微生物限度檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量控制

微生物限度檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量控制第1頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月概念細(xì)菌的生長繁殖需要一定的營養(yǎng)條件，為獲取能力并維持其生長繁殖，細(xì)菌必須從外界吸取某些物質(zhì)，包括水分、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長因子。不同種類的細(xì)菌對(duì)營養(yǎng)的要求也不同。第2頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月概念培養(yǎng)基具有適合細(xì)菌生長需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，包括微生物生長所需要的水分、碳源、氮源、無機(jī)鹽及某些生長因子（維生素、輔酶）等。除此以外，還具備待培養(yǎng)菌適宜生長的酸堿度。培養(yǎng)基是人工配制的微生物生活環(huán)境第3頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月分類主要用于增菌用于檢測(cè)動(dòng)力及保存菌種用于分離鑒定細(xì)菌第4頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月分類雙糖鐵培養(yǎng)基SS培養(yǎng)基普通瓊脂培養(yǎng)基血液瓊脂培養(yǎng)基庖肉培養(yǎng)基第5頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月概念由于不同批次的蛋白胨、浸膏（粉）、瓊脂、膽鹽等成分的質(zhì)量及酸堿度不同等，影響了培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定性。適宜的培養(yǎng)基制備方法、儲(chǔ)存條件和質(zhì)量控制是提高優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證第6頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月主要內(nèi)容培養(yǎng)基購置、貯存、制備、使用注意事項(xiàng)培養(yǎng)基質(zhì)量控制常用菌株保存方法第7頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月一、培養(yǎng)基購置、貯存、制備、使用注意事項(xiàng)第8頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月

購置依據(jù)ISO/IEC17025《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》，對(duì)培養(yǎng)基的供應(yīng)企業(yè)進(jìn)行評(píng)價(jià)后選擇合格的供應(yīng)商；應(yīng)選擇產(chǎn)品市場(chǎng)信譽(yù)度高、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè)；要求生產(chǎn)企業(yè)提供：培養(yǎng)基成分名稱及產(chǎn)品編號(hào)、批號(hào)、使用前的pH、儲(chǔ)藏信息和有效期、性能評(píng)價(jià)和所用測(cè)試菌株、技術(shù)數(shù)據(jù)清單、質(zhì)控證書以及必要的安全/危害數(shù)據(jù)等材料。第9頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月驗(yàn)收購買的培養(yǎng)基到貨后，應(yīng)有專人做好接受和驗(yàn)收工作，應(yīng)仔細(xì)核對(duì)生產(chǎn)企業(yè)提供的資料、培養(yǎng)基名稱、規(guī)格數(shù)量、外觀特征、批號(hào)、保質(zhì)期是否符合要求。每批培養(yǎng)基到貨物后都應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)，滿足檢測(cè)方法規(guī)定的要求后方可投入使用。

第10頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的儲(chǔ)存干粉培養(yǎng)基應(yīng)保存在陰涼干燥處，要避免陽光直射；未開瓶的培養(yǎng)基在室溫下的最長保存2年，開瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕，應(yīng)注意防潮并在6個(gè)月內(nèi)用完。應(yīng)定期對(duì)儲(chǔ)存中的培養(yǎng)基進(jìn)行常規(guī)檢查，如容器密閉性復(fù)查、首次開封日期、內(nèi)容物的感官檢查，如果培養(yǎng)基發(fā)生結(jié)塊、顏色異常和其他變質(zhì)跡象就不能再使用。

第11頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的制備

制備培養(yǎng)基用容器不得為銅鍋或鐵鍋，以防有離子混入培養(yǎng)基中，影響微生物的生長。所有容器在使用前都要根據(jù)不同的情況，經(jīng)過一定的處理，洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝，經(jīng)過滅菌等準(zhǔn)備就緒后，才能使用。容器的大小需大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍以上，避免在加熱溶解過程中，培養(yǎng)基溢出。

