溶出度試驗的相關理論

關于溶出度試驗的相關理論第1頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三2一、概念與適用范圍1、概念溶出度：藥物從制劑中溶出的速率與程度（評價藥品有效性）包括溶出度與釋放度。溶出度試驗是評價口服固體制劑內在質量的一種重要手段，旨在保證不同生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的同一藥品的口服固體制劑具有相同的品質和療效。2、適用范圍2.1水中難溶藥物的制劑2.2水中雖易溶，但處方與工藝造成阻溶的制劑2.3治療劑量與中毒劑量接近的制劑2.4緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑、透皮貼劑等2.5易溶的藥物，也應考察溶出度第2頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三3二、溶出度試驗的意義固體制劑口服給藥后，藥物的吸收取決于藥物由制劑中的釋放、生理條件下藥物的溶出度或溶解作用及藥物在為胃腸道的生物膜通透性。而藥物制劑中的釋放、生理條件下藥物的溶出度具有決定性作用，因此藥物的體外溶出度有可能預測體內行為。1、評價制劑批間的質量的一致性；2、指導新制劑的開發(fā)；3、產(chǎn)品發(fā)生某些變更后，如處方、生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)場所的變更和生產(chǎn)工藝的放大后，確保藥品質量和療效的一致性。第3頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三4如何將原料制成（固體）制劑即如何科學、有效地進行制劑工藝/處方/輔料的篩選主要評價：溶出度試驗第4頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三5

從專業(yè)角度看：療效的優(yōu)劣，即藥物在體內吸收的多寡，是與生物利用度緊密相關的。一個優(yōu)質藥品，在采用一定的裝置與轉速條件下（通常認為槳板法/50轉最接近中老人人群），在pH值的寬范圍內（即多種溶出介質中）可能均有一定溶出與釋放，這樣就可保證該藥品用于人體時，可在各種體內環(huán)境下，對任何體質患者均有一定療效！劣質藥品，可能只在一種體內環(huán)境下（如青壯年、胃酸正常者）才有一定的溶出和吸收，而在其他體內環(huán)境下可能崩解、溶出就會很差，生物利用度也就很低。如果某制劑，僅在pH1.2條件下體外溶出較好，在pH6.8條件下體外溶出較差，結果也許只能保證對于胃酸正常的患者吸收良好，而對胃酸缺乏的患者可能就會很差了。第5頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三6療效的優(yōu)劣體內生物利用度的差異體外溶出曲線的不同制劑的優(yōu)劣關鍵、核心第6頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三7生物利用度體外多條溶出曲線處方/輔料/制劑工藝原研藥生物利用度體外多條溶出曲線處方/輔料/制劑工藝仿制藥相同相同不同90%企業(yè)界的使命仿制藥研發(fā)思路→“殊途同歸”第7頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三8均能夠具有相似的溶出曲線生物等效大多數(shù)藥物極少數(shù)藥物生物不等效體外溶出度試驗，在各種溶出介質中，在嚴格的溶出度條件下（低轉速）生物等效性試驗這樣就大大提高了生物等效性(BE)試驗的成功率！但并不能替代BE試驗！第8頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三9pH7溶出度pH10204060801000204060..0204060801000204060Time(min)02460510152025Time(h)02460510152025胃酸正?；颊哳A測體內血藥濃度實測體內血藥濃度胃酸缺乏患者A藥廠產(chǎn)品B藥廠產(chǎn)品01234567010203040Time(h)01234567010203040Time(h)年輕人老年人第9頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三10三、溶出度曲線的測定日本仿制藥申報要求，體外至少四條溶出曲線與原研制劑一致，方可申報。世界衛(wèi)生組織、美國與歐盟要求皆雷同日本。我國新藥審評中心2010年9月發(fā)布了“關于仿制藥通用技術文件（簡稱:CTD）申報資料提交要求征求意見的通知”，其中明確規(guī)定“需進行多溶出介質中的比對研究”！說明自研產(chǎn)品與對照藥品在不同溶出條件下的溶出曲線比較研究結果（采用f2相似因子的比較方式）。第10頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三11溶出度曲線的具體操作1、溶出介質選擇（不少于四種）：【普通制劑】(1)酸性藥物pH值分別為1.2、5.5-6.5、6.8-7.5和水；(2)中/堿性藥物和包衣制劑pH值分別為1.2、3.0~5.0、6.8和水；(3)難溶性藥物制劑pH值分別為1.2、4.0-4.5、6.8和水；(4)腸溶制劑pH值分別為1.2、6.0、6.8和水；【緩/控釋制劑】pH值分別為1.2、3.0～5.0、6.8～7.5和水。與美國作法有所不同：美國統(tǒng)一采用1.0、4.5、6.8和水。無論何種制劑都不建議采用pH7.6以上的介質進行；第11頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三12<對參比制劑的遴選>從市場上購買來不同時間點的不同批號，分別測定，觀測溶出曲線波動情況。酌情審定<對仿制制劑樣品的要求>生產(chǎn)規(guī)模10萬單位或今后最大生產(chǎn)規(guī)模的1/10。

