實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)-臨床常用免疫學(xué)檢查-課件

臨床常用免疫學(xué)檢查血清免疫球蛋白檢測(cè)血清補(bǔ)體檢測(cè)細(xì)胞免疫的檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)自身抗體檢測(cè)其他免疫檢測(cè)盧葵花二0一一1ppt課件概述：

隨著社會(huì)進(jìn)步和醫(yī)學(xué)科學(xué)發(fā)展，臨床免疫學(xué)檢查在實(shí)驗(yàn)診斷中的比重越來(lái)越大，是迄今最特異、最靈敏的檢測(cè)方法，已被廣泛用于醫(yī)學(xué)臨床與實(shí)驗(yàn)研究的各個(gè)領(lǐng)域，成為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的一個(gè)重要組成部分。2ppt課件概述：

免疫學(xué)檢驗(yàn)的檢測(cè)對(duì)象是具有免疫活性的物質(zhì)，抗原和抗體是免疫學(xué)檢驗(yàn)的兩個(gè)重要因素，也是免疫學(xué)反應(yīng)的基本條件，利用其不同的反應(yīng)類型，建立了各種不同的免疫學(xué)技術(shù)。3ppt課件免疫學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介方法：散射比濁法、免疫電泳法、標(biāo)記免疫法4ppt課件免疫電泳法是將免疫擴(kuò)散和電泳相結(jié)合的一種免疫學(xué)分析法，是免疫學(xué)基本技術(shù)之一。樣品中的各種蛋白質(zhì)成分可被分成肉眼不可見(jiàn)的若干區(qū)帶。當(dāng)停止電泳后，在與電泳方向平行的抗體槽中注入抗體，進(jìn)行擴(kuò)散反應(yīng)，當(dāng)相應(yīng)的抗原抗體結(jié)合后，形成肉眼可見(jiàn)的沉淀弧。常見(jiàn)用于分析許多疾病中出現(xiàn)的異常免疫球蛋白及片段。5ppt課件標(biāo)記免疫是免疫技術(shù)和標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合的一門(mén)檢測(cè)技術(shù)。

免疫技術(shù)：利用Ag+Ab=Ag－Ab，以Ag或Ab作試劑，檢測(cè)對(duì)應(yīng)的Ab或Ag。

標(biāo)記技術(shù)：利用可提供探測(cè)信號(hào)的標(biāo)記（如放射性核素、酶、熒光素），標(biāo)記Ag或Ab，抗原抗體反應(yīng)后探測(cè)標(biāo)記信號(hào)，反映受檢Ag或Ab行為。特點(diǎn)：高度特異性（免疫技術(shù)），高度敏感性（標(biāo)記技術(shù)）。6ppt課件標(biāo)記免疫

按標(biāo)記不同，標(biāo)記免疫分析可分為：放射免疫分析（RIA），用放射性核素作標(biāo)記；酶免疫分析（EIA），用酶作標(biāo)記；熒光免疫分析（FIA），用熒光物作標(biāo)記；發(fā)光免疫分析（LIA），發(fā)光物作標(biāo)記。7ppt課件

本章就臨床常用的免疫學(xué)檢查,包括血清免疫球蛋白檢測(cè)、血清補(bǔ)體檢測(cè)、細(xì)胞免疫的檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物監(jiān)測(cè)、自身抗體檢測(cè)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)等作一簡(jiǎn)介。8ppt課件

免疫球蛋白檢測(cè)

(immunoglobulin,Ig)

