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安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科作業(yè)指導(dǎo)書文件編號(hào):AYL-S7-052版本:3.0頁碼:第1頁共4頁編寫者:沈繼錄審核者:玉節(jié)衿批準(zhǔn)人:活總生效日期:2012.1.1文件發(fā)放范圍:微生物組文件年度審核審核者:審核者:審核者:審核者:日期:日期:日期:日期:血液及骨髓標(biāo)本的采集及運(yùn)送1檢驗(yàn)項(xiàng)目血液、骨髓的細(xì)菌培養(yǎng)2物品準(zhǔn)備與檢驗(yàn)申請領(lǐng)取標(biāo)本采集的容器。請拿檢驗(yàn)申請條碼到內(nèi)科醫(yī)技樓三樓細(xì)菌室登記領(lǐng)取專用血培養(yǎng)瓶。細(xì)菌室周一到周六上午、周一至周五下午正常上班。其他時(shí)間如中午、夜間、節(jié)假日請到外科一號(hào)樓一樓急診化驗(yàn)室領(lǐng)取。成人血培養(yǎng)領(lǐng)成人瓶(藍(lán)色帽為未用抗生素需氧瓶,灰色帽為已用抗生素需氧瓶,紫色帽為厭氧瓶),兒童血培養(yǎng)領(lǐng)兒童瓶(粉紅色帽)。打印微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)簽。當(dāng)班護(hù)士將醫(yī)生所開醫(yī)囑輸入個(gè)臨床科室病人管理系統(tǒng),核對病人信息和檢驗(yàn)申請信息后,生成微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)簽。標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)包括:病人姓名、性別、住院號(hào)、床位、標(biāo)本種類、檢驗(yàn)項(xiàng)目及檢驗(yàn)單據(jù)號(hào)等。經(jīng)雙人核對檢驗(yàn)項(xiàng)目清單、標(biāo)本容器及醫(yī)囑后,將標(biāo)簽正確地貼在標(biāo)本容器上,不可貼在標(biāo)本容器蓋上,不可覆蓋容器自帶的條形碼。3標(biāo)本采集采集指征3.1.1癥狀指征:病人出現(xiàn)以下一種或幾種體征時(shí)應(yīng)采集血培養(yǎng)①發(fā)熱O38C)或低溫?36C)②寒戰(zhàn)③白細(xì)胞增多(>10xl09/L特別有“核左移”時(shí)),④血液病患者出現(xiàn)粒細(xì)胞減少(成熟的多形核白細(xì)胞<lx109/L)⑤血小板減少⑥皮膚、黏膜出血⑦昏迷⑧多器官衰竭⑨血壓降低⑩C反應(yīng)蛋白升高及呼吸加快等。疾病指征:化膿性病灶或損害、粘膜損傷性疾病、肝臟疾病、糖尿病、血液疾病及惡性腫瘤、艾滋病、呼吸道感染或呼吸衰竭、長期輸液或?qū)Ч芙槿爰膊?、血液透析患者。幾種特殊情況新生兒可疑菌血癥時(shí),除發(fā)熱或低溫外,很少培養(yǎng)出細(xì)菌,應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。老年菌血癥病人可能不發(fā)熱或不低溫,如伴有身體不適、肌痛或中風(fēng),可能是感染性心內(nèi)膜炎,也應(yīng)采取血培養(yǎng)。骨髓培養(yǎng)與血液培養(yǎng)的送檢指征是基本一致的,臨床常規(guī)血液感染有指征時(shí)以抽取血培養(yǎng)為主。但當(dāng)骨髓炎時(shí)或長期使用抗菌藥物患者,抽取骨髓培養(yǎng)陽性率會(huì)遠(yuǎn)高于血培養(yǎng)。④各種無菌體液標(biāo)本,如胸腹水、漿膜腔積液及各種穿刺液等亦可注入血培養(yǎng)瓶以提高培養(yǎng)的陽性率。采集方法皮膚消毒程序嚴(yán)格按以下三步法進(jìn)行:70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上。用一根碘酊或碘伏棉簽消毒皮膚(1?2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s),從穿刺點(diǎn)向外以1.5?2cm直徑畫圈進(jìn)行消毒。70%酒精脫碘。對碘過敏的病人只能用70%酒精消毒,消毒60s,待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。培養(yǎng)瓶消毒程序用70%異丙基乙醇(不能用碘酒)消毒血培養(yǎng)瓶橡膠塞。酒精作用30s。靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序在穿刺前或穿刺期間,為防止靜脈滑動(dòng),可戴乳膠手套固定靜脈,不可接觸穿刺點(diǎn)。用注射器無菌穿刺取血后,直接注入血培養(yǎng)瓶中(勿換針頭)。血標(biāo)本接種到培養(yǎng)瓶后,輕輕顛倒混勻以防血液凝固,立即送檢,切勿冷藏!*若沒有70%酒精也可用75%酒精代替。注入血液后不需再消毒瓶塞,也不用再蓋塑料蓋,不要將棉球或棉簽貼在瓶口。采血量成人采血量是8?10ml,兒童采血量1?5ml(占總血量的1%)。骨髓采集量一般為21ml。3.2.5注意事項(xiàng):①從靜脈采血(通常采血部位為肘靜脈),不建議從動(dòng)脈采血,疑是細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí),則以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜,切忌在靜脈滴注抗菌藥物處采血。