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文檔簡介
實驗三
卵磷脂的提取和鑒定實驗?zāi)康牧私饬字愇镔|(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)學(xué)習(xí)卵磷脂的提取鑒定的原理和方法。實驗原理磷脂是生物體組織細(xì)胞的重要成分,在腦、神經(jīng)組織、腎上腺和紅細(xì)胞中含量較高,在蛋黃中含量特別豐富(10%左右)。卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂、蛋白質(zhì)及糖類等不溶,利用此性質(zhì)可將卵磷脂和其它成分分離。卵磷脂溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性質(zhì)可將其與醇溶性的中性脂肪分離開,達(dá)到純化卵磷脂的目的。R1-COO-CH2R2-COO-C—H CH2—O—P—O—R
OHO12
*3R1常為飽和脂肪酸如C16,C18R2常為不飽和脂肪酸如花生四烯酸R=—CH2CH2-N(CH3)3OH
卵磷脂+
-卵磷脂徹底水解的產(chǎn)物是什么?化學(xué)性質(zhì)如何?卵磷脂的化學(xué)結(jié)構(gòu)卵磷脂被堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽,可分別進(jìn)行化學(xué)鑒定。膽堿:在堿的進(jìn)一步作用下生成無色且具有氨和魚腥氣味的三甲胺;磷酸鹽:在酸性條件下與鉬酸銨作用,生成黃色的磷鉬酸沉淀。甘油:(略);脂肪酸:(略)通過對分解產(chǎn)物的檢驗可以對提取的卵磷脂粗品進(jìn)行鑒定。實驗器材材料與試劑:雞蛋黃,95%乙醇,乙醚,丙酮,10%NaOH,鉬酸銨試劑;儀器:50mL、500mL燒杯,電爐,蒸發(fā)皿,藥勺,玻璃棒,玻璃漏斗,試管,一次性刻度吸管,石蕊試紙,試管夾,洗瓶規(guī)格?實驗操作步驟與現(xiàn)象觀察記錄
(一)卵磷脂的提取將濾液置于蒸發(fā)皿內(nèi),水浴蒸干,所得干物即為卵磷脂粗品。
取約10g(兩吸管)蛋黃于50ml小燒杯中邊攪拌邊加入95%乙醇30mL現(xiàn)象:濾紙過濾濾液性狀:粗提物性狀:藥勺刮取取粗提物少許,置干燥試管底部,(二)卵磷脂的溶解性觀察加入2mL丙酮加入1mL乙醚,用玻棒攪動現(xiàn)象?現(xiàn)象?注意:加乙醚在第3實驗室進(jìn)行,禁止明火。(三)卵磷脂的水解與鑒定1.三甲胺的檢驗
取干燥試管一支,加入少量提取物和3mL10%NaOH
溶液,水浴加熱15min,在管口放一片蒸餾水潤濕過的紅色石蕊試紙,觀察顏色有無變化,并嗅其氣味,記錄。將上述加熱過的溶液過濾。濾液性狀:思考:脂肪酸皂化反應(yīng)原理?現(xiàn)象?應(yīng)用?2.磷酸的檢驗
取干凈試管一支,加入10滴上述濾液,加入10滴95%乙醇,搖勻,再加入10滴鉬酸銨試劑,觀察現(xiàn)象;
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