抗生素類藥物的分析課件

第十六章抗生素類藥物的分析1謝謝觀賞2019-8-29第十六章抗生素類藥物的分析1謝謝觀賞2019-8-29第十六章抗生素類藥物的分析1謝謝觀賞2019-8-29第十六第一節(jié)概述一、抗生素藥物的定義和特點

定義：抗生素是指在低微濃度下即可對某些生物的生命活動有特異抑制作用的化學物質的總稱。抗生素的來源：1.生物合成（發(fā)酵）2.化學合成或半合成2謝謝觀賞2019-8-29第一節(jié)概述一、抗生素藥物的定義和特點定義：抗生素第一節(jié)概述一、抗生素藥物的定義和特點定義：抗生素特點：1.化學純度較低同系物多異構體多降解物多2.活性組分易發(fā)生變異3.穩(wěn)定性差3謝謝觀賞2019-8-29特點：1.化學純度較低同系物多異構體多降解物多2.活性組分易特點：1.化學純度較低同系物多異構體多降解物多2.活性組分易

分類（按結構與性質）：

β–內酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內酯類、多烯大環(huán)類、多肽類、苯烴胺類、蒽環(huán)類、其他抗生素類二、抗生素的分類三、抗生素藥物的細菌耐藥性耐藥性的種類；耐藥的機制4謝謝觀賞2019-8-29分類（按結構與性質）：二、抗生素的分類三、抗生素藥物的細分類（按結構與性質）：二、抗生素的分類三、抗生素藥物的細抗生素質量的復雜性

產品穩(wěn)定性差分子結構大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用發(fā)酵過程不易控制易受污染生產工藝復雜四、抗生素藥物的質量分析5謝謝觀賞2019-8-29抗生素質量的復雜性產品穩(wěn)定性差分子結構大多抗生素質量的復雜性產品穩(wěn)定性差分子結構大多（二）檢查：（一）鑒別：官能團的呈色反應光譜法、色譜法、生物學法1.影響產品穩(wěn)定性的指標：水分2.控制有機和無機雜質的指標3.與臨床安全性密切相關的指標:異常毒性、細菌內毒素、熱原、降壓物質、無菌4.其他檢查項目6謝謝觀賞2019-8-29（二）檢查：（一）鑒別：官能團的呈色反應1.影響產品穩(wěn)定性（二）檢查：（一）鑒別：官能團的呈色反應1.影響產品穩(wěn)定性(三)含量或效價測定（一）微生物檢定法:管碟法和濁度法測定抗生素抑菌或殺菌的能力，結果以效價表示優(yōu)點1、與臨床效果一致2、靈敏度高3、干擾物質少缺點1、操作繁瑣2、培養(yǎng)時間長2、測定誤差大7謝謝觀賞2019-8-29(三)含量或效價測定（一）微生物檢定法:管碟法和濁度法測定抗(三)含量或效價測定（一）微生物檢定法:管碟法和濁度法測定抗（二）理化方法以理化方法測定主藥含量優(yōu)點專屬性強準確度高3.簡單、快速不一定代表生物效價缺點（三）抗生素活性表示方法8謝謝觀賞2019-8-29（二）理化方法以理化方法測定主藥含量優(yōu)點專屬性強不一定代表生（二）理化方法以理化方法測定主藥含量優(yōu)點專屬性強不一定代表生第二節(jié)β–內酰胺類抗生素

青霉素類9謝謝觀賞2019-8-29第二節(jié)β–內酰胺類抗生素青霉素類9謝謝觀賞2019-8第二節(jié)β–內酰胺類抗生素青霉素類9謝謝觀賞2019-8青霉素（青霉素G、芐青霉素）10謝謝觀賞2019-8-29青霉素（青霉素G、芐青霉素）10謝謝觀賞2019-8-29青霉素（青霉素G、芐青霉素）10謝謝觀賞2019-8-29青頭孢菌素類11謝謝觀賞2019-8-29頭孢菌素類11謝謝觀賞2019-8-29頭孢菌素類11謝謝觀賞2019-8-29頭孢菌素類11謝謝觀酸性結構與性質一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽

（一）羧基

易溶于水

12謝謝觀賞2019-8-29酸性結構與性質一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽（一）酸性結構與性質一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽（一）與有機堿(普魯卡因)成鹽

難溶于水普魯卡因青霉素13謝謝觀賞2019-8-29與有機堿(普魯卡因)成鹽難溶于水普魯卡因青霉素13謝謝觀與有機堿(普魯卡因)成鹽難溶于水普魯卡因青霉素13謝謝觀（二）旋光性頭孢菌素類

