免疫散射比濁法測(cè)定CRP

免疫散射比濁法測(cè)定CRP

【關(guān)鍵詞】散射比濁法

［摘要］目的本文對(duì)比濁法測(cè)定血清CRP進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)。方法采用免疫散射比濁法檢測(cè)100例患者和30例健康正常人血清CRP含量，同時(shí)與乳膠凝集法結(jié)果對(duì)比。結(jié)果批內(nèi)、批間變異系數(shù)分別為%和%，定量檢測(cè)具有滿(mǎn)意的線(xiàn)性響應(yīng)，免疫比濁法陽(yáng)性率為35%，乳膠法為18%，比濁法陽(yáng)性率明顯高于乳膠法。結(jié)論本方法的重復(fù)性、準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性、特異性均較好，脂血、黃疸無(wú)明顯影響，具有較高的臨床推廣價(jià)值。

［關(guān)鍵詞］散射比濁法;乳膠凝集法;C-反應(yīng)蛋白

Abstract:ObjectiveMethodologicalevaluationofnephelometrywasperformedinthedetectionofserumThelevelsofse-rumCRPin100patientsand30normalsubjectsweredeterminedbytwomethods:nephelometryandlatexagglutinationtest，andtheresultswereTheCVvalueofintra-assaysof%，andthatofinter-assaysof%.Quantificationdetectionshowsasatisfactorylinerelation.ThepositiverateofCRPwas35%bynephelometry，and18%bylatexagglutinationhigherpositiveratewasobtainedbynephelometryincomparisonwithlatexlatexagglutinationNephelometryisquitegoodinreplication，accura-cy，stability，andspecificity，andnotaffectedbylipidandisvaluableinclinicalapplication.

Keywords:nephelometry;latexagglutinationtest;CRP

CRP是一種急性期反應(yīng)蛋白，能激活補(bǔ)體、促進(jìn)吞噬并具有其他的免疫調(diào)控作用。在各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤、心肌、手術(shù)創(chuàng)傷、放射線(xiàn)損傷等時(shí)，CRP在病后數(shù)小時(shí)迅速升高，病變好轉(zhuǎn)時(shí)又迅速降至正常。目前國(guó)內(nèi)CRP的檢測(cè)普遍采用膠乳凝集法和免疫擴(kuò)散法，這兩種方法雖然操作簡(jiǎn)便，但其重復(fù)性、穩(wěn)定性等較差，陽(yáng)性率低。國(guó)外主要采用ELISA和比濁法進(jìn)行CRP的檢測(cè)。國(guó)內(nèi)近年來(lái)也逐漸開(kāi)始采用比濁法對(duì)CRP進(jìn)行定量分析，我們采用半自動(dòng)散射比濁儀檢測(cè)了100例患者和30例健康人血清CRP含量，并同時(shí)與乳膠法進(jìn)行比較分析。

1材料與方法

儀器和試劑

半自動(dòng)免疫比濁儀TURBOXPLUS、CRP測(cè)定試劑盒均購(gòu)自O(shè)RION公司。

檢測(cè)對(duì)象

體檢健康血清30例，患者100例。測(cè)定CRP含量，并收集患者血清30份混合、分裝、冷凍保存待用。

檢測(cè)方法

采用散射比濁法，反應(yīng)杯中加入配制好的反應(yīng)液，混合均勻，室溫，反應(yīng)25～35min，免疫散射比濁儀測(cè)定。CRP正常值為小于10mg/ml。乳膠凝集試驗(yàn)按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。

2結(jié)果

兩種方法檢測(cè)和結(jié)果比較

檢測(cè)100例患者血清CRP，比濁法陽(yáng)性率為35%，乳膠法陽(yáng)性率為18%，比濁法陽(yáng)性率高于乳膠法。通過(guò)配對(duì)χ2檢驗(yàn)兩種方法檢測(cè)CRP的陽(yáng)性數(shù)有顯著性差異，30例體檢健康正常人CRP值均小于10mg/ml。

批內(nèi)、批間精密度檢測(cè)

取混合患者血清一份，作批內(nèi)重復(fù)測(cè)定20次，結(jié)果顯示CV值為%，在儀器所標(biāo)明的范圍內(nèi)，批間試驗(yàn)每天一次共20次，結(jié)果顯示CV值為%，在儀器標(biāo)明的8%范圍內(nèi)。

線(xiàn)性關(guān)系評(píng)價(jià)

取患者混合高值血清一份測(cè)定CRP含量，然后作倍比稀釋共5個(gè)稀釋度，結(jié)果表明該方法具有滿(mǎn)意的線(xiàn)性響應(yīng)。

干擾試驗(yàn)

脂血、黃疸對(duì)測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯影響。

3討論

傳統(tǒng)的乳膠凝集法檢測(cè)CRP缺乏精確度，樣品的滴度是靠稀釋血清的陽(yáng)性結(jié)果來(lái)確定的，不能定量地表示檢測(cè)結(jié)果，而且對(duì)于小量低濃度的CRP不夠敏感，因而不能滿(mǎn)足現(xiàn)代臨床對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的要求［1］。為了能夠給臨床提供反映患者免疫功能狀況及療效的指標(biāo)，國(guó)內(nèi)近年來(lái)逐漸開(kāi)始對(duì)CRP進(jìn)行定量測(cè)定，采用得較多的方法是ELISA法，但該法操作較為復(fù)雜，特異性和重復(fù)性均不如免疫散射比濁法，免疫散射比濁法具有試劑穩(wěn)定，操作簡(jiǎn)便，流程短，重復(fù)性和精確性好的優(yōu)勢(shì)［2-4］。作者利用ORION公司提供的半自動(dòng)免疫比濁儀TURBOXPLUS，采用散射免疫比濁法檢測(cè)了100例患者和30例健康人群CRP含量，同時(shí)以乳膠法作對(duì)照，結(jié)果顯示兩種方法檢測(cè)的陽(yáng)性率有顯著性差異。散射比濁法檢測(cè)批內(nèi)、批間變異系數(shù)分別小于5%和8%，與有關(guān)文獻(xiàn)

［2］報(bào)道一致，其重復(fù)性好、特異性強(qiáng)且操作簡(jiǎn)便，明顯優(yōu)于乳膠法?？傊庖弑葷岱y(cè)定CRP是一種快速準(zhǔn)確的定量檢測(cè)方法，是今后臨床檢測(cè)CRP值得推廣的方法，但是比濁法也與乳膠法測(cè)定CRP一樣存在免疫學(xué)中抗原過(guò)剩而引起的鉤狀效應(yīng)，導(dǎo)致假陰性產(chǎn)生。目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)比濁法試劑我們采用的試劑及儀器均為進(jìn)口產(chǎn)品，因而成本較貴，建議國(guó)內(nèi)試劑生產(chǎn)廠(chǎng)家能生產(chǎn)此類(lèi)試劑使此法能被廣泛應(yīng)用。

［參考文獻(xiàn)］

［1］楊溢，陳其云，楊揚(yáng)，等.免疫比濁法測(cè)定血清C-反應(yīng)蛋白的評(píng)價(jià)［J］.四川省衛(wèi)生管理干部學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，22:165-166.

［2］楊衛(wèi)東.外科手術(shù)中CRP檢測(cè)應(yīng)用的探討［J］