肉制品中食品添加劑（山梨酸、苯甲酸）的測定-紫外分光光度計的使用

技能點：紫外分光光度計的使用

一、紫外分光光度計概述一

二、紫外分光光度計的使用二

三、紫外分光光度計的維護與保養(yǎng)三目錄頁（紫外分光光度計的使用）一、紫外分光光度計概述紫外分光光度法是利用物質(zhì)對紫外光譜區(qū)域內(nèi)的光具有選擇性吸收的現(xiàn)象，對物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。用于測量和記錄待測物質(zhì)分子對紫外光的吸光度及紫外吸收光譜，并進行定性定量以及結(jié)構(gòu)分析的儀器，稱為紫外吸收光譜儀或紫外分光光度計。（紫外分光光度計的使用）一、紫外分光光度計概述（一）儀器工作原理

在一定的條件下，吸光物質(zhì)對單色光的吸收符合朗伯-比爾定律，即：A=εbc式中A為吸光度；b為光程長度（即吸收池厚度），單位為cm；c為吸光物質(zhì)的物質(zhì)的量濃度，單位為mol/L；ε為摩爾吸光系數(shù)，單位為L/(mol?cm)；當(dāng)b一定時，吸光物質(zhì)的吸光度為其濃度c的單值（線性）函數(shù)。因此對吸光物質(zhì)的濃度的測試可直接歸結(jié)為對吸光度A的測試。（紫外分光光度計的使用）一、紫外分光光度計概述（二）儀器的結(jié)構(gòu)目前，紫外分光光度計的型號較多，但它們的基本構(gòu)造都相似，都由光源、單色器、樣品吸收池、檢測器和信號顯示系統(tǒng)等五大部件組成，其組成框圖見圖1-1。（紫外分光光度計的使用）二、紫外分光光度計的使用操作步驟：開機選擇波長校準測量數(shù)據(jù)處理關(guān)機（紫外分光光度計的使用）三、紫外分光光度計的維護與保養(yǎng)（一）氘燈的更換1）關(guān)閉電源，取下波長調(diào)節(jié)鈕，掀開儀器蓋板。2）待燈冷卻后，用螺絲刀將接線架上三根氘燈引線松開（記下三根引線的顏色），松開氘燈固定螺釘，取出氘燈座，松開夾緊螺釘，換上新氘燈，調(diào)整位置，重新擰緊螺釘，將氘燈接線按原來引線的顏色接好。3）將波長調(diào)在220nm處，接上電源，打開氘燈，檢查光斑是否進入狹縫，如不進入，松開圖1-2中的“1”，轉(zhuǎn)動氘燈出光孔或松開圖1-2中的“3”，移動氘燈至氘燈光進入狹縫為止（注意！眼睛不可?？措疅舭l(fā)出的紫光）。（紫外分光光度計的使用）三、紫外分光光度計的維護與保養(yǎng)（二）波長準確度的校驗

在紫外光區(qū)檢驗波長準確度比較實用的方法是用苯蒸氣的吸收光譜曲線來檢查。圖1-3是苯蒸氣在紫外光區(qū)的特征吸收峰，利用這些吸收峰所對應(yīng)波長來檢查儀器波長準確度非常方便。具體做法是：在吸收池滴一滴液體苯，蓋上吸收池蓋，待苯揮發(fā)充滿整個吸收池后，就可以測繪苯蒸氣的吸收光譜。若實測結(jié)果與苯的標準光譜曲線不一致，表示儀器有波長誤差，必須加以調(diào)整。（紫外分光光度計的使用）三、紫外分光光度計的維護與保養(yǎng)（三）透射比正確度的檢驗取0.006gK2Cr2O7溶于1000g0.001mol/LHClO4標準溶液。0.001mol/LHClO4溶液為參比，用1cm的石英吸收池分別在235nm、257nm、313nm、350nm波長處測定透射比，與表1-4所列標準溶液的標準值比較，根據(jù)儀器級別，其差值應(yīng)在0.8%～2.5%之內(nèi)。表1-4K2Cr2O7溶液透射比（25℃）（紫外分光光度計的使用）三、紫外分光光度計的維護與保養(yǎng)（四）吸收池的配套性檢驗吸收池配套性檢驗的具體步驟