C6C7青霉素類

C3C5C6

14謝謝觀賞2019-8-29（二）旋光性頭孢菌素類C6C7青霉素類（二）旋光性頭孢菌素類C6C7青霉素類

（三）紫外吸收特性頭孢菌素類母核有共軛體系

青霉素類母核無明顯UV

多數(shù)有苯環(huán)取代基

15謝謝觀賞2019-8-29（三）紫外吸收特性頭孢菌素類（三）紫外吸收特性頭孢菌素類（四）β–內酰胺環(huán)

水溶液不穩(wěn)定

干燥純凈穩(wěn)定

不穩(wěn)定性因素四元環(huán)張力大

酰胺鍵易水解

（某些金屬離子）（溫度）某些氧化劑16謝謝觀賞2019-8-29（四）β–內酰胺環(huán)水溶液（四）β–內酰胺環(huán)水溶液例青霉素的降解反應青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑?；u胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl217謝謝觀賞2019-8-29例青霉素的降解反應青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉例青霉素的降解反應青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉(頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%)18謝謝觀賞2019-8-29(頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%)18謝謝觀賞2019(頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%)18謝謝觀賞2019色譜法（一）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法二、鑒別試驗19謝謝觀賞2019-8-29色譜法（一）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法二、鑒別試色譜法（一）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法二、鑒別試1、IR法β-內酰胺環(huán)酰胺（二）光譜法20謝謝觀賞2019-8-291、IR法β-內酰胺環(huán)酰胺（二）光譜法20謝謝觀賞2019-1、IR法β-內酰胺環(huán)酰胺（二）光譜法20謝謝觀賞2019-2、UV法樣品、分解產物頭孢氨芐

λmax=262nm青霉素V鈉

A280nm/A264nm=1.30～1.50Cu2+21謝謝觀賞2019-8-292、UV法樣品、分解產物頭孢氨芐λmax=2622、UV法樣品、分解產物頭孢氨芐λmax=262Cu2+pH3.8△22謝謝觀賞2019-8-29Cu2+pH3.8△22謝謝觀賞2019-8-29Cu2+pH3.8△22謝謝觀賞2019-8-29Cu2+p（三）呈色反應1.羥肟酸鐵反應β-內酰胺類NaOH呈色Fe3+/3H+23謝謝觀賞2019-8-29（三）呈色反應1.羥肟酸鐵反應β-內酰胺類NaOH呈色（三）呈色反應1.羥肟酸鐵反應β-內酰胺類NaOH呈色2.茚三酮反應△24謝謝觀賞2019-8-292.茚三酮反應△24謝謝觀賞2019-8-292.茚三酮反應△24謝謝觀賞2019-8-292.茚三酮α-氨基、伯胺某些羥基胺類酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍紫色25謝謝觀賞2019-8-29α-氨基、伯胺酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍紫色25謝謝觀賞2α-氨基、伯胺酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍紫色25謝謝觀賞23.與重氮苯磺酸反應:酚羥基（偶合）26謝謝觀賞2019-8-293.與重氮苯磺酸反應:酚羥基（偶合）26謝謝觀賞20193.與重氮苯磺酸反應:酚羥基（偶合）26謝謝觀賞2019（四）各種鹽的反應1.K+、Na+反應2.重氮化-偶合反應重氮化-偶合反應27謝謝觀賞2019-8-29（四）各種鹽的反應1.K+、Na+反應2.重氮化-偶合反應重（四）各種鹽的反應1.K+、Na+反應2.重氮化-偶合反應重三、特殊雜質檢查1、聚合物：分子排阻色譜法凝膠色譜柱－分子篩機制，色譜柱采用親水硅膠、凝膠或葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠；流動相為水或緩沖液

28謝謝觀賞2019-8-29三、特殊雜質檢查1、聚合物：分子排阻色譜法28謝謝觀賞201三、特殊雜質檢查1、聚合物：分子排阻色譜法28謝謝觀賞201

如：頭孢他啶聚合物的測定

固定相：葡聚糖凝膠G-10（40120μm）

流動相A：3.5%硫酸銨的0.1mol/L磷酸鹽緩沖液

流動相B：水檢測波長：254nm

對照品溶液：頭孢他啶對照品100μg/ml

29謝謝觀賞2019-8-29如：頭孢他啶聚合物的測定

固定相：葡聚糖凝膠G-10（如：頭孢他啶聚合物的測定

固定相：葡聚糖凝膠G-10（系統(tǒng)適用性試驗：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖2000、流動相A測定；重復性用對照品溶液、流動相B測定。

