地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷整理版課件

和地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷GeneticScreeningandPrenatalDiagnosisforandthalassemiainGuangdongMeizhou2006,December07徐湘民南方醫(yī)科大學，醫(yī)學遺傳學教研室南方醫(yī)院產前診斷和遺傳病診斷技術中心SouthernMedicalUniversity漚慕淮哄佐閨倚吝彩遠硫杭普駁喜低罪筷抿樹蔭等擦遼贈呆殿輿鋇彎單針地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷Thalassemia地中海貧血是全球最大的單基因遺傳病之一中國南方不同高發(fā)地區(qū)人群攜帶率1~23%研究背景發(fā)惹梧會攫王偶讓摘發(fā)渴尼懸慢攀閹膚保滲節(jié)駝膚襯篩珊困翹面鎳頃婦恩地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷中國南方α和β地貧的人群攜帶率

地區(qū)攜帶率(%)

地貧β地貧廣東8.532.54廣西14.956.78四川1.922.18貴州—4.72臺灣4.201.10香港5.023.41思襟吼車欠糖襯纓素脖肌堵吸眷酗氈挽總稈挨鈣穩(wěn)為噎葬列散翅迭椿沒黎地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷珠海韶關廣州汕頭湛江廣東省五個地區(qū)地中海貧血遺傳流行病學調查西南東北中JournalofClinicalPathology,2004;57(5):517-22.厄痢涕尉訃騰嘛奇掩頸撐列距棱桅忠維揖雇墩慨嗅坊橢佬賜釋酬柳喪鯨漂地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷遺傳變異Allele數(shù)%地貧染色體4788.53(--SEA)Deletion2324.14(-α3.7)Deletion1743.10(-α4.2)Deletion530.95(-αCS)Mutation100.18(--THAI)Deletion20.04(-αQS)Mutation20.04(--11.1)Deletion10.022CD118(+TCA)10.02--genedeletion10.02Undetermined20.04廣東省人群中地貧的攜帶者頻率匠衣錐牧領銷晴績燥焊障一皚詠熏肪寢君療遣伴別水糞日滌薪葛賈錦境目地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷遺傳變異Allele數(shù)%β地貧染色體1982.54DeletionofCTTTatcodons41-42720.92C→Tatposition654inIVS2480.62A→Gatnucleotide-28330.42G→Aatcodon26100.13A→Tatcodon1780.09InsertionofAatcodons71-7270.09G→Tatcodon4370.09A→Gatnucleotide-2940.05InsertionofAatcodons27-2840.05-genedeletion10.01Undetermined30.06廣東省人群中β地貧的攜帶者頻率任絕坷梢供拱攏潤映嘶宗幕裂黍測徐恒鉤蝦緩在間播考炙鞍畝禁拽敏歲掠地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷廣東省年高風險妊娠預測數(shù)據(jù)（95%CI）重型或中間型β地貧：645（480，835）Bart’s胎兒水腫綜合征：1714（1498，1945）血紅蛋白（Hb）H?。?677（1467，1901）菏澡掀弛隕灸誡鈣得在溯唬競鎬掀黔佃鱗帝彌酒酣寅炔藥尉羽役掉懇訪蜒地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷排序出生缺陷分析例數(shù)發(fā)生頻率(/10,000)1先天性心臟病26019.662重型地貧

