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文檔簡介
1.檢驗?zāi)康闹笇?dǎo)腦脊液(CSF)常規(guī)測定.2.方法原理2.1腦脊液是存在于腦室及蛛網(wǎng)膜下腔中的無色透明液由于脈絡(luò)叢上皮細胞對血漿中各種物質(zhì)的選擇性分泌和超濾作用,血漿中各種成分對血腦屏障的通透性各有不同。其中最易通過血腦屏障的是氯、鈉、鎂離子及乙醇;其次為清蛋白、葡萄糖、鈣離子、乳酸、氨基酸、尿素和肌酐;纖維蛋白原、補體、抗體、某些藥物、膽紅素、膽固醇則極難或不能通.中樞神經(jīng)系統(tǒng)任何部位發(fā)生器質(zhì)性病變時,如感染、炎癥、腫瘤、外傷、水腫和阻塞等都可以引起腦脊液成分的改變。通過對腦脊液理學(xué)檢查,顯微鏡檢查、化學(xué)和免疫學(xué)檢查及腦脊液病原學(xué)檢,可對疾病的診斷、治療和預(yù)后判斷提供依據(jù)。2。2腦脊液(CSF)常測內(nèi)包括:顏色性、有細計、紅胞數(shù)潘氏試、菌。2。3潘(pany):CSF中的球蛋白與苯酚結(jié)合,形成不溶性的蛋白鹽而產(chǎn)生白色混濁或沉淀。3.方法性能參數(shù)線檢、量、定準性密靈和特1 顏R)2 透明度clearit)3 凝固性coagulabilit)4 腦脊液有核細胞計數(shù)(CSF—
6 中性粒細胞E)7 淋巴細胞)8 單核細胞MO)9 潘氏試驗panystet)NUCL)5 腦脊液紅細胞計數(shù)CSF—RBC)4。標本類型4.1標本類型:新鮮。4。2標拒收條:拒延遲溫2h、藏6h未送達標本。4。3標保存與定性:般室溫1h檢驗,可胞數(shù)及。5.要求的容器、防腐劑或添加物、儀器、試劑或分析系統(tǒng)5。1標本容器BD無促凝成紅頭管或凈干燥帶玻璃管。5。2試劑5。2.1:生水白液劉氏快速瑞氏染色液
0。9%Nal液1%冰乙酸1ml析酸+蒸水至100ml)A液:曙紅、甲醇B液:亞甲藍潘氏試劑 10%苯酚液純酚10ml+蒸餾水至100ml)5。2。2試劑儲有效:試劑稱生理水冰乙酸1%乙酸10%苯酚溶液劉氏快速瑞氏染色液
存儲件有效期室溫 1年室溫 2年冷藏 1年室溫 1年室溫 2年
開瓶效期 位置1年 存貨柜/血常規(guī)室作臺1年 藥品柜1年 試劑箱1年 藥品柜6個月 藥品/染色操作臺5。3儀器S板.6.校準程序(計學(xué)源)不適用7.質(zhì)量控制,控制品使用水平和頻率,允許限的糾正措施不適用8。程序步驟8.1勻,300/μl個時或白增可產(chǎn)生濁),并記錄.8。2顯鏡檢查8.2.1胞計(無塊標)1)混總括CL。b)用作1:1稀釋,計數(shù)有核細胞數(shù)c)紅細胞數(shù)=細胞總數(shù)-有核細胞數(shù)(當白細胞數(shù)≥30個/μl,在白胞計數(shù)池直接分至少50個白細)(2)本:外觀 稀釋 樣本量 稀釋/溶解劑)稀釋標 粉/輕度混濁 1:20 20μl 380l本:于清 色/濁 1:50 10μl 490l潔試管 高/濁1:100 10μl 990l中按上表進行稀釋,用以計數(shù)細胞總數(shù);b)溶解RB:于清潔試管中按上表進行稀釋,用以計數(shù)有核細胞數(shù);c)沖池;計數(shù)d)紅細胞數(shù)=細胞總數(shù)-有核細胞數(shù)8。2.2有凝或稠標:1。(m×5min離,分上清和沉渣.(3混勻沉渣,涂片,用高倍鏡觀察NUCL、RBC。4。8。2.3離心獲取渣和上液:將完計數(shù)的CSF離心,2000rpm×5min離心,吸出上清液于另一試,并在試管上編號。8.2.4當L106/μl細片.