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第九單元生物技術(shù)實(shí)踐26微生物的應(yīng)用探考情悟真題【考情探究】考點(diǎn) 內(nèi)容 要求 5年考情 推測(cè)熱度考題例如 素養(yǎng)要素 難度和利用
分別
究力量究力量
分分
中 ★★★★☆中 ★★★★☆分析解讀本專題包括了微生物培育和分別的一般方法,選考中往往與生產(chǎn)生活相結(jié)合,側(cè)重于實(shí)際問題的解決。估量今后的考察形式還是以非選擇題為主,可單獨(dú)考察,也可結(jié)合基因工程或食品加工等學(xué)問加以考察。復(fù)習(xí)時(shí)重點(diǎn)把握微生物培育和分別的相關(guān)操作技術(shù),留意區(qū)分劃線分別法和涂布分別法?!菊骖}探秘】考點(diǎn)微生物的培育和利用【考點(diǎn)集訓(xùn)】考向微生物的利用1.(2023浙江綠色聯(lián)盟聯(lián)考,32)答復(fù)以下有關(guān)分別土壤中以尿素為氮源的微生物的試驗(yàn):(1)1g土樣后用逐步稀釋,得到不同濃度的稀釋液,取樣時(shí)盡量只取。(2)尿素溶液用(填工具)進(jìn)展滅菌,以下關(guān)于該滅菌操作的表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是。固定化酶的滅菌可使用該法C.其他培育基成分應(yīng)用高壓蒸汽法滅菌D.菌液稀釋、接種等均應(yīng)在酒精燈火焰旁操作倍數(shù)下,培育基中的紅色圈直徑大小不一,說明不同菌落的微生物可能是同一種菌的不同 ,這種用于篩選高表達(dá)量微生物的方法稱為 。假設(shè)在10-5濃度下培育皿的平均菌落數(shù)為13,則該1g土樣中含分解尿素微生物的數(shù)量約為 個(gè)/mL。答案 (1)無菌水 懸液 (2)G6玻璃砂漏斗 B(3)菌株 單菌落分別(或涂布分別)一)]某村莊有一條小溪,近幾年由于上游幾家乳膠廠不斷向其中排放廢水,小溪變得不再清亮。某同學(xué)想測(cè)定該溪水中的細(xì)菌含量狀況。答復(fù)以下問題:先依據(jù)所學(xué)學(xué)問制備LB培育基。制備該培育基的步驟:計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板,以下關(guān)于制培育基的表達(dá),錯(cuò)誤的選項(xiàng)是( )培育基應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)展滅菌培育基應(yīng)先滅菌再分裝到培育皿溶化瓊脂時(shí)不能使培育基溢出或燒焦121℃,500g/cm215分鐘該同學(xué)利用上述制備的培育基來檢測(cè)水樣中的細(xì)菌數(shù)量,他所選擇的分別方法應(yīng)是 ;該同學(xué)在接種前,隨機(jī)取假設(shè)干滅菌后的空白平板先行培育了一段時(shí)間,這樣做的目的是 在超凈工作臺(tái)上進(jìn)展,工作臺(tái)上試驗(yàn)前一段時(shí)間需翻開,試驗(yàn)中需關(guān)閉的是 (A.酒精燈 B.照明燈C.紫外線 D.過濾風(fēng))。,他所選擇的這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比實(shí)際細(xì)菌的數(shù)目要低,這是由于① ;②(不考慮試驗(yàn)操作緣由引起的細(xì)菌數(shù)目的變化)。該同學(xué)欲將所分別出的某種細(xì)菌臨時(shí)保藏,應(yīng)接種到試管的 培育基上,等菌落長成后,放入冰箱低溫保藏。答案 (1)D涂布分別法 檢查平板滅菌是否徹底 C①該方法只能統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目,死菌無法統(tǒng)計(jì)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí),平板上觀看到的只是一個(gè)菌落(4)斜面方法區(qū)分消毒與滅菌【方法集訓(xùn)】位的雜菌( )培育基、手、接種環(huán)答案C
