蘆丁的提取與定性課件

實(shí)驗(yàn)二蘆丁的提取與定性反應(yīng).實(shí)驗(yàn)二.1概述黃酮類化合物廣泛存在于自然界，是一類重要的天然有機(jī)化合物。其不同的顏色為天然色素家族添加了更多色彩。這類含有氧雜環(huán)的化合物多存在于高等植物及羊齒類植物中。黃酮類化合物在花、葉、果等組織中多以苷的形式存在，而在木部堅(jiān)硬組織中，多以游離苷元形式存在。黃酮苷類雖有一定極性，可溶于水，但卻難溶于酸性水，易溶于堿性水，故可用堿性水提取，再將堿水提取液調(diào)成酸性，黃酮苷類即可沉淀析出。此法簡(jiǎn)便易行，蘆丁、橙皮苷、黃芩苷提取都應(yīng)用此法。蘆丁的提取與定性反應(yīng).概述黃酮類化合物廣泛存在于自然界，是一類重要的天然有機(jī)化合2一實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^(guò)蘆丁的提取與精制掌握堿-酸法提取黃酮類化合物的原理及操作通過(guò)蘆丁結(jié)構(gòu)的檢識(shí)，了解苷類結(jié)構(gòu)研究的一般程序和方法了解UV及NMR在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)要求獲得三個(gè)化合物：蘆丁、槲皮素、蘆丁的全乙酰物能根據(jù)化學(xué)實(shí)驗(yàn)及UV、NMR數(shù)據(jù)初步推斷出蘆丁的結(jié)構(gòu)。并對(duì)黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)測(cè)定有一般性的了解蘆丁的提取與定性反應(yīng).一實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康模禾J丁的提取與定性反應(yīng).3蘆丁廣泛存在于植物中，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)含蘆丁的植物達(dá)70種以上，本實(shí)驗(yàn)以槐花米為原料提取蘆丁。由槐米提取蘆丁的方法有水或醇浸提法，熱、冷堿浸提酸沉法，每法各有優(yōu)缺點(diǎn)。前者所需時(shí)間長(zhǎng)，后者有一定水解產(chǎn)物存在。為克服這些缺點(diǎn)，已多采用超聲提取，利用強(qiáng)力超聲波發(fā)生“空化”現(xiàn)象的瞬間所產(chǎn)生的強(qiáng)大沖擊力，使藥材組織中的分子在不被破壞結(jié)構(gòu)的情況下，更快的與組織剝離，繼而分散溶解在溶劑中，從而提高溶出的速度和溶出率.蘆丁廣泛存在于植物中，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)含蘆丁的植物達(dá)70種以上，本實(shí)4（1）利用蘆丁可溶于熱水，難溶于冷水的性質(zhì)進(jìn)行提取；再利用蘆丁在熱乙醇和冷乙醇中溶解度差異較大的性質(zhì)進(jìn)行精制。（2）利用蘆丁可被稀酸水解，生成苷元和糖，通過(guò)紙色譜和薄層色譜進(jìn)行檢識(shí).（1）利用蘆丁可溶于熱水，難溶于冷水的性質(zhì)進(jìn)行提取；再利用蘆5槲皮素蘆丁蘆丁十乙酰化物蘆丁的提取與定性反應(yīng).槲皮素蘆丁蘆丁十乙?；锾J丁的提取與定性反應(yīng).6三、實(shí)驗(yàn)試劑與器材實(shí)驗(yàn)材料：槐米、槲皮素和蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品試劑：蒸餾水、碳酸鈣、濃鹽酸、鎂粉、pH試紙、1%氫氧化鈉、濃硫酸、α－萘酚試劑、50%乙醇、1%三氯化鋁－甲醇試劑、1%醋酸鎂－甲醇試劑、1%槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品；1%蕓香甙標(biāo)準(zhǔn)品、正丁醇、冰醋酸、水、苯胺－鄰苯二甲酸試劑、石灰乳、硼砂。儀器：500ml燒杯、研磨、脫脂棉、濾紙、布氏漏斗、吸濾瓶、廣口瓶、試管、玻璃棒、200mL燒杯、100mL燒杯、滴管、硅膠薄層板、量筒、層析缸、硅膠薄層板、循環(huán)水多用真空泵電子天平、電熱套等。.三、實(shí)驗(yàn)試劑與器材.7四、實(shí)驗(yàn)流程攪拌下加入石灰乳加水300ml槐花米（15g）調(diào)節(jié)PH8-9直火加熱保持微沸30min雙層濾紙趁熱抽濾濾液殘?jiān)?0-70度下，用濃鹽酸調(diào)PH3-4靜置提取蘆丁的提取與定性反應(yīng).四、實(shí)驗(yàn)流程攪拌下加入石灰乳加水300ml槐花米（15g）調(diào)8定性反應(yīng)鹽酸-鎂粉反應(yīng)

將樣品溶于1ml乙醇，加入少許鎂粉振搖，滴加幾滴濃鹽酸，1-2min內(nèi)，觀察顏色變化。Molish反應(yīng)