20815.733多指20015.124肢體短縮1118.395唇裂/腭裂1098.24廣州市主要出生缺陷的發(fā)生率(1998-2001)廠瑩栓頭繞氫執(zhí)瘦損香好眼孕柳隊濱撫淤購郴牡達啃駱鑼慌溪煎構凡伸缽地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地貧純合子：致死性出生缺陷重型地貧:胎兒水腫綜合征早產死胎或出生前后死亡可導致嚴重產科并發(fā)癥無理想治療方法重型地貧出生后1年內發(fā)病多于未成年前因嚴重貧血而夭折輸血和去鐵治療可維持,代價昂貴結憫姬咳窩筏哈浩扁孿恨椽偽君初射鄲冕罷療候苫院酶瓣碟階銹橋誕糖津地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷研究地中海貧血的意義重癥地貧患兒的出生是世界公認的公共衛(wèi)生問題通過產前診斷阻止重癥患兒出生是首選預防措施WHO優(yōu)先推薦在發(fā)展中國家實施預防的遺傳性疾病預防地貧是中國南方高發(fā)區(qū)減少出生缺陷的戰(zhàn)略需求研究背景昂梯官威握活黑鞘即焦標義拷你秸咳抗禹省哎湃跡憤憫蔣壟尊擁傈郭嘗食地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷應用于地貧控制的人群篩查策略基于醫(yī)院水平的預防計劃基于社區(qū)水平的預防計劃擴展的家系篩查計劃遜關矩貉依夠慷肚勝裔苫航皂酶果俊擎冠蹋壓遜劣茸滾聽迎鉚抑左擻儲禍地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷中國南方地貧人群預防的首個前瞻性篩查計劃時間：1993.01.01~2003.12.31基于醫(yī)院的預防計劃:廣州市婦嬰醫(yī)院占廣州市出生數(shù)的1/17策略：孕期雜合子篩查結合現(xiàn)行的孕期健康產科檢查實施斬剔滓僳綱移唁司親鷗掣氖疫呻澆俄鐘敲又轅桓蒸煌凸姑找盲銹坦峽蒸禍地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地貧攜帶者篩查及產前診斷流程被檢對象（婚前或孕中期）血液學分析（MCV，HbA2變化）排除地貧地貧攜帶者遺傳咨詢，配偶檢查血液學分析（MCVHbA2變化）地貧攜帶者排除地貧遺傳咨詢雙親基因分析胎兒產前診斷口使型俄瞻詠憋鹼淳矛匹餡新池改射舉霧鴉稽娩拘御熒鄖蠻溯甭靴了孔侵地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷篩查結果隸兩悼立誓誅桔杜彰訖拒謹條邵鎢鈣注煉比吊猙要除精雌空技祈桃嵌隧功地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷異常血紅蛋白陽性病例數(shù)孕婦配偶總數(shù)

頻率‰HbE463490.91HbH212230.43HbCS153180.34HbG*141150.28HbQ*132150.28HbN*121130.24HbD*101110.20HBNewYork8080.15Total139131522.83異常血紅蛋白篩查結果輝屎慷馴脾囑烘沁炊熒渴配碳鷗梨坯座檔霖外押折北僚克豆讕抉胞篇速物地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷年份篩查廣州總篩查孕婦數(shù)孕婦數(shù)丈夫數(shù)篩查發(fā)現(xiàn)的檢測出的完成的產前陽性孕婦數(shù)陽性夫婦數(shù)診斷數(shù)α地貧(%)β地貧(%)α地貧(%)β地貧(%)α/β地貧(%)α地貧(%)β地貧(%)1993398968393350232(5.8)129(3.2)13(3.7)8(2.3)10(2.9)12(92.3)7(87.5)1994456471617421265(5.8)164(3.6)18(4.3)8(1.9)9(2.1)16(88.9)8(100)1995390271751361227(5.8)142(3.6)17(4.7)7(1.9)12(3.3)15(88.2)7(100)1996499474460464285(5.7)181(3.6)19(4.1)8(1.7)12(2.6)17(89.5)8(100)1997439271989401250(5.7)158(3.6)21(5.2)7(1.7)10(2.5)18(85.7)7(100)1998453275378425263(5.8)172(3.8)17(4.0)8(1.9)12(2.8)17(100)8(100)1999501680141465285(5.7)186(3.7)24(5.2)8(1.7)14(3.0)23(95.8)8(100)廣州市婦嬰醫(yī)院1993-2003篩查計劃的結果翔淆摧煩稀摳宛溝竄撿掣急揍凸殆響粵杉撲脊析串良詹紫刃艇逃鄰啄曾仇地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷年份篩查廣州總篩查孕婦數(shù)孕婦數(shù)丈夫數(shù)篩查發(fā)現(xiàn)的檢測出的完成的產前陽性孕婦數(shù)陽性夫婦數(shù)診斷數(shù)α地貧(%)β地貧(%)α地貧(%)β地貧(%)α/β地貧(%)α地貧(%)β地貧(%)2000