免疫球蛋白是一組具有抗體活性或抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白，由漿細(xì)胞所合成與分泌，廣泛地存在于機(jī)體的血液、體液、外分泌液和B淋巴細(xì)胞膜的表面?？煞譃镮gG、IgA、IgM、IgD和IgE五類。9ppt課件分子量較大的一對(duì)肽鏈稱為重鏈（Heavychain，H鏈），不同的重鏈由于氨基酸殘基的排列順序、二硫鍵的數(shù)目和位置、含糖的種類及數(shù)量不同，其抗原性也不同。根據(jù)H鏈抗原性的差異可將其分為5類：μ鏈、γ鏈、α鏈、δ鏈和ε鏈，每個(gè)Ig分子的兩條重鏈亦完全相同。L鏈共有兩型，Kappa(κ）與Lambda（λ）。同一個(gè)免疫球蛋白單體分子上的L鏈型別完全相同。10ppt課件分類百分比參考值IgG70%-80%7.0-16.6g/LIgA10%-15%0.7-3.5g/LIgM5%-10%0.5-2.6g/LIgD0.02%-1%0.6-2.0mg/LIgE0.002%0.1-0.9mg/L正常人群各年齡段個(gè)體中血清IgG、IgA、IgM的含量有很大差異11ppt課件測(cè)定方法

血清中含量較高的

IgG、IgA、IgM多采用單向免疫擴(kuò)散法、火箭免疫電泳法和免疫比濁法，而標(biāo)本中含量極微的IgD和IgE則采用敏感度較高的放射免疫法和酶免疫法等進(jìn)行定量測(cè)定。12ppt課件

IgG

占總Ig的70%~80%是血清中的主要抗體，主要由脾臟和淋巴結(jié)合成，在機(jī)體的免疫防御中起重要作用，抗細(xì)菌、病毒和寄生蟲(chóng)等，還具抗毒素作用，為不完全抗體，分子量?。?50000），唯一能自由地通過(guò)胎盤(pán)。半衰期約為23天，故臨床上使用丙球作治療時(shí)以2～3周注射一次13ppt課件IgA

約占血清總Ig

10%~15%分為血清型與分泌型兩種，具有抗細(xì)菌、抗病毒、抗毒素作用，其中的分泌型（SIgA）在局部與抗呼吸道、消化道和泌尿生殖道感染、炎癥或腫瘤等病變密切相關(guān),是抗過(guò)敏的重要免疫屏障。

SIgA唾液平均為0.3g/L,初乳平均為5.06g/L,糞便平均為1.3g/L。14ppt課件

IgM

約占血清總Ig的5%~10%分子量最大（900000），由五個(gè)IgM單體連接而成，故又稱巨球蛋白。脾臟是它的主要合成部位，IgM主要分布于血液中，防止發(fā)生菌血癥方面起重要作用，半衰期5天左右。

天然同族凝集素抗A抗B、冷凝集素及傷寒沙門(mén)菌的抗體均屬此類。15ppt課件

IgM在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，最先出現(xiàn)的球蛋白，當(dāng)機(jī)體受抗原刺激后，也是最早出現(xiàn)的抗體，在補(bǔ)體和吞噬細(xì)胞參與下，其殺菌、溶菌、激活補(bǔ)體和促進(jìn)吞噬等作用均顯著強(qiáng)于IgG幾百倍。在機(jī)體的早期免疫防御中占有重要地位。16ppt課件臨床意義：

IgG、IgA、IgM在參與機(jī)體的特異性體液免疫反應(yīng)中擔(dān)負(fù)了重要的作用,維持人體內(nèi)的生理性動(dòng)態(tài)平衡,對(duì)抗外來(lái)病原微生物的侵襲有保護(hù)功能,常規(guī)檢測(cè)了解Ig水平,可作為反映人體體液免疫狀況的指標(biāo).