接種環(huán)、手、高壓鍋2.(2023屆浙江七彩陽光高三聯(lián)考,7)以下關(guān)于G6玻璃砂漏斗過濾滅菌的表達(dá),錯(cuò)誤的選項(xiàng)是( A.G6玻璃砂漏斗孔徑小,細(xì)菌不能濾過B.滅菌前應(yīng)將漏斗用鹽酸浸泡和抽濾去酸C.過濾時(shí)可承受抽濾方式加快滅菌速率D.該滅菌方法適用于加熱易分解物質(zhì)的滅菌答案 B
【五年高考】A組 自主命題·浙江卷題組考點(diǎn)微生物的培育和利用11月選考,32(一),7分]答復(fù)與微生物培育及應(yīng)用有關(guān)的問題:對(duì)培育基進(jìn)展高壓蒸汽滅菌時(shí),滅菌時(shí)間應(yīng)從 。對(duì)于不耐熱的液體,一般可將其轉(zhuǎn)入G6玻璃砂漏斗中,承受 方式可較快地進(jìn)展過濾滅菌。與釀造果醋相比,利用大米高粱等富含淀粉的原料制醋,需增加 桿菌培育基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇組成,其中甘露醇的主要作用是 。為篩選胞外α-淀粉酶分泌型菌種,一般從(A.果園樹下B.肉類加工廠四周C.米酒廠四周D.枯樹四周)獲得土樣,用無菌水稀釋,涂布到含有淀粉的選擇培育基上培育,一段時(shí)間后在培育基外表滴加碘液,可在菌落四周觀看到水解圈。假設(shè)要篩選酶活性較高的菌種,需選擇假設(shè)干個(gè) 比值大的菌落,分別利用液體培育基振蕩培育進(jìn)展擴(kuò)增。然后將培育液離心,取 用于檢測(cè)酶活性。答案 (1)到達(dá)設(shè)定的溫度或壓力值 抽濾將淀粉分解為葡萄糖 作為碳源C水解圈直徑與菌落直徑 上清液10月選考,32(一),7分]請(qǐng)答復(fù)從土壤中分別產(chǎn)脲酶細(xì)菌和脲酶固定化試驗(yàn)的有關(guān)問題:LB固體培育基:取適量的蛋白胨、酵母提取液、NaCl,參加肯定量的蒸餾水溶解,再加 滅菌備用。尿素固體培育基:先將適宜濃度的尿素溶液,用 滅菌過的G6玻璃砂漏斗過濾,由于G6玻璃砂漏斗 ,故用于過濾除菌,然后將尿素溶液加到已經(jīng)滅菌的含有酚紅的培育基中,備用。取適量含產(chǎn)脲酶細(xì)菌的10-10-5兩種土壤稀釋液,分別涂布接種到LB固體培育基和尿素固體培育基培育48h,推想固體培育基上生長的菌落數(shù)最少的是 (A.10-5稀釋液+尿素固體培育基 B.10-5稀釋+LB固體培育基 C.10-4稀釋液+尿素固體培育基 D.10-4稀釋+LB固體培育基)。在尿素固體培育基上產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落四周消滅 ,其緣由是細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生了 。酶時(shí),用石英砂吸附脲酶,裝柱。再用蒸餾水洗滌固定化酶柱,其作用是 。答案 (1)瓊脂 (2)高壓蒸汽 孔徑很小,細(xì)菌不能濾過 (3)A 紅色環(huán)帶 氨(或NH)(4)除去游離3的脲酶B組 統(tǒng)一命題、省(區(qū)、市)卷題組考點(diǎn)微生物的培育和利用課標(biāo)全國Ⅲ,37,15分)答復(fù)以下與細(xì)菌培育相關(guān)的問題。在細(xì)菌培育時(shí),培育基中能同時(shí)供給碳源、氮源的成分是 (填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO”)。通常,制備培育基時(shí)要依據(jù)所培育細(xì)菌的不同來調(diào)整培育基的pH,其緣由3是 硝化細(xì)菌在沒有碳源的培育基上 (填“能夠”或“不能”)生長,緣由是 。用平板培育細(xì)菌時(shí)一般需要將平板 (填“倒置”或“正置”)。平板上會(huì)形成菌落,爭論人員通??梢罁?jù)菌落的外形、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物,緣由是 。有些使用后的培育基在丟棄前需要經(jīng)過 這種處理可以殺死丟棄物中全部的微生物。答案 (1)蛋白胨 不同細(xì)菌生長生殖所需的最適pH不同能夠 硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源 (2)倒置 (3)在肯定的培育條件下,不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征 (4)滅菌)W是一種含氮有機(jī)物,會(huì)污染土壤。W在培育基中到達(dá)肯定量時(shí)培育基表現(xiàn)為不透亮。