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環(huán)境工程微生物學(xué)遺傳和變異是一切生物最本質(zhì)的屬性。微生物將其生長(zhǎng)發(fā)育所需要的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型和環(huán)境條件,以及對(duì)這些營(yíng)養(yǎng)和外界環(huán)境條件產(chǎn)生的一定反應(yīng),或出現(xiàn)的一定性狀(例如:生態(tài)、生理生化特性等)傳給后代,并相對(duì)穩(wěn)定地一代一代傳下去。這就是微生物的遺傳。遺傳具有保守性,優(yōu)點(diǎn):保障優(yōu)良性狀穩(wěn)定遺傳;缺點(diǎn):環(huán)境變化,無(wú)法適應(yīng)而死亡。2環(huán)境工程微生物學(xué)當(dāng)微生物從它適應(yīng)的環(huán)境遷移到不適應(yīng)的環(huán)境后,微生物改變自己對(duì)營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件的要求,在新的生活條件下產(chǎn)生適應(yīng)新環(huán)境的酶(適應(yīng)酶),從而適應(yīng)新環(huán)境并生長(zhǎng)良好,這是遺傳的變異。遺傳變異性使微生物得到發(fā)展,為人類(lèi)改造微生物提供理論依據(jù)。微生物的變異很普遍。3環(huán)境工程微生物學(xué)4環(huán)境工程微生物學(xué)1.種瓜得瓜,種豆得豆;2.龍生龍,鳳生鳳,老鼠兒子會(huì)打洞;3.虎父無(wú)犬子;4.一母生九子,母子十不同。請(qǐng)大家想一想,與遺傳變異有關(guān)的俗語(yǔ)或諺語(yǔ)有哪些?5環(huán)境工程微生物學(xué)第一節(jié)微生物的遺傳一、遺傳和變異的物質(zhì)基礎(chǔ)——DNA生物的各項(xiàng)生命活動(dòng)都有它的物質(zhì)基礎(chǔ)。生物遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)是什么呢?答案是DNA,科學(xué)告訴我們,親代將各種遺傳性狀通過(guò)DNA傳遞給了子代,子代獲得DNA后形成一定的蛋白質(zhì),將遺傳特性表現(xiàn)出來(lái)。6環(huán)境工程微生物學(xué)哪些人用什么方法最終證明了遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)是DNA呢?1.格里菲斯經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)(1928)及埃弗里、麥克勞德、麥卡蒂等人的轉(zhuǎn)化補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)(1941)。2.赫西和蔡斯大腸桿菌T2噬菌體感染大腸桿菌實(shí)驗(yàn)。7環(huán)境工程微生物學(xué)R型菌(粗糙、無(wú)毒性)S型菌(光滑、有毒性)多糖類(lèi)莢膜格里菲斯——肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)8環(huán)境工程微生物學(xué)將R型活菌注入小鼠體內(nèi)一段時(shí)間后9環(huán)境工程微生物學(xué)將S型活菌注入小鼠體內(nèi)一段時(shí)間后10環(huán)境工程微生物學(xué)將殺死的S型菌注入小鼠體內(nèi)一段時(shí)間后11環(huán)境工程微生物學(xué)將R型活菌與殺死的S型菌注入小鼠體內(nèi)一段時(shí)間后細(xì)菌發(fā)生轉(zhuǎn)化,性狀的轉(zhuǎn)化可以遺傳。12環(huán)境工程微生物學(xué)埃弗里、麥克勞德、麥卡蒂轉(zhuǎn)化補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)從S型肺炎球菌活體上取得蛋白質(zhì)、莢膜、DNA、RNA,分別與R型肺炎球菌混合后注入到小白鼠體內(nèi),結(jié)果被注入DNA的小白鼠死亡,其它小白鼠存活。13環(huán)境工程微生物學(xué)DNA蛋白質(zhì)多糖RNADNA是遺傳物質(zhì)只有DNA引起R型肺炎球菌轉(zhuǎn)化14環(huán)境工程微生物學(xué)