17ppt課件1、IgG是主要的抗感染抗體抗菌性抗體抗毒素性抗體保護(hù)性抗體抗病毒性抗體抗自身組織或細(xì)胞成分的抗體損傷性抗體18ppt課件2、IgM

是病原體感染或人工免疫后最先出現(xiàn)的抗體,針對(duì)變性自身蛋白成份時(shí),對(duì)機(jī)體有病理性損傷.19ppt課件在臨床上許多疾病都可出現(xiàn)Ig水平的高度異常,這些指標(biāo)的變化有助于臨床診斷和判斷預(yù)后,也可作為考核療效的指標(biāo).20ppt課件高Ig血癥慢性細(xì)菌感染:肺結(jié)核,麻風(fēng),慢性支氣管炎,感染早期IgM顯著升高，以后IgG升高，IgA也可升高。自身免疫性疾?。篠LE患者多有血清IgG、IgA、IgM的升高，血清Ig升高的程度與疾病的活動(dòng)程度明顯相關(guān)，RA患者也有血清Ig的升高，但以IgM升高更為明顯。21ppt課件慢性肝臟疾病：慢性活動(dòng)性肝炎，肝硬化，肝癌等患者血清Ig都有不同程度的升高，膽道阻塞時(shí)，血清IgA可升高。漿細(xì)胞病變：淋巴瘤、漿細(xì)胞惡性病變，MM，巨球蛋白血癥等患者血清中可有異常升高Ig和輕鏈的片段，但以單克隆升高為主。22ppt課件低Ig血癥

先天性低Ig血癥：主要見(jiàn)于先天性體液免疫缺陷或體液免疫與細(xì)胞免疫的聯(lián)合缺陷，IgG＜1g/L，IgA和IgM為正常人的1%。

IgG缺陷患者常易有反復(fù)發(fā)生的化膿性感染。IgA缺乏者極易有反復(fù)呼吸道感染，

IgM缺乏者易患革蘭氏陰性菌敗血癥。23ppt課件獲得性低Ig血癥：主要見(jiàn)于某些病毒感染后對(duì)機(jī)體免疫功能的破壞，患者在感染前體液免疫指標(biāo)正常，以后血清Ig水平降低。因疾病丟失的低Ig血癥：最常見(jiàn)腎病綜合征患者，終末期尿毒癥患者，因大量蛋白從尿中丟失。嚴(yán)重胃腸疾患因合成↓，代謝增加。24ppt課件

3、IgE增高：見(jiàn)于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、肝臟病、結(jié)節(jié)病、RA和各種過(guò)敏性疾病。

IgE降低：見(jiàn)于丙種球蛋白缺乏癥、惡性腫瘤、長(zhǎng)期用免疫抑制劑者和共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥等。

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檢測(cè)到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖性疾病。見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、重鏈病、輕鏈病和半分子病等。26ppt課件血清補(bǔ)體的檢測(cè)

補(bǔ)體（complement,C）是存在于正常人和動(dòng)物血清中的一組與免疫有關(guān)的具有酶活性的球蛋白，不穩(wěn)定，加熱56℃30分鐘即被滅活。補(bǔ)體成分有C1(C1q、C1rC1s)C2……C9等9個(gè)成份(11種球蛋白)，各成分通常以非活性狀態(tài)存在于血清和體液中，需經(jīng)激活才能表現(xiàn)出生物學(xué)活性。補(bǔ)體：是一組具有酶原活性的糖蛋白，由傳統(tǒng)途徑的9種成分C3-C9、旁路途徑的3種成分及其衍生物組成，參與滅活病原體的免疫反應(yīng)，也參與破壞自身組織和自身細(xì)胞而造成的免疫損傷。

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正常人血清中的補(bǔ)體含量相對(duì)穩(wěn)定。只有在患病時(shí)補(bǔ)體含量才會(huì)發(fā)生變化，因此測(cè)定補(bǔ)體的含量對(duì)于診斷自身免疫性疾病、免疫復(fù)合物引起的變態(tài)反應(yīng)性疾病、補(bǔ)體缺陷病等都有一定的意義。28ppt課件總補(bǔ)體溶血活性檢測(cè)

