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文檔簡介

組織學緒論武捷一、什么是組織學(一)概念組織學(histology)是研究機體(正常)微細結構及其相關功能的科學。(二)研究內(nèi)容細胞 組織器官系統(tǒng)細胞(cell):是構成機體形態(tài)結構與功能的基本單位。組織(tissue):細胞+細胞間質(zhì)(intercellular

materials

)形態(tài)和功能相同或相似的細胞群細胞外基質(zhì)(

extracellular

matrix,ECM

);由細胞產(chǎn)生;構成細胞生存的微環(huán)境人體具有4種基本組織:上皮組織結締組織肌組織神經(jīng)組織器官(organ):幾種組織按一定的方式有機地組合構成器官??涨恍云鞴賖ollow

organ

(中空性器官)實質(zhì)性器官parenchyma

organ系統(tǒng)(system):結構上連續(xù)或功能上相關的器官組成系統(tǒng)。循環(huán)系統(tǒng)circulatory

system免疫系統(tǒng)immune

system內(nèi)分泌系統(tǒng)endocrine

system神經(jīng)系統(tǒng)nervous

system消化系統(tǒng)digestive

system呼吸系統(tǒng)respiratory

system泌尿系統(tǒng)urinary

system生殖系統(tǒng)reproductive

system二、如何學習組織學(一)光學顯微鏡(LM)術(分辨率:0.2μm

)照明燈聚光器載物臺和切片夾推進器物鏡粗細準焦螺旋目鏡1.樣本制備1.1石蠟切片(Paraffin

section

)取材(

Specimen):新鮮,小固定(

Fixation):保持組織的原有結構和化學成分常用固定劑:福爾馬林,Bouin’s液脫水(

Dehydration):以酒精替代組織中的水分透明(

Clearing):以二甲苯替代酒精

包埋(

Embedding):以石蠟替代二甲苯切片和裱片(

Sectioning

&

mounting):5~10μm冰凍切片(Frozen

section)能較好保存某些化學成分和酶冰凍切片機/恒冷箱切片機其他涂片(

smear

)鋪片(whole

mounts)磨片(ground

section)2.染色(Staining

)2.1

H-E

染色法Hematoxylin(蘇木素):堿性染料,藍紫色Eosin(伊紅):酸性染料,粉紅色嗜堿性basophilic:與堿性染料親和力強;如,核染色質(zhì)、核糖體嗜酸性acidophilic:與酸性染料親和力強;如,細胞質(zhì)、膠原纖維嗜中性neutrophilic:與兩種染料親和力均不強2.2

其他銀染:硝酸銀染色親銀性(

Argentaffin)嗜銀性(

Argyrophilia)甲苯胺藍染色異染性(

Metachromasia)熒光染色(

Fluorescence

staining)透射電鏡(TEM)分辨率:0.2

nm放大倍數(shù)從幾千倍到幾十萬倍超微結構ultrastructure電子束代替可見光電磁場代替玻璃透鏡超薄切片:50

~

80

nm重金屬鹽染色電子密度(二)電子顯微鏡(EM)術2.掃描電鏡(SEM

)分辨率:5

nm揭示細胞、組織和器官表面的立體微細結構3.冷凍蝕刻術(Freezeetching)觀察細胞斷裂表面的微細結構(三)組織化學和細胞化學術對化學成分(糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、酶)進行定位和定量研究1.

過碘酸-Schiff

反應(periodic

acid

Schiff

reaction,PAS反應)定位多糖、蛋白多糖,形成不溶性紫紅色反應產(chǎn)物2.

其他(四)免疫組織化學

Immunohistochemistry根據(jù)免疫學原理,應用帶有可見標記的特異性抗原-抗體反應,檢測組織細胞中的抗原性物質(zhì)檢測多肽、蛋白質(zhì)的分布特異性強,敏感度高Avidin-biotin-peroxidase

complex

method(親和素-生物素-過氧化物酶復合物法)(五)原位雜交(in

situ

hybridization,ISH)

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