藥物雜質(zhì)檢查-一般雜質(zhì)檢查（藥物分析課件）

十三、澄清度檢查法

檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。

1.檢查方法對(duì)照法

2.濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制

中國(guó)藥典規(guī)定用濁度標(biāo)準(zhǔn)液作為澄清度檢查的標(biāo)準(zhǔn)。

反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5個(gè)級(jí)號(hào)）3.判斷藥典中規(guī)定的“澄清”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過(guò)0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液?！皫缀醭吻濉眲t指供試品溶液的濁度介于0.5號(hào)至1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度之間4.溶劑：水、酸、堿、有機(jī)溶劑有機(jī)酸的堿金屬鹽類(lèi)藥物強(qiáng)調(diào)用“新沸過(guò)的冷水”

檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物中混入的無(wú)機(jī)雜質(zhì)(金屬氧化物或無(wú)機(jī)鹽類(lèi))。

1.原理

樣品炭化后+H2SO4濕潤(rùn)→700～800℃熾灼至恒重→熾灼殘?jiān)蛩峄曳郑┫蘖恳话銥?.1%～0.2%九、熾灼殘?jiān)鼨z查法2.操作方法3.注意事項(xiàng)

（1）供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q(chēng)量誤差決定。

（3）若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查，則500～600℃熾灼至恒重。

（2）含氟的藥物對(duì)瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。（4）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化例1.熾灼殘?jiān)鼨z查法一般加熱恒重的溫度為A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃例2.熾灼殘?jiān)鼨z查后，將殘?jiān)糇髦亟饘贆z查時(shí)，熾灼溫度應(yīng)為A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃例3.熾灼殘?jiān)南蘖恳话銥锳.1％B.0.5％～1％C.0.4％～0.5％D.0.2％～0.3％E.0.1％～0.2％例4.熾灼殘?jiān)鼨z查時(shí)，炭化后經(jīng)硫酸處理后灰化至完全的稱(chēng)為A.灰分B.殘?jiān)麮.硫酸灰分D.熾灼灰分E.殘余灰分七、干燥失重測(cè)定法

干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測(cè)定方法：

（一）常壓恒溫干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105℃。

干燥失重：第二次及以后各次稱(chēng)重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。

熾灼殘?jiān)旱诙渭耙院蟾鞔畏Q(chēng)重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)熾灼0.5h后進(jìn)行。

（二）干燥劑干燥法適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。干燥劑：硅膠、濃硫酸、P2O5

。（三）減壓干燥法

適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。

除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg）以下。真空烘箱(帶真空泵、干燥瓶）例1A．干燥失重測(cè)定法B．熾灼殘?jiān)鼨z查

C．兩者皆是D．兩者皆不是1.有機(jī)物雜質(zhì)檢測(cè)法2.不溶物的測(cè)定法3.雜質(zhì)檢查法4.有機(jī)藥物中不揮發(fā)無(wú)機(jī)物的檢測(cè)法5.藥物中揮發(fā)性物質(zhì)的檢測(cè)法DDCBA例2.干燥失重測(cè)定的方法有A．熾灼（500～600℃）法B．常壓恒溫干澡法C．減壓干燥法D．干燥劑干燥法E．減壓干燥劑干燥法例3.干燥失重測(cè)定中應(yīng)注意哪幾個(gè)方面

A.供試品平鋪在稱(chēng)量瓶中的厚度一般不超過(guò)5mmB.干燥溫度一般為105℃C.可用干燥劑干燥

D.主要指水分和揮發(fā)性物質(zhì)

E.測(cè)定時(shí)間不超過(guò)3小時(shí)第二節(jié)一般雜質(zhì)檢查一、一般雜質(zhì)檢查規(guī)則

《藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定：

1.遵循平行操作原則（1）儀器的配對(duì)性如納氏比色管應(yīng)配對(duì)，刻度線高低相差不超過(guò)2mm，砷鹽檢查時(shí)導(dǎo)氣管長(zhǎng)度及孔的大小要一致（2）對(duì)照品與供試品的同步操作2.正確的取樣及供試品的稱(chēng)量范圍

1g不超過(guò)±2%，＞1g不超過(guò)±1%3.正確的比色、比濁方法4.檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對(duì)供試管和對(duì)照管各復(fù)查二份三、硫酸鹽檢查法（一）原理

對(duì)照法（二）測(cè)定條件

1.標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.2～0.5mg的所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液2～5ml。

2.反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，(鹽酸作用？）且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。

3.試劑：氯化鋇

5.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。

4.供試液和對(duì)照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。

（三）干擾及排除6.最適檢測(cè)濃度：

0.2~0.5mgSO4-2/50ML例：藥物中硫酸鹽檢查時(shí)，所用的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液是