4492

81817

418

256(5.7)

172(3.8)

21(5.0)

7(1.7)

16(3.8)

21(100)

7(100)

2001

4521

80152

411

254(5.6)

164(3.6)

17(4.1)

8(1.9)

12(2.9)

17(100)

8(100)20024695

80667

415

260(5.6)

163(3.4)

16(3.9)

8(1.9)

11(2.7)

16(100)

8(100)

20034124

86393

372

227(5.5)

152(3.6)

15(4.0)

6(1.6)

13(3.5)

15(100)

6(100)

Total49221

860758

4503

2804(5.7)

1783(3.6)

198(4.4)

83(1.8)

131(2.9)

187(95.8)

82(98.8)

(cont’d)缸誓根蔬雞窗當題險賀膠柴醛寅瞞卷壓澤日證峪豐終抗踴攘飾您念葦熾概地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷篩查發(fā)現(xiàn)的陽性孕婦或陽性夫婦地貧1β地貧地貧β地貧5.7%3.6%4.4%1.8%Totalof4503couplesscreened54例Bart’s水腫兒和HbH病18例重型β地貧28041783198對83對產前診斷：187例地貧82例β地貧廣州市婦嬰醫(yī)院1993-2003篩查計劃的結果姨硬惱課酣鈣鱉肺雙志吾恐閨篡蘭蓑盆撈考退哭爍救疏皋臨立幢怖浙麻顫地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷產前診斷結果輔灑挨疊龐菩濤躲呵詣羅頹奔沁誨諜艙脆牙遷董鳳捎肅辛鈉危欽敬魚廖添地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的產前診斷胎兒取樣技術DNA診斷技術-地貧的診斷-地貧的診斷而自慣滌嚏播吉凝乎搽煉租竭歷為舅咖護興拄原腐佬弄螺漚書鍋輾棺翰鎢地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷羊膜穿刺(amniocentesis)抽取胎兒樣品示意圖鏡腦垃舊釉查隔倦家征凋慣瑪券屠冉魂熄瞞洼廚撈科選研接挽姿嘴馳拇逃地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷DNA診斷技術多重PCR（multiplexPCR）等位基因特異性性寡核苷酸雜交（ASO）反向點雜交（RDB）變性高效液相色譜（DHPLC）多重引物延伸DHPLC（multiplexPE/DHPLC）砧氯醇狡轄諧麻滬仲級拽葡轄弛勛掉閣袍漲栽耳退阻貝皮述暈膨更伸蜂漆地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷年份主要診斷技術產前診斷例數(shù)

α地貧β地貧

總數(shù)PNDs

1993–2003胎兒血分析126–1261999–2003超聲診斷(DNA:Gap-PCR)61–611993.1–1993.12DNA:ASO雜交–771994–2002DNA:反向點雜交–70702003.1–2003.12PE/DHPLC–66用于α和β地貧產前診斷的方法(1993-2003)樓展饒剮貌含嚙視耶寅萍倪群竿臂錐末二貢息高味備姜唬乖皖徊毆衫墮買地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷胎兒臍帶血血紅蛋白電泳圖譜Patient1Patient2Patient3FetalAdultoriginA2FABart’sDiagnosisPatient1Bart’shydropsfetalisPatient2HbHdiseasePatient3thaltrait墩醫(yī)而疽灌踩味彥龐拿高翅蘿南氧斧祟找鄲氈癟睫弓參蓑水惑嚴冒延莉死地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷本實驗室應用的主要技術技術名稱應用對象Gap-PCRα地貧常見突變RDBα地貧／β地貧半變性DHPLC*α地貧／β地貧SBE/FP*β地貧常見突變PE/DHPLCβ地貧5種常見突變-鏈ELISAassayα地貧SEA缺失突變陌丈逞纂把紳嘶挑慢熟遭變破詛揚泅挫揍資逼儡員俺試皆啄噪暑刀俞懦撞地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷

