免疫組化應(yīng)用課件

免疫組化應(yīng)用免疫組化應(yīng)用免疫組化應(yīng)用免疫組化的原理根據(jù)抗原和抗體特異性反應(yīng)的免疫學(xué)原理，應(yīng)用標(biāo)記抗體檢測(cè)組織中未知抗原的方法?？乖?抗體（標(biāo)記）→抗原抗體復(fù)合物通過(guò)抗原和抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)組織中的化學(xué)成分（蛋白—抗原）顯示系統(tǒng)：抗原抗體復(fù)合物+檢測(cè)系統(tǒng)將二抗和酶通過(guò)一個(gè)多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個(gè)多聚體（即）免疫組化的原理根據(jù)抗原和抗體特異性反應(yīng)的免疫學(xué)原理，應(yīng)用標(biāo)記抗體檢測(cè)組織中未知抗原的方法。抗原+抗體（標(biāo)記）→抗原抗體復(fù)合物通過(guò)抗原和抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)組織中的化學(xué)成分（蛋白—抗原）顯示系統(tǒng)：抗原抗體復(fù)合物+檢測(cè)系統(tǒng)將二抗和酶通過(guò)一個(gè)多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個(gè)多聚體（即）PrimaryAntibodyPolymercomplexSubstrate-chromogensolution染色方法(1)、將切片撈至膠片上，放入60℃溫箱中烘烤1小時(shí)。(2)、經(jīng)二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水后流水沖洗。(3)、過(guò)3％H2O2中20后流水沖洗。(4)、修復(fù)高火3后，低火15后，自然冷卻至室溫。(5)、取出玻片放至濕盒，沖洗，33。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的第一抗體40。(6)、沖洗，33。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的聚合物增強(qiáng)劑(試劑A），室溫孵育20。(7)、沖洗，33。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的酶標(biāo)鼠/兔聚合物(試劑B），室溫下孵育30。(8)、沖洗，33。擦干玻片，每張玻片加2滴或100μl的液，顯微鏡下觀察，10顯色。(9)、流水沖洗，蘇木素復(fù)染1-2，0.1％鹽酸分化，自來(lái)水沖洗后返藍(lán)。(10)、梯度酒精脫水干燥，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。免疫組化的使用范圍組織學(xué)標(biāo)本中的應(yīng)用細(xì)胞塊中的應(yīng)用各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達(dá)對(duì)腫瘤進(jìn)行來(lái)源分類上皮性腫瘤的標(biāo)記物間葉腫瘤的標(biāo)記物淋巴造血系統(tǒng)腫瘤的標(biāo)記物神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的標(biāo)記物、、56各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達(dá)上皮性腫瘤中的腺癌CK7+CK20-Villin+Villin-可見(jiàn)于：胃腺癌(41.67%)、乳頭狀腎細(xì)胞癌(17.39%)、乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌(5.36%)、卵巢漿液性腺癌(3.7%)少見(jiàn)于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌、前列腺癌、直腸腺癌、乳腺浸潤(rùn)性小葉癌、卵巢粘液性癌?？梢?jiàn)于：乳腺浸潤(rùn)型小葉癌(100%）、肺腺癌(95.83%）、乳腺浸潤(rùn)型導(dǎo)管癌(78.57%)、卵巢漿液性腺癌(70.37%）、嫌色細(xì)胞癌(66.67%）、卵巢粘液性腺癌(37.5%）、肺鱗癌(11.43%）、前列腺癌(9.09%）、直腸腺癌(2.78%）、胃腺癌(2.78%）、腎透明細(xì)胞癌(2.33%）。少見(jiàn)于：肺小細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌。CK7+CK20+Villin+Villin-可見(jiàn)于：胃腺癌(13.89%）、卵巢粘液性腺癌(12.5%）、直腸腺癌(5.56%），乳頭狀腎細(xì)胞癌(4.35%）少見(jiàn)于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、腎嫌色細(xì)胞癌、乳腺癌、卵巢漿液性癌?？梢?jiàn)于：卵巢粘液性腺癌(12.5%）乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌(3.57%）、胃腺癌(2.78%）、直腸腺癌(2.78%）。少見(jiàn)于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤(rùn)性小葉癌、卵巢漿液性癌。CK7-CK20-Villin+Villin-可見(jiàn)于：乳頭狀腎細(xì)胞癌(43.47%）、胃腺癌(18.06%）、直腸腺癌(16.67%）、卵巢粘液腺癌(12.5%）、嫌色細(xì)胞癌(11.11%）、前列腺癌(4.54%）。少見(jiàn)于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、乳腺浸潤(rùn)型導(dǎo)管癌、乳腺浸潤(rùn)性小葉癌、卵巢漿液性癌?？梢?jiàn)于：肺小細(xì)胞癌(100%）、腎透明細(xì)胞癌(42/43，97.67%）肺鱗癌(88.57%）、前列腺癌(86.36%）、乳頭狀腎細(xì)胞癌(34.78%）、嫌色細(xì)胞癌(22.22%）、卵巢漿液腺癌(18.52%）、乳腺浸潤(rùn)型導(dǎo)管癌(16.07%）、胃腺癌(13.89%）、直腸腺癌(5.56%）、肺腺癌(4.17%）。少見(jiàn)于：乳腺浸潤(rùn)性小葉腺癌、卵巢粘液腺癌。CK7-CK20+Villin+Villin-可見(jiàn)于：直腸腺癌(52.78%)、卵巢粘液性腺癌(25%)、胃腺癌(6.94%)、卵巢漿液性癌(3.7%）。少見(jiàn)于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌、乳腺浸潤(rùn)性小葉癌。可見(jiàn)于：直腸腺癌(13.89%）、卵巢漿液性腺癌(3.7%）。少見(jiàn)于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌、乳腺浸潤(rùn)性小葉癌、卵巢粘液性癌、胃腺癌1、軟組織小圓細(xì)胞腫瘤