A.標(biāo)準(zhǔn)氯化鋇B.標(biāo)準(zhǔn)醋酸鉛溶液C.標(biāo)準(zhǔn)硝酸銀溶液D.標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液

E.以上都不對(duì)

二、氯化物檢查法（一）原理對(duì)照法樣品管對(duì)照管1.0mL用水稀釋至50mL6.0mL0.60g0.010%(濃度：10

gCl－/ml)（二）檢查方法

藥典附錄除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品葡萄糖中氯化物檢查在暗處放置5min

(避免AgCl分解)同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較即得（三）測(cè)定條件

1.標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液10

gCl

/ml，50ml溶液中含50～80

g的Cl

所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5～8ml。

2.反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

（1）加速AgCl渾濁的形成；

（2）產(chǎn)生較好的乳濁；

（3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。

3.試劑：硝酸銀

5.避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見(jiàn)光易分解。

4.供試液和對(duì)照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

7.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。6.溫度的影響：30~40℃產(chǎn)生濁度最大，且恒定，但作為限度檢查，可在室溫進(jìn)行。

8.平行操作原則

9.

最適檢出濃度：

0.05~0.08mg/50ml（四）干擾及排除

1.若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

（1）內(nèi)消色法：倍量法，如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查。

（2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。

a.內(nèi)消色法如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查.

2.當(dāng)有其它干擾物質(zhì)存在時(shí)，必需在檢查前除去（1）碘化物中氯化物的檢查

（2）溴化物中氯化物的檢查

（3）碘中氯化物的檢查

a.碘化物中氯化物的檢查Cl－的氧化電位高(1.35)不能被氧化為Cl2I-的氧化電位低(0.53)

b.碘中氯化物的檢查反應(yīng)原理:根據(jù)氨中溶解度不同

AgCl(溶解)＞AgBr(微溶)＞AgI(不溶)Cl－的氧化電位高(1.35)不能被氧化為Cl2Br-的氧化電位低(1.08)c.

溴化物中氯化物的檢查

3.不溶于水的有機(jī)藥物

（1）加水振搖，過(guò)濾，取濾液進(jìn)行檢查。

（2）加熱，放冷，過(guò)濾，取濾液進(jìn)行檢查。

（3）溶于有機(jī)溶劑如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后進(jìn)行檢查。

4.有機(jī)藥物中有機(jī)氯雜質(zhì)的檢查，具體情況，具體分析。

問(wèn)題：藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是

A.硫酸B.硝酸C.鹽酸D.醋酸E.磷酸

例1.中國(guó)藥典（2000年版）規(guī)定，檢查氯化物雜質(zhì)時(shí)，一般取用標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（10μgCl－/ml）5～8ml的原因是A.使檢查反應(yīng)完全B.藥物中含氯化物的量均在此范圍C.加速反應(yīng)D.所產(chǎn)生的濁度梯度明顯E.避免干擾

例2.采用硝酸銀試液檢查氯化物時(shí)，加入硝酸使溶液酸化的目的是

A．加速生成氯化銀渾濁反應(yīng)B．消除某些弱酸鹽的干擾C．消除碳酸鹽干擾D．消除磷酸鹽干擾E．避免氧化銀沉淀生成例3.當(dāng)采用比濁法檢查氯化物雜質(zhì)時(shí)，若藥物本身有顏色而干擾檢查的話，應(yīng)該選用的處理方法為A．內(nèi)消色法B．外消色法C．比色法D．差示比濁法

E．差示可見(jiàn)分光法

例4.若要進(jìn)行高錳酸鉀中氯化物的檢查，最佳方法是A.加入一定量氯仿提取后測(cè)定B.氧瓶燃燒C.倍量法D.加入一定量乙醇E.以上都不對(duì)例5.下列哪些條件為藥物中氯化物檢查的必要條件A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分鐘D.用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液做對(duì)照E.在白色背景下觀察

五、熱分析法熱分析法是在程序控制溫度下，精確記錄待測(cè)物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過(guò)程所發(fā)生的晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化和脫水、熱分解、氧化還原等化學(xué)變化，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)（如熔點(diǎn)和沸點(diǎn)）的確定、鑒別和純度檢查的方法。

亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制劑輔料的優(yōu)選1.熱重法（TGA）

熱重法是在程序控制溫度下，測(cè)量物質(zhì)質(zhì)量與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。

記錄質(zhì)量變化對(duì)溫度的關(guān)系曲線即熱重曲線。熱重曲線的縱坐標(biāo)為質(zhì)量(m)，橫坐標(biāo)為溫度(T)或時(shí)間(t)。m

