第六章基因重組與基因工程

第十七章基因重組與基因工程

(geneticrecombination

andgeneticengineer)1基因重組(geneticrecombination)

是指在體外用酶學(xué)方法將不同來源的DNA進(jìn)行切割、連接，組成一個新的DNA分子的過程，又稱DNA重組?；蚩寺?genecloning)

將重組DNA分子導(dǎo)入到合適的受體細(xì)胞中，使其擴增和繁殖，以獲得大量的同一DNA分子，稱此為基因克隆、DNA克隆或分子克隆?；蚬こ?geneticengineering)

是將不同來源的DNA片段與載體分子連接形成重組DNA分子，再導(dǎo)入宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，也稱重組DNA技術(shù)。2

本章主要內(nèi)容重要的工具酶基因克隆常用的載體重組DNA基本原理重組技術(shù)在醫(yī)學(xué)和制藥工業(yè)中的應(yīng)用3第緩一攤節(jié)員重宮要堂的曲工駁具泥酶工具還酶基飲因蓋工淘程聰中吉的安工枝具技酶鍬主樓要已包泊括用茫于D忙N落A和R鋪N炊A分奏子的切竟割槳、連亦接、聚耳合鎮(zhèn)、葛逆轉(zhuǎn)叫錄等相灘關(guān)涂的柔各裝種位酶慶類徹。4一哭、雀限盟制知性宣核隆酸圾內(nèi)至切完酶(兩r胖e漸s吼t鼻r川i征c森t涼i剝o往n夕e薄n拍d倒o茄n鄉(xiāng)豐u秧c鴿l窮e愛a屈s失e袖,圾R堅E搏)是勒一竹類稼由娃細(xì)擔(dān)菌刺產(chǎn)價生叔的敘能理專頸一濃識狡別建和切金割律雙膨鏈鞋D辦N懷A中套的爆特盒定問堿蕩基捉序社列閘的盜核排酸建內(nèi)捎切枕酶拳，魂簡拉稱限渾制僚酶或切勿割東酶。根開據(jù)敵限灶制買酶藏作疑用遣特衰性顆，王一別般循分爛為申Ⅰ輛、錯Ⅱ瀉和搬Ⅲ存型漠，其烏中竊常陵用蘆的蔽是Ⅱ虧型估限尼制穿酶。5限野制遙酶寸（慶Ⅱ澤型狐）錢識毛別推及銳切利割碑位呆點特蒸異賠識竹別村及粒切傅割炎4棚8侮個絕b竹p深長褲度飽且扎具遺有回閥文饑序親列的恐D啞N局A澇片沾斷肥，肯主掌要恩產(chǎn)凍生弦3迅種少末兔端篇結(jié)暮構(gòu)撿：5當(dāng)ˊ藝－劫粘狐性插末饑端3梢ˊ流－挺粘宮性舟末得端平描端漏或歲鈍率端回賊文欣序督列(告p斧a棗l者i薦n撓d琴r梅o褲m競e柏)是筐指舒該被部煌位承的樂核保苷旦酸獲序與列貿(mào)呈知1正8掉0O反岡向男重質(zhì)復(fù)苗;粘徑性熔末脖端(導(dǎo)s笑t猛i蛙c續(xù)k砌y臺e裂n倍d夕)是草指段經(jīng)忘內(nèi)鼓切換酶恭特虎異狠切盒割雁后豪產(chǎn)肌生科的芬5矮ˊ剩－竟末悅端疲突欠出陳和含3桂ˊ胳－栗末刻端怕突條出刻的迷堿陳基筒序件列賴相紐奉互毅間渣具辣有兇互終補辨性。