某爭論小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。答復(fù)以下問題。要從土壤中分別目標(biāo)菌,所用選擇培育基中的氮源應(yīng)當(dāng)是 。在從土壤中分別目標(biāo)菌的過程中,覺察培育基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如下圖)。假設(shè)要得到目標(biāo)菌,應(yīng)中選擇 菌落進(jìn)一步純化,選擇的依據(jù)是 。中的氮?dú)庾鳛榈?請(qǐng)簡要寫出試驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即。該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(E)。為了比較酶E與自然W力量的差異,該小組擬進(jìn)展如下試驗(yàn),請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有肯定濃度W的固體培育基上,A處滴加含有酶E的緩沖液,B處滴加含有一樣濃度自然酶的緩沖液,C處滴加 ,三處滴加量一樣。②一段時(shí)間后,測(cè)量透亮圈的直徑。假設(shè)C處沒有消滅透亮圈,說明 的透亮圈直徑大小相近,說明 。答案(1)W(2)乙乙菌落四周消滅透亮圈,W(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培育基上,假設(shè)細(xì)菌能生長,則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?4)①緩沖液②緩沖液不能降解W酶EW的力量相近課標(biāo)全國Ⅱ,37,15分)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,常常通過消毒和滅菌來避開雜菌的污染。:在試驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的試驗(yàn)器具 填“可以”或“不行以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)展干熱滅菌。毒常承受巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是 。密閉空間內(nèi)的空氣可承受紫外線照耀消毒,其緣由是紫外線能 在照耀前,適量噴灑 ,可強(qiáng)化消毒效果。水廠供給的自來水通常是經(jīng)過 (填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),假設(shè)壓力到達(dá)設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有到達(dá)相應(yīng)溫度,最可能的緣由是 。答案 (1)可以 (2)在到達(dá)消毒目的的同時(shí),養(yǎng)分物質(zhì)損失較少 (3)破壞DNA構(gòu)造 消毒液 (4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡C組教師專用題組1.〔2015浙江自選,17,10分〕某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶料添加劑,開展了產(chǎn)該酶菌株的篩選、酶的固定化及其特性分析爭論,其流程如以下圖所示:土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘,共目的是篩選出① 。在無菌條件下,將經(jīng)過處理的土壤懸液進(jìn)展② ,然后涂布于含有植酸鈉的固體培育基上。培育后觀看到③ ,其四周消滅透亮水解圈,圈的直徑大小與④ 強(qiáng)弱有關(guān)。篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后,將優(yōu)良菌株進(jìn)展液體擴(kuò)大培育。培育時(shí)需要振蕩,其主要目的是⑤。液體培育基與固體培育基相比,不含有的成分是⑥ 。件下,將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后,滴加到肯定濃度的鈣離子溶液中,使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對(duì)酶進(jìn)展⑦ 。