第12頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的制備

培養(yǎng)基制備用水中不能含有任何抑制或影響微生物生長的物質(zhì)。使用蒸餾水或與其同質(zhì)的水。最好不使用離子交換器生產(chǎn)的去離子水。

第13頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的制備

每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號(hào)，最終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等，記錄復(fù)制復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。第14頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的制備

培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，最好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào)，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的

第15頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的制備

在培養(yǎng)基分裝滅菌前，各成分應(yīng)溶解均勻。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化，迄至煮沸。如為瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，最后必須加以補(bǔ)足。第16頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的制備因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會(huì)有所變化，培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正。例如，牛肉浸液約可降低pH0.2，而腸浸液pH卻會(huì)有顯著的升高。因此，對(duì)這個(gè)步驟，操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的最終PH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。一般滅菌前比最終pH高0.2-0.3。用1mol/LNa0H或lmol/LHCL調(diào)整。

第17頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的滅菌

已配制好的培養(yǎng)基必須立即滅菌，避免微生物生長繁殖而消耗養(yǎng)分，改變培養(yǎng)基的酸堿度。高溫可破壞培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分，還會(huì)使瓊脂的凝膠強(qiáng)度下降，因此必須嚴(yán)格控制滅菌溫度和時(shí)間，并且不可重復(fù)滅菌。高壓蒸汽滅菌鍋的壓力表等要定期進(jìn)行檢定，并定期采用生物指示菌法或化學(xué)變色紙片對(duì)滅菌效果進(jìn)行驗(yàn)證。

第18頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的滅菌

滅菌以后培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度，避免長時(shí)間保存在滅菌鍋內(nèi)，造成過度滅菌，影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分或選擇性效果。每批培養(yǎng)基制備好以后，應(yīng)仔細(xì)檢查一遍，如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測(cè)定其最終pH。將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長，即棄去。第19頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的儲(chǔ)存培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處，最好能放于普通冰箱放置時(shí)間一般不宜超過一周。傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。如果保存時(shí)間超過2天，應(yīng)將其放入密封的塑料袋中保存。配好的肉湯類培養(yǎng)基如果保存時(shí)間超過2周，應(yīng)將其放在帶有螺旋蓋的試管或其它密閉的試管或容器中防止蒸發(fā)第20頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的使用平板在接種使用時(shí)，表面必須無明顯潮濕水珠。對(duì)于冰箱保存的平板，應(yīng)待溫度回復(fù)至室溫后再使用用于沉降菌檢測(cè)的所有平板必須經(jīng)無菌試驗(yàn)后才可使用固體培養(yǎng)基滅菌后再融化只允許一次。第21頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基質(zhì)量控制第22頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月由于不同批次的蛋白胨、浸膏（粉）、瓊脂、膽鹽等成分的質(zhì)量及酸堿度不同等，影響了培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定性。因此對(duì)購入的干培養(yǎng)基開展質(zhì)量檢驗(yàn)驗(yàn)收是實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制的重要內(nèi)容之一。第23頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月現(xiàn)有培養(yǎng)基質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)WS/T2322003商業(yè)性微生物培養(yǎng)基質(zhì)量檢定規(guī)程衛(wèi)生部衛(wèi)監(jiān)發(fā)（1993）7號(hào)文件食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)用干燥培養(yǎng)基生產(chǎn)質(zhì)控和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)第24頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月質(zhì)控參數(shù)1.外觀：干粉色澤、研細(xì)度。2.溶解后培養(yǎng)基色澤、透明度、雜質(zhì)、沉淀物、硬度（凝膠強(qiáng)度）；3.滅菌后pH值；4.菌落形態(tài)、菌落大?。ㄖ睆剑?；5.生長率第25頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月計(jì)數(shù)培養(yǎng)基判斷結(jié)果干粉色澤均勻、研細(xì)度好，色澤符合要求制備好的培養(yǎng)基有相應(yīng)的顏色，一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無渾濁、無沉淀。pH值符合、硬度適宜，劃線不破、透明無沉淀物。菌落大小、形態(tài)與對(duì)照培養(yǎng)基一致。第26頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月選擇性培養(yǎng)基判斷結(jié)果檢查項(xiàng)目：