N不低于900，拖尾因子<2，峰面積的RSD應小于5.0%。

測定方法：進樣供試液，用流動相A；進樣對照液，用流動相B。以外標法計算，含頭孢他啶聚合物以頭孢他啶計不得超過0.3%。30謝謝觀賞2019-8-29系統(tǒng)適用性試驗：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖系統(tǒng)適用性試驗：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖2、有關物質和異構體頭孢呋辛酯中有關物質和異構體的檢查反相HPLC法固定相：ODS；流動相：0.2mol/L磷酸二氫銨-甲醇（62:38）3、吸光度

雜質吸光度、藥物吸光度4、有機溶劑

氣相色譜法測定溶劑殘留量5、結晶性偏光顯微鏡法和X射線粉末衍射法31謝謝觀賞2019-8-292、有關物質和異構體31謝謝觀賞2019-8-292、有關物質和異構體31謝謝觀賞2019-8-292、有關物內標法＋校正因子外標法特點快速、高效、靈敏專屬性強、重現(xiàn)性好

一法多用（鑒別、檢查、含測）四、含量測定反相高效液相色譜法32謝謝觀賞2019-8-29內標法＋校正因子外標法特點四、含量測定反相高效內標法＋校正因子外標法特點四、含量測定反相高效第三節(jié)氨基糖苷類抗生素鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、巴龍霉素等33謝謝觀賞2019-8-29第三節(jié)氨基糖苷類抗生素鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、新霉素第三節(jié)氨基糖苷類抗生素鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、新霉素鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺鏈霉素化學結構34謝謝觀賞2019-8-29鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-鏈霉素化學結構34謝謝觀賞2019鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-鏈霉素化學結構34謝謝觀賞2019絳紅糖胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺慶大霉素35謝謝觀賞2019-8-29絳紅糖胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-慶大霉素35謝謝絳紅糖胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-慶大霉素35謝謝慶大霉素C復合物慶大霉素C1R=HR1、R2=CH3

慶大霉素C2R=R2=H

R1=CH3

慶大霉素C1aR、R1、R2=H

慶大霉素C2aR=CH3R1=R2=H

36謝謝觀賞2019-8-29慶大霉素C復合物36謝謝觀賞2019-8-29慶大霉素C復合物36謝謝觀賞2019-8-29慶大霉素C復合性質：堿性多與硫酸成鹽溶解性旋光性4.苷的水解和穩(wěn)定性：酸性、堿性均易水解鏈霉素pH5～7.5；慶大霉素pH2～12穩(wěn)定

5.UV：鏈霉素:230nm、慶大霉素等無37謝謝觀賞2019-8-29性質：堿性多與硫酸成鹽37謝謝觀賞2019-8-29性質：堿性多與硫酸成鹽37謝謝觀賞2019-8-29性質：二、

鑒別試驗茚三酮反應（一）△羥基胺結構（二）Molisch試驗具有五碳糖或六碳糖結構H+糠醛或羥甲基糠醛α-萘酚蒽酮紅紫色藍紫色38謝謝觀賞2019-8-29二、鑒別試驗茚三酮反應（一）△羥基胺結構（二）M二、鑒別試驗茚三酮反應（一）△羥基胺結構（二）MN-甲基葡萄糖胺反應（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色（Elson-Morgan反應）39謝謝觀賞2019-8-29N-甲基葡萄糖胺反應（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基N-甲基葡萄糖胺反應（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基(縮合)乙酰丙酮吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色40謝謝觀賞2019-8-29(縮合)乙酰丙酮吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色40謝(縮合)乙酰丙酮吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色40謝麥芽酚反應（四）

鏈霉糖特有反應H+分子重排41謝謝觀賞2019-8-29麥芽酚反應（四）鏈霉糖特有反應H+分子重排41謝謝觀賞麥芽酚反應（四）鏈霉糖特有反應H+分子重排41謝謝觀賞紫紅麥芽酚42謝謝觀賞2019-8-29紫紅麥芽酚42謝謝觀賞2019-8-29紫紅麥芽酚42謝謝觀賞2019-8-29紫紅麥芽酚42謝謝觀鏈霉胍特有反應（或α-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應（五）橙紅色化合物43謝謝觀賞2019-8-29鏈霉胍特有反應（或α-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應（五）橙紅色鏈霉胍特有反應（或α-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應（五）橙紅色（六）反應H+IR法（八）慶大霉素無UV吸收（七）色譜法：TLC法和HPLC法UV法光譜法：44謝謝觀賞2019-8-29（六）反應H+IR法（八）慶大霉素無UV吸收（七）色譜法：T（六）反應H+IR法（八）慶大霉素無UV吸收（七）色譜法：T三、