含量與參比制劑的差值應在5%以內。

選用的樣品應在重量/裝量差異所規(guī)定范圍的1/2內。<對測定樣品數(shù)的要求>

理論上個測定12個單位，現(xiàn)實情況測定6個單位即可，第12頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三132、測定時間點的確定普通制劑與腸溶制劑可為5、10、15、20、30、45、60、90、120分鐘，此后每隔1小時直至6小時止；緩控釋制劑可為15、30、45、60、90、120分鐘，3、4、5、6、8、10、12、24小時。當連續(xù)兩點溶出率均達90%（緩控釋制劑為85%）以上、且差值在5%以內時，試驗則可提前結束。<對于結束時間點>在酸性介質中最長測定時間為2小時，在其他各pH值介質中普通制劑為6小時，緩控釋制劑為24小時。

第13頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三143、累積釋放度校正計算公式3.1補液時各時間點校正后的累積溶出量（%）其中Cn為各時間點取出后的樣品濃度；L為制劑標示量（單位需與Cn一致）V1為各時間點固定取樣體積V2為溶出介質體積第14頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三153.2不補液時：各時間點校正后的累積溶出量（%）其中Cn為各時間點取出后的樣品濃度L為制劑標示量（單位需與Cn一致）V1為各時間點固定取樣體積V2為溶出介質體積第15頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三164、曲線比較法美國和日本等國家的官方機構采用相似因子的模型非依賴方法，采用“相似因子”和“差異因子”比較溶出度曲線。通過計算差異因子（f1)和相似因子（f2）比較溶出行為的相似性，4.1相似因子（f2)的計算其中Rt和Tt分別表示兩制劑在第n個取樣點時的平均累積溶出率第16頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三174.2差異因子（f1)的計算其中n為時間點個數(shù)，Rt為參照批次（改變前）藥品在時間t的溶出度值，Tt為試驗批次（改變后）藥品在時間t的溶出度值第17頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三185、計算時間點的確定：計算時所選取的時間點相隔無需相等，但兩制劑所取時間點必須一致；且計算時間點應不少于3個，由于該計算結果有賴于比較時間點個數(shù)的特性，故溶出率在85%以上的時間點應不得多于一個。建議依據(jù)參比制劑溶出率的具體情況，選取溶出率間隔相近的4~5個時間點進行計算，除0小時外，第一選取時間點溶出結果的變異系數(shù)應不得過20%，自第二時間點至最后時間點溶出結果的變異系數(shù)應不得過10%，如超過，應從儀器適用性或樣品的均一性角度考慮予以解決。第18頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三196、溶出曲線相似性的判定通常，根據(jù)每一時間間隔時兩條曲線的平均溶出度值，計算差異因子和相似因子，當f1值接近0，f2值接近100時，認為兩曲線相似。一般情況，f1值達15（0-15）;f2高于50（50-100），則兩條曲線可確認為相同性或等價性。后來普遍采用f2比較法，當f2數(shù)值介于50-100認為兩條溶出曲線是相似的，該數(shù)值限定是基于兩條比較曲線上任一比較時間點溶出量平均差異限度不大于10%的考慮，溶出度平均差異與相應f2因子臨界值的關系：由于曲線形式多樣，根據(jù)曲線的不同形態(tài)，分別擬定了限度值比較時間點溶出量平均差異2%5%10%15%20%F2因子臨界值8365504136第19頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三206.1普通與腸溶制劑【用于仿制藥時）（1）參比制劑在15分鐘內平均溶出率達85%以上，仿制制劑在15分鐘內平均溶出率也達85%以上；或15分鐘時，仿制制劑與參比制劑平均溶出率的差在±15以內。（2）參比制劑在15~30分鐘平均溶出率達85%以上時，f2因子大于42.(3)參比制劑在30分鐘內平均溶出率未達85%，但只要滿足一下任何一個條件仍可判定為相似。a.參比制劑平均溶出率在結束時間內達85%以上時，f2因子大于42.B.參比制劑平均溶出率在結束時間內達50%以上但未達85%時，f2因子大于46.C.參比制劑平均溶出率在結束時間內未達50%時，f2因子大于53.第20頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三21【用于其他各事項時】：（1）原制劑在15分鐘內平均溶出率達85%以上，變更后制劑在15分鐘以內平均溶出率也達85%以上；或15分鐘時兩者的平均溶出率差在±10%以內。（2）原制劑在15~30分鐘平均溶出率達85%以上時，f2因子大于50.（3）原制劑在30分鐘內平均溶出率未達85%，但只要滿足一下任何一個條件仍可判定為相似。原制劑平均溶出率在結束時間內達85%以上時，f2因子大于50原制劑平均溶出率在結束時間內達50%以上但未達85%時，f2因子大于55原制劑平均溶出率在結束時間內未達50%，f2因子大于61。第21頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三226.2調釋制劑：中國藥典所定義的緩釋制劑、控釋制劑以及遲釋制劑均屬于調釋制劑的范疇?！居糜诜轮扑幯邪l(fā)時】（1）參比制劑在結束時間內平均溶出率達80%以上，f2因子大于50