類(分100個NUC;如見有不能分類細胞或懷疑有惡性細胞時,應(yīng)請示上級主管,由有經(jīng)驗的上級主管進行分析,并在報告時另行描述報告,如腦膜白血病或腫瘤細胞等。8.3潘氏試驗8.3。1試驗操:取小管一支加入10%的石酸溶液約5ml,用一吸管加滴CSF上清液立即在黑色背景燈照下觀察結(jié)果。8。3.2結(jié)果判:陰:清透明。弱陽性(±:呈白狀,在黑色背景下才能看到.陽性(+):灰色云狀。(2+:白色渾濁。(3+:白色濃絮狀沉.(4+:白色凝塊。9。計算結(jié)果原理9。1顏色9。1.1紅色:常見于穿刺傷或出性病變.為區(qū)蛛網(wǎng)下腔血和刺損應(yīng)注:1后:性,多出過4色,紅沉血.(2)紅細胞縮,僅見陳舊出,在刺損引起血時可看到,腦脊?jié)B透較血高所。9。1。2黃色:可因陳舊性蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血、椎管梗阻、化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、重癥如核黃疸等引起。9。1。3白色或灰白色:多因白細胞增加所致,常見于化膿性腦膜炎。9。1。4色或黑:常見腦膜黑素瘤。9.1.5綠色:可見于綠膿假單胞菌、肺炎鏈球菌、甲型鏈球菌引起的腦膜炎、高膽紅素血癥和膿性腦脊液。9.2透明度腦液混濁度與細數(shù)量有腦液中細數(shù)超過300×10/L可出現(xiàn)混濁蛋白含量加或大微生也可生混濁.9。3凝固:結(jié)性腦炎靜置12-24后,腔梗阻時,可產(chǎn)生黃色膠凍狀。9。4潘氏試驗:有腦組織和腦脊髓膜疾患時常成陽性反應(yīng)如化膿性腦脊髓膜炎、梅毒性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、脊髓灰質(zhì)炎、流行性腦炎等。腦出血時多呈陽性反應(yīng),如外傷性血液混入腦脊液中,亦呈陽性反應(yīng)。9。5細胞分類:951的CSF變的關(guān).9.5.2中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染、結(jié)核性或霉菌性腦脊髓膜炎時,細胞數(shù)可中度增加,常以淋巴細胞為主。9.5.3時化膜增加,以中。9。5。4生蟲病,可見較的嗜酸性細胞。9。5.4腦室或蛛網(wǎng)膜下腔出血時,腦脊液內(nèi)可見多數(shù)紅細胞。10。生物參考區(qū)間顏R) 色 (y)明(y)塊 潘 氏 試 驗陰性R性(pndse)數(shù) 成人0—8)×106/L中性粒細E)(0—6%)(CSF—NUCL) 童(0-15)106/L新生兒(0—8%)新生兒0—30)106/L淋巴細胞) (40-80%) 單核細胞M)成人(15—45%)新生5—35%) 新生(50-90%)紅細胞計數(shù)(F—0LC)(正常腦脊液中白細胞主要為淋巴細胞、單核細胞,之比約為7:3,可含極中粒細胞).11。警告值、急值適用)12。檢驗結(jié)可告區(qū)間13.對超出可報范圍的果的處理13.1如檢到菌時建議養(yǎng)確認.13.2有不能分細胞,請示上主管,并另行描述告,如膜白血或腫瘤胞。14.實驗室解釋15。安全防護措施15。1有樣品按有潛在染性的標處理。15。2測定完成后,上清及沉渣管于2000mg/L有效消液泡4小時上,倒入醫(yī)療物水槽,由醫(yī)院一毒理塑試或器容等療棄倒入黃色療圾袋,貼上標并口由院一毀理。15。3原液保存48小時或以上,倒入黃色醫(yī)療
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