黑龍江《水蛭凍干粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》征

附件1水蛭凍干粉ShuizhiDongganfen本品為水蛭科動(dòng)物螞蟥WhitmaniapigraWhitman經(jīng)冷凍干燥而得的炮制品?！九谥啤咳≡幉?，洗凈，冷凍，粉碎，凍干，粉碎，分裝即得。【性狀】本品為灰白色至灰黃色粉末；氣微腥，味微咸。【鑒別】（1）取本品粉末1g，加乙醇10ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，取濾液作為供試品溶液。另取水蛭對(duì)照藥材1g，,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2020年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（4:1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；紫外光燈(365nm)下顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。取門(mén)冬氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、鹽酸賴(lài)氨酸和酪氨酸對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml各含100μg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。照{(diào)含量測(cè)定}項(xiàng)下的方法自“精密量取對(duì)照品溶液1ml，置10ml量瓶中”，起依法制備對(duì)照品溶液，吸取上述對(duì)照品溶液及{含量測(cè)定}項(xiàng)下的供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品色譜中，應(yīng)呈現(xiàn)與對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相對(duì)應(yīng)的色譜峰。峰1：門(mén)冬氨酸；峰2：谷氨酸；峰3：蘇氨酸；峰4：脯氨酸；峰5：丙氨酸；峰6：纈氨酸；峰7：異亮氨酸；峰8：亮氨酸；峰9：賴(lài)氨酸；峰10：酪氨酸色譜柱：Kromasil100-5-C8，4.6×250mm，5μm推薦儀器：ThermofisherU3000高效液相色譜儀【檢查】水分不得過(guò)10.0%（《中國(guó)藥典》2020年版四部通則0832第二法）總灰分不得過(guò)8.0%（《中國(guó)藥典》2020年版四部通則2302）酸不溶性灰分不得過(guò)2.0%（《中國(guó)藥典》2020年版四部通則2302）酸堿度取本品粉末約1g，加入0.9%氯化鈉溶液10ml，充分?jǐn)嚢?，浸?0分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，離心，取上清液，依法測(cè)定（《中國(guó)藥典》2020年版四部通則0631），pH值應(yīng)為5.0～7.5。微生物限度照非無(wú)菌藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（《中國(guó)藥典》2020年版四部通則1107、1108）測(cè)定，應(yīng)符合規(guī)定。時(shí)間（分鐘）流動(dòng)相A(%)流動(dòng)相B(%)0～2595→805→2025～3080→4020→6030～4540→1060→9045～5010→590→95【含量測(cè)定】照高效液相色譜法（《中國(guó)藥典》2020年版四部通則0512）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.06mol/L醋酸鈉溶液（用冰醋酸調(diào)pH6.40）-乙腈（200:30）為流動(dòng)相A；以乙腈-水（50:50）為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；柱溫為40℃；流速為每分鐘0.8ml；檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm。理論板數(shù)按纈氨酸計(jì)算應(yīng)不低于10000。對(duì)照品溶液的制備取纈氨酸對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含100μg的溶液即得。供試品溶液的制備取本品約1g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1mol/L鹽酸溶液25ml，稱(chēng)定重量，水浴回流提取1.5小時(shí)，放置室溫，稱(chēng)定重量，用0.1mol/L鹽酸溶液補(bǔ)足減失重量，離心取上清液，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液2ml，精密加入鹽酸2ml，105℃放置24小時(shí)。取出冷卻后，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，加入6mol/L氫氧化鈉溶液4ml，加0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度。搖勻，濾過(guò)。精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各1ml，分別置10ml量瓶中，加0.5mol/L碳酸鈉緩沖液1.0ml和1%2,4-二硝基氟苯的乙腈溶液1.0ml，搖勻，60℃水浴放置60分鐘。取出冷卻后，加入0.02mol/L醋酸銨溶液至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每1g含纈氨酸(C5H11NO2）不得少于14.0mg。【性味與歸經(jīng)】咸、苦、平；有小毒。歸肝、脾經(jīng)?！竟δ芘c主治】破血通經(jīng)，逐瘀消癥。用于血瘀經(jīng)閉，癥瘕痞塊，中風(fēng)偏癱，跌撲損傷。也可用于腦血栓、腦