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文檔簡介
惡性淋巴瘤臨床病理診斷新進(jìn)展演示文稿本文檔共48頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分優(yōu)選惡性淋巴瘤臨床病理診斷新進(jìn)展本文檔共48頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分
腫瘤?淋巴瘤類型?
淋巴瘤?本文檔共48頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分本文檔共48頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分本文檔共48頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分一、淋巴造血組織類標(biāo)志物
遵循一線抗體(LCA、CK、Vim、S-100等)進(jìn)行淋巴瘤初篩,二線抗體(CD20、CD79a,CD3、CD45RO,CD68等)進(jìn)行淋巴瘤初步分類,三線抗體(CD30、CD15、Bcl-2、ALK等)識別特殊類型淋巴瘤的基本診斷原則。這些抗體不僅是各型淋巴瘤正確診斷和鑒別診斷的基礎(chǔ),同時也是臨床靶向化療的依據(jù)。如CD20抗體與放射性核素偶聯(lián)的藥物Rituxan(美羅華)、Zevalin、Bexxar治療低度惡性B細(xì)胞性淋巴瘤有效率可達(dá)70%,現(xiàn)也可用于復(fù)發(fā)和難治的中或高度惡性B細(xì)胞性淋巴瘤;CD33與刺胞枚素偶聯(lián)物Myelotarg用于CD33陽性的髓性白血病;CD52人源化單抗Campath用于B細(xì)胞性白血病及蕈樣霉菌病等T細(xì)胞性淋巴瘤
本文檔共48頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分(1)T細(xì)胞未成熟時——CD3、CD45RO,CD2、CD5、CD7、CD1成熟——CD4+,CD8+(2)B細(xì)胞---未成熟時表達(dá)CD20、CD79a,CD9、CD10、19、21、22,CD33、52等成熟時——SIgG(3)漿細(xì)胞---CD38(4)單核巨噬細(xì)胞---CD68,CD13,CD14,CD15等,還可表達(dá)溶菌酶、a1-AT、MAC387等
本文檔共48頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分陽性染色的正確定位
(1)胞膜型:CD20、CD45RO、CD3、CD5、CD79a、LCA、CD43
(2)胞質(zhì)型:CD68、Mac387、穿孔素TIA-1,顆粒酶B。
(3)胞核型:TdT、CyclinD-1
(4)特殊型:CD30、CD15為膜、膜與胞質(zhì)點(diǎn)(高爾基區(qū)),ALK為核胞質(zhì)型。定位不準(zhǔn)確,不能作為真陽性,應(yīng)找原因重作。本文檔共48頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分在解決疑難病例診斷方面起著重要作用;隨著人們醫(yī)療風(fēng)險意識的增強(qiáng),許多普通的病例也常常需要免疫組化進(jìn)一步證實(shí);成為病理醫(yī)生常規(guī)工作不可缺少的重要工作;常規(guī)手段;至今無絕對特異的抗體!無100%病例或腫瘤細(xì)胞陽性的抗體!應(yīng)選擇一組抗體而不是一個抗體。本文檔共48頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分二、世界衛(wèi)生組織(WHO)惡性淋巴瘤新分類(2001年)分類原則每一種類型惡性淋巴瘤為臨床上“真正的”獨(dú)立的疾?。╠iseaseentity)定義每一種類型惡性淋巴瘤依據(jù)形態(tài)學(xué)免疫表型遺傳學(xué)特征臨床特點(diǎn)本文檔共48頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分WHO分類原則形態(tài)學(xué)和免疫表型特點(diǎn)確定主要的分化細(xì)胞類型(predominantdifferentiatedcelltype)特殊臨床特點(diǎn)(specialclinicalfeatures),特殊病因?qū)W特點(diǎn)(specialetiologicalfeatures)主要的原發(fā)性細(xì)胞遺傳學(xué)異常(mainprimarycytogeneticabnormalities)本文檔共48頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分臨床特點(diǎn)播散性/白血病性淋巴瘤性:結(jié)外:鼻、腸、肝脾、皮膚結(jié)內(nèi)分級(grading)變型(variant)亞型(subtype)本文檔共48頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分WHO分類不再列出臨床分組即不再分出:低度、中度和高度惡性或不再分出:惰性、中度侵襲性、侵襲性和高度侵襲性。WHO不采用惡性淋巴瘤簡化分類,但在常見類型下用黑線劃出。本文檔共48頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分
