全血膽堿脂酶測定

全血膽堿脂酶測定第1頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月有機磷農(nóng)藥的簡單回顧全血膽堿酯酶活性測定概述三氯化鐵比色法第2頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月有機磷農(nóng)藥

organophosphorouspesticide第3頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月接觸機會生產(chǎn)第4頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月施用第5頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月食物第6頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月誤服、自殺第7頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月毒作用機制抑制體內(nèi)膽堿酯酶（ChE）活性使體內(nèi)乙酰膽堿大量積聚，引發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂乙酰膽堿膽堿酯酶有機磷農(nóng)藥第8頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月診斷《職業(yè)急性有機磷殺蟲劑中毒診斷標準》(GBZ-2002)職業(yè)史現(xiàn)場職業(yè)衛(wèi)生調(diào)查臨床癥狀體征實驗室檢查——全血膽堿酯酶（ChE）活性第9頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月診斷分級標準全血ChE活性范圍急性輕度中毒---50%-70%急性中度中毒---30%-50%急性重度中毒---30%以下第10頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗?zāi)康募由顚τ袡C磷農(nóng)藥中毒機制的認識掌握全血ChE活性測定的意義掌握全血ChE活性測定原理、方法第11頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月意義有機磷農(nóng)藥中毒的重要診斷指標中毒者治療后的效果觀察指標接觸有機磷農(nóng)藥人員健康狀況的動態(tài)觀察指標第12頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月方法Asch-DTNB比色法（GBZ52）三氯化鐵比色法溴麝香草酚藍（B·T·B）比色法紙片法Biocheck法（便攜式分析儀）第13頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月三氯化鐵比色法[原理]乙酰膽堿膽堿酯酶膽堿+乙酸堿性羥胺乙酰羥胺HClFeCl3羥肟酸鐵(棕紅色絡(luò)合物)第14頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月[器材]刺針一次性自控式微量吸管（20μl）分光光度計恒溫水浴箱（37℃±0.5℃）第15頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月[試劑]磷酸鹽緩沖液（PH=7.20）堿性羥胺溶液1∶2鹽酸溶液10%三氯化鐵溶液乙酰膽堿標準應(yīng)用液（1ml含4μmol）第16頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月[分析步驟]1.乙酰膽堿標準曲線的繪制

2.樣品測定第17頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月1.乙酰膽堿標準曲線的繪制（1）取六只具塞試管，配制乙酰膽堿標準色列管號123456乙酰膽堿標準應(yīng)用液（ml）00.20.40.60.81.0水（ml）111111磷酸鹽緩沖液（ml）10.80.60.40.20乙酰膽堿含量（μmol）00.81.62.43.24.0第18頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）各管加堿性羥胺4ml，立即振搖3min（3）各管加1∶2鹽酸溶液2ml，振搖1min（4）各管加10%三氯化鐵溶液2ml，搖勻，過濾（5）測吸光度：λ——520nm，參比管——第1管（6）繪制標準曲線第19頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月2.樣品測定A管（樣品管）B管（對照管）0.98ml磷緩0.98ml磷緩20ul血20ul血37℃水浴5min堿性羥胺4ml,振3min乙酰膽堿標準應(yīng)用液1ml乙酰膽堿標準應(yīng)用液1ml37℃水浴30min堿性羥胺4ml,振3min1∶2鹽酸溶液2ml,搖1min10%三氯化鐵溶液2ml搖勻、過濾、比色第20頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月計算1.被水解的乙酰膽堿吸光度=

對照管吸光度（B管）－樣品管吸光度（A管）2.查標準曲線，得出被水解乙酰膽堿（μmol）

---即0.02ml血經(jīng)37℃，30min反應(yīng)條件下的

膽堿酯酶活性絕對值C第21頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月3.膽堿酯酶活性相對值（%）浙江地區(qū)健康人膽堿酯酶活性絕對值男：3.22±0.336μmol女：3.19±0.398μmol第22頁，課件共24頁，創(chuàng)作于2023年2月注意事項采血前先準備好試管，加入磷緩采血時嚴格消毒，用過的棉球、刺針集中放置準確控制水浴溫度和放置時間加三氯化鐵顯色后，在20min內(nèi)比色