赫西和蔡斯實(shí)驗(yàn)——噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)(含S)(含P)15環(huán)境工程微生物學(xué)噬菌體感染實(shí)驗(yàn)16環(huán)境工程微生物學(xué)用放射性同位素35S標(biāo)記外殼蛋白質(zhì)細(xì)菌內(nèi)無(wú)放射性17環(huán)境工程微生物學(xué)用放射性同位素32P標(biāo)記內(nèi)部DNA細(xì)菌內(nèi)有放射性DNA是真正的遺傳物質(zhì)18環(huán)境工程微生物學(xué)DNA—主要的遺傳物質(zhì)綜上所述注:DNA不是唯一的遺傳物質(zhì),較少的微生物也靠RNA進(jìn)行遺傳。19環(huán)境工程微生物學(xué)二、DNA的結(jié)構(gòu)與復(fù)制(一).DNA結(jié)構(gòu)最經(jīng)典的結(jié)構(gòu):雙螺旋結(jié)構(gòu)。沃森、克里克1953年提出。20環(huán)境工程微生物學(xué)沃森(左)和克里克與DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型1953年的克里克(FrancisCrick,1916-2004)(右)和沃森(JamesWatson,1928-)在實(shí)驗(yàn)室里,他們兩人因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)了DNA的分子結(jié)構(gòu),而在1962年與威爾金斯一起獲得諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。21環(huán)境工程微生物學(xué)22環(huán)境工程微生物學(xué)DNA有兩條核苷酸鏈彼此圍繞同一根軸互相盤(pán)繞形成,為雙螺旋結(jié)構(gòu)。每個(gè)單鏈均由脫氧核糖-磷酸-脫氧核糖-磷酸交替排列構(gòu)成。每個(gè)核苷酸鏈上都有四個(gè)堿基:T——胸腺嘧啶A——腺嘌呤G——鳥(niǎo)嘌呤C——胞嘧啶彼此與另一條核苷酸鏈上的堿基組成堿基對(duì):T—AA—TG—CC—G23環(huán)境工程微生物學(xué)四種堿基的結(jié)構(gòu)
24環(huán)境工程微生物學(xué)核苷酸的結(jié)構(gòu)
25環(huán)境工程微生物學(xué)堿基AGCT脫氧核糖磷酸堿基26環(huán)境工程微生物學(xué)AGCT脫氧核糖磷酸堿基27環(huán)境工程微生物學(xué)DNA分子結(jié)構(gòu)
28環(huán)境工程微生物學(xué)ATGCATGC29環(huán)境工程微生物學(xué)DNA鏈的延伸
30環(huán)境工程微生物學(xué)31環(huán)境工程微生物學(xué)DNA的電子顯微鏡照片
32環(huán)境工程微生物學(xué)A與T、G與C的配對(duì)(依靠氫鍵連接)
33環(huán)境工程微生物學(xué)一個(gè)DNA分子可包含幾十萬(wàn)到幾百萬(wàn)個(gè)堿基對(duì),每個(gè)堿基之間間距為0.34nm。每10個(gè)堿基組成一個(gè)螺旋,螺距3.4nm。堿基之間一一對(duì)應(yīng),順序固定,所以可以保證遺傳的穩(wěn)定性,但是,如果收到干擾,個(gè)別堿基排列順序發(fā)生變化,都會(huì)導(dǎo)致微生物死亡或變異。34環(huán)境工程微生物學(xué)1.DNA的存在形式真核生物中DNA以染色體存在于細(xì)胞核內(nèi),而在原核生物中,DNA存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。2.基因基因:生物體內(nèi)貯存遺傳信息、能進(jìn)行自我復(fù)制能力的遺傳功能單位。