惡性淋巴瘤的特殊病因?qū)W特點(diǎn)EBV:伯基特淋巴瘤、NK/T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤HTLV-1:成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤幽門螺桿菌:胃MALT型邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤本文檔共48頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分
原發(fā)性細(xì)胞遺傳學(xué)異常本文檔共48頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分繼發(fā)性細(xì)胞遺傳學(xué)異常本文檔共48頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分淋巴組織腫瘤WHO分類:B細(xì)胞前驅(qū)B細(xì)胞腫瘤
前驅(qū)B淋巴母細(xì)胞白血病/淋巴瘤(B-ALL/LBL)成熟(周圍)B細(xì)胞腫瘤
B-慢性淋巴細(xì)胞性白血病/小淋巴細(xì)胞淋巴瘤(B-CLL/SLL)
B-幼淋巴細(xì)胞白血?。˙-PLL)
B-淋巴漿細(xì)胞性淋巴瘤(LPL)脾邊緣區(qū)淋巴瘤(SMZL)毛細(xì)胞白血病(HCL)
漿細(xì)胞骨髓瘤(PCM)骨外漿細(xì)胞瘤(EOP)
MALT型結(jié)外邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤(MALT-MZL)淋巴結(jié)邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤(MZL)濾泡性淋巴瘤(FL)套細(xì)胞淋巴瘤(MCL)彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)伯基特(Burkitt)淋巴瘤(BL)淋巴瘤樣肉芽腫病移植后淋巴組織增生性疾病,多樣性本文檔共48頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分前驅(qū)T細(xì)胞腫瘤
前驅(qū)T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤/白血?。═-LBL/ALL)成熟(周圍)T細(xì)胞腫瘤
T-幼淋巴細(xì)胞性白血?。═-PLL)
T-大顆粒淋巴細(xì)胞性白血病(T-LGL)侵襲性NK細(xì)胞白血?。ˋNKCL)成人T細(xì)胞淋巴瘤/白血?。ˋTCL/L)結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤,鼻型
(NK/TCL)
腸病型T細(xì)胞淋巴瘤(ITCL)肝脾T細(xì)胞淋巴瘤皮下脂膜炎樣T細(xì)胞淋巴瘤蕈樣肉芽腫/Sezary綜合征(MF/SS)間變性大細(xì)胞淋巴瘤(ALCL),
T和裸細(xì)胞,原發(fā)性皮膚型周圍T細(xì)胞淋巴瘤,無其他特征(PTCL)血管免疫母細(xì)胞性T細(xì)胞淋巴瘤(AITCL)間變性大細(xì)胞淋巴瘤(ALCL),T和裸細(xì)胞,原發(fā)性全身型母細(xì)胞性NK細(xì)胞淋巴瘤淋巴組織腫瘤WHO分類:T細(xì)胞和NK細(xì)胞本文檔共48頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分
淋巴組織腫瘤WHO分類:
霍奇金淋巴瘤(霍奇金病)結(jié)節(jié)性淋巴細(xì)胞為主型霍奇金淋巴瘤(NLPHL)經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤
結(jié)節(jié)硬化型霍奇金淋巴瘤,1和2級(NSHL)富于淋巴細(xì)胞經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤
混合細(xì)胞型霍奇金淋巴瘤(MCHL)淋巴細(xì)胞消減型霍奇金淋巴瘤(LDHL)本文檔共48頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分
鏡影細(xì)胞23本文檔共48頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分三、常見淋巴結(jié)外淋巴瘤的臨床病理特點(diǎn)
1、結(jié)外病變的癥狀
(1)胃腸道
食欲減退、腹痛,腹瀉、腹塊、腸梗阻和出血等。