（2）參比制劑在結束時間內平均溶出率達50%以上但未達80%時，f2因子大于55

（3）參比制劑在結束時間內平均溶出率達未50%，f2因子大于61第22頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三23對于仿制藥、為提高生物等效性試驗成功率、如何確定體外溶出度試驗條件與參數(shù)？至關重要第23頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三24四、溶出度方法的建立1中、美、英、日四國藥典收錄情況中國轉籃法、槳法、小杯法（2010版）美國轉籃法、槳法、流池法、往復筒法、圓筒法、槳碟法、往復架法英國轉籃法、槳法、槳碟法、流池法日本轉籃法、槳法、流池法第24頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三252、使用范圍2.1轉籃法適用于：膠囊、丸劑、片劑、漂浮的制劑不適用于：崩解型片崩解后顆粒下沉的片劑，或粘性易堵塞篩網(wǎng)的制劑2.2漿法片劑、膠囊、丸劑崩解型片崩解后顆粒下沉的片劑，底部易形成“錐形堆積”——應使用槳法2.3小杯法小劑量的片劑、膠囊、丸劑一般僅供UV—VIS測定如用HPLC測定，一般應采用籃法或槳法第25頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三263.ChP2010溶出度的變化3.1.擴大了籃、軸和槳的材料范圍不銹鋼→不銹鋼或其他惰性材料3.2.溶出杯：高：168±8mm→185±25mm3.3.籃的尺寸籃網(wǎng)絲徑：0.25mm→0.28±0.03mm網(wǎng)孔：0.4mm→0.4±0.04mm籃內徑：20.2mm→20.2±1mm靠攏通氣孔：2.0mm→2.0±0.5mm2.4.籃法：先開啟轉動，再降入杯中→先降入杯中，再開啟轉動2.5.槳法：先開啟轉動，再投藥→先投藥，再開啟轉動2.6取樣點：籃(槳)上部至液面中間距杯壁10mm處→不小于10mm處第26頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三274.溶出度方法選擇的一般原則：4.1對于非崩解型藥物，宜采用轉籃法4.2對于崩解型藥物，在進行轉籃法的整個試驗過程中，確保轉籃的通透性尤為重要，對于處方中主藥或輔料（如膠性物質），影響轉籃通透性的固體制劑，一般用漿法4.3制劑中含有難以溶解，擴散的成分，一般應用漿法4.4對于漂浮的制劑，一般應用轉籃法，如輔料堵塞網(wǎng)孔，則應選用漿法，將供試品放入沉降籃中，并在正文中加以規(guī)定，采用小杯法時不能用沉降籃。4.5小杯法主要用漿法條件下，溶出液的濃度過稀，即使采用靈敏度低的方法也難以進行定量測定的品種