6⑴萌產(chǎn)倒生醋5柄'南-濤粘遠(yuǎn)性拒末紡端⑵抹產(chǎn)季生杯3進(jìn)'汁-耀粘押性奮末故端7⑶溝產(chǎn)潤生腹平窩(邀頭咬末綿)淚端鍬/懲鈍篇端其職它衣特繪殊棕性晉質(zhì)的Ⅱ飯型記限賭制瘦酶同似裂北酶嚴(yán)（異菊源廟同雷工灘酶）同圓尾雄酶可跡變脆酶8同竿裂摸酶又輛稱光異陳源腰同震工脂酶貪。債指憤來消源桿不島同蠻，汗但錦具粉有相克同宣的劫識易別序弊列。在百切章割姐D慈N叉A話時扇，鵲其切嚴(yán)割決點可器以帝是相拼同的影，蹲產(chǎn)貌生很平襲頭鵲末播端嘉，趣稱譽為同臂識朵同航切；切欺割般點也謠可壤以前是不勢同的光，悉產(chǎn)榜生婚3誓ˊ印或奏5抱ˊ江粘澤性獸末旁端叔，月稱利為同粉識結(jié)異嘆切。9同被裂米酶—鈴—棵同小識同切1正0同訊裂換酶—畏—極同翼識異切1耍1同造尾圍酶同慢尾規(guī)酶指接來夸源屑不應(yīng)同臉，汁但幣識身別屠與墾切醫(yī)割患順務(wù)序旦有棉一灣定鍬的建相震關(guān)絞性超的捆一寄類氏酶鋪。暴它喉們結(jié)作稻用犬后產(chǎn)節(jié)生著相半同的粘殿性睛末賭端。1胡2可很變屈酶可侮變凱酶識緣瑞別辣順肌序佛中史的墳一碧個蚊或條幾悲個師堿鴨基妥是科可枕變殊的叫，并亮且咬識億別芹順捎序赴往固往酒超菊過俘6渣個醉堿抖基駐對您。如豆，B滴s害tp縮慧Ⅰ究，跪其納識膜別貓順吼序甚為疼G并G糞T蝦N揭A橡C殃C出。1夜3常礙用春限趕制俯性年核孔酸揪內(nèi)灶切疼酶追的擾特轟性微生物名稱酶名稱識別順序同裂酶同尾酶BacillusamyloliquefaciensH解淀粉芽孢桿菌BamHⅠGGATCCBstⅠBglⅡMboⅠBacilliusglobigil球芽孢桿菌BglⅡACATCTEscherichiacoliRY13大腸桿菌EcoRⅠGAATTCHaemophilusinfluenzae流感嗜血菌HindⅢAAGCTTHsuⅠProvidenciastuartii164普羅威登細(xì)菌PstⅠCTGCAGSalpⅠStreptomycesalbusSubspeciespathocidicus白色鏈球菌SalⅠGTCGACAvaⅠXhoⅠ1肺4限降制洋性連內(nèi)憶切續(xù)酶啟的易應(yīng)乒用通偵過險切季割砌不麗同皇來所源動D舉N放A縫雙憂鏈計的勁特汗異友堿欠基音序負(fù)列恨，產(chǎn)槍生含下有墊黏魄性遵末蹄端耗或仿平狀端晉的霸、膽長睡度迫不既同中的尚D榴N挑A仇片暢段豎。用敏于阿D竊N罵A交重污組解、憐制苦備爬探迎針題、混分五子階雜扯交隊、時D鞏N枯A勵序農(nóng)列聲分莫析修等預(yù)。1僵5二纖、洽D蘿N也A家聚愿合膀酶（最千常柏用烘的射D上N測A陰聚蛙合睛酶裕有捉以均下匠4芹種）D歷N地A開聚著合但酶為Ⅰ廈（化全靈酶識）D率N簡A鞭聚鼻合悟酶得Ⅰ悅大歲片限段蜘—得—范K愈l范e躬n準(zhǔn)o蓮w館片陵段T米a狠q鞋D藏N丘A延聚哥合承酶T4噬啦菌亮體壇D袍N滑A隊聚秘合籍酶1渾6㈠網(wǎng)D雅N峰A展聚石合供酶鋒ⅠE雜.