促生長能力抑制能力指示能力第27頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月事例13批4號(hào)培養(yǎng)基質(zhì)量控制第28頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月編號(hào)生產(chǎn)廠家批號(hào)1××市微生物培養(yǎng)基廠0801242×××試劑有限公司0803153×市疾病預(yù)防控制中心20070821生長率試驗(yàn)對(duì)照瓊脂為：哥倫比亞瓊脂，由法國生物-梅里埃公司提供，有效期至20100404第29頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月質(zhì)控采用菌株生長率試驗(yàn)：O1群霍亂弧菌小川型、O1群霍亂弧菌稻葉型、O139群霍亂弧菌雜菌抑制試驗(yàn)：大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌。第30頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月

培養(yǎng)基質(zhì)控參數(shù)

PH值

霍亂弧菌生長率

雜菌抑制能力

菌落典型性第31頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月

結(jié)果（一）PH值：受試培養(yǎng)基均在要求范圍內(nèi)雜菌抑制能力：采用的4株測(cè)試菌株肉湯混和物在四號(hào)平板上均無生長。第32頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基編號(hào)O139小川稻葉1+/--+2

+-+3+++/-+

四號(hào)瓊脂上菌落大于對(duì)照瓊脂

-

四號(hào)瓊脂上菌落小于對(duì)照瓊脂

+/-

四號(hào)瓊脂上菌落與對(duì)照瓊脂上相當(dāng)

稀釋菌液推皿后，置于37℃培養(yǎng)24h，作菌落計(jì)數(shù)，并觀察菌落生長情況。1、所有受試四號(hào)瓊脂平板菌落的亞碲酸鉀還原良好。2、四號(hào)瓊脂上菌落生長情況結(jié)果(二)第33頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月編號(hào)O139生長率（%）小川生長率（%）稻葉生長率（%）195.286.693.6292.884.195.3394.690.892.5

四號(hào)瓊脂上菌落數(shù)生長率=------------------------------×100%

對(duì)照瓊脂上菌落數(shù)

生長率計(jì)算結(jié)果:第34頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)論3批培養(yǎng)基均為合格產(chǎn)品。第35頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月事例26批SS培養(yǎng)基質(zhì)量控制第36頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基理化指標(biāo)pH值色澤硬度透明度17.10正常（橙紅）適宜、劃線不破透明、無不溶物26.70偏紅適宜、劃線不破透明、無不溶物36.90偏紅適宜、劃線不破透明、無不溶物47.20正常（橙紅）適宜、劃線不破透明、無不溶物56.80偏紅適宜、劃線不破透明、無不溶物66.60紫紅適宜、劃線不破透明、無不溶物對(duì)照7.20正常適宜、劃線不破透明、無不溶物pH值、色澤、硬度、透明度、沉淀物結(jié)果第37頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月pH值、色澤、硬度、透明度、沉淀物檢測(cè)結(jié)果1、硬度、透明度、沉淀物6批培養(yǎng)基均符合要求2、pH值除1號(hào)、4號(hào)符合要求外，其他培養(yǎng)基均偏低，尤其是6號(hào)更是低至6.603、凝固后的瓊脂色澤符合性與pH值相同。第38頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月24h菌落形態(tài)培養(yǎng)基鴨沙門菌ATCC50083鼠傷寒沙門菌ATCC50013傷寒沙門菌ATCC50097腸炎沙門菌分離株大腸埃希菌ATCC25922形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小1無適中H2S適中無適中H2S適中挑紅適中2H2S適中無較小無適中無較小挑紅適中3H2S適中無較小無適中H2S較小挑紅適中4H2S較大H2S適中無適中H2S適中挑紅適中5無較大無

適中無適中無適中挑紅適中6無適中無

適中無較小無適中挑紅適中對(duì)照正常適中正常適中正常適中正常適中正常適中第39頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月36h菌落形態(tài)

