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鈉鉀氯離子測(cè)定1檢驗(yàn)?zāi)康闹笇?dǎo)本室工作人員規(guī)范操作本檢測(cè)項(xiàng)目,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確。2實(shí)驗(yàn)原理羅氏MODULAR電解質(zhì)模塊采用間接法進(jìn)行K、Na、Cl三項(xiàng)的檢測(cè),儀器自動(dòng)將每個(gè)標(biāo)本進(jìn)行31倍稀釋后進(jìn)行檢測(cè).通過檢測(cè)K、Na、Cl三個(gè)離子選擇性電極與參比電極(具有衡定的電動(dòng)勢(shì))間的EMF(電動(dòng)勢(shì))變化,從而計(jì)算出標(biāo)本中相應(yīng)的離子濃度。(1)E=E0+RT/nF.In(f.Ct)/(f.Ci)其中E=相應(yīng)電極的電動(dòng)勢(shì)EMFE0=標(biāo)準(zhǔn)的電動(dòng)勢(shì)EMFR=恒量T=溫度(37℃)n=相應(yīng)離子負(fù)荷F=法拉第恒量In=自然對(duì)數(shù)f=活度系數(shù)Ct=檢測(cè)液中的離子濃度Ci=內(nèi)標(biāo)液中的離子深度(2)E=E'0+S.In(Ct)3標(biāo)本采集3.1病人準(zhǔn)備:無特殊要求。最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。3.2類型:血清、肝素鋰抗凝血漿或尿液。3.3.標(biāo)本采集、處理與貯存:應(yīng)盡量避免標(biāo)本溶血或嚴(yán)重脂血。溶血標(biāo)本,紅細(xì)胞中的鉀會(huì)釋放到血清或血漿中,造成假性鉀便高。因此血清、肝素鋰抗凝血漿標(biāo)本應(yīng)及時(shí)離心分離血清或血漿并避免殘留紅細(xì)胞。嚴(yán)重脂血的標(biāo)本,會(huì)造成假性低鈉鉀血癥,應(yīng)通過超速離心消除脂血的影響。血清或血漿標(biāo)本的穩(wěn)定性:在2~25℃貯存,氯穩(wěn)定7天,鉀6周,鈉2周。24小時(shí)尿液標(biāo)本不添加防腐劑,混濁尿應(yīng)離心后吸取上清液,嚴(yán)禁酸化尿液。尿標(biāo)本的穩(wěn)定性:在2~25℃貯存,氯穩(wěn)定7天,鉀在2~8℃貯存穩(wěn)定2個(gè)月,在15~25℃貯存穩(wěn)定45天[4],鈉在2~25℃貯存穩(wěn)定45天。3.4標(biāo)本運(yùn)輸:室溫條件下運(yùn)輸3.5標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn):細(xì)菌污染、溶血、嚴(yán)重脂血的不能做測(cè)定。4實(shí)驗(yàn)材料:4.1試劑與標(biāo)準(zhǔn)液ROCHE配套 試劑。ISE參比電極液500mlISE內(nèi)定標(biāo)液2000mlISE稀釋液2000mlROCHE配套校準(zhǔn)物。具體如下:ISE低定標(biāo)液10x3mlISE高定標(biāo)液10x3ml4.1.1試劑準(zhǔn)備:試劑為即用式。4.1.2試劑穩(wěn)定性與貯存:所有試劑未開包裝前:參比電極液、內(nèi)定標(biāo)液、稀釋液儲(chǔ)存于15℃-25℃可穩(wěn)定至有效期。開包裝后:參比電極液可穩(wěn)定至有效期;內(nèi)定標(biāo)液、稀釋液可穩(wěn)定4周。SE低定標(biāo)液和ISE高定標(biāo)液儲(chǔ)存于15℃-25℃可穩(wěn)定至有效期4.1.3變質(zhì)指示:當(dāng)試劑有濁度時(shí),表明有細(xì)菌污染或過失效期不能繼續(xù)使用。4.1.4注意事項(xiàng):試劑在每次使用后均應(yīng)立即蓋好蓋子。ISE內(nèi)參比液在保存期間可有部分沉淀釋出,這不會(huì)影響試劑性能,但在使用前應(yīng)充分混勻試劑。試劑中含防腐劑。不可入口!避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。4.2校準(zhǔn)品:使用羅氏公司提供的ISE低/高值血清標(biāo)準(zhǔn)液對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn),每天開機(jī)前校準(zhǔn)或在下列情況下校準(zhǔn):試劑批號(hào)更換、質(zhì)控?cái)?shù)值明顯漂移或失控、更換電極、主要的預(yù)防性保養(yǎng)后或關(guān)鍵部件更換后。4.3質(zhì)控品:使用正常值、病理值復(fù)合控制品。5儀器羅氏P800生化分析儀6操作步驟6.1樣品的準(zhǔn)備:將標(biāo)好號(hào)的樣品離心后放到儀器規(guī)定的位置。6.2試劑的檢測(cè):儀器開機(jī)后,檢查各種試劑的位置,體積等確認(rèn)無誤后方可進(jìn)行測(cè)定。6.3項(xiàng)目基本參數(shù):參見羅氏P800生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù)。6.4儀器操作步驟:參見生化檢驗(yàn)羅氏P800生化分析儀操作規(guī)程。7質(zhì)量控制在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析,以2S為質(zhì)控警告限,3S為失控限,繪制質(zhì)控圖,判斷是否在控。