血小板交叉配型技術(shù)在免疫性血小板輸注無效患者中的應(yīng)用

血小板交叉配型技術(shù)在免疫性血小板輸注無效患者中的應(yīng)用

血小板注射可以提高患者的出血癥狀，降低出血死亡率，但對于多次輸血、且子女多胞胎的患者，血小板注射無效（ptr）。1材料和方法1.1血小板輸注無效本研究包含2018年5月-2019年1月期間的江西省省直醫(yī)院24名血小板輸注無效患者(均為惡性腫瘤患者且存在多次輸血史)?；颊哌B續(xù)≥2次輸注隨機單采血小板24h后的校正血小板增高指數(shù)(correctcountincrement,CCI)低于4500，即定義為血小板輸注無效。其中隨機選取12名患者采用血小板的配合性輸注，另外12名患者則采用隨機輸注方法，兩組之間的年齡及性別無顯著性差異。1.2檢測細胞的檢測血小板抗體檢測和交叉配型試劑盒(批號8000239008，荷蘭Sanquin)、血小板抗體檢測用指示紅細胞(批號8000239936,8000244253,8000253016，荷蘭San鄄quin)、平板醫(yī)用離心機(日本久保田2420)。1.3單帶采血小板的來源血小板制品均由本課題組提供，每次輸注2個治療量。每個治療量的血小板含量≥2.5×101.4血小板的隨機注入選取ABO同型單采血小板進行隨機輸注。1.5血小板特異性抗體首先選取ABO同型的單采血小板，然后血小板配型采用固相凝集法并按照血小板抗體檢測和交叉配型試劑盒說明書(MASPAT試劑盒)進行操作。反應(yīng)板中已包被有血小板特異性的鼠單克隆抗體，供者血小板懸液經(jīng)離心洗滌后可在反應(yīng)孔底部形成血小板單層。在反應(yīng)孔中加入受者血清和LISS(低離子強度溶液)孵育，讓血清中抗體與反應(yīng)孔中的血小板單層結(jié)合，之后未結(jié)合的成分通過洗滌被去除。加入鼠抗人IgG及人IgG致敏紅細胞(指示紅細胞)離心，如果存在血小板特異性抗體，紅細胞將平鋪在孔底，實驗結(jié)果陽性；反之，紅細胞扣聚集在孔底，邊緣光滑，實驗結(jié)果陰性。選擇血小板配型結(jié)果為陰性的單采血小板供患者輸注。1.6灌溉根據(jù)實驗室指標對配合性輸注組及隨機輸注組進行判斷，實驗室指標為輸注24h后的CCI值，其計算公式為：CCI=輸注后血小板計數(shù)(101.7統(tǒng)計分析應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計處理軟件，數(shù)據(jù)以“均數(shù)±標準差2結(jié)果2.1患者分別獲得隨機對照血小板的隨機和合作注射12名患者隨機輸注單采血小板絕大多數(shù)可出現(xiàn)血小板輸注無效現(xiàn)象，而12名患者配合性輸注血小板絕大多數(shù)可取得良好輸注效果，見表1。2.2隨機注算與合作注入的比較經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析表明：配合性輸注的有效率顯著高于隨機輸注組，配合性輸注后24h平均CCI值也同樣顯著高于隨機輸注組，見表2。3配合性輸注在血小板輸注無效患者中的輸注效果顯著改善臨床造成血小板輸注無效(platelettransfusionrefractoriness,PTR)的原因分為非免疫因素和免疫因素，其中約80%是由非免疫性因素引起的，約20%是由免疫性因素引起的本次案例中24例患者均為惡性腫瘤患者并存在多次輸血史，易出現(xiàn)血小板輸注無效。我們通過對2組患者的不同血小板輸注方式(隨機輸注及配合性輸注)的比較，評價配合性血小板輸注(血小板交叉配型試驗)在由免疫因素所致血小板輸注無效患者的應(yīng)用價值。本次研究發(fā)現(xiàn)12例患者的血小板隨機輸注組出現(xiàn)血小板輸注無效，甚至引起輸注后的血小板下降。結(jié)果表明由于存在多次輸血史，包含血小板制品，誘導(dǎo)了患者產(chǎn)生同種免疫即產(chǎn)生了HLA和/HPA抗體，致血小板輸注無效，24hCCI值<4500。而配合性輸注組12例患者的血小板輸注絕大多數(shù)可出現(xiàn)良好的輸注效果。兩種輸注方式的輸注效果(輸注有效率及24h平均CCI值)具有顯著性差異。表明配合性輸注在免疫因素所致血小板輸注無效患者中的血小板輸注效果明顯優(yōu)于隨機輸注。雖然免疫因素所致血小板輸注無效的原因主要是HLA和HPA抗體，但由于不同地域經(jīng)濟及科研水平的限制，對于尚未具備或建立HLA和HPA建庫的條件的醫(yī)院及血站無法通過在供者庫中尋找HLA和HPA匹配的血小板，因此血小板配型試驗提供了更為快速、經(jīng)濟的試驗方法解決HLA和HPA抗體所致血小板輸注無效有研究表明針對PTR最好的對策是對血小板輸注無效患者進行血小板交叉配型檢測以達到血小板配合性輸注，這樣不僅可預(yù)防PTR的發(fā)生提高輸注效果，而且也不會造成因盲目輸注而造成寶貴血液資源浪費從而降低患者經(jīng)濟費用。本文采用血小板單克隆特異性抗體固定試驗試劑盒(MonoclonalAntibodySolidphaseAntigensTest,MASPAT)用于血小板交叉配型，它是一種固相微孔板系統(tǒng)，通過血小板與血清之間的抗原抗體免疫反應(yīng)來檢測血小板抗體，是目前國外較為青睞的血清學(xué)檢測方法綜上所述，本文結(jié)果表明，通過血小板單克隆特異性抗體固定試驗(MASPAT試劑盒)對免疫因素所致血小板輸注無效患者進行血小板交叉配型可以預(yù)防PTR的發(fā)生并提高其輸注效果，在改善CCI值及減少