是DNA分子上的具有特定堿基排列順序的核苷酸片斷。每個(gè)細(xì)菌約有5000~10000個(gè)基因。35環(huán)境工程微生物學(xué)3.遺傳信息的傳遞貯存在DNA上的遺傳信息都會(huì)轉(zhuǎn)錄到RNA上,通過(guò)RNA的翻譯作用指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成,最終依靠蛋白質(zhì)體現(xiàn)遺傳性狀。DNARNA轉(zhuǎn)錄蛋白質(zhì)翻譯36環(huán)境工程微生物學(xué)(二)DNA的復(fù)制微生物為了保證遺傳的穩(wěn)定性,DNA的復(fù)制十分精確。復(fù)制過(guò)程:1.解旋:DNA雙鏈氫鍵斷裂,雙鏈分開(kāi);2.復(fù)制:以各自雙鏈為模板,進(jìn)行復(fù)制。3.分配:新復(fù)制的核苷酸鏈與原來(lái)的一條核苷酸鏈按照堿基配對(duì)原則形成新的雙鏈結(jié)構(gòu)并分給子代。37環(huán)境工程微生物學(xué)DNA的復(fù)制
38環(huán)境工程微生物學(xué)注意:1.復(fù)制過(guò)程必須有酶的參與;如:解旋酶、聚合酶等。2.解旋過(guò)程中,并不是完全斷開(kāi)后才開(kāi)始復(fù)制,而是解開(kāi)一段后,就進(jìn)行復(fù)制。復(fù)制好的就開(kāi)始形成雙螺旋。3.每個(gè)子代細(xì)胞都獲得了親代細(xì)胞的一個(gè)DNA單鏈。39環(huán)境工程微生物學(xué)1868年的某天瑞士的生物化學(xué)家米歇爾(Miescher)研究一個(gè)病人的繃帶,小心地將繃帶上粘著的病人傷口處的物質(zhì)洗下來(lái)。洗脫物中含有許多膿細(xì)胞。他向其中加入酒精,將細(xì)胞中的脂肪類(lèi)物質(zhì)除去,之后又加入含有胃蛋白酶的提取液清除各種雜蛋白,這樣,他就可以拿到純的濃細(xì)胞的細(xì)胞核了。于是米歇爾開(kāi)始研究這些核。結(jié)果他意外地發(fā)現(xiàn)核中有一種從未認(rèn)識(shí)到的新物質(zhì),并起名為“核素”。這就是現(xiàn)在我們知道的DNA。經(jīng)過(guò)后人的研究,核素為酸性物質(zhì),含有三種成分:糖、磷酸、有機(jī)堿。又發(fā)現(xiàn)糖少了一個(gè)氧。稱(chēng)之為脫氧核糖。小資料——米歇爾的發(fā)現(xiàn)40環(huán)境工程微生物學(xué)三、DNA的變性和復(fù)性1.DNA變性DNA雙鏈?zhǔn)艿酵饨缱饔茫ㄊ軣?、提高pH),氫鍵被破壞而形成單鏈的現(xiàn)象。2.DNA的復(fù)性變性DNA重新形成天然DNA的過(guò)程。也稱(chēng)為退火。如:高溫條件下變性的DNA在降溫后回重新形成雙鏈結(jié)構(gòu)。41環(huán)境工程微生物學(xué)注意:DNA的復(fù)性是隨機(jī)的。即復(fù)性的DNA不可能完全回復(fù)到原來(lái)狀態(tài)。42環(huán)境工程微生物學(xué)復(fù)性實(shí)驗(yàn):用非放射性同位素N15標(biāo)記的DNA和用放射性同位素N14標(biāo)記的DNA同時(shí)變性與復(fù)性實(shí)驗(yàn),最終得到3種雙鏈DNA。a.25%含N14的雙鏈;b.25%含N15的雙鏈;c.50%含有N14和N15的雙鏈。43環(huán)境工程微生物學(xué)四、RNA
即核糖核酸。RNA與DNA相似,不同之處是核糖及堿基。RNA的堿基也有四個(gè),為U——尿嘧啶(DNA為T(mén):胸腺嘧啶)A——腺嘌呤G——鳥(niǎo)嘌呤C——胞嘧啶堿基對(duì):U—AA—UG—CC—G44環(huán)境工程微生物學(xué)RNA有四種:tRNA、rRNA、mRNA、反義RNA。mRNA:信使RNA,帶有氨基酸的信息密碼(三聯(lián)密碼子),用于翻譯氨基酸。tRNA:轉(zhuǎn)移RNA,帶有與mRNA互補(bǔ)的反密碼子,能識(shí)別氨基酸和mRNA的密碼。