本法適用于藥物結(jié)晶水的測(cè)定和貴重藥物或在空氣中極易氧化藥物的干燥失重分析。

特點(diǎn)：準(zhǔn)確測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量變化及變化速度、樣品用量少、速度快2.差熱分析法（DTA）

差熱分析法是在程序控制溫度下，測(cè)量待測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫度差（△T）與溫度(或時(shí)間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)。

差熱分析曲線記錄的縱坐標(biāo)為樣品與參比物的溫度差(

T)，

T與熱容量差(CR—Cs)成正比，橫坐標(biāo)為溫度。

△T差熱分析曲線無(wú)反應(yīng)吸熱反應(yīng)

本法可鑒別藥物或其多晶形，可檢查藥物的純度3.差示掃描量熱法（DSC）

差示掃描量熱法是在程序控制溫度下，測(cè)量輸給待測(cè)物質(zhì)和參比物的能量差與溫度(或時(shí)間)關(guān)系的一種技術(shù)。

本法可鑒別藥物或其多晶形、純度檢查以及熔點(diǎn)和水分等的測(cè)定。例1~5

A.HPLCB.TGAC.TLCD.DSCE.DTA

1.差示熱分析法

2.薄層色譜法

3.熱重分析法

4.高效液相色譜法

5.差示掃描量熱法ECBAD十二、溶液顏色檢查法控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法。

ChP(2010)采用三種方法檢查。

第一法目視比色法即與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法，全波長(zhǎng)范圍定性觀察觀察方法

標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制

第二法分光光度法單一波長(zhǎng)定量第三法色差計(jì)法全波長(zhǎng)范圍定量

本法是通過(guò)色差計(jì)直接測(cè)定溶液的透視三刺激值，對(duì)其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。測(cè)定與水的色差值

測(cè)色儀器一般為光電積分型色差計(jì)

六、砷鹽檢查法（一）古蔡法

ChP（2010）、BP（2011）遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較1.原理對(duì)照法

黃色棕色2.操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備（2）供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作古蔡法3.測(cè)定條件

（1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，1

gAs/ml。

（2）酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。

（3）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：A.還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度；

B.碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行；

C.氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；

D.可抑制微量Sb的干擾，在實(shí)驗(yàn)條件下，100

gSb存在不干擾。（4）醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝管高度60～80mm。

（5）鋅粒應(yīng)無(wú)砷（6）砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察4.干擾及排除（1）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，加HNO3，△，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。（2）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。（3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，要先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。常用的有機(jī)破壞方法：（4）本法適用于不含Sb或含Sb量小于100

g的供試品。

堿破壞法：a加入氫氧化鈣500-600

C灼燒例：酚磺

b加入無(wú)水碳酸鈉堿融例：苯甲酸鈉

酸破壞法：加稀硫酸與溴化鉀例：葡萄糖中砷鹽檢查（二）Ag-DDC法檢查、含量測(cè)定

ChP(2010)、USP（34）

對(duì)照法

砷化氫與Ag-DDC溶液作用，還原Ag—DDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，進(jìn)行比較。

用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。USP（34）用吡啶，ChP（2010）用三乙胺。

本法適用于含Sb量小于500

g的供試品。（三）白田道夫法原理：氯化亞錫在HCl中能將砷鹽還原成棕褐色的膠態(tài)砷，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液，同法處理后比較顏色。

含Sb藥物中砷鹽的檢查如葡萄糖酸銻鈉優(yōu)點(diǎn)：不受銻干擾缺點(diǎn)：靈敏度低Sb≤100ugSb≤500ugSb>500ugZn、HClKI、SnCl2HgBr2Zn、HClKI、SnCl2Ag-DDCSnCl2HCl黃棕色砷斑

紅色膠態(tài)銀棕褐色膠態(tài)砷方法適用范圍試劑結(jié)果古蔡氏法Ag-DDC

法白田道夫法(四)奇列氏法（次磷酸法）BP1.原理

在鹽酸酸性溶液中,次磷酸還原砷鹽為棕色的游離砷,與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液同法處理后比較顏色.NaH2PO2+HCl→H3PO2+NaCl3H3PO2+H3AsO3→3H3PO3+2AS↓棕色

2.特點(diǎn)不受S2-,SO32-,Sb干擾靈敏度較古蔡氏法低例1.在藥物的雜質(zhì)檢查中，其限量一般不超過(guò)百萬(wàn)分之十的是

A.氯化物B.硫酸鹽C.醋酸鹽D.砷鹽E.淀粉

例1.在藥物的雜質(zhì)檢查中，其限量一般不超過(guò)百萬(wàn)分之十的是

A.氯化物B.硫酸鹽C.醋酸鹽D.砷鹽E.淀粉

例2.在用古蔡法檢查砷鹽時(shí)，導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的目的是A.除去I2