(2)肝膽
肝實(shí)質(zhì)受侵可引起肝區(qū)疼痛。
(3)骨骼
臨床表現(xiàn)有局部骨骼疼痛及繼發(fā)性神經(jīng)壓迫癥狀,胸骨的淋巴瘤/白血病可形成綠色瘤外觀。
(4)皮膚
非特異性損害常見的有皮膚瘙癢癥及癢疹。瘙癢癥在霍奇金病較為多見(占85%)。
(5)扁桃體和口、鼻、咽部
淋巴瘤侵犯口、鼻、咽部者,臨床有吞咽困難、鼻塞、鼻衄。
(6)其他
淋巴瘤尚可浸潤胰腺,發(fā)生吸收不良綜合征。
本文檔共48頁;當(dāng)前第21頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分2.結(jié)外病變的體征
(1)發(fā)熱及肝脾腫大肝實(shí)質(zhì)受侵可引起肝腫大,活組織檢查約25%一50%的非霍奇金淋巴瘤有肝累及,尤多見于非霍奇金淋巴瘤。脾臟浸潤大多由腹部淋巴結(jié)病灶經(jīng)淋巴管擴(kuò)散而來。
(2)胸部在非霍奇金淋巴瘤中,約25%在病程中發(fā)生胸腔積液,除腫瘤浸潤外也可能因縱隔累及,淋巴阻塞所致。
(3)骨骼惡性淋巴瘤侵犯骨骼可有局部按壓痛、病理性骨折。(4)皮膚特異性皮膚損害表現(xiàn)多樣化,包括丘疹、斑疹、皮下結(jié)節(jié)、浸潤性斑塊、腫塊、潰瘍等,常先見于頭頸部。多見于T細(xì)胞成人白血病淋巴瘤綜合征或蕈樣肉芽腫,帶狀皰疹也好發(fā)于霍奇金病,占5%一16%。
本文檔共48頁;當(dāng)前第22頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分5)扁桃體和口、鼻、咽部
臨床可見局部腫物及頜下淋巴結(jié)腫大,部分有明顯潰瘍壞死。
(6)腎
腎腫大、高血壓及尿素氮潴留,其他尚見腎盂腎炎、腎盂積水、腎梗塞、淀粉樣變等。
(7)神經(jīng)系統(tǒng)
中樞神經(jīng)系統(tǒng)累及可有顱內(nèi)內(nèi)高壓癥狀。形態(tài)可有梭形細(xì)胞變形,并圍繞血管套排列。
(8)其他
淋巴瘤尚可浸潤胰腺,發(fā)生吸收不良綜合征。
本文檔共48頁;當(dāng)前第23頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分表166例淋巴結(jié)外非霍奇金淋巴瘤病理組織分型構(gòu)成比及發(fā)病年齡。類型例數(shù),百分比(%)平均年齡(歲)B細(xì)胞淋巴瘤
44(66.7%)47.4MALT型結(jié)外邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤(MALT-MZL)22(33.3%)46.6彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)10(15.2%)48.7濾泡性淋巴瘤(FL)4(6.1%)51.5小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤(B-SLL)5(7.6%)52.5漿細(xì)胞瘤
2(3.0%)39.4套細(xì)胞淋巴瘤(MCL)1(1.5%)38.0T細(xì)胞淋巴瘤
19(28.8%)41.0外周非特異T細(xì)胞淋巴瘤(PTCL)7(10.6%)41.7結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤(NK/T)5(7.6%)50.4間變性大細(xì)胞淋巴瘤(ALCL)3(4.55%)47.5淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤2(3.0%)12.0血管免疫母細(xì)胞性T細(xì)胞淋巴瘤(AITCL)1(1.5%)51.0腸病型T細(xì)胞淋巴瘤(ITCL1(1.5%)35.0組織細(xì)胞腫瘤1(1.5%)35.0未能分類的淋巴瘤2(3.0%)52.5
本文檔共48頁;當(dāng)前第24頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分結(jié)外非霍奇金淋巴瘤雖然發(fā)生于各個器官,類型多種多樣,但均有異型淋巴樣細(xì)胞浸潤和破壞,按一、二、三線抗體的免疫組化標(biāo)記原則能夠既節(jié)省又有效的標(biāo)記出來。本組結(jié)外淋巴瘤占全部淋巴瘤的44.9%(66/147),其較高的發(fā)生率可能與機(jī)體免疫機(jī)能受抑制及某些慢性感染增加有關(guān),同時由于免疫組化等技術(shù)的廣泛應(yīng)用使結(jié)外淋巴瘤與其他小細(xì)胞肉瘤、PNET、神經(jīng)內(nèi)分泌癌、假性淋巴瘤等鑒別出來[4]。淋巴結(jié)外淋巴瘤在臨床經(jīng)過、病理組織學(xué)特點(diǎn)和免疫組化表型等方面與結(jié)內(nèi)淋巴瘤相比較有其不同的個性特征。如早期一般沒有肝脾和淋巴結(jié)的腫大,與病變器官的其他病變?nèi)菀渍`漏診。