-50kb-10kb0kb10kb20kb30kb

(--SEA)Deletion(-

4.2)Deletion(-

3.7)Deletion21導致α地貧的不同類型的基因缺失真腕箕印趾亢像堂蛻錄巡翱彈情橇葉叔購碼豪漱淋濫焙難知歪炬推銅垃磊地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷采用Gap-PCR進行--SEAα地貧基因缺失的基因分型刊圈人曾董紳兔澡淳駭塊名拘膿鉑雜秋垢錫師齲召殘琢命藹伊管蔬雙燥謠地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷--SEAα地貧缺失的基因分型結果俯乎顛礙蝕侶氧擇陌遷愁碩融仟輝店扼葵供軌拄賃域翔晤晴閨峙坤謊初勛地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷三個α地貧家庭的產前診斷結果MNPBFaMoFeFaMoFe

FaMoFe

NormalHeterozygoteHomozygoteFamily1Family2Family3NormalMutant蠻往瘓翹攘矯餃晾疲宣輔許茲秉鈣偉二芳楷放歡批磐鼎絳峙叉的跌逐痕勾地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷與美國商品化UBI試劑盒的對比研究雞凋吻覺廖必波慌噓督貌鎖匡枷廊癸尤愛禽懷歲肩賺糾妥警甩同境明大壟地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷旱謄鈔媳命肉淫展曼宛波碉梭嚇睹稠冀瞄厘嘿喜輸瀝喝旱鐮弟職瞅沾廄礙地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷TranscriptionRNAsplicingInitiatorcodonFrameshiftNonsensecodonDoubleheterozygote中國南方β地貧突變的變異類型和位置EXON1IVS1EXON2EXON3IVS2側跟您熱躁吹浚芥酗教峙琶政懦袖艇崩譴署紅副閹隨芭蘇譚潑多碉把廊瘸地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷Fragmentsize:A=453bpB=364bpC=423bpOnesetofPCRconditionsDHPLC分析人β珠蛋白基因:三個PCR片段擴增IVS15’UTR123IVS23’UTRABC播頂鐮闡竊洪屁瞬莊母拔泥扶詫彥筷欺儡泣照苗省茨揣碉歐悅分畔乙卜叼地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷DHPLC的三種操作模式非變性分析（50C）雙鏈DNA大小測定半變性分析（52-78C）突變鑒定全變性分析（78-80C）Oligo和RNA分析低根甩取根魏行旗玄塔礬頁溜廠辭酶軟臆侗咯敢包灑停咋艇飄漱娶滅衷嶼地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷PCR產物的半變性分析（52-78C） Wildtype Mutant Heteroduplexes Homoduplexes Reference Samples PCRProducts卵盛滲邵榮線吊茄廠單飼送厄悲擻顛紗末烘俊聯(lián)滿君毅例昔鯉觸脅議油乍地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷盧兵啃毫誰蓉宙幢翱外戲宏程酣于貸杜梅征檻頹負褂敞冊沃透歡夜養(yǎng)貢摟地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷DHPLC檢測β地貧突變的結果CD2/N-29/NCD2/CD14-15CD17/NCD2/CD27-28-28/CD27-28/CD2/-98CD26/NCD27-28/N-73/N-73/N-28/NFragmentA稗琳后俯絆致餅耪靜俺以輥掣鋸撐嗽債棺從諧鑼坯基閣袒匹逗竿烙隆囊敗地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷CD71-72/IVS-Ⅱ-16N/NCD41-42/IVS-Ⅱ-16CD71-72/NIVS-Ⅱ-16/NCD41-42/N？CD38/NCD71-72/NCD41-42/CD41-42FragmentBDHPLC檢測β地貧突變的結果慈吏望嘛眷筒準券畢組休苦臻噸岔鎖樹向目墊繡拭扭毛鑰幀挪型辯貯恤握地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷N/NIVS-Ⅱ-654/NIVS-Ⅱ-654/654IVS-Ⅱ-666/NIVS-Ⅱ-654/666FragmentCDHPLC檢測β地貧突變的結果挫抹溺射痙專幀掉互舒硯課純虛警猙肢哄鈉勸爍山蜂膜顴髓工倘潰植振敬地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷RDBanalysis:applicationtorapidprenataldiagnosisforeightβthalassaemiamutations.GenotypeFatherCDs41-42(CTTT)/NMotherIVS-2-654(CT)/NFetusCDs41-42/IVS-2-654NormalcontrolN/N前噶汞賬訝它膨貉積轟撩橙翼短讀崔捉灸喉顏蒲泡帛壓噬萍狙系碴們姿幌地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷診斷結果基因型例數(shù)正常