吸附 B.包埋 C.裝柱 D.洗滌溫度與植酸酶相對(duì)于酶活性的關(guān)系如下圖。以下表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是⑧ 。A.測(cè)試溫度中,固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃測(cè)試溫度范圍內(nèi),固定化植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)低于非固定化植酸酶C.固定化與非固定化植酸酶相比,相對(duì)酶活性在80%以上時(shí)的溫度范圍較寬D.65℃時(shí)固定化與非固定化植酸酶的相對(duì)酶活性因蛋白質(zhì)變性而位于最低點(diǎn)答案〔1〕①耐高溫菌株〔2〕②稀釋③單菌落④植酸酶的活性〔3〕⑤供氧⑥瓊脂(4〕⑦B〔5〕⑧D配制培育基滅菌、倒平板X培育觀看分)幽門螺桿菌(Hp)配制培育基滅菌、倒平板X培育觀看:在配制培育基時(shí),要參加尿素和酚紅指示劑,這是由于Hp含有① ,它能以尿素作為氮源;假設(shè)有Hp,則菌落四周會(huì)消滅② 色環(huán)帶。以下對(duì)尿素溶液進(jìn)展滅菌的最適方法是③ 滅菌。A.高壓蒸汽 B.紫外燈照耀C.70%酒精浸泡D.過濾步驟X表示④ 。在無菌條件下操作時(shí),先將菌液稀釋,然后將菌液⑤ 基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得⑥ 菌落。在培育時(shí),需將培育皿倒置并放在⑦ 中。假設(shè)不倒置培育,將導(dǎo)致⑧ 。臨床上用1C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp,其根本原理是Hp能將1C標(biāo)記的⑨ 分解為NH和314CO。2答案 (1)①脲酶 (2)③D④接種 ⑤涂布 ⑥單⑦恒溫培育箱 形成單菌落(5)⑨尿素【三年模擬】時(shí)間:25分鐘分值:45分一、選擇題(每題5分,共5分)屆浙江嘉興高三9月測(cè)試,17)如圖是劃線分別法接種微生物的示意圖,以下表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是( )該接種過程一般需灼燒接種環(huán)5次C.假設(shè)培育的是尿素分解菌,可參加酚紅指示劑D.該接種方法不能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)培育液中微生物數(shù)量答案 B二、非選擇題(共40分)2.(2023屆浙江嘉興高三9月測(cè)試,29)(8分)答復(fù)與微生物培育、果膠提取及果酒制作有關(guān)的問題。在豆芽汁中參加肯定量蔗糖和瓊脂,用蒸餾水定容后滅菌,得到M培育基。①M(fèi)培育基如用于培育霉菌,在培育基滅菌 (選填“前”或“后”)要把培育基的pH調(diào)至 填“中性偏酸”“中性”或“中性偏堿”)。生物,在M培育基中用淀粉取代蔗糖,并參加顯色劑,接種土壤稀釋液并培育。參加的顯色劑是 ,在產(chǎn)淀粉酶微生物的菌落四周會(huì)形成 。柚皮富含果膠,將柚皮汁進(jìn)展過濾,參加 消滅絮狀沉淀,再經(jīng) 果膠干制品。利用葡萄勻漿釀制葡萄酒的兩個(gè)簡易裝置如下圖。①與甲裝置相比,乙裝置的優(yōu)點(diǎn)有:避開發(fā)酵瓶中氣壓過高; 出一點(diǎn)即可)。后3天內(nèi)都未看到氣泡冒出。欲使發(fā)酵盡快發(fā)生,你的建議是 。答案 (8分,每空1分)①前 中性偏酸 ②碘—碘化鉀溶液 透亮圈無水乙醇 過濾①避開因開蓋放氣導(dǎo)致雜菌污染 ②參加更多的酵母3.(2023浙江金麗衢十二校聯(lián)考,32)(7分)某同學(xué)要從土壤中分別出能分解尿素的細(xì)菌,并統(tǒng)計(jì)單位體積土用。答復(fù)以下問題:配制該培育基應(yīng)參加的凝固劑和顯色劑分別是 ,參加培育基的三角瓶需用 滅菌。素的細(xì)菌時(shí),在接種前需要檢測(cè)培育基是否被污染。承受的檢測(cè)方法是 。