本文檔共48頁;當(dāng)前第25頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分常見結(jié)外B細(xì)胞淋巴瘤的特點(diǎn)淋巴結(jié)外B細(xì)胞淋巴瘤本組44例(占66.7%),瘤細(xì)胞多具有相對一致的單一性增生,可表現(xiàn)為結(jié)節(jié)濾泡性或彌漫性增生形式,按細(xì)胞大小分為小B細(xì)胞淋巴瘤和大B細(xì)胞淋巴瘤。前者包括MALT淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤、淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤、漿細(xì)胞淋巴瘤等類型;后者即彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤。一般說來,小B細(xì)胞淋巴瘤患者年齡較大,本組中位年齡為49歲,病程進(jìn)展緩慢,屬于惰性淋巴瘤,但部分可轉(zhuǎn)化為大細(xì)胞性淋巴瘤。彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤比較常見,發(fā)病年齡較寬,但主要還是老年人,屬于侵襲性淋巴瘤。
本文檔共48頁;當(dāng)前第26頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分1.MALT淋巴瘤:本組MALT型結(jié)外邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)病率最高,共22例,占總病例的33.3%,占結(jié)外B細(xì)胞淋巴瘤的50%(22/44)。原發(fā)部位部位為胃8例,扁桃體4例,腸3例,鼻咽3例,鼻腔、腮腺、甲狀腺和眼眶各1例。臨床常有慢性免疫性疾病或慢性炎癥史,呈惰性經(jīng)過,表現(xiàn)為腫塊或潰瘍。病理黏膜見異型淋巴樣細(xì)胞浸潤和破壞;瘤細(xì)胞為小到中等的中心細(xì)胞樣和單核樣細(xì)胞,可有小淋巴細(xì)胞樣或漿細(xì)胞樣分化,無或少數(shù)散在轉(zhuǎn)化大細(xì)胞;常見淋巴上皮病變和淋巴濾泡殖入(圖1~3)。免疫組化:LCA、CD20、CD79a等膜表達(dá)陽性,而CD3、CD45RO瘤細(xì)胞陰性。文獻(xiàn)報道還表達(dá)濾泡樹突細(xì)胞的邊緣區(qū)細(xì)胞相關(guān)抗原CD21和CD35。
本文檔共48頁;當(dāng)前第27頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分本文檔共48頁;當(dāng)前第28頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分2.彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤:彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤共10例,占結(jié)外B細(xì)胞淋巴瘤的.22.7%(10/44)。原發(fā)部位部位為腸4例,胃2例,扁桃體2例,鼻咽和縱隔各1例。其中1例胃MALT淋巴瘤合并彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤轉(zhuǎn)化,并在5月內(nèi)迅速累及頸部淋巴結(jié)和全身各處。病理瘤細(xì)胞以彌漫浸潤的轉(zhuǎn)化性大B細(xì)胞為主要成分(圖4)。瘤細(xì)胞核一般大于正常巨噬細(xì)胞的核,或者超過正常淋巴細(xì)胞的兩倍以上。形態(tài)上可以是具2~4個近核膜小核仁的中心母細(xì)胞、或具1個中位大核仁的免疫母細(xì)胞,其中1例為富于T細(xì)胞性的變種。免疫組化:CD20、CD79a等膜表達(dá)陽性。本文檔共48頁;當(dāng)前第29頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分本文檔共48頁;當(dāng)前第30頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分3.濾泡性淋巴瘤:本組共4例,包括扁桃體3例、胃1例。腫瘤細(xì)胞形態(tài)為中心/中心母細(xì)胞樣(生發(fā)中心細(xì)胞),大部分呈濾泡性生長(圖5),病情發(fā)展緩慢。免疫組化:除B細(xì)胞表達(dá)陽性外,還表達(dá)Bcl-2、CD10。本文檔共48頁;當(dāng)前第31頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分本文檔共48頁;當(dāng)前第32頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分4.小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤:本組5例,分別位于脾、左髂骨、左膝神經(jīng)和右眼眶,多為50歲以上的老年人。組織學(xué)為單一性的小圓淋巴細(xì)胞彌漫浸潤,瘤細(xì)胞較成熟,但可合并或逐步發(fā)展為淋巴細(xì)胞性白血病。免疫組化:除B細(xì)胞表達(dá)陽性外,還表達(dá)CD23、CD5。