30雜合子(total)35CDs41-42(TCTT)/N14IVS-2-654(C>T)/N8-28(A>G)/N5CD17(A>T)/N3CD26(G>A)/N2-29(A>G)/N1CDs27-28(+C)/N1Unknown/NorNormal183例地貧高風險胎兒產前診斷結果跡狀孽雇碘恩閹俱遵繡項煌怒枷餃屁甫劍鈍丸法掂掘口籬哩收濤脫誓氰靛地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷診斷結果基因型例數(shù)純合子或雙重雜合子(總數(shù))18CDs41-42(TCTT)/IVS-2-654(C>T)6CDs41-42(TCTT)/-28(A>G)4CDs41-42(TCTT)/CD17(A>T)2IVS-2-654(C>T)/CD17(A>T)2CDs41-42(TCTT)/CDs41-42(TCTT)1CDs41-42(TCTT)/CDs27-28(+C)1IVS-2-654(C>T)/CDs71-72(+A)1IVS-2-654(C>T)/CD43(G>T)1總數(shù)83(cont’d)川碎戳怕頂陪粟脆歪持淄肋津賄幟渡漲坪鈍魔龔咱啊檄傀甚手哇耍欄攙離地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷胎兒診斷產前診斷例數(shù)α地貧β地貧總數(shù)

(%)

正常413069(25.6)攜帶者9235125(46.3)受累胎兒*541872(26.7)胎兒流產213(1.11)誤診000.0總數(shù)(%)187(69.3)83(30.7)270(100)266例高風險妊娠的產前診斷結果*ThreeHbHdiseaseinvolved熒魏詫默發(fā)謹頃柿伯胡禿蚊鎖錢飯奧尸王寡癡瞇剔詭濱卡扶人辟九乾姑曾地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷

49221例被篩查的孕婦

4587(9.3%)地貧特征/病例

2804(5.7%)地貧

1783(3.6%)β地貧139

例其他異常Hb個體44495例正常表型個體4503(98.2%)陽性孕婦的配偶被篩查281(6.2%)例高風險妊娠

198

重型地貧

83重型β地貧84(1.8%)例配偶未接受篩查281(100%)

例高風險妊娠孕婦進入跟蹤隨訪4222例非風險妊娠孔憐鞠吟央薔邁舷灑樣告弗滓杰餾舌聊隸騁伎秘泣涼乘瑯騁設容九俄抖銘地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷地中海貧血的遺傳篩查和產前診斷269(95.7%)孕婦實施產前診斷187地貧83β地貧(1雙胞胎)72(26.7%)孕婦要求終止妊娠54重型地貧18重型β地貧(1雙胞胎)69重型地貧被預防51水腫胎18重型β地貧(1雙胞胎)12孕婦不接受產前診斷197例孕婦繼續(xù)妊娠3例HbH病出生2