總補(bǔ)體溶血活性（CH50）以溶血素（抗體）致敏的綿羊紅細(xì)胞（抗原抗體復(fù)合物）激活待測(cè)血清中的C1

，進(jìn)而引起補(bǔ)體活化的連鎖反映，在綿羊紅細(xì)胞上形成多分子的聚合物，影響其膜表面的結(jié)構(gòu)與功能，最終導(dǎo)致綿羊紅細(xì)胞溶解。溶血程度與補(bǔ)體量呈正相關(guān)，為S形曲線。故一般以50%溶血作為檢測(cè)終點(diǎn)。29ppt課件

【參考值】試管法50～100kU/L主要檢測(cè)補(bǔ)體傳統(tǒng)途徑活化的活性程度。反映的是補(bǔ)體9種成分的綜合水平。1、CH50

增高見(jiàn)于急性炎癥、組織損傷和某些惡性腫瘤；30ppt課件2、CH50

降低見(jiàn)于嚴(yán)重反復(fù)的細(xì)菌感染,各種免疫復(fù)合物性的疾病，如腎小球腎炎、RA、SLE、強(qiáng)直性脊柱炎等自身免疫性疾病的活動(dòng)期。補(bǔ)體活化過(guò)度，血清補(bǔ)體水平下降。大S燒傷，大出血及腎病綜合征等大量補(bǔ)體蛋白丟失。急、慢性肝炎、肝硬化或肝癌患者，血漿蛋白合成不足。31ppt課件補(bǔ)體C3檢測(cè)是一種由肝臟合成的β2-球蛋白，由α和β兩條多肽鏈組成。是傳統(tǒng)途徑和旁路途徑被激活的關(guān)鍵物質(zhì)。[參考值]0.8～1.5g/L32ppt課件[臨床意義]正常人血清中補(bǔ)體組分的含量相對(duì)穩(wěn)定，患病時(shí)，補(bǔ)體在體內(nèi)合成降低，活化代謝增強(qiáng)和消耗異?；蛳忍煨匀毕菘梢鹧逯懈餮a(bǔ)體組分水平的變化。33ppt課件增高：由于急性期反應(yīng)使補(bǔ)體合成增多，它可與其它血漿蛋白的改變相伴隨，如CRP的增多和TRF（轉(zhuǎn)鐵蛋白）降低。總補(bǔ)體活性以及C3和C4的含量增多，見(jiàn)于所有風(fēng)濕性疾病的急性期，如RA（伴有關(guān)節(jié)外表現(xiàn)時(shí)可↓），風(fēng)濕熱，強(qiáng)直性脊柱炎34ppt課件

其它疾患如急性病毒性肝炎，急性心梗，癌，糖尿病，妊娠，結(jié)節(jié)病淀粉樣變性，甲狀腺炎，傷寒，大葉性肺炎和小腸炎性病等補(bǔ)體值↑35ppt課件減低：⑴分解增加，任何與循環(huán)復(fù)合物有關(guān)的疾病如：大多數(shù)急性腎小球腎炎、鏈球菌感染后腎炎、狼瘡性腎炎患者。還見(jiàn)于活動(dòng)性SLE和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。36ppt課件⑵合成↓如嚴(yán)重肝臟疾患⑶先天性缺陷（僅有一種補(bǔ)體）⑷其它：肝素、人造腎的透析膜（使活化）37ppt課件細(xì)胞免疫的檢測(cè)

淋巴細(xì)胞（lymphocyte）是體內(nèi)分布廣泛、種類繁多且功能各異的細(xì)胞群體?？煞譃門(mén)、B和NK等細(xì)胞群，它們又可分為若干亞群，各有其特異的表面標(biāo)志和功能。各種淋巴細(xì)胞形態(tài)相似，在一般光鏡下不易區(qū)分。

38ppt課件T細(xì)胞花結(jié)形成試驗(yàn)