啊C膊o暢l拜iD畢N詞A匪聚弓合雨酶員Ⅰ嫂（傘D覺N盛A依p雙o捧l涼Ⅰ拿）春是古一尖個子具者有3差種底酶刃活吹性金的誓多廳功淋能藝性壯酶側(cè)。包除括障：5ˊ→憐3ˊ婆D適N屋A聚福合丸酶相活肆性5ˊ→釘3ˊ核匙酸界外殼切悔酶粥活中性3ˊ→自5ˊ核痰酸覆外礎(chǔ)切恨酶滑活臘性1縫7D跡N孝A慈p蚊o已l濃Ⅰ掙應(yīng)窗用⑴常船用廈來催著化驕D到N串A躍缺嗚口亭平告移努反聞應(yīng)蝦，蟲制禍備稼高撤比柴活失性呼D漫N騎A探絞針；⑵姑c漆D韻N烈A廣第肅二釋條席鏈袖的擔(dān)合站成?。虎乔穼﹀\D般N舊A條3突勾出敢末頭端棍進(jìn)誕行跨標(biāo)懸記訪；⑷償D襪N饅A褲序楊列嫩分汗析追。1頂8E件.神c茄o斥l雜iD好N坡A浴p慶o舒l列.擊Ⅰ肯催刻化付缺酸口但平液移*T*T*T*TMg2+DNase

I5'3'3'5'3'5'5'3'3'5'5'3'3'5'5'3'3'5'dATP,dCTP,dGTP[-32P]dTTPE.coliDNAPOLI1旁9㈡豪K丈l吼e掉n垮o網(wǎng)w禿片蠢段撥（艱D新N勿A覺p溉o芒l從.況大齒片弱斷旺）2召0K健l賣e氧n掉o泥w僚片授段雙用抹途⑴梯補絞齊議雙慎鏈股D逼N巷A辨的3謙ˊ寒末創(chuàng)端爛；⑵截用老標(biāo)阿記木堿即基迎補齊爆3ˊ末侮端嫩；⑶用妄于c稱D刊N育A購克燒隆昌中倚第待二什股姜鏈迷的援合室成；⑷D膀N皆A尿序?qū)倭惺幏趾⑽鳆}。2麻1㈢首T薦a夠q很D住N館A文p稀o在l翅（杜耐偶熱割D系N予A枕聚汁合盲酶泉）作纏用饅特銹點1汽）支T圖a啞q訴D間N門A踢p皺o母l悠催毯化日D勇N億A礙合咐成經(jīng)的狂最奮適巴溫紋度蒙范柱圍7攀07偉5慈℃醬，2午）恩9妥5姜℃膏以具上斬高捎溫廁，救半褲小榜時屯不沙失歡活幟，3際）浩最訓(xùn)適違合煎用禿于聚始合咐酶熟鏈村反改應(yīng)方（閉P蛾C崗R喊）。2葡2三苦、粉逆查轉(zhuǎn)般錄煌酶(竭r亂e逃v丑e貝r開s攝e殺t鄉(xiāng)豐r魂a渠n修s兵c款r公i武p電t盡a適s朗e恢)特稼點逆頓轉(zhuǎn)嗽錄驕酶姑是路一撥個執(zhí)多野功泥能成性愛酶核，字至孔少煉具責(zé)有劇以黑下河3頓種眨酶活烘性挺：⑴細(xì)以桿單德鏈燥R頭N揮A洞為江模冒板狠，弄催刺化名合之成閃c嫩D嶄N姨A箏單承鏈⑵紀(jì)具趴有艱R慣N打a斑s秒e發(fā)H湊活部性法，束能揉水烤解逆R貢N擾A糊:沒D赴N謊A兼雜貿(mào)交鼻鏈幼中充的R信N高A⑶書以澇D勉N姓A沸為站模篩板賴，催殖化稅合框成夾c妖D膏N腸A返雙腹鏈距。2別3逆祖轉(zhuǎn)晌錄額酶唯的費應(yīng)早用蜜：⑴將按m摘R開N伸A話逆儉轉(zhuǎn)井錄很成哨c瞎D庫N吳A眉，羊構(gòu)頂建其c納D套N憤A量文青庫；⑵率補輕平趴和裙標(biāo)胳記馳5ˊ-氧末友端襖突陸出耽的垃D弟N閉A脾片泛段忍；⑶到代奧替野K頁l圾e蓋n兵o搞w挪酶尾用其于途D佳N有A閘序辯列殊分圍析蜜；⑷執(zhí)制繼備災(zāi)雜倍交鏟探質(zhì)針炊等稅。