B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH3例4.古蔡氏法中，SnC12的作用有A.使As5+→As3+

B.除去H2SC.除去I2

D.組成鋅錫齊E.除去其它雜質(zhì)

例5.Ag—DDC法檢查砷鹽的原理為：砷化氫與Ag—DDC吡啶作用，生成的物質(zhì)是A.砷斑B.銻斑C.膠態(tài)砷D.三氧化二砷E.膠態(tài)銀例6.中國(guó)藥典（2010年版）收載的古蔡法檢查砷鹽的基本原理是

A.與鋅、酸作用生成H2S氣體

B.與鋅、酸作用生成AsH3氣體

C.產(chǎn)生的氣體遇氯化汞試紙產(chǎn)生砷斑

D.比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的面積大小

E.比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的顏色強(qiáng)度

適用于

A.古蔡氏（Gutzeit）法

B.二乙基二硫代氨基甲酸銀法

C.A和B均可D.A和B均不可1.在連接砷化氫發(fā)生瓶的導(dǎo)管中裝入醋酸鉛棉花2.使用的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液為2m13.測(cè)定結(jié)果要與標(biāo)準(zhǔn)砷斑相比較4.要測(cè)定吸收度5.要用酸堿滴定法

CCABD例7.用古蔡氏法檢查下列藥物中的砷鹽時(shí)，排除干擾的方法：

A.先用硝酸或溴水氧化

B.先加酸性氯化亞錫還原

C.改用白田道夫法D.先加氰化鉀掩蔽

E.先加草酸生成沉淀

1.硫化物

2.亞硫酸鹽

3.硫代硫酸鹽

4.高鐵鹽

5.銻鹽AAABC例8.Ag—DDC法檢查砷鹽時(shí)，所產(chǎn)生的紅色溶液為

A.HDDC吡啶溶液

B.Ag吡啶溶液

C.Ag的膠態(tài)溶液

D.Ag(DDC)溶液

E.AsAg3溶液例8.ChP（2010）檢查葡萄糖酸銻鈉中的砷鹽時(shí)，應(yīng)選用A.古蔡氏法B.白田道夫法C.碘量法D.Ag—DDC法E.契列法例9.葡萄糖中砷鹽的檢查，需要的試劑應(yīng)有

A．Pb2+標(biāo)準(zhǔn)液

B．SnCl2試液

C．KI試液

D．ZnE．醋酸鉛棉花例10.Ag-DDC法檢查砷鹽時(shí)，加入碘化鉀和酸性氯化亞錫的作用為A．將As5+還原為As3+B．有利于AsH3生成反應(yīng)C．抑制SbH3的生成D．形成Zn-Sn齊以均勻而連續(xù)地發(fā)生氫氣E．催化加速生成AsH3例11.古蔡氏法檢砷，藥典規(guī)定制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑時(shí)，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液A.1mlB.5mlC.2mlD.依限量大小決定E.以上都不對(duì)例12.古蔡氏法檢查所用的溶液是A.強(qiáng)堿性溶液B.強(qiáng)酸性溶液C.含稀鹽酸10ml/50ml溶液D.含稀硝酸10ml/50ml溶液E.含強(qiáng)氧化劑(硝酸或過(guò)硫酸銨)溶液A.硝酸銀試液B.氯化鋇試液C.硫代乙酰胺試液D.硫化鈉試液E.硫氰酸鹽試液1．藥物中鐵鹽檢查2．磺胺嘧啶中重金屬檢查3．藥物中硫酸鹽檢查4．葡萄糖中重金屬檢查5．藥物中氯化物檢查EACBD可用于檢查的雜質(zhì)為A.氯化物B.砷鹽C.鐵鹽D.硫酸鹽E.重金屬1．在酸性溶液中與氯化鋇生成渾濁液的方法2．在酸性溶液中與硫氰酸鹽生成紅色的方法3．在實(shí)驗(yàn)條件下與硫代乙酰胺形成均勻混懸溶液的方法4．Ag-DDC法5．古蔡法DCEBB雜質(zhì)檢查中所用的酸是A.稀硝酸B.稀鹽酸C.硝酸D.鹽酸E.醋酸鹽緩沖液1.氯化物檢查法2.硫酸鹽檢查法3.鐵鹽檢查法4.重金屬檢查法5.砷鹽檢查法ABBED藥物中的水分包括結(jié)晶水和吸附水。中國(guó)、美國(guó)和英國(guó)藥典收載了費(fèi)休氏法和甲苯法。費(fèi)休氏法（卡爾·費(fèi)休法）（karlfischer）:可以測(cè)定結(jié)晶水、吸附水和游離水。原理：I2+SO2+H2O→2HI+SO3八水分測(cè)定法根據(jù)消耗碘的量來(lái)測(cè)定水分的含量。是對(duì)于測(cè)定水分最為專(zhuān)一，也是最為準(zhǔn)確的化學(xué)方法主要內(nèi)容一、理論部分二、水分測(cè)定儀的基本操作步驟三、KF滴定的優(yōu)越性及其特點(diǎn)四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)六、水分測(cè)定儀的維護(hù)保養(yǎng)一、KarlFischer滴定基本理論