特殊雜質檢查及組分分析鏈霉素雜質（一）鏈霉素B（甘露糖鏈霉素）

方法TLC中的對照品法

1.來源反應中間體45謝謝觀賞2019-8-29三、特殊雜質檢查及組分分析鏈霉素雜質（一）鏈霉素三、特殊雜質檢查及組分分析鏈霉素雜質（一）鏈霉素對微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同工藝差別C組分比例不一致規(guī)定控制各組分的相對百分含量ChPUSPBPJP慶大霉素C組分的測定（二）46謝謝觀賞2019-8-29對微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同C組對微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同C組ChP（2010）采用蒸發(fā)光散射檢測器測定慶大霉素C組分，以C18作固定相；0.2mol/L三氟乙酸－甲醇作流動相，小諾霉素作內標，考察系統(tǒng)適用性USP熒光衍生化后紫外測定（三）硫酸鹽測定：剩余EDTA絡合滴定法或HPLC法ChP（2010）中硫酸依替米星中硫酸根離子的測定采用HPLC法-蒸發(fā)光散射檢測器47謝謝觀賞2019-8-29ChP（2010）采用蒸發(fā)光散射檢測器測定慶大霉素C組分，以ChP（2010）采用蒸發(fā)光散射檢測器測定慶大霉素C組分，以四、含量測定微生物檢定法各國藥典主要采用HPLC法常用于體內藥分

48謝謝觀賞2019-8-29四、含量測定微生物檢定法各國藥典主要采用HPLC法四、含量測定微生物檢定法各國藥典主要采用HPLC法第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD49謝謝觀賞2019-8-29第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD49謝謝觀賞2019-8第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD49謝謝觀賞2019-850謝謝觀賞2019-8-2950謝謝觀賞2019-8-2950謝謝觀賞2019-8-2950謝謝觀賞2019-8-29一、

結構與性質酸堿性與溶解度（一）1.與酸、堿均能成鹽2.

強酸或強堿中溶解度↑

3.吸濕性多含結晶水酚羥基、烯醇型羥基弱酸性二甲胺基弱堿性51謝謝觀賞2019-8-29一、結構與性質酸堿性與溶解度（一）1.與酸、堿均一、結構與性質酸堿性與溶解度（一）1.與酸、堿均與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+Fe3+Al3+

UV和熒光（三）與金屬離子絡合（四）pH3~7.5熒光

旋光性（二）52謝謝觀賞2019-8-29與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+53謝謝觀賞2019-8-2953謝謝觀賞2019-8-2953謝謝觀賞2019-8-2953謝謝觀賞2019-8-29穩(wěn)定性（五）1.差向異構化54謝謝觀賞2019-8-29穩(wěn)定性（五）1.差向異構化54謝謝觀賞2019-8-29穩(wěn)定性（五）1.差向異構化54謝謝觀賞2019-8-29穩(wěn)定差向四環(huán)素55謝謝觀賞2019-8-29差向四環(huán)素55謝謝觀賞2019-8-29差向四環(huán)素55謝謝觀賞2019-8-29差向四環(huán)素55謝謝觀（土霉素、多西環(huán)素不易差向異構化）56謝謝觀賞2019-8-29（土霉素、多西環(huán)素不易差向異構化）56謝謝觀賞2019-8-（土霉素、多西環(huán)素不易差向異構化）56謝謝觀賞2019-8-2.降解反應（1）酸性下降解λmax=445nmλmax=435nm橙黃色57謝謝觀賞2019-8-292.降解反應（1）酸性下降解λmax=445nmλmax2.降解反應（1）酸性下降解λmax=445nmλmax脫水四環(huán)素58謝謝觀賞2019-8-29脫水四環(huán)素58謝謝觀賞2019-8-29脫水四環(huán)素58謝謝觀賞2019-8-29脫水四環(huán)素58謝謝觀～～TCETCATCEATC＜＜59謝謝觀賞2019-8-29～～TCETCATCEATC＜＜59謝謝觀賞2019-8-2～～TCETCATCEATC＜＜59謝謝觀賞2019-8-2（2）堿性下降解（熒光）60謝謝觀賞2019-8-29（2）堿性下降解（熒光）60謝謝觀賞2019-8-29（2）堿性下降解（熒光）60謝謝觀賞2019-8-29（2）2、TLC法1、HPLC法：加入EDTA，克服痕量金屬造成的拖尾現(xiàn)象二、鑒別試驗3、IR光譜法4、UV光譜法61謝謝觀賞2019-8-292、TLC法1、HPLC法：加入EDTA，克服痕量金屬造成的2、TLC法1、HPLC法：加入EDTA，克服痕量金屬造成的5、顯色法，與H2SO4反應顯色6、FeCl3反應：酚羥基的特征反應62謝謝觀賞2019-8-295、顯色法，與H2SO4反應顯色6、FeCl3反應：酚羥基的5、顯色法，與H2SO4反應顯色6、FeCl3反應：酚羥基的三、