2伴4四弓、淚D質(zhì)N蠢A瓣連門接斯酶(磨D弦N朋A經(jīng)l鵲i桃g攏a豆s庭e喪)催圖化減雙授鏈頌D融N庭A宗中球一葬條何鏈蹦的沙3型ˊ捏－菌O示H彼與蹄另叢一書條柏鏈坑的盾5馳ˊ框－話P使O3H2形挪成汽磷帝酸弟二雕酯末鍵憤，標(biāo)從尿而互構(gòu)宅成錢完駛整隊的班D菠N蕩A換長臭鏈惜。D酸N乳A涉連浙接葉酶婆的油用允途（少1翅）言兩再個貨雙咸鏈到D神N宿A同片獵段陶連洽接彼起幕來5敞ˊ征-聞A晨C懷G辦A餃A雪T共T忘C我G切T魄-其3州ˊT4D是N愉A躍連螞接鄉(xiāng)豐酶5淘ˊ腦-炊A增C哭G熄A撐A項T你T蕉C墳G掉T放-蜜3妖ˊ3葡ˊ份-非T般G周C養(yǎng)T單T挪A煉A遺G繩C妻A毒-織5撇ˊ屠3石ˊ情-練T漸G劣C蒼T掃T墳A袍A虧G曉C功A街-擇5嘴ˊ（椅2群）賴修勵補優(yōu)帶摘有眉缺初口戴的齒雙旅鏈崗D業(yè)N俗A排分賊子T4DNA連接酶2揮5五助、豬堿拜性限磷輪酸魔酶（燥a側(cè)l混k辜a展l夕i蘿n采e數(shù)p幻玉h助o事s提p筆h怨a布t綁a銅s脹e斤）能澤夠降催授化復(fù)水價解奇去頓除猶D們N軍A棒或翁R吊N脂A呈5找ˊ山-腐端繭的當(dāng)磷袍酸圍基麥團(tuán)擺。用粒途⒈制挽備旦載窗體時洲，腎用興堿戀性悉磷興酸霞酶臨處寨理酬去婆除銳載劉體而分辭子微5威ˊ濾－遭端災(zāi)磷娘酸舅基彩后叢，村可彎防澡止廈載津體茄自步身煮環(huán)都化嫌連貍接碎，競提榜高賢重悔組救效妖率嗓。⒉退用3衰2P覆標(biāo)勝記胞5忘'各-資端伙前闊，趙去羅除肅5窄'嚼-程P墊，劈燕再津通灘過庭激握酶爽作尤用泡把鏈放樂射嚼性商核痛苷怖酸管加榮到5該'山-超端映進(jìn)考行崇標(biāo)沖記。2噴6六茫、刷末泡端征（朝脫丈氧堪核難苷夕酸是）鼻轉(zhuǎn)貌移姨酶徒(檢T毀d央T聰)作張用將桿標(biāo)貓記卸或失未岔標(biāo)堡記嚷的倚d圈N鵲T歲P傻加量到罵D琴N巨A插的蝕3甚ˊ財—杯O仗H短末配端杏；遭也數(shù)可役催蔽化惰載逼體然分形子室或霞待飽克班隆乎的疲D每N員A抄片變段勺上先加撿上開互捎補煙的薦同豈聚提尾食，遠(yuǎn)便飄于劣進(jìn)愿一滿步擺連叔接愿。應(yīng)格用①琴探匠針嗚標(biāo)枕記P3巨2-搬α.d除G頓T炎PG3篩2G3佳2G3催2G3鏈2G3嫩2G3筋2G3為2G3玻2②膨在滅載激體騙和堵待深克暗隆問的院片盤段午上烈形摟成岸同章聚障物桌尾拐，趕以章便駱于奪進(jìn)另行賠連蹲接3絞′3熟′2時7重叛要吐的榨工精具競酶工具酶活性限制性核酸內(nèi)切酶識別特異堿基序列，切割DNAT4DNA連接酶催化DNA5ˊ-磷酸與3ˊ-羥基形成磷酸二酯鍵DNA聚合酶以DNA為模板合成DNA逆轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成cDNA堿性磷酸酶切除5－末端磷酸T4多聚核苷酸激酶催化核酸5'-羥基磷酸化末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶

催化3'-端合成同聚尾2指8第證二釋節(jié)援基吃因齒克獎隆核常并用碗的治載升體載宗體(克v寨e潑c騎t費o爬r口)是鏡指器能疑在無連稍接窯酶蹦作鐮用危下捏和因外持源仇D協(xié)N咐A噸片況段醋連伙接油起懂來認(rèn)，膊并片運登送架到穴宿璃主眠細(xì)師胞珠的窗運緒載孤工蠟具北。君其酸化眠學(xué)億本柔質(zhì)肢為溫D母N冰A將分制子任。本站節(jié)率主艷要影內(nèi)王容載我體穿必鉛須丸具最備僑的殊基房誠本睜條翻件載消體折的度分模類常趨用桂的姑載弟體2倒9一俘、壓載忌體欣必缸須堅具輕備霸的點基上本輝條視件⒈板具警有艙獨承立些復(fù)棵制底能毫力⒉協(xié)具兄備弄多湯個謝限潮制咐酶蘆的凝識澆別服位稈點贈(多薯克榴隆紅位形點)⒊燙具紛有遺燥傳煌表典型膚或篩逮選標(biāo)佩記⒋捧有足前夠市的波容劇量以訊容嫁納寬外和源約D徹N灑A階片脅段⒌侮可雀導(dǎo)痛入外受糊體侵細(xì)掉胞杜。3題0二剃、忽載仿體袍的依分企類*（親一客）克順隆道載路體用項來攤克死隆騙和布擴壺增致D極N語A白片霧段倘的襖載調(diào)體裝。有特質(zhì)濫?；蜠枝N近A狠、滔噬犯菌霸體輪D優(yōu)N疲A撿和趙病酬毒姐D逢N武A幣三社類。（座二?。┍懋a(chǎn)達(dá)見型請載嘆體為止了柱使離插弊入磨的竹外風(fēng)源園D涂N閣A銜能灘夠綿表沖達(dá)銷為薄多作肽圍鏈檢而閥設(shè)銅計汁的墾載翼體寨稱她為表煩達(dá)糖型敬載司體。表收達(dá)壺型見載勾體除巨需運載程體至必嗽備平條封件悶外販，剩還恥需伴相疤應(yīng)費的啟綢動何子闊、卵核兇糖駝體拐結(jié)崇合吧位焰點款、柳增確強呈子稅、姑終梯止蓋子等誓表絡(luò)達(dá)誕調(diào)哥控衫構(gòu)鋒件辯。3豬1三勒、輛常周用坡的館載首體（屑一染）甜質(zhì)梁粒液(想p俯l愛a節(jié)s愚m倆i叼d虧)態(tài)：是恥存鞠在請于著細(xì)資菌榮染鵲色蒼體潛外申的壯、綁能粥自薯主予復(fù)膊制菠的棄雙勤鏈綢環(huán)野狀劃D家N掀A肝分尿子冬。作烈為柔克隔隆溉載盜體吐的弓質(zhì)墊粒武應(yīng)赤具順備魂以賺下順特海點理：1影.漸分搞子博量屯相輔對懶較容小孩，反能譜穩(wěn)展定遲存耀在美于體細(xì)檔菌瘋體極內(nèi)求，有勻較戒高截的她拷慚貝皇數(shù)機；2綠.段具戰(zhàn)有聯(lián)1思個茶以衛(wèi)上訓(xùn)的疑遺埋傳腰標(biāo)壯志窯，倆便駁于曠篩貓選適；3享.陽具噸有招多陸克排隆流位輝點求。3尺2總濫而覽言盤之付，汁質(zhì)爽粒仁載護(hù)體搞應(yīng)溝該隱是午一汪種歪分嘉子竿量幫較埋小書、悼高燙拷限貝唐的浪“界松傅弛蹈型躁”低質(zhì)澆粒賣，附且浩具忽有慢一陸個持以猶上繞遺蚊傳習(xí)標(biāo)拘志剛和逗多階克虜隆爬位灶點鉤的擱質(zhì)璃粒異。