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文檔簡介
組織學緒論武捷一、什么是組織學(一)概念組織學(histology)是研究機體(正常)微細結構及其相關功能的科學。(二)研究內(nèi)容細胞 組織器官系統(tǒng)細胞(cell):是構成機體形態(tài)結構與功能的基本單位。組織(tissue):細胞+細胞間質(zhì)(intercellular
materials
)形態(tài)和功能相同或相似的細胞群細胞外基質(zhì)(
extracellular
matrix,ECM
);由細胞產(chǎn)生;構成細胞生存的微環(huán)境人體具有4種基本組織:上皮組織結締組織肌組織神經(jīng)組織器官(organ):幾種組織按一定的方式有機地組合構成器官??涨恍云鞴賖ollow
organ
(中空性器官)實質(zhì)性器官parenchyma
organ系統(tǒng)(system):結構上連續(xù)或功能上相關的器官組成系統(tǒng)。循環(huán)系統(tǒng)circulatory
system免疫系統(tǒng)immune
system內(nèi)分泌系統(tǒng)endocrine
system神經(jīng)系統(tǒng)nervous
system消化系統(tǒng)digestive
system呼吸系統(tǒng)respiratory
system泌尿系統(tǒng)urinary
system生殖系統(tǒng)reproductive
system二、如何學習組織學(一)光學顯微鏡(LM)術(分辨率:0.2μm
)照明燈聚光器載物臺和切片夾推進器物鏡粗細準焦螺旋目鏡1.樣本制備1.1石蠟切片(Paraffin
section
)取材(
Specimen):新鮮,小固定(
Fixation):保持組織的原有結構和化學成分常用固定劑:福爾馬林,Bouin’s液脫水(
Dehydration):以酒精替代組織中的水分透明(
Clearing):以二甲苯替代酒精
包埋(
Embedding):以石蠟替代二甲苯切片和裱片(
Sectioning
&
mounting):5~10μm冰凍切片(Frozen
section)能較好保存某些化學成分和酶冰凍切片機/恒冷箱切片機其他涂片(
smear
)鋪片(whole
mounts)磨片(ground
section)2.染色(Staining
)2.1
H-E
染色法Hematoxylin(蘇木素):堿性染料,藍紫色Eosin(伊紅):酸性染料,粉紅色嗜堿性basophilic:與堿性染料親和力強;如,核染色質(zhì)、核糖體嗜酸性acidophilic:與酸性染料親和力強;如,細胞質(zhì)、膠原纖維嗜中性neutrophilic:與兩種染料親和力均不強2.2
其他銀染:硝酸銀染色親銀性(
Argentaffin)嗜銀性(
Argyrophilia)甲苯胺藍染色異染性(
Metachromasia)熒光染色(
Fluorescence
staining)透射電鏡(TEM)分辨率:0.2
nm放大倍數(shù)從幾千倍到幾十萬倍超微結構ultrastructure電子束代替可見光電磁場代替玻璃透鏡超薄切片:50
~
80
nm重金屬鹽染色電子密度(二)電子顯微鏡(EM)術2.掃描電鏡(SEM
)分辨率:5
nm揭示細胞、組織和器官表面的立體微細結構3.冷凍蝕刻術(Freezeetching)觀察細胞斷裂表面的微細結構(三)組織化學和細胞化學術對化學成分(糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、酶)進行定位和定量研究1.
過碘酸-Schiff
反應(periodic
acid
Schiff
reaction,PAS反應)定位多糖、蛋白多糖,形成不溶性紫紅色反應產(chǎn)物2.
其他(四)免疫組織化學
Immunohistochemistry根據(jù)免疫學原理,應用帶有可見標記的特異性抗原-抗體反應,檢測組織細胞中的抗原性物質(zhì)檢測多肽、蛋白質(zhì)的分布特異性強,敏感度高Avidin-biotin-peroxidase
complex
method(親和素-生物素-過氧化物酶復合物法)(五)原位雜交(in
situ
hybridization,ISH)
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