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實(shí)驗(yàn)十胰島素及腎上腺素對(duì)血糖濃度的影響原理胰島素能降低血糖,腎上腺素能升高血糖給動(dòng)物注射胰島素或腎上腺素取注射前、后兔的靜脈血,測(cè)定血糖含量通過公式計(jì)算血糖改變百分率血糖改變%=注射后BS-注射前BS注射前BS×100%原理葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸+H2O2本實(shí)驗(yàn)是葡萄糖氧化酶(GOD)和過氧化物酶(POD)相偶聯(lián)發(fā)生的偶聯(lián)反應(yīng)2H2O2+4-氨基安替比林+酚
POD紅色醌類化合物+H2O操作步驟動(dòng)物準(zhǔn)備注射前取血注射激素注射后取血計(jì)算結(jié)果稱體重,重的注射胰島素,輕的注射腎上腺素已準(zhǔn)備腹部皮下45°注射,不要穿入腹腔內(nèi)臟作好標(biāo)記防止溶血測(cè)定血糖加樣要準(zhǔn)反應(yīng)時(shí)間一致505nm比色注射激素和取血計(jì)算注射劑量:胰島素為0.75U/Kg體重,腎上腺素為0.4mg/Kg體重;皮下注射激素;注射激素后取血,時(shí)間:腎上腺素30min,胰島素1h(心臟取血);采血后靜置10min至血清析出;3000r/min離心分離10min,吸取血清至新的EP管中,做好標(biāo)記。取小試管4支,編號(hào),按下表操作:加入物(ml)空白管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定前測(cè)定后血清
--0.010.01葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液-0.01--蒸餾水0.01---酶酚混合試劑1.501.501.501.50血糖測(cè)定混勻,置37°C水浴中,保溫15min,加2.0mlH2O混勻后在波長(zhǎng)505nm處比色,以空白調(diào)零,測(cè)定各管吸光度。注意事項(xiàng)1.腹部皮下注射,以45°進(jìn)針,針頭不要刺入腹腔,更不要穿破皮膚注射到體外。2.最后加酶酚混合試劑,各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)一致。3.葡萄糖氧化酶法可直接測(cè)定腦脊液葡萄糖含量,但不能直接測(cè)定尿液葡萄糖含量結(jié)果計(jì)算血糖改變%=注射后BS-注射前BS注射前BS×100%血糖濃度(mmol/L)=A測(cè)定管A
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