廣悄泛她應(yīng)期用鉛的鈔質(zhì)謙粒個：p泥B做R伍3暴2演質(zhì)貍粒揭、鄙p僻U倘C援系望列坐等3抽3p廚B項R賺3苗2紗2基質(zhì)驢粒①標(biāo)4訂3瘡6直3輸b謠p②寫含截一邪個味復(fù)千制眠點含綱一睜個龜抗訓(xùn)氨訂卞貼青趁霉照素趨基濫因從(a候m器pR)④鬧一眉個交抗炮四姑環(huán)苦素咬基豪因鎖(t抗e漲tR)⑤a齊m羊pR和t型e證tR抗款性淚基永因雁內(nèi)企各戒有望一拔些意限雁制普酶峽的都酶扔切帆位憐點割，門供絮外棒源欠基若因四插航入當(dāng)向外揚源掛基頂因哪插島入乏抗松藥勝基我因圓內(nèi)在后行，是抗鄙藥輝基智因蘋失略活扛。A旨m絡(luò)pR→桐A雕m黑p爛敏摘感西(A植m刊pS)采、T茄e竟tR→匠T凱e鍛t呀敏珍感埋(T遵e蒼tS)級.3拼4p斜U兆C豬系野列貌質(zhì)濫粒由隨p漫B閣R謀3再2肝2纖和落M狠1詠3設(shè)噬脫菌濁體與構(gòu)臨建允而修成銳的磚雙撓鏈類質(zhì)蒙粒帆載孤體弦；（數(shù)1雅）包2直6攏7胖4予b遮p曠；（頓2頭）捏有a術(shù)m型pR和狂與采M澤1滾3利噬店菌鄰體相頓同遵的賭多添克舞隆美位晨點沉（匠M粒C項S辛）（沿3上）亂有店1鄉(xiāng)豐個回來怖自鴉E疾.貼c徑o費l訓(xùn)i灰的L肌a欲c盜Z州基簽因片依斷隊,受編襖碼艇半敢乳勾糖揀苷劈燕酶硬，便步于消藍(lán)旨白儉篩俯選3吉5(寇二繳)砍λ斥噬衰菌煮體組姥成顛特淹點：雙乓鏈知線鋒狀莖D稈N必A拼分崖子管，全殺長瓶5他0寬k鑼b葵，含逆6日6互個釘基膏因恥，在競其探分床子揮兩耕端貌各鍋含神有亦1裝2衣個抖堿屆基竄的筑互盲補私單巡壽鏈規(guī)，昨是碎天楊然甘的域粘立性做末埋端掘，褲被門稱絹為C敗O刪S賠位武點。3嶼6λ宰噬所菌外體筐兩這種燈生快長濁途蠅徑均（膏示陳意因圖核）3從7λ嗚噬原菌計體怒感才染黨細(xì)論菌昆后梯的兩雅種蟻生歡長嚇途成徑溶煌菌擴性墓生瘋長噬贈菌扁體佛感且染遺細(xì)枯菌計后怎，蝦借主助術(shù)其薯2乏個社C設(shè)O堆S磚位創(chuàng)點豎互吹補成說環(huán)，比在臂宿溉主晃菌倡體范內(nèi)連蒸續(xù)摸復(fù)漆制，胳合認(rèn)成陸大扯量遣基堂因景產(chǎn)釘物幼，譯進(jìn)患而俗裝法配陶成家噬碰菌靠體維顆留粒費，裂味解派宿宗主吊菌，號釋跪放棍出哲來圈的趨噬煙菌鐮體紛又票可意感鏟染步其蜂他激細(xì)騾菌永。溶渴源疫性駝生奔長噬沸菌閑體段感宿染增細(xì)尋菌祖后圈，橋可帥將御自橡身遣D甲N爪A整倦合到帳細(xì)括菌敵的狗染揪色協(xié)體閑中里去扇，搜與距之一屆起碰復(fù)捆制，放并扣遺竄傳鑒給歡子棉代友細(xì)賴胞機，笨宿拉主叛細(xì)鑒胞蟻不現(xiàn)被訪裂痕解染。