紅細(xì)胞膜缺陷性貧血及其實(shí)驗(yàn)診斷考點(diǎn)總結(jié)

紅細(xì)胞膜缺陷性貧血及其實(shí)驗(yàn)診斷考點(diǎn)總結(jié)<大綱要點(diǎn)>一、紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與功能（了解）二、紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)及其應(yīng)用（掌握-熟練掌握）三、遺傳性紅細(xì)胞膜缺陷性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷（掌握-熟練掌握）四、獲得性紅細(xì)胞膜缺陷性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷（熟練掌握）一、紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與功能1.紅細(xì)胞膜的組成與結(jié)構(gòu)紅細(xì)胞膜（脂類(lèi)、蛋白質(zhì)、碳水化合物）的主要蛋白有主體蛋白和外周蛋白。后者包括收縮蛋白、肌動(dòng)蛋白、錨蛋白和區(qū)帶（4.1～4.5）等，即骨架系統(tǒng)，起支架作用，對(duì)維持紅細(xì)胞的形狀、穩(wěn)定性和變形性有重要作用。膜的主要脂類(lèi)為磷脂和膽固醇，起屏障和保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性作紅細(xì)胞膜的組成與結(jié)構(gòu)示意圖2.紅細(xì)胞膜的功能屏障作用和可變性；半透性；免疫性；受體特性：激素類(lèi)受體、遞質(zhì)類(lèi)受體、丙二、紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)及其應(yīng)用1.紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)（熟練掌握）2.自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)（掌握）3.酸化甘油溶血試驗(yàn)（掌握）4.蔗糖溶血試驗(yàn)（掌握）5.酸化血清溶血試驗(yàn)（熟練掌握）6.紅細(xì)胞膜蛋白電泳分析（掌握）1.紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)原理：檢測(cè)紅細(xì)胞對(duì)不同濃度低滲鹽溶液的抵抗力。紅細(xì)胞在低滲鹽溶液中，當(dāng)水滲透到紅細(xì)胞內(nèi)部達(dá)一定程度時(shí)，紅細(xì)胞發(fā)生膨脹破裂。根據(jù)不同濃度的低滲鹽溶液中紅細(xì)胞溶血的情況，通過(guò)紅細(xì)胞表面積與容積的比值，反映對(duì)低滲鹽溶白生成障礙性貧血、缺鐵性貧血等。2.自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)解途徑酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可導(dǎo)作為糾正物，觀察溶血可否有一定的糾正，稱(chēng)為糾正試驗(yàn)。糾正；自身免疫性溶貧溶血度輕度增加，加葡萄糖3.酸化甘油溶血試驗(yàn)但甘油與膜脂質(zhì)又有親和性，可使膜脂質(zhì)減少。當(dāng)紅細(xì)胞膜蛋白及膜脂質(zhì)有缺陷時(shí)，它們?cè)趐H6.85甘油緩沖液中比正常紅細(xì)胞溶解速度快，導(dǎo)致紅細(xì)胞懸液的吸光度降至50%的時(shí)間（AGLT）明顯縮短。臨床意義：減少見(jiàn)于遺傳性球形細(xì)胞增多癥（25～150s）、腎功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶4.蔗糖溶血試驗(yàn)為PNH簡(jiǎn)易、重要的篩查試驗(yàn)。原理：是根據(jù)PNH患者的紅細(xì)胞，在低離子強(qiáng)度的蔗糖溶液中對(duì)補(bǔ)體敏感性增強(qiáng)，經(jīng)孵育，補(bǔ)體與紅細(xì)胞膜結(jié)合加強(qiáng)，蔗糖溶液進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致滲透性溶血而設(shè)計(jì)的。參考值：定性試驗(yàn)：正常為陰性；定量試驗(yàn)：正血病、骨髓硬化時(shí)可出現(xiàn)假陽(yáng)性。5.酸化血清溶血試驗(yàn)稱(chēng)Hamtest，即紅細(xì)胞在酸性（pH6.4～6.5）的正常血清中孵育，補(bǔ)體被激活，PNH紅細(xì)胞破壞而產(chǎn)生溶6.紅細(xì)胞膜蛋白電泳分析（1）原理：將制備的紅細(xì)胞膜樣品進(jìn)行SDS電泳，離得到紅細(xì)胞膜蛋白的電泳圖譜，從而可見(jiàn)各膜蛋白組分百分率。參考值：各種膜蛋白組分百分率變化較大，多以正常紅細(xì)胞膜蛋白電泳圖譜作比較?；蛞詭?蛋白為基準(zhǔn)，各膜蛋白含量以與帶3蛋白的比例表示。有收縮蛋白等含量減低或結(jié)構(gòu)異常。某些血紅蛋白病骨架蛋白等可明顯異常。