培養(yǎng)基鴨沙門菌ATCC50083鼠傷寒沙門菌ATCC50013傷寒沙門菌ATCC50097腸炎沙門菌分離株大腸埃希菌ATCC25922形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小1H2S適中H2S適中H2S適中H2S適中挑紅適中2H2S適中無較小無適中H2S較小挑紅適中3H2S適中H2S適中H2S適中H2S較小挑紅適中4H2S較大H2S適中無適中H2S適中挑紅適中5H2S較大無

適中無適中H2S適中挑紅適中6無適中無

適中無較小H2S較小挑紅適中對(duì)照正常適中正常適中正常適中正常適中正常適中第40頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月48h菌落形態(tài)培養(yǎng)基鴨沙門菌ATCC50083鼠傷寒沙菌ATCC50013傷寒沙門菌ATCC50097腸炎沙門菌分離株大腸埃希菌ATCC25922形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小形態(tài)大小1H2S適中H2S適中H2S適中H2S適中挑紅適中2H2S適中無較小無較小H2S適中挑紅適中3H2S適中H2S適中H2S較小H2S適中挑紅適中4H2S較大H2S適中無適中H2S適中挑紅適中5H2S較大無

適中無適中H2S適中挑紅適中6H2S適中無

適中H2S較小H2S較小挑紅適中對(duì)照正常適中正常適中正常適中正常適中正常適中第41頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月菌落形態(tài)結(jié)果1號(hào)、4號(hào)培養(yǎng)基菌落形成H2S速度較快,大小也適中。5號(hào)、6號(hào)、3號(hào)培養(yǎng)基菌落大小適中,但形成H2S速度較慢。2號(hào)、3號(hào)培養(yǎng)基部分菌落偏小，形成H2S速度較慢。H2S形成時(shí)間：24h與36h差異明顯。36h與42h差異不明顯。第42頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月菌落直徑和生長率檢測(cè)結(jié)果培養(yǎng)基大腸埃希菌ATCC25922鼠傷寒沙門菌ATCC50013志賀菌ATCC51573傷寒沙門菌ATCC50097直徑

(mm)生長率(%)直徑(mm)生長率(%)直徑(mm)生長率(%)直徑(mm)生長率(%)12.5048.402..69103.952.4258.331.8871.8622.7011.762.2063.842.2341.671.8098.2032.7013.072.6070.062.3039.581.7073.6542.6031.702.78110.172.4862.501.82104.7052.6213.732.6080.792.4052.081.80111.3862.701.312.6097.742.3233.3331.80100.00對(duì)照2.90100.002.80100.002.60100.002.20100.00