第27頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三285、轉數(shù)的選擇：在研究基礎上，盡量選擇低轉速。轉籃法以100轉/分為主;槳法以50轉/分為主。小杯法—適用于小劑量片劑、膠囊，推薦35轉/分，一般使用35～50轉/分。。流體力學效應認為：轉籃法100轉/分≌槳法50轉/分≌小杯法35轉/分注：機械參數(shù)的選擇一定要具有區(qū)分力。如設定得寬松（如槳板法/100轉、加高濃度表面活性劑、甚至有機溶劑），則于體內的評價可能就會失去意義，建立不起體內外相關性，也無法評價生物等效性了第28頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三29

溶出度試驗中的“轉速”與生物利用度的相關性槳板法100轉槳板法50轉0500100015000246810Time(h)Conc(ng/ml)020406080100024681012Time(h)%dissolvedA藥廠產(chǎn)品B藥廠產(chǎn)品020406080100024681012Time(h)%dissolved身體機能良好者體內02004006008000246810Time(h)Conc.(ng/ml)身體機能虛弱者體內相關不相關相關第29頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三306、介質體積選擇：溶出介質的體積一般應符合漏槽條件，漏槽條件是指藥物在溶出或釋放介質中的濃度遠小于其飽和濃度，一般溶出（釋放）的介質體積為藥物飽和溶液所需介質體積的3~10倍。一般一個劑量單位以溶劑900ml或1000ml為最普遍，規(guī)格較小時也可使用常用體積的1/2～3/4。后來增加了小杯法（即溶出度測定法第三法），小杯法常用體積為100～250ml。每個溶出杯中只允許放一片（粒）制劑第30頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三317、溶出介質選擇應根據(jù)制劑的特性選擇用水、0.01~0.1mol/L的鹽酸溶液或適宜的緩沖液（pH一般不超過7.6）。應臨用新配經(jīng)脫氣處理，對于極難溶出的品種，可適量加入表面活性劑（如0.5%以下的十二烷基硫酸鈉），如確需使用有機溶劑，可適量加入，如異丙醇、乙醇等（濃度通常5%以下），但應有依據(jù)并盡可能選用低濃度。必要時應做生物利用度考察。通過測定藥物在不同介質中的溶出曲線（通常應測定至藥物全部溶出）來選擇適宜的溶出介質。7.1原則：所選介質應能靈敏地反映制劑生產(chǎn)工藝的變化，不推薦嚴格模擬體內胃腸道環(huán)境7.2介質種類7.2.1水——最常用，良好脫氣水的pH值為5.0～7.0適用于溶解度對pH值不敏感的藥物水的表面張力大，對某些藥物可能不適用第31頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三327.2.2酸溶液——模擬酸性胃液的介質適用于酸中穩(wěn)定的藥物濃度一般為0.1～0.01mol/L，pH值一般為1.0～2.27.2.3醋酸鹽緩沖液——模擬中等酸性胃液的介質濃度一般為0.05mol/L，pH值一般為3.4～6.0醋酸易揮發(fā)，導致pH值變化，溶出速率變化測定時間長的藥物不宜采用醋酸鹽緩沖液作介質7.2.4磷酸鹽緩沖液(PBS)——模擬中等酸性至弱堿性胃液或腸液的介質濃度一般為0.05mol/L，pH值一般為4.5～7.6第32頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三337.3介質的pH值溶解度對pH值不敏感的藥物，一般首選水溶解度對pH值敏感的藥物適合胃內溶出的藥物,應考慮不同人群胃酸分泌量的差異，確保各類人群用藥有效，一般應選擇溶解度較小的pH值介質對于弱酸性藥物，一般選擇酸性介質對于弱堿性藥物，一般選擇近中性或弱堿性介質考慮藥物的穩(wěn)定性，選擇藥物較穩(wěn)定的pH值介質介質pH值應準確至規(guī)定值的±0.05，介質的pH值一般不超過7.6。