卡爾·費(fèi)休法簡(jiǎn)稱(chēng)費(fèi)休法，是1935年卡爾·費(fèi)休(KarlFjscher)提出的測(cè)定水分的容量分析方法。費(fèi)休法是測(cè)定物質(zhì)水分的各類(lèi)化學(xué)方法中，對(duì)水最為專(zhuān)一、最為準(zhǔn)確的方法。雖屬經(jīng)典方法但經(jīng)過(guò)近年改進(jìn)，提高了準(zhǔn)確度，擴(kuò)大了測(cè)量范圍，已被列為許多物質(zhì)中水分測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)方法。

KarlFischer

1901-1958一、KarlFischer滴定基本理論

1.費(fèi)休氏法化學(xué)反應(yīng)原理化學(xué)反應(yīng)I2

+SO2+H2O

2HI+SO3ˉ吡啶存在時(shí)無(wú)水吡啶能定量地吸收HI和SO3ˉ，生成氫碘酸吡啶和亞硫酸吡啶。C5H5N·I2+C5H5N·SO2+C5H5N+H2O2C5H5N·HI+C5H5N·SO3

一、KarlFischer滴定基本理論亞硫酸吡啶不穩(wěn)定，能與水發(fā)生副反應(yīng)，消耗一部分水，因而干擾測(cè)定。如下反應(yīng)：C5H5N·SO3+H2OC5H5NHSO4H加入無(wú)水甲醇避免了上述副反應(yīng)的發(fā)生。

C5H5N·SO3+CH3OHC5H5NHSO4CH3綜上總的反應(yīng)式:C5H5N?I2+C5H5N?SO2+C5H5N+CH3OH+H2O2C5H5N?HI+C5H5N?HSO4CH3

一、

KarlFischer滴定基本理論2.費(fèi)休氏水分測(cè)定電化學(xué)反應(yīng)原理

一旦所有的水都與碘進(jìn)行了反應(yīng),滴定杯中的混和液中就會(huì)有游離態(tài)的碘,此游離碘將促使離子導(dǎo)電并且降低電壓,以使極化電流穩(wěn)定,當(dāng)電壓降至某一設(shè)定值時(shí),滴定終止.

二、水分測(cè)定儀的基本操作步驟1.準(zhǔn)備工作

2.加入試劑

3.預(yù)滴定、標(biāo)定和漂移值測(cè)定

4.

供試品水分測(cè)定

5.關(guān)機(jī)

三、KF滴定的優(yōu)越性及其特點(diǎn)1.KF滴定的優(yōu)越性(與其它幾種水分測(cè)定比較)卡氏水分測(cè)定法干燥失重（常壓、減壓）甲苯法（中藥）應(yīng)用廣泛（適用于多種有機(jī)物和無(wú)機(jī)物，還包括遇熱易破壞的藥品）烘箱干燥（對(duì)熱較穩(wěn)定藥品）減壓干燥（使用對(duì)熱較不穩(wěn)定或水分較難除盡的）含揮發(fā)性成分藥品適合于ppm級(jí)至100％水含量100％水含量100％水含量檢測(cè)快速檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)操作簡(jiǎn)易結(jié)果準(zhǔn)確操作簡(jiǎn)單，但精密度準(zhǔn)確度不夠高操作存在甲苯用量大，毒性大不受地方限制受地方限制受地方限制三、KF滴定的優(yōu)越性及其特點(diǎn)(1)試劑對(duì)水的作用靈敏性和專(zhuān)一性高，是較理想的水分測(cè)定方法。(2)適用于遇熱易分解的物質(zhì)或含有揮發(fā)性成分的供試品的水分測(cè)定。(3)費(fèi)休氏試劑本身可以作為指示劑，也可用永停滴定法指示終點(diǎn)。2.KF滴定的特點(diǎn)三、KF滴定的優(yōu)越性及其特點(diǎn)(4)屬于非水溶液的氧化還原滴定方法，所以具有與碘可以發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)不適用本法。(5)受空氣濕度的影響較大，因此空氣濕度大和陰雨天氣不宜進(jìn)行。三、KF滴定的優(yōu)越性及其特點(diǎn)3.費(fèi)休氏水分測(cè)定儀的特點(diǎn)測(cè)量精度高，密封性能好，漂移值＜2mgH2O/min，背景自動(dòng)測(cè)定和扣除。DL31卡爾費(fèi)休容量法水分滴定儀三、KF滴定的優(yōu)越性及其特點(diǎn)可與天平連接直接獲取樣品重量、連接電腦直接輸出報(bào)告。滴定迅速：通常只需3分鐘操作簡(jiǎn)便，功能靈活多樣，常規(guī)操作中，只需通過(guò)儀器面板的三鍵完成。在滴定中可隨時(shí)修改參數(shù)和輸入信息，無(wú)需中斷正在進(jìn)行的滴定。787KF專(zhuān)一型容量法自動(dòng)卡氏水份測(cè)定儀