特殊雜質檢查

4-差向四環(huán)素（ETC）脫水四環(huán)素（ATC）差向脫水四環(huán)素（EATC）鹽酸金霉素（CTC）

有關物質（一）HPLC法（2010版）標準品對照法63謝謝觀賞2019-8-29三、特殊雜質檢查4-差向四環(huán)素（ETC）三、特殊雜質檢查4-差向四環(huán)素（ETC）（二）雜質吸收度（三）殘留有機溶劑64謝謝觀賞2019-8-29（二）雜質吸收度（三）殘留有機溶劑64謝謝觀賞2019-8（二）雜質吸收度（三）殘留有機溶劑64謝謝觀賞2019-8四、

含量測定HPLC法

鹽酸四環(huán)素的測定

系統(tǒng)適用性試驗：鹽酸四環(huán)素、有關物質及ATC峰間的分離度均應符合要求。

定量方法：外標法以峰面積計。

65謝謝觀賞2019-8-29四、含量測定HPLC法鹽酸四環(huán)素的測定

四、含量測定HPLC法鹽酸四環(huán)素的測定

第五節(jié)抗生素類藥物中高分子雜質的檢查1.高分子雜質分子量大于藥物本身的雜質總稱。如主要來自于發(fā)酵工藝可致敏的青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽；來源于生產、貯存過程中的自身聚合物等。66謝謝觀賞2019-8-29第五節(jié)抗生素類藥物中高分子雜質的檢查1.高分子雜質6第五節(jié)抗生素類藥物中高分子雜質的檢查1.高分子雜質6如聚合物67謝謝觀賞2019-8-29如聚合物67謝謝觀賞2019-8-29如聚合物67謝謝觀賞2019-8-29如聚合物67謝謝觀賞2高分子雜質的分析方法

簡單測定系統(tǒng)：葡聚糖凝膠G-10（40～

120μm）柱.

HPLC系統(tǒng):葡聚糖凝膠G-10柱.

68謝謝觀賞2019-8-29高分子雜質的分析方法

簡單測定系統(tǒng)：葡聚糖凝膠G-10（40高分子雜質的分析方法

簡單測定系統(tǒng)：葡聚糖凝膠G-10（4069謝謝觀賞2019-8-2969謝謝觀賞2019-8-2969謝謝觀賞2019-8-2969謝謝觀賞2019-8-29第十六章抗生素類藥物的分析70謝謝觀賞2019-8-29第十六章抗生素類藥物的分析1謝謝觀賞2019-8-29第十六章抗生素類藥物的分析70謝謝觀賞2019-8-29第十第一節(jié)概述一、抗生素藥物的定義和特點

定義：抗生素是指在低微濃度下即可對某些生物的生命活動有特異抑制作用的化學物質的總稱。抗生素的來源：1.生物合成（發(fā)酵）2.化學合成或半合成71謝謝觀賞2019-8-29第一節(jié)概述一、抗生素藥物的定義和特點定義：抗生素第一節(jié)概述一、抗生素藥物的定義和特點定義：抗生素特點：1.化學純度較低同系物多異構體多降解物多2.活性組分易發(fā)生變異3.穩(wěn)定性差72謝謝觀賞2019-8-29特點：1.化學純度較低同系物多異構體多降解物多2.活性組分易特點：1.化學純度較低同系物多異構體多降解物多2.活性組分易

分類（按結構與性質）：

β–內酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內酯類、多烯大環(huán)類、多肽類、苯烴胺類、蒽環(huán)類、其他抗生素類二、抗生素的分類三、抗生素藥物的細菌耐藥性耐藥性的種類；耐藥的機制73謝謝觀賞2019-8-29分類（按結構與性質）：二、抗生素的分類三、抗生素藥物的細分類（按結構與性質）：二、抗生素的分類三、抗生素藥物的細抗生素質量的復雜性