第43頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月項(xiàng)目1號(hào)2號(hào)3號(hào)4號(hào)5號(hào)6號(hào)外觀符合符合符合符合符合符合pH值符合7.10偏低6.70偏低6.90符合7.20偏低6.80過低6.60色澤符合偏紅偏紅符合偏紅過紅硬度、沉淀物符合符合符合符合符合符合菌落形態(tài)典型H2S遲、菌落小H2S遲、菌落小典型H2S偏遲H2S偏遲大腸菌菌落直徑2.50mm2.70mm2.70mm2.60mm2.62mm2.70mm生長率48.40%11.76%13.07%31.70%13.73%1.31%沙門菌菌落直徑2.69mm2.20mm2.60mm2.78mm2.60mm2.60mm生長率103.95%63.84%70.06110.1780.7997.74志賀菌菌落直徑2.42mm2.23mm2.23mm2.48mm2.40mm2.40mm生長率58.3341.6739.5862.50%52.0833.33%結(jié)論合格不合格不合格合格基本合格基本合格第44頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月常見培養(yǎng)基干粉外觀要求.doc常見培養(yǎng)基典型菌落形態(tài).doc增菌類培養(yǎng)基的質(zhì)量要求.doc第45頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月常用菌株保存方法第46頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月質(zhì)控菌株要求標(biāo)準(zhǔn)菌株：來自國際/國家菌種保藏中心(本標(biāo)準(zhǔn)要求為ATCC菌株)或經(jīng)ISO9002認(rèn)證的經(jīng)銷商提供的菌株(有資質(zhì))制備儲(chǔ)備菌株和工作菌株時(shí)一次制備多份，每株菌原則上不能重復(fù)使用通常工作菌株不能再傳代，但處理得當(dāng)可再次使用第47頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株(Referencestock)標(biāo)準(zhǔn)菌株在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過一次傳代獲得的一組完全相同的菌株傳代菌株應(yīng)當(dāng)完全具備標(biāo)準(zhǔn)菌株的所有性狀傳代時(shí)要保證一定的量(減少傳代次數(shù))每株菌株盡量避免多次使用采用不同的保存方法保存期限不同如凍干法,液氮法,穿刺法,液體石蠟法,斜面保存法等(見后)第48頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月菌種保藏方法斜面冰箱保藏法液體石蠟封藏法半固體保存法液氮保存法低溫保存法冷凍真空干燥保藏法第49頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月斜面冰箱保藏法：將菌種接在新鮮斜面培養(yǎng)基上，定溫培養(yǎng)長出豐滿菌苔后，一般形成芽孢的細(xì)菌要形成芽孢，形成孢子的微生物要長出孢子，貼上標(biāo)簽，放在試管架上，在棉塞部位用尼龍紙或防水紙包好，放入40C冰箱中保藏。一般每隔3個(gè)月至半年用新鮮培養(yǎng)基移植1次。方法簡便，實(shí)驗(yàn)室均采用。缺點(diǎn)：移接代數(shù)太多，易產(chǎn)生變異、退化。第50頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月液體石蠟封藏法在已長好的斜面菌種上加入無菌液體石蠟油，高出斜面1cm直立試管放入冰箱保藏，適用保存細(xì)菌和放線菌。石蠟的處理：250mL三角瓶裝100mL液體石蠟，1.05kg/cm3高壓滅菌30min，然后放在1050C左右的烘箱中1h，使水分蒸發(fā)掉。第51頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月半固體保存法將菌種穿刺接種于半固體高層培養(yǎng)基中，在適宜條件下培養(yǎng)培養(yǎng)結(jié)束后，無菌操作在層流臺(tái)下用無菌吸管吸取無菌液體石蠟至培養(yǎng)好的菌種管內(nèi)，并使石蠟高出菌種表面約1cm，將試管直立，置于2-8℃冰箱中或室溫下保存。此法制備簡單，不需要其他特殊設(shè)備一般無芽胞細(xì)菌也可保藏1年左右缺點(diǎn)是保存時(shí)必須直立放置，不便攜帶；取培養(yǎng)物接種時(shí)，當(dāng)接種環(huán)在火焰上灼烷時(shí)容易飛濺第52頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月液氮保存法保存制備細(xì)胞懸液，甘油或二甲亞砜作保護(hù)劑分裝無菌安瓿瓶，每管0.2ml預(yù)凍至-40℃（控制溫度下降速率為1℃／min）放入液氮生物貯存罐中氣相保存恢復(fù)直接浸入38℃水浴中解凍5～10min轉(zhuǎn)接于適宜培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)注意：大多數(shù)屬種適于慢速凍結(jié)和快速解凍第53頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月適用菌種病毒支原體各類細(xì)菌、放線菌、酵母菌、絲狀真菌藍(lán)藻動(dòng)物細(xì)胞

第54頁，課件共59頁，創(chuàng)作于2023年2月液體石蠟覆蓋保存法傳代保存的變相方法能夠適當(dāng)?shù)匮娱L保存時(shí)間優(yōu)質(zhì)石蠟121℃高壓滅菌2h，160℃干燥箱中滅菌1-2h，放冷備用液體石蠟的深度以1cm左右保存期通常6個(gè)月至一