3板8第熱三澡節(jié)保重司組男D狡N弓A蹤蝶基抽本振原崇理（D跟N捐A聽重黨組克基淚本鉤程說序擁包犯括險下爛列貍過斷程悄）分—朽獲兵取葛目褲的盤基晚因住和副載遲體接—益目渣的棒基穗因扒與扒載析體租的芳連積接轉(zhuǎn)—膝重勉組辨D師N文A殃導(dǎo)統(tǒng)入忽宿救主徐細(xì)菜胞篩—俘重讀組兼D渾N漁A川的莖篩隨選柜與足鑒拍定3臭9一途、去目凳的竹基撇因松的突獲覆取古（分）目底的劃基毛因是拆指企所猶要巷研犬究興或失應(yīng)瘦用粘的游基鋸因銹，頂也豆是然需梢要翁克少隆吳或經(jīng)表句達(dá)監(jiān)的督基荒因蔬。目序的轎基懼因何來雀源1滴）健制比備隊基醫(yī)因視組夫D茫N尼A2橋）著制經(jīng)備獄c烤D辨N勁A3描）拍聚沿合產(chǎn)酶賭鏈躬反犧應(yīng)4偵）哄人幅工糟合堆成恐基鍵因4胸0（喘一合）銅制膏備駁基裹因路組蘋D斜N哭A（板基慌因文朱庫谷，g嫌e略n貿(mào)o紙m吳i抱c浙l錢i顆b仆r罰a惕r測y）分立離凈、倡純蹤蝶化互基腳因詞組肚D選N貝A在遭E菌D羊T倍A鳳等紅存書在芳下菌，養(yǎng)用扣蛋括白↓岸R狐E酶K消掙化筑細(xì)妥胞跡、書酚采抽笛提繭；大推小勢不逢同區(qū)酶見切副片萍段常靜用掠蔗遭糖尋梯叔度滔離敘心征或允電另泳↓分慶離訪酶刮切唇片訊斷荷；分莖別灰與線同嫁樣滿R就E稿酶傲切拋的健載誤體范連壇接常以用倘噬綿菌茶體文載西體挨或況質(zhì)販粒油載裁體↓D挖N飄A剩連浸接禿酶芒連握接扛；導(dǎo)奸入攜宿追主匪細(xì)旋胞虎、扶擴明增導(dǎo)凍入睜宿緊主床細(xì)噸胞農(nóng)內(nèi)去培永養(yǎng)普、姨擴圖增蜻；↓得科到價分光子串克罩隆繩混腫合腔體用暫分遭子某雜高交栽等寫方辦法湯進(jìn)再行灰鑒扛定和、（姨基什因疏文奧庫饞）篩通選役、鏈再結(jié)擴繳增教，音分版離袖、題回星收傅。4糕1（日二被）闖制概備具c稠D換N龍A（嘩c爭D教N舌A場文導(dǎo)庫君）分荷離混目幕的刃基本因的黨m踩R遵N擦A逆何轉(zhuǎn)蔑錄增生睛成借c斬D敏N腳A鳴單膛鏈水謀解秘去坊除細(xì)m蠻R領(lǐng)N租A拒，合遞成園c孤D假N勸A挎雙恨鏈水致解址回旗折梢處呼單分鏈得最到略平越端沈雙滅鏈灶c病D容N靠A與管載她體艘連饒接訓(xùn)，困導(dǎo)納入冰宿寒主彈細(xì)羅胞虛擴栗增→構(gòu)記建喜c濁D宜N涉A許文屈庫翻。4寸2（蠅三榆）寶聚件合塔酶值鏈液反牲應(yīng)按(便P銀C臂R搖)在竭體芳外你，以河目渣的瓣基存因鑰為狗模求板嫌，疤在吐D鉤N納A屋引保物博、屢d餓N蟻T碌P丈、蚊T孟a犁q懲D嘴N啦A取P沿o吐l澆等爺存仰在牌下城，榆構(gòu)之成譽一悉個響反辰應(yīng)虹體哈系截?？缃?jīng)9雪4爭℃澇變第性蜘、溪5圾4駕℃哭退度火偵及而7僵2畢℃梨延蛋伸3炕個根步旗驟別的愛反飼復(fù)宵多謹(jǐn)次端循檢環(huán)新（立2攪5裕3秀0錦次）婚，留擴分增澤目燈的傅基臥因吧（判見跳1命8肌章插）爸。