8計(jì)算方法使用羅氏公司提供的ISE低/高值血清標(biāo)準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器后,在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi),儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果,以mmol/L報(bào)告。9參考值范圍(成人)見下表:鈉鉀氯血清136-146mmol/L3.5-5.1mmol/L98-108mmol/L血漿136-146mmol/L3.4-4.5mmol/L98-108mmol/L尿液(24小時(shí))40-220mmol/天25-125mmol/天110-250mmol/天參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。(由于分析方法局限性,應(yīng)注意對(duì)高脂血癥和高蛋白血癥的病人標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的解釋。)我室的參考范圍鉀:3.5-5.3mmol/L鈉:137-147mmol/L氯:99-110mmol/L10臨床意義10.1鉀離子是細(xì)胞內(nèi)液中的主要陽離子。鉀離子測(cè)定可用于診斷電解質(zhì)失衡,心律不齊,肌無力,肝腦病變和腎衰竭,并在糖尿病和靜脈輸液治療中檢測(cè)酮酸中毒。并發(fā)醛固酮過多癥的高血壓患者,超過90%的人K+濃度很低。嘔吐,腹瀉,嗜酒和葉酸缺乏癥都可引起K+濃度降低??焖佥斎隟+,晚期腎衰,溶血性病變,外傷,Addison氏綜合癥,代謝性酸中毒,急性饑餓癥,脫水和急救等均可引起K+濃度升高。通常情況下,K+經(jīng)腎小球過濾掉,但在K+濃度較低時(shí),K+會(huì)保留下來。在飲食增加,高醛固酮癥,腎小管性酸中毒和堿中毒發(fā)病時(shí),尿液中K+的含量上升。10.2鈉離子是細(xì)胞外液中的主要陽離子,人體內(nèi)的鈉平衡由腎臟維持。尿液排泄過多,腹瀉,Addison氏綜合癥,腎小管腎炎等都可引起鈉濃度降低。嚴(yán)重脫水,某些類型的腦外傷,糖尿病昏迷和鹽攝入過量可導(dǎo)致鈉濃度升高。10.3氯離子是細(xì)胞外液中的主要陰離子,它的生理重要性在于能保持人體正常的水代謝,滲透壓和細(xì)胞外液中正常的離子平衡。在脫水,腎小管酸中毒(高氯代謝酸中毒),食鹽攝入過多等情況下,氯的濃度會(huì)升高。在水含量過多,慢性呼吸性酸中毒,失鹽性腎炎,代謝性堿中毒和充血性心臟衰竭等情況下,氯的濃度會(huì)降低。11操作性能11.1本法線性范圍Na+:10–250mmol/lK+:1–100mmol/lCl-:10–250mmol/l不準(zhǔn)確度允許范圍不精密度CV靈敏度Na±4mmol/l;Na4.67%Na10mmol/LK±0.5mmol/lK3.19%K1mmol/LCl±5%Cl2.86%Cl10mmol/L12超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為血清/血漿鈉為250mmol/L,鉀為100mmol/L,氯為250mmol/L。如樣品測(cè)定值超過上限時(shí),應(yīng)將樣品用去離子水作1:1稀釋,重新測(cè)定,結(jié)果乘以2。13病危報(bào)警值的處理當(dāng)血清/血漿:鈉≥160mmol/L或≤120mmol/L;鉀≥6.2mmol/L或≤2.7mmol/L,氯≥120mmol/L或≤85mmol/L時(shí),應(yīng)在復(fù)查該標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果后,及時(shí)報(bào)告臨床醫(yī)生,必要時(shí)可以再抽血復(fù)查。14方法局限性14.1標(biāo)準(zhǔn):回收率在90%-110%之間。14.2黃疸:黃膽指數(shù)在60范圍內(nèi)不會(huì)有明顯干擾。(直接和間接膽紅素濃度約為60mg/dl)14.3脂血:乳糜指數(shù)達(dá)2000以上時(shí)明顯干擾。(甘油三酯濃度約為2000mg/dl)14.4溶血:溶血指數(shù)在1000以內(nèi)時(shí)不會(huì)有明顯干擾。(血紅素濃度約為1000mg/dl)14.5藥物:以下所例的藥物濃度范圍內(nèi)不會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生明顯干擾:Acetaminophen(paracetamol)200mg/lAcetylcysteine150mg/lAcetylsalicylicacid1000mg/lAmpicillin-Na1000mg/lAscorbicacid300mg/lCa-Dobesilate200mg/lCefoxitin2500mg/lCyclosporin5mg/lDoxycyclin50mg/lHeparin5000UIbuprofen500mg/lIntralipid10000mg/lL-Dopa20mg/lMethyldopa20mg/lMetronidazol200mg/lPhenylbutazone400mg/lRifampicin60mg/lTheophylline100
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