用于檢測(cè)T細(xì)胞的數(shù)量。

T細(xì)胞表面有綿羊紅細(xì)胞（SRBC）受體，可與SRBC結(jié)合形成花結(jié)樣細(xì)胞，稱為紅細(xì)胞玫瑰花結(jié)形成試驗(yàn)或E玫瑰花結(jié)形成試驗(yàn)（ERFT）。顯微鏡下計(jì)數(shù)花結(jié)形成細(xì)胞占淋巴細(xì)胞的比例，以每個(gè)淋巴細(xì)胞黏附3個(gè)或3個(gè)以上羊紅細(xì)胞者為花結(jié)形成細(xì)胞。

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【參考值】EtRFC為64.4±6.7%

【臨床意義】①降低；見(jiàn)于免疫缺陷性疾病，如惡性腫瘤、免疫性疾病、某些病毒感染、大面積燒傷、多發(fā)性神經(jīng)炎等。②升高：見(jiàn)于甲亢、甲狀腺炎、重癥肌無(wú)力、慢性活動(dòng)性肝炎、SLE活動(dòng)期和器官移植排斥反應(yīng)等。

40ppt課件腫瘤標(biāo)志物檢查

是由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)，主要包括蛋白質(zhì)類、糖類物質(zhì)和酶類腫瘤標(biāo)志物。41ppt課件甲胎蛋白測(cè)定(由胎肝和卵黃囊合成的特殊蛋白質(zhì)，電泳時(shí)位于白蛋白和α球蛋白之間，胎兒出生后一到兩周即消失）癌胚抗原測(cè)定（CEA）

胚胎期主要存在于胎兒的胃腸管、胰腺和肝臟，出生后含量極低。胃腸道惡性腫瘤時(shí)↑↑，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。42ppt課件

甲胎蛋白測(cè)定定性陰性定量<25μg/L升高見(jiàn)于：原發(fā)性肝癌、消化道腫瘤、支氣管腫瘤、生殖腺胚胎瘤、病毒性肝炎及肝硬化等。生理性↑見(jiàn)于孕婦。原發(fā)性肝癌陽(yáng)性率可達(dá)75%~80%以上，其值可達(dá)300μg/L以上43ppt課件癌胚抗原測(cè)定（CEA）胎兒早期的消化管及某些組織合成，孕六個(gè)月后含量逐漸減少，出生后含量極低，對(duì)腫瘤的診斷、預(yù)后、復(fù)發(fā)判斷有意義。正常低于15μg/L。↑↑見(jiàn)于90%的胰腺癌、74%的結(jié)腸癌、60%的乳腺癌，常高于60μg/L。44ppt課件結(jié)腸炎、胰腺炎、肝臟疾病、肺氣腫及支氣管哮喘也可升高。胃癌病人胃液和唾液中可檢測(cè)出CEA。45ppt課件自身抗體的檢測(cè)

某些原因削弱或破壞健康人的自身免疫耐受，使得自身免疫系統(tǒng)對(duì)自身組織或成分產(chǎn)生免疫應(yīng)答，稱為自身免疫。由此所產(chǎn)生的疾病稱為自身免疫病，診斷方法是作自身抗體免疫檢測(cè)。46ppt課件類風(fēng)濕因子RF

RF最初由Rose(1948)在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清中發(fā)現(xiàn)的。RF與天然IgG結(jié)合的能力較差，最易與免疫復(fù)合物中的IgG或聚合的IgG結(jié)合，活化補(bǔ)體，或被吞噬C吞噬，后者釋放的溶酶體酶、活性肽、膠原酶、前列腺素E2等，可造成骨關(guān)節(jié)損傷及血管炎。47ppt課件

類風(fēng)濕因子是由于感染因子（細(xì)菌、病毒等）引起體內(nèi)產(chǎn)生的以變性IgG（一種抗體）為抗原的一種抗體，故又稱抗抗體。常見(jiàn)的類風(fēng)濕因子有IgM型、IgG型、IgA型和IgE型。人體內(nèi)普遍存在著類風(fēng)濕因子，并起著一定的生理作用。48ppt課件