假設(shè)要統(tǒng)計(jì)土壤樣品中尿素分解菌的數(shù)目,宜承受 法接種,依據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體,統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目就能大約推想出樣品中的活菌數(shù)一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為10-的培育基中得平板上菌落數(shù)的平均值為24.6,則每升樣品中的活菌數(shù)是 方法測(cè)得的菌體數(shù)較 ,其緣由是。答案 (1)瓊脂糖和酚紅(挨次顛倒不得分)封口膜 (2)將未接種的培育基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間(:37℃恒溫箱中培育),觀看培育基上是否有菌落產(chǎn)生 (3)涂布 0
少 由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起,往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落或死菌未計(jì)入,故用此方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)偏低(其他合理答案酌情給分)屆浙江名校高考爭論聯(lián)盟一模,29)(10分)乳酸菌指發(fā)酵糖類主要產(chǎn)物為乳酸的一類革蘭氏陽性MRS固體培育基:5g5g、酵母提取2.5g1g500mL2.5gKHPO1gMnSO·4HO0.12g12.5gMgSO·7HO2 4 4 2 4 20.29g、CaCO5g10g。請(qǐng)答復(fù):3MRS培育基中瓊脂的作用是 ,滅菌時(shí)設(shè)置的壓力和時(shí)間分別為 、 。滅菌后制作平板用于試驗(yàn),對(duì)平板進(jìn)展無菌檢測(cè)的方法是 使用涂布分別法分別乳酸菌,培育后覺察平板上形成的單菌落四周會(huì)產(chǎn)生CaCO溶解圈,溶解圈大小能夠反映 。3假設(shè)用革蘭氏染色法對(duì)大腸桿菌進(jìn)展染色,結(jié)果 填“呈紫色”或“不呈紫色”)。用乳酸菌制作酸乳時(shí),可對(duì)乳酸菌進(jìn)展固定化處理,方法:稱取適量海藻酸鈉配成水溶液,參加乳酸菌并攪拌均勻,以肯定速度滴入CaCl溶液中形成凝膠,使其凝固成珠狀。上述承受的固定方法是 珠2撈出后要用無菌水沖洗,目的是洗去 。乳酸菌可用于泡菜的制作,在對(duì)泡菜作亞硝酸鹽定量檢測(cè)時(shí),假設(shè)樣液測(cè)定時(shí)的比色杯光程小于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)的比色杯光程,則測(cè)得的樣液中亞硝酸鹽含量 (填“偏大”“偏小”或“不影響”);假設(shè)泡菜液測(cè)得的OD值過大。超出標(biāo)準(zhǔn)曲線,則最適宜的做法是 。答案 (1)凝固劑 500g/cm2 30min將空白平板置于37恒溫箱培育24小,觀看有無雜菌生長 乳酸菌產(chǎn)乳酸的量的大小(答“乳酸菌產(chǎn)乳酸的力量的大小”給分)(2)不呈紫色包埋法 凝珠外表的CaCl溶液2偏小 對(duì)樣品溶液進(jìn)展適當(dāng)稀釋浙江七彩陽光聯(lián)考,32(一)](7分)答復(fù)以下與分別以尿素為氮源的微生物有關(guān)的問題:有些細(xì)菌含有 們可以通過降解尿素作為其生長的氮源。請(qǐng)用化學(xué)反響式表示這類細(xì)菌降解尿素的過程: 。本試驗(yàn)需通過比較尿素固體培育基和LB固體培育基上的菌落數(shù),了解土壤稀釋液中能以尿素為氮源的微生物的比例,因此要用 (填方法)進(jìn)展接種。配制培育基時(shí)選擇瓊脂糖作為凝固劑的緣由是 。尿素溶液的滅菌選擇的方法是 。,可選用液體培育基培育,NH的含量。步驟如下:3液過濾和脫色處理后,用納氏試劑顯色處理。用光程為1cm的比色杯在570nm處測(cè)定光密度值。假設(shè)光密度值偏低,應(yīng)選擇 (A.增大光程,光波長不變B.增大光程,光波長增加C.減小光程,光波長不變D.減小光程,光波長增加),再次測(cè)定光密度值,直到數(shù)據(jù)適宜為止。其次步,標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
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