產品穩(wěn)定性差分子結構大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用發(fā)酵過程不易控制易受污染生產工藝復雜四、抗生素藥物的質量分析74謝謝觀賞2019-8-29抗生素質量的復雜性產品穩(wěn)定性差分子結構大多抗生素質量的復雜性產品穩(wěn)定性差分子結構大多（二）檢查：（一）鑒別：官能團的呈色反應光譜法、色譜法、生物學法1.影響產品穩(wěn)定性的指標：水分2.控制有機和無機雜質的指標3.與臨床安全性密切相關的指標:異常毒性、細菌內毒素、熱原、降壓物質、無菌4.其他檢查項目75謝謝觀賞2019-8-29（二）檢查：（一）鑒別：官能團的呈色反應1.影響產品穩(wěn)定性（二）檢查：（一）鑒別：官能團的呈色反應1.影響產品穩(wěn)定性(三)含量或效價測定（一）微生物檢定法:管碟法和濁度法測定抗生素抑菌或殺菌的能力，結果以效價表示優(yōu)點1、與臨床效果一致2、靈敏度高3、干擾物質少缺點1、操作繁瑣2、培養(yǎng)時間長2、測定誤差大76謝謝觀賞2019-8-29(三)含量或效價測定（一）微生物檢定法:管碟法和濁度法測定抗(三)含量或效價測定（一）微生物檢定法:管碟法和濁度法測定抗（二）理化方法以理化方法測定主藥含量優(yōu)點專屬性強準確度高3.簡單、快速不一定代表生物效價缺點（三）抗生素活性表示方法77謝謝觀賞2019-8-29（二）理化方法以理化方法測定主藥含量優(yōu)點專屬性強不一定代表生（二）理化方法以理化方法測定主藥含量優(yōu)點專屬性強不一定代表生第二節(jié)β–內酰胺類抗生素

青霉素類78謝謝觀賞2019-8-29第二節(jié)β–內酰胺類抗生素青霉素類9謝謝觀賞2019-8第二節(jié)β–內酰胺類抗生素青霉素類78謝謝觀賞2019-青霉素（青霉素G、芐青霉素）79謝謝觀賞2019-8-29青霉素（青霉素G、芐青霉素）10謝謝觀賞2019-8-29青霉素（青霉素G、芐青霉素）79謝謝觀賞2019-8-29青頭孢菌素類80謝謝觀賞2019-8-29頭孢菌素類11謝謝觀賞2019-8-29頭孢菌素類80謝謝觀賞2019-8-29頭孢菌素類11謝謝觀酸性結構與性質一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽

（一）羧基

易溶于水

81謝謝觀賞2019-8-29酸性結構與性質一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽（一）酸性結構與性質一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽（一）與有機堿(普魯卡因)成鹽

難溶于水普魯卡因青霉素82謝謝觀賞2019-8-29與有機堿(普魯卡因)成鹽難溶于水普魯卡因青霉素13謝謝觀與有機堿(普魯卡因)成鹽難溶于水普魯卡因青霉素82謝謝觀（二）旋光性頭孢菌素類

C6C7青霉素類

C3C5C6

83謝謝觀賞2019-8-29（二）旋光性頭孢菌素類C6C7青霉素類（二）旋光性頭孢菌素類C6C7青霉素類

（三）紫外吸收特性頭孢菌素類母核有共軛體系

青霉素類母核無明顯UV

多數(shù)有苯環(huán)取代基

84謝謝觀賞2019-8-29（三）紫外吸收特性頭孢菌素類（三）紫外吸收特性頭孢菌素類（四）β–內酰胺環(huán)

水溶液不穩(wěn)定

干燥純凈穩(wěn)定

不穩(wěn)定性因素四元環(huán)張力大

酰胺鍵易水解

（某些金屬離子）（溫度）某些氧化劑85謝謝觀賞2019-8-29（四）β–內酰胺環(huán)水溶液（四）β–內酰胺環(huán)水溶液例青霉素的降解反應青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑酰基羥胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl286謝謝觀賞2019-8-29例青霉素的降解反應青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉例青霉素的降解反應青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉(頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%)87謝謝觀賞2019-8-29(頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%)18謝謝觀賞2019(頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%)87謝謝觀賞2019色譜法（一）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法二、鑒別試驗88謝謝觀賞2019-8-29色譜法（一）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法二、鑒別試色譜法（一）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法二、鑒別試1、IR法β-內酰胺環(huán)酰胺（二）光譜法89謝謝觀賞2019-8-291、IR法β-內酰胺環(huán)酰胺（二）光譜法20謝謝觀賞2019-1、IR法β-內酰胺環(huán)酰胺（二）光譜法89謝謝觀賞2019-2、UV法樣品、分解產物頭孢氨芐