（低四疼）漁人砌工四合召成扇基痰因應(yīng)討用綱D扣N區(qū)A予測赴序督儀哪測點出達(dá)某迫一其基辱因婚的葡堿唱基留序煌列輕，懇或伍根庸據(jù)折某跡一淺蛋裳白餓質(zhì)攀的穴氨秘基應(yīng)酸毫組塘成啊反糖推幅核祝苷碰酸駁序嘗列揮，錫再蒸用召D和N杏A沫合鏈成饒儀減通決過央化撓學(xué)均合堂成季原用理哨合射成劃目鋤的跪基徑因填。（一喘般井先雀合嫂成料短顯片母斷偷D牲N量A孩，掉然多后便再辱拼較接迫成膊長莖片墓段）4倉3二鈔、耽目咸的隆基止因追與假載宏體農(nóng)的準(zhǔn)連暗接淘（接）（值主危要鹿有風(fēng)以百下聰4濕種飄連肅接系方茶式掛）1侄)粘傍性堂末司端蠻連模接2簡）平亞頭躲末那端罰連混接3幼）人銹工蟻接賀頭挪法4抗）同攏源捆多蓄聚有尾迫連贊接痕法4測4（串一醫(yī)）值粘孤性厲末富端菠連核接將騾目默的蜓基搶因高和姻載乳體廁用風(fēng)同規(guī)一屬種務(wù)限須制嚴(yán)酶周酶愧切哪，邀產(chǎn)杏生相聾同良粘御性露末勾端圍，伏再帝通時過惡D燥N腦A月連糟接山酶浮作聰用筐將咬兩呀者描連汽接屈起辭來阿，半構(gòu)閣成趟重圣組秒D體N惕A借分怪子溝。（餡二云）料平幻玉頭鬧末暴端冊連捏接有蛛些卵限長制果酶始只潮能榨將快目言的膛基穩(wěn)因占和歲載乞體敞D勞N誰A臣切藝割羨成平藍(lán)端檔，紹此困時完在T4D危N草A誼連貪接暗酶的深作休用西下企同嫌樣掏能單連謎接喚起來戰(zhàn)。4介5（泥三燒）夫人頭工揉接照頭旗法合榮成連程接送子→磚與盒D藏N流A糠平桑頭次末景端率連斗接業(yè)→鵝限動制雀酶鈔切柏割稈,蘋產(chǎn)樓生當(dāng)粘漸性飄末曾端糞→臂連打接澤，敗構(gòu)努建拌重尾組劑D挨N缺A槍。4遣6（恨四漿）董同蠻源抱多名聚乞尾懲連狹接串法4異7三豬、惱重?fù)谓M影D勒N騎A獲導(dǎo)焰入敘宿南主揀細(xì)吉胞療（轉(zhuǎn)）無鬧性稈繁例殖體促外惜重住組擾后鑄的慘D淹N軌A導(dǎo)腿入受現(xiàn)體院細(xì)械胞，芝然潤后村隨競受茄體責(zé)細(xì)桃胞嘩生貿(mào)長棉、另增閥殖顏，振使氏重構(gòu)組圓D耐N羊A壟發(fā)高生遍復(fù)望制番、亦擴疤增糠，棗這璃一航過吃程餐稱蟲為大無耳性眠繁續(xù)殖別?？斯┞墓魃蠅m述擋無氣性吉繁狠殖晉細(xì)吉胞涉中綿進(jìn)壯一川步亦篩結(jié)選面出雜含蠻目展的憤D放N答A拐的開重醋組鳴體波分色子背即船為芝無蓮性啊繁堪殖殼系趕或委克器隆犬。宿天主蛋細(xì)勝胞進(jìn)到行吉無桌性脾繁目殖潛時裙所般采高用尤的似受透體天細(xì)躬胞雹.4攜8重禍組丟D憤N棄A導(dǎo)紐奉入宿燃主眠細(xì)軟胞罩的類斜型轉(zhuǎn)崖化以質(zhì)廈粒作乏載咐體碗構(gòu)伯建綠的專重鵲組北體咐導(dǎo)圾入質(zhì)受否體罪細(xì)溉胞蘆的渴過貴程敢；轉(zhuǎ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