如需使用更高pH值的介質，則應有充分的理由并進行驗證腸溶制劑：建議先用酸性介質，然后添加適宜溫度的緩沖溶液，再用酸或堿調節(jié)至所需的pH值第33頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三348、介質的溫度：口服制劑：37±0.5℃直腸用制劑：38±0.5℃經(jīng)皮給藥制劑：32±0.5℃第34頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三359、取樣時間及限度的確定應考慮臨床用藥需求及制劑的特點，考察溶出曲線，確定取樣時間,一般取樣品時間為45分鐘。復方制劑在溶出度測定時重點針對難溶性或治療窗窄的成分進行。限度:對于普通制劑，建議以第一次出現(xiàn)溶出量均在85%以上的兩時間點，且該兩時間點溶出量差值在5%以內時，取前一時間點作為質量標準中的取樣時間點，并將該點得溶出量減去15%作為溶出限度，如第一時間點為20，由于其不為刻鐘的整數(shù)倍，一般同法順延至30分鐘。對于調釋制劑，溶出度應至少設定三個取樣時間點；第一點是為避免“突釋”故應設定為試驗1~2小時后或溶出量相當于標示量20%~30%時間點；第二點是為考察藥品溶出度特性，該限度應設定在溶出量約50%時間點；最后一點是為確保藥物（幾乎）定量釋放，通常為藥物溶出量超過70%時間點，任何一點的擬定范圍建議勿超過標示含量的20%，且各點溶出限度交叉范圍的建議勿超過20%。第35頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三36五、溶出度方法的驗證溶出度方法驗證與含量測定基本相同：包括：專屬性、線性、耐用性、精密度、回收率、溶液穩(wěn)定性等值得注意的是：1、含量測定回收率一般選用測試濃度的80～120％，高、中、低濃度規(guī)定為80%、100%、120%；對于溶出度范圍則規(guī)定為限度的20%，高、中、低三濃度設為：50%、限度規(guī)定、100%。2、干擾試驗：測定干擾性試驗在2%以下可忽略不計，2-5%之間可適當將限度提高，超過5%則測定方法不可取，如果是空膠囊產(chǎn)生的應進行膠囊的消除試驗（不大于標示量2%可忽略不計，大于標示量25%，試驗無效）?？漳z囊僅對UV測定有吸收干擾，如用UV方法測定溶出度，每次均應進行空白膠囊試驗，因為膠囊殼的批次、來源不同，則UV吸收不同，會給結果帶來誤差，當空膠囊干擾較大時，建議采用HPLC測定第36頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三37六、影響溶出度測定的因素

1.儀器的影響1.1.儀器的工作環(huán)境應置無強光照射、氣流穩(wěn)定的位置、遠離振動源、底腳加減振海綿或橡膠（儀器振動位移為0.025毫米時，溶出增加5～10％）1.

2儀器本身因素儀器的水平度、轉桿的垂直度杯邊高1mm，溶出量增加約3%轉桿傾斜2～5°，溶出量增大2～25%轉桿與杯板垂直度轉桿與溶出杯中心度中心偏離1mm，溶出量約增加3%偏離2mm，約增加8%第37頁，講稿共43頁，2023年5月2日，星期三382.介質的影響2.1介質的pH值影響藥物的溶出度、影響藥物的吸收系數(shù)、影響藥物的穩(wěn)定性、水的pH值不確定性潑尼松校正片(FDA10mg片)以pH為6.0、6.6和7.4的水作介質，溶出結果有2