近年來(lái)對(duì)IgM型類風(fēng)濕因子的生物作用已有所了解，這些生物作用包括：1、調(diào)節(jié)體內(nèi)免疫反應(yīng)；2、激活補(bǔ)體，加快清除微生物感染；3、清除免疫復(fù)合物使機(jī)體免受循環(huán)復(fù)合物的損傷。只有類風(fēng)濕因子的量超過(guò)一定的滴度時(shí)稱類風(fēng)濕因子陽(yáng)性。49ppt課件由于IgM型類風(fēng)濕因子是類風(fēng)濕因子的主要類型，而且具有高凝集的特點(diǎn)，易于沉淀，故臨床上主要測(cè)定IgM型類風(fēng)濕因子，測(cè)定方法為乳膠凝集法和酶聯(lián)免疫吸附法。50ppt課件

【參考值】正常為陰性類風(fēng)濕性疾病陽(yáng)性率達(dá)70%-90%，RF為RA病情活動(dòng)程度的判斷指標(biāo)之一。

自身免疫性疾病多發(fā)性肌炎、干燥綜合癥、SLE、自身免疫性溶血性貧血某些感染性疾病傳染性單核細(xì)胞增多癥、感染性心內(nèi)膜炎、結(jié)核病等。特異性不高哦！51ppt課件丙種反應(yīng)性蛋白CRP是一種由肝臟合成，能與肺炎雙球菌C多糖體起反應(yīng)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。急性期濃度可升高上千倍，

CRP能結(jié)合多種細(xì)菌、真菌、原蟲(chóng)以及核酸、磷脂酰膽堿等，有激活補(bǔ)體、促進(jìn)吞噬和調(diào)節(jié)免疫的作用。廣泛存在于血清和其他體液中。52ppt課件

定性陰性定量＜8mg/L【臨床意義】

↑見(jiàn)于：化膿性感染、組織壞死、惡性腫瘤、結(jié)締組織病、器官移植急性排斥等，有助于早期診斷升高不升高感染細(xì)菌性非細(xì)菌風(fēng)濕熱活動(dòng)期穩(wěn)定期疾病器質(zhì)性功能性53ppt課件

歡迎進(jìn)入課后習(xí)題54ppt課件1、IgG降低見(jiàn)于：（）A、病毒感染B、肺結(jié)核C、鏈球菌感染D、慢性肝炎E、淋巴瘤55ppt課件2、IgG、IgA、IgM在參與機(jī)體的特異性體液免疫反應(yīng)中擔(dān)負(fù)了重要的作用。作為反映人體體液免疫狀況的指標(biāo)應(yīng)測(cè)：A、IgG水平即可反映B、IgG、IgA、IgM三種水平即可反映C、IgG、IgA水平即可反映D、應(yīng)測(cè)定IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類Ig水平才能反映。56ppt課件3、甲說(shuō)：“IgE又稱親細(xì)胞抗體，是介導(dǎo)Ⅱ型變態(tài)反應(yīng)的主要抗體?！币艺f(shuō)：“IgE又稱反應(yīng)素，是介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的主要抗體。A、甲對(duì)乙不對(duì)B、甲乙都對(duì)C、乙對(duì)甲不對(duì)D、甲、乙都不對(duì)57ppt課件4、獲得性低Ig血癥是：A、先天性體液免疫缺陷，導(dǎo)致血清中Ig濃度較低B、先天性體液免疫和細(xì)胞免疫的聯(lián)合缺陷導(dǎo)致血清中Ig濃度降低。C、因大量蛋白從尿中丟失，出現(xiàn)血清Ig水平下降D、主要見(jiàn)于某些病毒感染后對(duì)體液免疫功能的破壞，導(dǎo)致感染前正常的血清Ig水平下降。58ppt課件5、CH50實(shí)驗(yàn)是一個(gè)經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)，它主要測(cè)定：A、血清補(bǔ)體經(jīng)典途徑的濃度含量B、血