三、遺傳性紅細(xì)胞膜缺陷性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷1.遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥（熟練掌握）2.遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥（掌握）1.遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥心淡染區(qū)消失，簡(jiǎn)易紅細(xì)胞滾動(dòng)試驗(yàn)呈陽(yáng)性。（2）骨髓象：骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)增生活躍。不同患者外周血涂片可見(jiàn)球形紅細(xì)胞球形紅細(xì)胞形成機(jī)制遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥患者常表現(xiàn)為黃疸、脾大、膽石癥SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析：紅細(xì)胞骨架蛋白、收縮蛋白缺陷。2.遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥骨髓象：骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)增生活躍。特殊試驗(yàn)：脆性試驗(yàn)、孵育后和自身溶血試驗(yàn)陽(yáng)性。遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥患者外周血涂片可見(jiàn)橢圓形紅細(xì)胞四、獲得性紅細(xì)胞膜缺陷性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥是一種后天獲得性紅細(xì)胞膜缺陷引起的溶血病。臨床上以間歇發(fā)作的睡眠后血紅蛋白尿?yàn)樘卣鳌Ｔ谝惶觳煌瑫r(shí)間點(diǎn)收集的PNH患者尿樣，外觀呈不同顏色。HSC的糖化磷脂酰肌醇（GPI）基因發(fā)生突變，影響GPI錨連接蛋白的穩(wěn)定性（如調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)補(bǔ)體敏感性的蛋白），其中最重要的是CD59（反應(yīng)性溶血膜抑制因子，可阻止膜攻擊復(fù)合物的組裝）和CD55（衰變GPI錨連接蛋白示意圖（1）血象：貧血為大細(xì)胞正色素性或低色素性，網(wǎng)織紅細(xì)胞增高，少數(shù)病例減少。紅細(xì)胞按對(duì)補(bǔ)體敏感性分為接近正常紅細(xì)胞(Ⅰ型）、中等敏感(Ⅱ型）、高度敏感(Ⅲ型）。溶血程度取決于Ⅲ型紅細(xì)胞多少。白細(xì)胞計(jì)數(shù)半數(shù)病例減少，中性粒細(xì)胞減少，淋巴細(xì)胞增多，血小板多數(shù)低（2）骨髓象：骨髓象隨病情變化不一，除按有核細(xì)胞分四級(jí)外，注意粒紅比例，增生低下者應(yīng)注明部位，診斷疑難者需同時(shí)作病理活檢。①酸化血清溶血試驗(yàn)（Hamtest）、蔗糖溶血試驗(yàn)、蛇毒溶血試驗(yàn)、尿潛血（尿含鐵血黃素）試驗(yàn)等，②排除其他需鑒別的溶血性疾??；錨連蛋白（CD55或CD59）低表達(dá)的異常細(xì)胞群，支持PNH，是目前診斷PNH特異性和敏感性最高且可定量診斷溶血性貧血最根本直接的證據(jù)為A.總膽紅素增高B.血清乳酸脫氫酶增高C.網(wǎng)織紅細(xì)胞增高D.紅細(xì)胞壽命縮短E.以上都不是『答案解析』診斷溶血性貧血最根本直接的證據(jù)是紅細(xì)胞壽命縮短，其他選短引起的相應(yīng)的癥狀。紅細(xì)胞膜異常導(dǎo)致的貧血是A.丙酮酸激酶缺乏癥B.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥C.陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥D.珠蛋白生成障礙性貧血E.血紅蛋白病『答案解析』陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥是由于紅細(xì)胞膜異常導(dǎo)致的貧血。關(guān)于尿含鐵血黃素試驗(yàn)，下列敘述哪項(xiàng)不正確A.陰性結(jié)果可排除血管內(nèi)溶血存在B.亦稱(chēng)Rous試驗(yàn)C.陽(yáng)性對(duì)慢性血管內(nèi)溶血的診斷價(jià)值最大D.用普魯士藍(lán)反應(yīng)顯示含鐵血黃素E.陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿常為陽(yáng)性『答案解析』尿含鐵血黃素試驗(yàn)陰性結(jié)果不能排除血管內(nèi)溶血存在，急性血管內(nèi)溶血尿中檢不出含鐵（+Coombs試驗(yàn)：陰性，紅細(xì)胞滲透脆性增加，最有可能的診斷是A.先天性非溶血性黃疸B.慢性肝病性貧血C.遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥D.珠蛋