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血小板抗體檢測(cè)及交叉配型在免疫性血小板輸注無(wú)效患者中的應(yīng)用
血小板注射是目前治療異常血小板減少或血小板功能異?;颊叩氖走x。它特別可以促進(jìn)一些由腫瘤放療、化療和血液抑制引起的血小板減少的支持治療。1數(shù)據(jù)和方法1.1血小板減少的基本資料選擇2015年7月-2016年3月漯河市中心醫(yī)院血液科、腫瘤科需輸注血小板治療的患者420例為觀察對(duì)象,所有患者均排除由感染、脾腫大、發(fā)熱等非免疫性因素所導(dǎo)致的血小板減少。其中男231例,女189例,年齡26~76歲,中位年齡48歲。420例患者中無(wú)輸血病史者170例,有輸血病史者250例;血液科患者230例,其中血小板減少性紫癜36例,白血病92例,再生障礙性貧血73例,骨髓異常增殖綜合征29例;腫瘤科患者190例,其中肝癌22例,胃癌31例,肺癌33例,乳腺癌46例,食管癌29例,宮頸癌18例,結(jié)腸癌11例。在征得患者知情同意情況下,均抽取血樣送漯河市中心血站進(jìn)行血小板抗體檢測(cè)及交叉配型。1.2養(yǎng)箱、水浴箱和儀器TD-3型血型血清學(xué)離心機(jī)、普通離心機(jī)(長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限公司),隔水式恒溫培養(yǎng)箱(上海樹(shù)立儀表有限公司),恒溫水浴箱(姜堰市天力醫(yī)療器械有限公司);BC5800血球計(jì)數(shù)儀(深圳邁瑞生物科技有限公司)。血小板交叉配型、抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自長(zhǎng)春博得生物技術(shù)有限責(zé)任公司,均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,試劑盒均在有效期內(nèi)使用。1.3eppendorf管采集患者空腹靜脈血5ml,EDTAK2抗凝,靜置15min,3000r/min離心10min,分離上清轉(zhuǎn)入Eppendorf管,-20℃保存待檢。1.3.1血小板聚集檢測(cè)采用固相凝集法檢測(cè)所有患者血小板HPA抗體和HLA抗體1.3.2血小板抗體檢測(cè)結(jié)果選取與患者ABO血型一致的單采血小板,按照血小板抗體檢測(cè)方法的操作步驟進(jìn)行配型,將檢測(cè)孔結(jié)果和對(duì)照組孔進(jìn)行比較,陽(yáng)性和弱陽(yáng)性均表示配型不相合。1.4血小板注射效果評(píng)價(jià)以血小板增高指數(shù)(CCI)來(lái)判斷患者血小板輸注后的療效,如輸注血小板后1hCCI<7.5×101.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(ue0af±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料兩組間比較用χ2結(jié)果2.1血小板抗體檢測(cè)結(jié)果在420例需輸注血小板治療的患者中,有106例血小板抗體檢查陽(yáng)性,陽(yáng)性率為25.24%。其中170例無(wú)輸血病史患者血小板抗體檢出13例,陽(yáng)性率為7.65%,250例有輸血病史患者中血小板抗體檢出93例,陽(yáng)性率為37.20%。有輸血病史患者血小板抗體陽(yáng)性檢出率高于無(wú)輸血病史患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。2.2血容量與血小板聚集率之間的關(guān)系在有輸血史250例患者中,隨輸血次數(shù)的增多,其血小板抗體陽(yáng)性率也越高,見(jiàn)表2。2.3血小板交叉配型與輸血療效的關(guān)系在106例血小板抗體陽(yáng)性患者中,有41例給予隨機(jī)輸注血小板治療,另外65例給予血小板交叉配型后,選擇配型相合的血小板輸注,配型相合輸注血小板在輸血后1hCCI和24hCCI及輸血療效均高于隨機(jī)輸注患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表3。3血小板抗體陽(yáng)性的變化近年來(lái),隨著成分輸血在臨床推廣和應(yīng)用以及輸血技術(shù)的不斷發(fā)展,血小板輸注已成為輸血的重要組成部分,并已成為腫瘤、血液病等患者有效、不可替代的支持治療方式。但在臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn),并非每例患者輸注血小板后均能取得良好療效,對(duì)于一些長(zhǎng)期反復(fù)輸血及既往有妊娠史的患者易誘發(fā)產(chǎn)生血小板抗體,導(dǎo)致血小板輸注無(wú)效。臨床表現(xiàn)為血小板輸注后被迅速破壞,實(shí)驗(yàn)室血常規(guī)檢查顯示血小板計(jì)數(shù)不僅沒(méi)有增加,甚至還會(huì)出現(xiàn)減少,且患者的出血癥狀也未得到明顯改善本文結(jié)果顯示,在170例無(wú)輸血病史患者中檢出13例(7.65%)血小板抗體陽(yáng)性,而250例有輸血病史患者中檢出93例(37.20%)抗體陽(yáng)性,有輸血病史患者血小板抗體陽(yáng)性檢出率顯著高于無(wú)輸血病史患者(P<0.05),并且隨著患者輸血次數(shù)的增多,其血小板抗體陽(yáng)性率也越高。這一結(jié)果表明患者輸注的異體血液可為抗原,可誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生特異性的抗體,而這種抗體主要為血小板中殘存白細(xì)胞誘發(fā)產(chǎn)生的HLA抗體,其約占免疫性血小板輸注無(wú)效的80%。葉海輝同時(shí),本文對(duì)檢出的106例抗體陽(yáng)性患者給予隨機(jī)和配合性血小板輸注,并觀察輸注后1h和24h血小板數(shù)量變化,結(jié)果顯示,兩種輸血方式患者CCI變化并不一致,配合性輸注患者CCI及有效率均明顯高于隨機(jī)輸注,其原因主要是配合性輸注通過(guò)交叉配型可選擇HPA和HLA相匹配的血小板,避免了血小板抗原抗體間的免疫反應(yīng)發(fā)生,使輸注的外源性血小板不被機(jī)體免疫系統(tǒng)所破壞,輸注后
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