗凝劑檢測：靜脈血水浴離心冰箱37℃37℃0-4℃1－2h沉淀24h內(nèi)，單克隆冷球蛋白數(shù)天后出現(xiàn)為混合型冷球蛋白驗證：將冷沉淀物置于pH4.0的0.1M乙酸鈉緩沖液加熱3－5d