將樣品溶于1ml乙醇，加入等體積10%α-萘酚溶液，傾斜試管，搖勻，沿管壁滴加濃硫酸，注意觀察兩界面產(chǎn)生的變化。黃酮母核苷類蘆丁的提取與定性反應(yīng).定性反應(yīng)鹽酸-鎂粉反應(yīng)將樣品溶于1ml乙醇，加入少許鎂9黃酮苷的水解第一次實(shí)驗(yàn)所得濾液濾液沉淀（粗品蘆?。┚?份重結(jié)晶水解抽濾按1：60量加入蒸餾水，沉淀懸浮于蒸餾水中，加熱煮沸15分鐘后，趁熱抽濾殘?jiān)鼮V液冷卻，靜置精制蘆?。▊溆茫┌?：70量加入2%硫酸，加熱40min，放冷靜置，抽濾沉淀濾液干燥槲皮素（備用）糖鑒定蘆丁的提取與定性反應(yīng).黃酮苷的水解第一次實(shí)驗(yàn)所得濾液濾液沉淀（粗品蘆?。┚?份重10糖的鑒定水解所得濾液用Ba(OH)2乳調(diào)PH值至中性，折疊濾紙過(guò)濾1.5gBa(OH)2加10ml水殘?jiān)鼮V液蒸干，放冷加1ml95%乙醇溶解樣品溶液紙色譜蘆丁的提取與定性反應(yīng).糖的鑒定水解所得濾液用Ba(OH)2乳調(diào)PH值至中性，折疊濾11糖的紙色譜鑒定標(biāo)準(zhǔn)品：葡萄糖、鼠李糖展開劑：BAW（4：1：5）顯色劑：鄰苯二甲酸苯胺點(diǎn)樣層析蘆丁的提取與定性反應(yīng).糖的紙色譜鑒定標(biāo)準(zhǔn)品：葡萄糖、鼠李糖展開劑：BAW（4：1：12蘆丁的全乙?；J丁0.1g加入2ml無(wú)水吡啶加入8ml醋酐反應(yīng)液直火，水浴上回流30min，放冷，攪拌下將反應(yīng)液倒入70ml水中，一直攪拌到油滴消失，白色沉淀析出為止反應(yīng)液抽濾，干燥反應(yīng)物防水蘆丁的提取與定性反應(yīng).蘆丁的全乙?；J丁0.1g加入2ml無(wú)水吡啶反應(yīng)液直火，水13聚酰胺薄層色譜樣品：分別取少量蘆丁、槲皮素、蘆丁的十乙?；镉?ml95%乙醇溶解展開劑：75%乙醇10ml顯色劑：氨水，2%AlCl3/EtOH顏色氨水熏AlCl3噴霧Rf值日光UV日光UV日光UV標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁槲皮素樣品蘆丁槲皮素蘆丁?；镉^察記錄蘆丁的提取與定性反應(yīng).聚酰胺薄層色譜樣品：分別取少量蘆丁、槲皮素、蘆丁的十乙酰14定性反應(yīng)鹽酸-鎂粉反應(yīng)

將樣品溶于1ml乙醇，加入少許鎂粉振搖，滴加幾滴濃鹽酸，1-2min內(nèi)，觀察顏色變化。Molish反應(yīng)

將樣品溶于1ml乙醇，加入等體積10%α-萘酚溶液，傾斜試管，搖勻，沿管壁滴加濃硫酸，注意觀察兩界面產(chǎn)生的變化。黃酮母核苷類樣品：少量蘆丁、槲皮素蘆丁的提取與定性反應(yīng).定性反應(yīng)鹽酸-鎂粉反應(yīng)將樣品溶于1ml乙醇，加入少許鎂152%二氯氧鋯-檸檬酸反應(yīng)

將樣品溶于1ml乙醇，加入2%二氯氧鋯-檸檬酸溶液，搖勻，觀察顏色變化。將反應(yīng)液均分成兩份，向其中一份滴加檸檬酸甲醇溶液，另一部分加等量醇溶液作對(duì)照。比較顏色變化。3-OH，5-OH定性反應(yīng)穩(wěn)定性：3-OH絡(luò)合物〉5-OH絡(luò)合物蘆丁的提取與定性反應(yīng).2%二氯氧鋯-檸檬酸反應(yīng)將樣品溶于1ml乙醇，加入2%16實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)蘆丁粉碎不可過(guò)細(xì)，以免過(guò)濾時(shí)速度過(guò)慢加入石灰乳即可達(dá)到堿溶解提取蘆丁的目的，還可以除去槐花米中含有的大量多糖類粘液質(zhì)，但pH值不能過(guò)高，否則鈣能與蘆丁形成螯合物而沉淀析出pH值過(guò)低會(huì)使蘆丁形成氧鹽重新溶解，降低收率（最佳pH值為5）蘆丁的提取與定性反應(yīng).實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)蘆丁粉碎不可過(guò)細(xì)，以免過(guò)濾時(shí)速度過(guò)慢蘆丁的提取與17思考題