100小細(xì)胞未分化癌+-+-----神經(jīng)內(nèi)分泌癌+-+-++--神經(jīng)母細(xì)胞瘤-+--++-尤文肉瘤-+--++-胚胎性橫紋肌肉瘤-+----+-惡性淋巴瘤---+----惡性黑色素瘤-+----+(45+)、、、、、45胞漿胞膜/胞漿胞膜100胞核/漿間皮：、陽(yáng)性橫紋?。?+)、1（弱+）血管：31、34陽(yáng)性顆粒細(xì)胞瘤：100、342100神經(jīng)纖維瘤+++孤立性纖維性腫瘤++-滑膜肉瘤-+-孤立性纖維性腫瘤99+滑膜肉瘤、雙陽(yáng)2、乳腺P635/634βE12導(dǎo)管原位癌+-+-浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌--+-浸潤(rùn)性小葉癌---+P63胞核5/6胞漿胞漿、胞膜34βE12胞漿

乳腺病理、顯示腫瘤的內(nèi)分泌表達(dá)，與腫瘤的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率相關(guān)2腫瘤相關(guān)因子，靶向治療67顯示細(xì)胞增殖指數(shù)、胞核2胞膜67胞核中間型上皮成熟型5/68/18+5/68/18+干細(xì)胞5/68/18-63-中間型肌上皮成熟型5/663+5/663+5/6,8/18，胞漿P63胞核2的染色意義陽(yáng)性強(qiáng)度的判斷：強(qiáng)的著色是指4x或10x物鏡下易于觀察到，弱的強(qiáng)的著色是指需要用40x物鏡觀察。2與治療及預(yù)后的關(guān)系不僅與浸潤(rùn)型乳腺癌的不良預(yù)后有關(guān)，并能預(yù)測(cè)多種化療藥機(jī)內(nèi)分泌治療的敏感性。靶向藥物赫賽汀2的染色意義0+浸潤(rùn)性腫瘤細(xì)胞無(wú)著色1+任何比例的浸潤(rùn)性腫瘤細(xì)胞呈弱而不完整的包膜著色或＜10%的腫瘤細(xì)胞呈弱且完整著色2+≥10%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)弱或不一致的、完整的包膜著色；或≤30%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)且完整的包膜著色3+＞30%的浸潤(rùn)性腫瘤細(xì)胞呈強(qiáng)且完整包膜著色指導(dǎo)治療267:60-70%的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率:10%的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率:40%的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率:46%的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率陽(yáng)性分級(jí)（或陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比例）與治療反應(yīng)的相關(guān)性尚缺乏統(tǒng)一認(rèn)識(shí)3、消化720+胃腸間質(zhì)瘤117，34肝1漿陽(yáng)、、2主要表達(dá)于結(jié)腸，胃癌和卵巢粘液性腺癌也有表達(dá)117胞膜/胞漿，34胞膜2胞核7，20，，胞漿4、泌尿腎10117透明細(xì)胞-++-+(膜)+-（乳頭狀癌）嫌色細(xì)胞癌++-+（漿）鐵++（嗜酸細(xì)胞腺瘤）集合管癌+++-±、–L、胞漿10胞膜、117、胞膜/胞漿

移行上皮：正常7陽(yáng)性，20陽(yáng)性提示腫瘤5、生殖卵巢上皮性腫瘤720-，125卵巢上皮（+）無(wú)性細(xì)胞瘤（女性）=精原細(xì)胞瘤（男性），，117胚胎性癌，30，子宮

合體滋養(yǎng)葉弱+細(xì)胞滋養(yǎng)葉--中間滋養(yǎng)葉弱+，胞漿

子宮內(nèi)膜樣癌++-宮頸癌--+胞漿胞核胞膜/胞漿前列腺基底細(xì)胞陽(yáng)性標(biāo)記：高分子量（34βE125/6）P504s腫瘤性腺泡（+），良性腺泡（-）前列腺上皮（+）34βE12，5/6，，P504s胞漿6、神經(jīng)內(nèi)分泌甲狀腺156乳頭狀癌++--濾泡癌++-+髓樣癌-+++甲狀腺乳頭狀癌3，19、胞漿1胞核56胞膜腎上腺皮質(zhì)1、、、陽(yáng)性髓質(zhì)、、15陽(yáng)性1、、、胞漿胞核/胞漿15胞膜/胞漿7、肺鱗狀細(xì)胞癌14、5/6、34βE12和p63；腺癌7和；神經(jīng)內(nèi)分泌癌56、、、13、18、。