四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)1.水含量及其適用分析方法容量法水含量1mg-100%庫(kù)侖法水含量10μg–10mg四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)容量分析法將待測(cè)樣品先溶解于無(wú)水甲醇中，用費(fèi)休氏試液滴定，當(dāng)樣品溶液中的水分消耗完畢，過(guò)量的用費(fèi)休氏試液可以指示終點(diǎn)：顏色有淡黃→淺紅棕色，或永停滴定法。用于常量和半微量水分測(cè)定。庫(kù)侖分析法滴定劑（費(fèi)休氏試液）中是不含有碘的，而是雙鉑電極在含碘離子的陽(yáng)極電解液中電解產(chǎn)生。當(dāng)所有的水消耗完畢，就會(huì)在電極上有過(guò)量的碘產(chǎn)生，永停滴定儀指示終點(diǎn)到達(dá)。主要用于微量水分的測(cè)定，因此，庫(kù)侖滴定法在藥品水分測(cè)定中較少應(yīng)用。分析方法四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)(1)滴定杯的密封性非常重要。在滴定過(guò)程中,一些甲醇會(huì)揮發(fā),凝聚于滴定杯的頂部接口處或滴定杯壁。在通常情況下,1L空氣平均含有12mg水.在潮濕的季節(jié),空氣中的水分含量甚至更高。1L空氣中的水分可消耗2.5mL的滴定度為5的試劑或6mL的滴定度為2的試劑。甲醇是十分吸潮的溶劑,因此滴定杯的上部區(qū)域會(huì)非常的潮濕。以上這部分可能存在的水分被稱(chēng)為漂移或背景,能導(dǎo)致滴定終點(diǎn)延遲,以至于引起所測(cè)得的水分含量偏高。2.滴定杯四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)(2)滴定杯可接受的最大漂移值

50μgH2O/min=0.01mL滴定度5

20μgH2O

/min=0.01mL滴定度2

10μgH2O

/min=0.01mL滴定度12.滴定杯四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)滴定度=WEmg/mLWE(水當(dāng)量)=mgH2O

/mL滴定劑

舉例:滴定度=5.125意味著:

如果滴定過(guò)程消耗了1.00mL滴定劑,則被滴定的水的量為5.125mg。溫度影響:+1°C-0.1%滴定度3.滴定度四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)4.填裝分子篩的干燥管(1)為了防止試劑受潮,一個(gè)裝滿分子篩(0.3nm)

或HYDRANAL?-

吸濕劑的干燥管應(yīng)該被采用到試劑瓶上。

這樣在更換試劑時(shí)始終獲得干燥的空氣。由此提高滴定度的穩(wěn)定性.

(2)使用后的分子篩可在160～300°C

的烘箱中再生(至少24小時(shí)).

(3)HYDRANAL?-吸濕劑可以在140°C下再生(直到顏色恢復(fù)正常).四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)液體為了將樣品直接注入溶液,使用帶有長(zhǎng)針頭的移液器或注射器.高水含量的液體用帶有短細(xì)針頭的注射器,如胰島素注射器。固體,粉末使用稱(chēng)量船或漏斗,差重法稱(chēng)量。糊狀物，脂類(lèi),乳制品使用不帶針頭的注射器,差重法稱(chēng)量。5.樣品處理四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)6.KF滴定的驗(yàn)證(容量分析法)測(cè)定滴定度預(yù)滴定添加和滴定一已知量的水添加和滴定樣品添加和滴定一已知量的水四、日常工作程序?qū)嵱靡c(diǎn)7.如何檢驗(yàn)一種未知的樣品?首先根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)程序滴定樣品。如果樣品不溶解添加助溶劑,如甲酰胺，二甲苯，己醇,或氯仿。嘗試在40-50°C進(jìn)行滴定,如有必要滴定可以在沸騰的甲醇中進(jìn)行.使用均化器。碾磨樣品.如果樣品引起副反應(yīng)

檢查pH。

使用非甲醇介質(zhì).