血培養(yǎng)不要和測血?dú)饧把恋娜⊙瑫r(shí)進(jìn)行(或在先)。②用注射器無菌穿刺取血后勿換針頭(如果行第二次穿刺,應(yīng)換針頭)直接注入消毒后的血培養(yǎng)瓶。不推薦靜脈血直接入瓶。③多次采血應(yīng)在不同部位的血管穿刺以排除皮膚菌叢污染的可能。除非無法作靜脈穿刺取血,否則不應(yīng)從靜脈植入管(靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口)內(nèi)取血。④如血培養(yǎng)是通過靜脈植入管采集的(不要棄去起始部分的血液,不用抗凝劑沖洗)應(yīng)同時(shí)自外周靜脈采集血液進(jìn)行血培養(yǎng),以協(xié)助判讀血培養(yǎng)陽性結(jié)果,同時(shí)應(yīng)在申請單上注明。⑤抽血前應(yīng)將標(biāo)簽貼于或直接寫于血培養(yǎng)瓶頸上或瓶身空白處,標(biāo)簽內(nèi)容包括病人信息、采血時(shí)間、采血部位、采血量。注意不要把標(biāo)簽貼在培養(yǎng)瓶條形碼上,不要在條碼上涂寫,否則儀器無法識(shí)別。⑥如同時(shí)作需氧和厭氧培養(yǎng),應(yīng)先將標(biāo)本接種到厭氧瓶中,然后再注入需氧瓶,嚴(yán)格防止將空氣注入?yún)捬跗恐?。若血量不足則先接種需氧瓶10ml血,然后將剩余的血注入?yún)捬跗績?nèi),因?yàn)檎婢~綠假單胞菌、窄食單胞菌只在需氧瓶內(nèi)生長。⑦有血的培養(yǎng)瓶若不能立即送檢,可放室溫保存,但不可放入冰箱保存。未使用的血培養(yǎng)瓶放室溫保存。3.2.6血培養(yǎng)次數(shù)和采血時(shí)間(1)總的采血原則:采血培養(yǎng)應(yīng)該盡量在使用抗菌藥之前進(jìn)行(心內(nèi)膜炎除外),在24h內(nèi)采集2?3份血培養(yǎng)(一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份血培養(yǎng))。如有可能最好同時(shí)做厭氧菌培養(yǎng)。對間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱的患者,應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.5?1h采集血液,或于寒戰(zhàn)或發(fā)熱后1h內(nèi)采集,因?yàn)榘l(fā)熱時(shí)血液中可能沒有細(xì)菌。在采集血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)不需要再重復(fù)采血培養(yǎng)(除外心內(nèi)膜炎和導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥),因?yàn)檫M(jìn)行治療后的2-5天血液中的感染細(xì)菌不會(huì)馬上消失。(2)特殊的全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)的建議:①懷疑為急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、急性腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎、細(xì)菌性肺炎、腎盂腎炎發(fā)熱患者,應(yīng)在不同部位(如兩臂)采集2?3份血標(biāo)本(應(yīng)在抗生素治療前完成)。②不明原因發(fā)熱如隱性膿腫,傷寒熱和波浪熱,先在不同部位采集2?3份血標(biāo)本,間隔三1h,24-36h后估計(jì)體溫升高之前(通常在下午)再采集2份以上。③懷疑為菌血癥或真菌血癥,但血培養(yǎng)持續(xù)陰性,應(yīng)改變血培養(yǎng)方法,以獲得罕見的或苛養(yǎng)的微生物。④懷疑為細(xì)菌性心內(nèi)膜炎者,在1?2h內(nèi)多部位采集3份血標(biāo)本,如果24h后陰性,再采集3份以上的血標(biāo)本。入院前2周內(nèi)接受抗菌藥物治療的患者,連續(xù)3天,每天采集2份,可選用能中和或吸附抗菌藥物的培養(yǎng)基。4標(biāo)本運(yùn)送和驗(yàn)收采血后應(yīng)該立即送檢,如不能立即送檢,需室溫保存,切勿冷藏。送檢地點(diǎn):檢驗(yàn)科細(xì)菌室4.3血培養(yǎng)瓶驗(yàn)收:①檢查培養(yǎng)瓶是否有滲漏、破裂或明顯污染。②檢查瓶子上的標(biāo)簽是否合格。③檢查血液標(biāo)本是否適量,血液是否凝固。4.4不合格血培養(yǎng)標(biāo)本的處理:①拒收培養(yǎng)瓶:血培養(yǎng)瓶標(biāo)簽不清,培養(yǎng)瓶破裂或明顯污染,血液凝固的培養(yǎng)瓶。處理方法:立即與臨床醫(yī)師聯(lián)系,報(bào)告拒收的具體理由。②補(bǔ)做培養(yǎng)瓶:血標(biāo)本采集后放置12h以上,用不適當(dāng)類型的培養(yǎng)瓶收集標(biāo)本,用過期的培養(yǎng)瓶收集標(biāo)本,采血量不足等。處理方法
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