rRNA:與蛋白質(zhì)形成核糖體,作為蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所。(核糖體RNA)反義RNA:起調(diào)節(jié)作用,主要決定mRNA的翻譯速度。45環(huán)境工程微生物學(xué)規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)通常呈單鏈結(jié)構(gòu)脫氧核苷酸核糖核苷酸腺嘌呤(A)鳥(niǎo)嘌呤(G)腺嘌呤(A)鳥(niǎo)嘌呤(G)胞嘧啶(C)胸腺嘧啶(T)胞嘧啶(C)尿嘧啶(U)脫氧核糖核糖磷酸磷酸DNA與RNA分子的比較46環(huán)境工程微生物學(xué)五、蛋白質(zhì)合成共分成四個(gè)階段1.DNA的復(fù)制細(xì)胞將某特定段DNA鏈進(jìn)行復(fù)制。2.mRNA的轉(zhuǎn)錄DNA雙鏈打開(kāi)后,以單鏈為模板,按照堿基配對(duì)原則復(fù)制RNA。將DNA上的信息轉(zhuǎn)給RNA。47環(huán)境工程微生物學(xué)五、蛋白質(zhì)合成3.翻譯由tRNA完成。通過(guò)反密碼子與mRNA密碼子的互補(bǔ),tRNA破譯氨基酸的密碼,進(jìn)而將所需氨基酸送到核糖體處。4.蛋白質(zhì)的合成特定的堿基順序密碼送到核糖體,氨基酸按照順序連接在一起,在酶的作用下形成多肽鏈,進(jìn)而形成蛋白質(zhì),最終將遺傳信息表達(dá)出來(lái)。48環(huán)境工程微生物學(xué)TCATGATTAAGTACTAATDNA的平面結(jié)構(gòu)圖細(xì)胞核中49環(huán)境工程微生物學(xué)AGTACTAATACGU游離的核糖核苷酸DNA解旋,一條鏈為模板合成RNA細(xì)胞核中ACGU50環(huán)境工程微生物學(xué)AGTACTAATDNA與RNA的堿基互補(bǔ)配對(duì)細(xì)胞核中聚合酶ACGU游離的核糖核苷酸ACGUUU51環(huán)境工程微生物學(xué)AGTACTAATDNA與RNA的堿基互補(bǔ)配對(duì)細(xì)胞核中聚合酶ACG游離的核糖核苷酸ACGUUUU52環(huán)境工程微生物學(xué)
細(xì)胞質(zhì)
核孔DNAmRNA在細(xì)胞核中合成
細(xì)胞核內(nèi)UCAUGAUUAAGTACTAATmRNA53環(huán)境工程微生物學(xué)UCAUGAUUAmRNAAGTACTAATUCAUGAUUAmRNA
細(xì)胞核內(nèi)54環(huán)境工程微生物學(xué)
密碼子
密碼子
密碼子
密碼子
mRNA上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基UCAUGAUAmRNAU55環(huán)境工程微生物學(xué)56環(huán)境工程微生物學(xué)AAUACUAUG
亮氨酸
天冬氨酸
異亮氨酸
氨基酸(原料)57環(huán)境工程微生物學(xué)
tRNA的一端運(yùn)載著氨基酸
反密碼子
亮氨酸UAA天冬氨酸ACU
異亮氨酸AUG58環(huán)境工程微生物學(xué)
核糖體UCAUGAUAmRNAU
亮氨酸UAA天冬氨酸ACU
異亮氨酸AUG59環(huán)境工程微生物學(xué)細(xì)胞質(zhì)中
核糖體UCAUGAUAmRNAU
亮氨酸UAA60環(huán)境工程微生物學(xué)細(xì)胞質(zhì)中
核糖體UCAUGAUAmRNAU
亮氨酸UAA天冬氨酸ACU
異亮氨酸AUG61環(huán)境工程微生物學(xué)細(xì)胞質(zhì)中
核糖體UCAUGAUAmRNAU
亮氨酸UAA天冬氨酸ACU
異亮氨酸AUG縮合62環(huán)境工程微生物學(xué)
亮氨酸天冬氨酸
異亮氨酸以mRNA為模板形成了有一定氨基酸順序的蛋白質(zhì)