測(cè)試樣品是否確實(shí)與碘發(fā)生反應(yīng)。

五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)(1)環(huán)境濕度環(huán)境濕度是導(dǎo)致卡爾費(fèi)休法滴定出現(xiàn)誤差的最常見(jiàn)的因素之一.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可通過(guò)使用空調(diào)降低室內(nèi)溫度來(lái)降低濕度.在濕度很大的情況下實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要配置除濕機(jī).1.水分測(cè)定結(jié)果的影響因素五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)（2）溫度溫度對(duì)卡爾費(fèi)休滴定速度有明顯的影響.在低溫下可以降低反應(yīng)速度,減少影響滴定結(jié)果的副反應(yīng)發(fā)生;在高溫下可加快樣品的溶解及水分的萃取,使滴定時(shí)間縮短.五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)（3）儀器的密封性能新購(gòu)的儀器密封性較好，隨著使用時(shí)間的延長(zhǎng)，密封程度會(huì)有所變化：密封圈的老化，干燥劑失效，長(zhǎng)時(shí)間不使用導(dǎo)致儀器內(nèi)部管路、滴定瓶、溶劑等吸附環(huán)境水分，使測(cè)定過(guò)程出現(xiàn)終點(diǎn)達(dá)到延長(zhǎng)，重現(xiàn)性差等問(wèn)題。五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)（4）電極的敏感度影響雙鉑電極敏感度的主要因素是沉積在電極表面的污垢。將電極保存在清潔的溶劑中并定期清洗，以保持電極對(duì)電化學(xué)反應(yīng)的靈敏度。五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)取樣方法和進(jìn)樣量的大小由于卡爾費(fèi)休滴定試劑很容易吸收水分,系統(tǒng)密封很重要，否則由于吸濕現(xiàn)象造成終點(diǎn)長(zhǎng)時(shí)間的不穩(wěn)定和嚴(yán)重的誤差。卡爾費(fèi)休試劑的滴定度的大小滴定試劑的發(fā)送頭的結(jié)構(gòu)與位置在滴定時(shí)攪拌要充分且均勻在進(jìn)樣時(shí),要防止注射器頭受外界的污染而影響測(cè)定結(jié)果所測(cè)樣品中干擾物質(zhì)的存在。2.影響水分測(cè)定精密度因素五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)-

確保電源線插入的插座已經(jīng)接地！如未接地，可能導(dǎo)致人身傷亡事故。3.注意事項(xiàng)(1)五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)-

-使用化學(xué)品和溶劑時(shí)，請(qǐng)遵照制造商的使用指導(dǎo)和通用的實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范-

勿在有爆炸危險(xiǎn)性的環(huán)境內(nèi)工作！儀器外殼并非完全氣密（存在因火星、進(jìn)入氣體產(chǎn)生的腐蝕等造成的爆炸可能性）-

卡爾費(fèi)休氏劑都易燃并具有刺激性或毒性：如皮膚不慎接觸了卡爾費(fèi)休試劑，應(yīng)立即用大量水沖洗！眼睛若不慎接觸，應(yīng)要沖洗徹底并咨詢(xún)醫(yī)生。(2)五、水分測(cè)定影響因素及注意事項(xiàng)1.立即擦去濺在儀器上的液體！儀器并不防水

2.必須排除以下環(huán)境影響因素：強(qiáng)勁的振動(dòng)；陽(yáng)光直射；環(huán)境濕度高于70％；溫度低于5℃或高于40℃；強(qiáng)大的電場(chǎng)或磁場(chǎng)(3)六、水分測(cè)定儀的維護(hù)保養(yǎng)1.清潔可以用蘸有酒精的布清潔滴定儀滴定容器和密封蓋均可拆卸下來(lái)進(jìn)行清洗,60℃烘干備用。當(dāng)某些卡爾費(fèi)休試劑或樣品使電極響應(yīng)時(shí)間退化時(shí)（終點(diǎn)漂移），就應(yīng)該清潔電極了：可以將之置入去離子水的超聲浴中幾分鐘或鉻酸浴中60秒，然后用水或乙醇清洗。