λmax=262nm青霉素V鈉

A280nm/A264nm=1.30～1.50Cu2+90謝謝觀賞2019-8-292、UV法樣品、分解產物頭孢氨芐λmax=2622、UV法樣品、分解產物頭孢氨芐λmax=262Cu2+pH3.8△91謝謝觀賞2019-8-29Cu2+pH3.8△22謝謝觀賞2019-8-29Cu2+pH3.8△91謝謝觀賞2019-8-29Cu2+p（三）呈色反應1.羥肟酸鐵反應β-內酰胺類NaOH呈色Fe3+/3H+92謝謝觀賞2019-8-29（三）呈色反應1.羥肟酸鐵反應β-內酰胺類NaOH呈色（三）呈色反應1.羥肟酸鐵反應β-內酰胺類NaOH呈色2.茚三酮反應△93謝謝觀賞2019-8-292.茚三酮反應△24謝謝觀賞2019-8-292.茚三酮反應△93謝謝觀賞2019-8-292.茚三酮α-氨基、伯胺某些羥基胺類酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍紫色94謝謝觀賞2019-8-29α-氨基、伯胺酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍紫色25謝謝觀賞2α-氨基、伯胺酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍紫色94謝謝觀賞23.與重氮苯磺酸反應:酚羥基（偶合）95謝謝觀賞2019-8-293.與重氮苯磺酸反應:酚羥基（偶合）26謝謝觀賞20193.與重氮苯磺酸反應:酚羥基（偶合）95謝謝觀賞2019（四）各種鹽的反應1.K+、Na+反應2.重氮化-偶合反應重氮化-偶合反應96謝謝觀賞2019-8-29（四）各種鹽的反應1.K+、Na+反應2.重氮化-偶合反應重（四）各種鹽的反應1.K+、Na+反應2.重氮化-偶合反應重三、特殊雜質檢查1、聚合物：分子排阻色譜法凝膠色譜柱－分子篩機制，色譜柱采用親水硅膠、凝膠或葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠；流動相為水或緩沖液

97謝謝觀賞2019-8-29三、特殊雜質檢查1、聚合物：分子排阻色譜法28謝謝觀賞201三、特殊雜質檢查1、聚合物：分子排阻色譜法97謝謝觀賞201

如：頭孢他啶聚合物的測定

固定相：葡聚糖凝膠G-10（40120μm）

流動相A：3.5%硫酸銨的0.1mol/L磷酸鹽緩沖液

流動相B：水檢測波長：254nm

對照品溶液：頭孢他啶對照品100μg/ml

98謝謝觀賞2019-8-29如：頭孢他啶聚合物的測定

固定相：葡聚糖凝膠G-10（如：頭孢他啶聚合物的測定

固定相：葡聚糖凝膠G-10（系統(tǒng)適用性試驗：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖2000、流動相A測定；重復性用對照品溶液、流動相B測定。

N不低于900，拖尾因子<2，峰面積的RSD應小于5.0%。

測定方法：進樣供試液，用流動相A；進樣對照液，用流動相B。以外標法計算，含頭孢他啶聚合物以頭孢他啶計不得超過0.3%。99謝謝觀賞2019-8-29系統(tǒng)適用性試驗：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖系統(tǒng)適用性試驗：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖2、有關物質和異構體頭孢呋辛酯中有關物質和異構體的檢查反相HPLC法固定相：ODS；流動相：0.2mol/L磷酸二氫銨-甲醇（62:38）3、吸光度

雜質吸光度、藥物吸光度4、有機溶劑

氣相色譜法測定溶劑殘留量5、結晶性偏光顯微鏡法和X射線粉末衍射法100謝謝觀賞2019-8-292、有關物質和異構體31謝謝觀賞2019-8-292、有關物質和異構體100謝謝觀賞2019-8-292、有關內標法＋校正因子外標法特點快速、高效、靈敏專屬性強、重現(xiàn)性好

一法多用（鑒別、檢查、含測）四、含量測定反相高效液相色譜法101謝謝觀賞2019-8-29內標法＋校正因子外標法特點四、含量測定反相高效內標法＋校正因子外標法特點四、含量測定反相高效第三節(jié)氨基糖苷類抗生素鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、巴龍霉素等102謝謝觀賞2019-8-29第三節(jié)氨基糖苷類抗生素鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、新霉素第三節(jié)氨基糖苷類抗生素鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、新霉素鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺鏈霉素化學結構103謝謝觀賞2019-8-29鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-鏈霉素化學結構34謝謝觀賞2019鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-鏈霉素化學結構103謝謝觀賞201絳紅糖胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺慶大霉素104謝謝觀賞2019-8-29絳紅糖胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-慶大霉素35謝謝絳紅糖胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-慶大霉素104謝慶大霉素C復合物慶大霉素C1R=HR1、R2=CH3

慶大霉素C2R=R2=H

R1=CH3

慶大霉素C1aR、R1、R2=H

慶大霉素C2aR=CH3R1=R2=H

105謝謝觀賞2019-8-29慶大霉素C復合物36謝謝觀賞2019-8-29慶大霉素C復合物105謝謝觀賞2019-8-29慶大霉素C復性質：堿性多與硫酸成鹽溶解性旋光性4.苷的水解和穩(wěn)定性：酸性、堿性均易水解鏈霉素pH5～7.5；慶大霉素pH2～12穩(wěn)定