細(xì)胞質(zhì)中單擊畫(huà)面繼續(xù)UCAUGAUAmRNAU63環(huán)境工程微生物學(xué)第二節(jié)微生物的變異一、變異的本質(zhì)——基因突變DNA雙鏈間靠精密的堿基配對(duì)互相連接。但是,偶爾也會(huì)出現(xiàn)差錯(cuò)。如堿基丟失、置換、插入。這樣就改變了堿基的原有順序,引發(fā)后代的表現(xiàn)類(lèi)型變異。如:R型菌S型菌。64環(huán)境工程微生物學(xué)二、基因突變類(lèi)型突變類(lèi)型自發(fā)突變誘發(fā)突變低劑量多因素突變互變異構(gòu)效應(yīng)物理誘變化學(xué)誘變定向培育和馴化65環(huán)境工程微生物學(xué)1.物理誘變利用物理因素導(dǎo)致的基因突變。UV、電離輻射等。重點(diǎn):誘變機(jī)制及DNA損傷的修復(fù)(1)機(jī)制DNA的堿基對(duì)于UV敏感,當(dāng)有UV輻射時(shí),就會(huì)進(jìn)行吸收,從而發(fā)生DNA結(jié)構(gòu)變化。如:胸腺嘧啶聚合形成胸腺嘧啶二聚體。66環(huán)境工程微生物學(xué)67環(huán)境工程微生物學(xué)(2)DNA的修復(fù)(有5種)只講a.光復(fù)活需要PHr酶68環(huán)境工程微生物學(xué)b.切除修復(fù)需要DNA
多聚酶、核酸酶及DNA連接酶c.重組修復(fù)先復(fù)制,組合,修復(fù)d.SOS修復(fù)在DNA受到大范圍重大損傷時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生一種應(yīng)急反應(yīng),使細(xì)胞內(nèi)所有的修復(fù)酶增加合成量,提高酶活性e.適應(yīng)性修復(fù)69環(huán)境工程微生物學(xué)三、基因突變的特點(diǎn)1.自發(fā)性概率極低。每104~1010繁殖才有一次出現(xiàn)基因突變體。2.可誘變性3.可逆性4.不對(duì)應(yīng)性指多種因素導(dǎo)致一種性狀的出現(xiàn)。71環(huán)境工程微生物學(xué)四、基因突變的表現(xiàn)類(lèi)型1.形態(tài)突變發(fā)生可見(jiàn)的形態(tài)變化。如大小、結(jié)構(gòu)變化。正常人的紅細(xì)胞為圓餅狀,可是貧血的人的紅細(xì)胞為鐮刀狀,很容易破碎。2.生化突變指原有的特定功能的改變或喪失,但形態(tài)不一定變化。如野生菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌72環(huán)境工程微生物學(xué)3.致死突變由于突變,無(wú)法生存4.條件致死突變經(jīng)突變后,在某些條件下可以生存,換了就無(wú)法生存。如:溫度敏感型對(duì)于溫度要求嚴(yán)格,超出范圍就會(huì)死亡。某菌在37℃可以生存,但降到34℃則死亡。73環(huán)境工程微生物學(xué)第三節(jié)基因重組概念:兩個(gè)不同性狀的細(xì)胞DNA融合,使基因重新組合,導(dǎo)致遺傳變異,產(chǎn)生新品種的過(guò)程。重組手段:雜交、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)。74環(huán)境工程微生物學(xué)1.雜交通過(guò)雙親細(xì)胞的融合,使整套或部分染色體的基因重組。通過(guò)雜交可以獲得有目的的新品種。2.轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞直接吸收供體細(xì)胞的DNA片斷,并將其整合到自己的基因組里,從而獲得供體細(xì)胞部分遺傳性狀的現(xiàn)象。轉(zhuǎn)化過(guò)程:感受態(tài)細(xì)胞出現(xiàn);DNA吸附;DNA進(jìn)入細(xì)胞內(nèi);DNA解鏈;形成受體DNA-供體DNA復(fù)合物;DNA復(fù)制和分離。75環(huán)境工程微生物學(xué)76環(huán)境工程微生物學(xué)3.轉(zhuǎn)導(dǎo)利用到溫和噬菌體做載體,將供體特定基因攜帶給受體細(xì)胞,使后者得到前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。注意:受體細(xì)胞和供體細(xì)胞不進(jìn)行直接接
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