六、水分測(cè)定儀的維護(hù)保養(yǎng)2.當(dāng)系統(tǒng)已不在密閉時(shí)，需要更換螺帽的O形圈3.當(dāng)特氟龍密封圈不再緊密時(shí)，需要更換泵管。4.分子篩：若卡爾費(fèi)休溶液的漂移值始終偏高，需要給干燥管灌裝新鮮的分子篩。（可以將分子篩放入160～300℃的干燥箱中至少24小時(shí)使之再生，由于裝在廢液瓶上的分子篩含有SO2，再生前應(yīng)用去離子水沖洗之。）六、水分測(cè)定儀的維護(hù)保養(yǎng)5.滴定完畢后，將費(fèi)休氏試液移入貯存瓶中密封保存，滴定裝置用甲醇洗滌，以防滴管頭及磨口和活塞處析出潔晶以致堵塞。六、水分測(cè)定儀的維護(hù)保養(yǎng)5.滴定完畢后，將費(fèi)休氏試液移入貯存瓶中密封保存，滴定裝置用甲醇洗滌，以防滴管頭及磨口和活塞處析出潔晶以致堵塞。四、鐵鹽檢查法1.原理

對(duì)照法（一）硫氰酸鹽法

ChP（2005）、USP（31）2.檢查方法

藥典附錄

除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品：（一）硫氰酸鹽法4ml25ml稀HCl30%硫氰酸銨過(guò)硫酸銨50mgH2O50mlH2O

樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液3mlHNO3

3.測(cè)定條件

（1）用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸鐵銨）配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（加入硫酸防止Fe3+的水解），標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液10

gFe3+/ml，50ml溶液中含10～50

g的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0～5.0ml。

（2）反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。

（3）試劑：硫氰酸銨。加過(guò)量硫氰酸銨，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行（4）檢查Fe2+和Fe3+

（5）鐵鹽檢查時(shí)，加氧化劑氧化Fe2+為Fe3+。加過(guò)硫酸銨可氧化Fe2+為Fe3+，同時(shí)可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+

（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。

4.干擾及排除

（1）為了提高靈敏度或供試管與對(duì)照管色調(diào)不一致時(shí)，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。？

（2）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)700～800℃熾灼破壞處理后再依法檢查。

（3）干擾離子的影響（二）巰基醋酸法對(duì)照法本法靈敏度較高，但試劑較貴例1.中國(guó)藥典（2010年版）規(guī)定鐵鹽的檢查方法為A.硫氰酸鹽法B.巰基醋酸法C.普魯士藍(lán)法D鄰二氮菲法E.水楊酸顯色法例2.中國(guó)藥典（2010年版）規(guī)定，硫氰酸銨法檢查鐵鹽時(shí)，加入過(guò)硫酸銨的目的是

A.使藥物中鐵鹽都轉(zhuǎn)變?yōu)镕e3+B.防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色

C.使產(chǎn)生的紅色產(chǎn)物顏色更深

D．防止干擾

E．便于觀察、比較

例3.鐵鹽檢查法時(shí)，要求酸性條件的原因是A.防止Fe3+水解B.防止Fe2+還原C.使生成顏色穩(wěn)定D.提高反應(yīng)靈敏度E.防止Fe3+與Cl-形成配位化合物

例4.中國(guó)藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查A.FeB.Fe2+C.Fe3+D.Fe2+和Fe3+E.以上都不對(duì)

十、易炭化物檢查法

檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。

方法：H2SO4炭化后與對(duì)照液比較。

對(duì)照液：（1）“溶液顏色檢查”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；（2）由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對(duì)照液；比色：同置白色背景前，平視觀察比較。（3）高錳酸鉀液十一、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法1.有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法是用以檢查藥物在生產(chǎn)過(guò)程中引入的有害有機(jī)溶劑，包括苯、氯仿、二氧六環(huán)、二氯甲烷、吡啶、甲苯及環(huán)氧乙烷。

2.檢查方法中國(guó)藥典采用氣相色譜法檢查殘留有機(jī)溶劑色譜條件：固定相：直徑為0.25～0.18mm的二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孔小球載氣：氮?dú)鈾z測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)柱溫：80～170℃色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：中國(guó)藥典規(guī)定，在殘留溶劑測(cè)定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。外標(biāo)法

限度檢查：根據(jù)藥典殘留溶劑限度檢查的規(guī)定，供試品所得被測(cè)溶劑峰面積不得大于對(duì)照品溶液相應(yīng)的峰面積。內(nèi)標(biāo)法

限度檢查：供試品溶液待測(cè)溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)峰物質(zhì)面積之比不得大于對(duì)照品溶液相應(yīng)比值。標(biāo)準(zhǔn)加入法當(dāng)供試品和對(duì)照品處于不完全相同的基質(zhì)中，基質(zhì)可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。采用標(biāo)準(zhǔn)加入法可以消除基質(zhì)效應(yīng)的影響。當(dāng)其它方法與標(biāo)準(zhǔn)加入法結(jié)果不一致時(shí)，以標(biāo)準(zhǔn)加入法為準(zhǔn)。

限度檢查：

雜質(zhì)對(duì)照液+供試液外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法測(cè)定總量總量-加入的雜質(zhì)對(duì)照品量=雜質(zhì)量有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定