5.UV：鏈霉素:230nm、慶大霉素等無106謝謝觀賞2019-8-29性質：堿性多與硫酸成鹽37謝謝觀賞2019-8-29性質：堿性多與硫酸成鹽106謝謝觀賞2019-8-29性質二、

鑒別試驗茚三酮反應（一）△羥基胺結構（二）Molisch試驗具有五碳糖或六碳糖結構H+糠醛或羥甲基糠醛α-萘酚蒽酮紅紫色藍紫色107謝謝觀賞2019-8-29二、鑒別試驗茚三酮反應（一）△羥基胺結構（二）M二、鑒別試驗茚三酮反應（一）△羥基胺結構（二）MN-甲基葡萄糖胺反應（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色（Elson-Morgan反應）108謝謝觀賞2019-8-29N-甲基葡萄糖胺反應（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基N-甲基葡萄糖胺反應（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基(縮合)乙酰丙酮吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色109謝謝觀賞2019-8-29(縮合)乙酰丙酮吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色40謝(縮合)乙酰丙酮吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色109麥芽酚反應（四）

鏈霉糖特有反應H+分子重排110謝謝觀賞2019-8-29麥芽酚反應（四）鏈霉糖特有反應H+分子重排41謝謝觀賞麥芽酚反應（四）鏈霉糖特有反應H+分子重排110謝謝觀紫紅麥芽酚111謝謝觀賞2019-8-29紫紅麥芽酚42謝謝觀賞2019-8-29紫紅麥芽酚111謝謝觀賞2019-8-29紫紅麥芽酚42謝謝鏈霉胍特有反應（或α-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應（五）橙紅色化合物112謝謝觀賞2019-8-29鏈霉胍特有反應（或α-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應（五）橙紅色鏈霉胍特有反應（或α-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應（五）橙紅色（六）反應H+IR法（八）慶大霉素無UV吸收（七）色譜法：TLC法和HPLC法UV法光譜法：113謝謝觀賞2019-8-29（六）反應H+IR法（八）慶大霉素無UV吸收（七）色譜法：T（六）反應H+IR法（八）慶大霉素無UV吸收（七）色譜法：T三、

特殊雜質檢查及組分分析鏈霉素雜質（一）鏈霉素B（甘露糖鏈霉素）

方法TLC中的對照品法

1.來源反應中間體114謝謝觀賞2019-8-29三、特殊雜質檢查及組分分析鏈霉素雜質（一）鏈霉素三、特殊雜質檢查及組分分析鏈霉素雜質（一）鏈霉素對微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同工藝差別C組分比例不一致規(guī)定控制各組分的相對百分含量ChPUSPBPJP慶大霉素C組分的測定（二）115謝謝觀賞2019-8-29對微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同C組對微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同C組ChP（2010）采用蒸發(fā)光散射檢測器測定慶大霉素C組分，以C18作固定相；0.2mol/L三氟乙酸－甲醇作流動相，小諾霉素作內標，考察系統(tǒng)適用性USP熒光衍生化后紫外測定（三）硫酸鹽測定：剩余EDTA絡合滴定法或HPLC法ChP（2010）中硫酸依替米星中硫酸根離子的測定采用HPLC法-蒸發(fā)光散射檢測器116謝謝觀賞2019-8-29ChP（2010）采用蒸發(fā)光散射檢測器測定慶大霉素C組分，以ChP（2010）采用蒸發(fā)光散射檢測器測定慶大霉素C組分，以四、含量測定微生物檢定法各國藥典主要采用HPLC法常用于體內藥分

117謝謝觀賞2019-8-29四、含量測定微生物檢定法各國藥典主要采用HPLC法四、含量測定微生物檢定法各國藥典主要采用HPLC法第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD118謝謝觀賞2019-8-29第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD49謝謝觀賞2019-8第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD118謝謝觀賞2019-119謝謝觀賞2019-8-2950謝謝觀賞2019-8-29119謝謝觀賞2019-8-2950謝謝觀賞2019-8-2一、

結構與性質酸堿性與溶解度（一）1.與酸、堿均能成鹽2.

強酸或強堿中溶解度↑

3.吸濕性多含結晶水酚羥基、烯醇型羥基弱酸性二甲胺基弱堿性120謝謝觀賞2019-8-29一、結構與性質酸堿性與溶解度（一）1.與酸、堿均一、結構與性質酸堿性與溶解度（一）1.與酸、堿均與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+Fe3+Al3+

UV和熒光（三）與金屬離子絡合（四）pH3~7.5熒光

旋光性（二）121謝謝觀賞2019-8-29與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+122謝謝觀賞2019-8-2953謝謝觀賞2019-8-29122謝謝觀賞2019-