本文檔共48頁;當(dāng)前第33頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分5.漿細(xì)胞瘤:本組見于脛骨和結(jié)腸各1例。組織學(xué)為單一性的漿細(xì)胞組成,這些腫瘤性漿細(xì)胞中可見核內(nèi)包含體。免疫組化:不表達(dá)LCA和B細(xì)胞標(biāo)記,可表達(dá)EMA和CD138。
本文檔共48頁;當(dāng)前第34頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分套細(xì)胞淋巴瘤形態(tài)學(xué)小瘤細(xì)胞:套細(xì)胞生長方式套區(qū)結(jié)節(jié)狀彌漫性免疫表型CD20+,CD79a+,IgM/D+CD5+,cyclinD1+,CD43+CD10-,bcl-6-,CD23-本文檔共48頁;當(dāng)前第35頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分套細(xì)胞淋巴瘤遺傳學(xué)特征:t(11;14)(q13;q32)臨床特點(diǎn)老年人(中位年齡60歲)男性常見(男:女=2:1)臨床Ⅲ-Ⅳ期淋巴結(jié)腫大,肝脾腫大,骨髓累及胃腸道(淋巴瘤樣息肉病),口咽環(huán)本文檔共48頁;當(dāng)前第36頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分本文檔共48頁;當(dāng)前第37頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分常見結(jié)外T細(xì)胞淋巴瘤的特點(diǎn)淋巴結(jié)外T細(xì)胞淋巴瘤本組19例,占總病例的28.8%(19/66),發(fā)病率雖然不高,但發(fā)病年齡差別大,累及的原發(fā)部位也更廣泛,本組的情況就顯示幾乎所有年齡和所有結(jié)外外臟器均可發(fā)生T細(xì)胞淋巴瘤。原發(fā)部位部位以鼻、胃腸、皮膚、肝脾及含淋巴組織的器官多見。臨床上常有發(fā)熱、盜汗及體重下降等B癥狀,多表現(xiàn)一個侵襲性過程,同B細(xì)胞淋巴瘤相比更易復(fù)發(fā)。組織學(xué)病變也表現(xiàn)明顯的多樣性,瘤細(xì)胞常有不同程度的核異型性如曲核、多形核、間變核等,背景反應(yīng)性的細(xì)胞也可很顯著,部分有高內(nèi)皮的血管增生或明顯的血管壞死。
本文檔共48頁;當(dāng)前第38頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分結(jié)外NK/T細(xì)胞淋巴瘤:本組共5例,包括鼻腔3例、鼻咽和扁桃體各1例?;旧隙嘉挥谥芯€部位,患者平均年齡45歲,3男2女。臨床以壞死性肉芽腫為特點(diǎn),并可檢測到EB病毒的感染。病理組織學(xué)黏膜見形態(tài)多樣的中等大或大小細(xì)胞混合性異型腫瘤細(xì)胞浸潤,并以圍繞血管生長和顯著壞死為特征(圖6)。免疫組化:CD3胞質(zhì)陽性,細(xì)胞毒顆??乖瑿D56、GramB均陽性。
本文檔共48頁;當(dāng)前第39頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分本文檔共48頁;當(dāng)前第40頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分間變性大細(xì)胞性淋巴瘤:本組見4例,3男1女,分別位于胃體小彎、胃底、乙狀結(jié)腸和左頜腮腺區(qū)。臨床上為結(jié)節(jié)性腫物,可有潰瘍形成,大體與癌不易區(qū)別,伴低熱及體重下降。組織學(xué)見瘤細(xì)胞大小形態(tài)明顯多形性,胞漿豐富,細(xì)胞間易黏附類似癌巢,常有較特征的腎形或胚胎樣核、花環(huán)狀多核巨細(xì)胞,近核有嗜酸性的核仁區(qū)(圖7~8)。免疫組化:瘤細(xì)胞CD30呈膜點(diǎn)狀(高爾器)陽性(圖9),ALK和EMA大部分陽性,而CK、CEA陰性。
本文檔共48頁;當(dāng)前第41頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分本文檔共48頁;當(dāng)前第42頁;編輯于星期三\5點(diǎn)15分淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤:本組見2例,為11歲和13歲小孩,縱隔和胸壁腫物。病理表現(xiàn)為中等大小,胞質(zhì)少,核染色質(zhì)細(xì)膩的瘤細(xì)胞彌漫浸潤,核分裂多見。免疫組化:CD3胞質(zhì)陽性,胞核TdT陽性。
本文檔共48頁;當(dāng)前第43
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