黑龍江《水蛭凍干粉質(zhì)量標準》征

附件1水蛭凍干粉ShuizhiDongganfen本品為水蛭科動物螞蟥WhitmaniapigraWhitman經(jīng)冷凍干燥而得的炮制品?！九谥啤咳≡幉?，洗凈，冷凍，粉碎，凍干，粉碎，分裝即得。【性狀】本品為灰白色至灰黃色粉末；氣微腥，味微咸。【鑒別】（1）取本品粉末1g，加乙醇10ml，超聲處理15分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液。另取水蛭對照藥材1g，,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2020年版四部通則0502）試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（4:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；紫外光燈(365nm)下顯相同顏色的熒光斑點。取門冬氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、鹽酸賴氨酸和酪氨酸對照品適量，精密稱定，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml各含100μg的混合溶液，作為對照品溶液。照{(diào)含量測定}項下的方法自“精密量取對照品溶液1ml，置10ml量瓶中”，起依法制備對照品溶液，吸取上述對照品溶液及{含量測定}項下的供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品色譜中，應呈現(xiàn)與對照品色譜峰保留時間相對應的色譜峰。峰1：門冬氨酸；峰2：谷氨酸；峰3：蘇氨酸；峰4：脯氨酸；峰5：丙氨酸；峰6：纈氨酸；峰7：異亮氨酸；峰8：亮氨酸；峰9：賴氨酸；峰10：酪氨酸色譜柱：Kromasil100-5-C8，4.6×250mm，5μm推薦儀器：ThermofisherU3000高效液相色譜儀【檢查】水分不得過10.0%（《中國藥典》2020年版四部通則0832第二法）總灰分不得過8.0%（《中國藥典》2020年版四部通則2302）酸不溶性灰分不得過2.0%（《中國藥典》2020年版四部通則2302）酸堿度取本品粉末約1g，加入0.9%氯化鈉溶液10ml，充分攪拌，浸提30分鐘，并時時振搖，離心，取上清液，依法測定（《中國藥典》2020年版四部通則0631），pH值應為5.0～7.5。微生物限度照非無菌藥品微生物限度標準（《中國藥典》2020年版四部通則1107、1108）測定，應符合規(guī)定。時間（分鐘）流動相A(%)流動相B(%)0～2595→805→2025～3080→4020→6030～4540→1060→9045～5010→590→95【含量測定】照高效液相色譜法（《中國藥典》2020年版四部通則0512）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.06mol/L醋酸鈉溶液（用冰醋酸調(diào)pH6.40）-乙腈（200:30）為流動相A；以乙腈-水（50:50）為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；柱溫為40℃；流速為每分鐘0.8ml；檢測波長為360nm。理論板數(shù)按纈氨酸計算應不低于10000。對照品溶液的制備取纈氨酸對照品適量，精密稱定，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含100μg的溶液即得。供試品溶液的制備取本品約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入0.1mol/L鹽酸溶液25ml，稱定重量，水浴回流提取1.5小時，放置室溫，稱定重量，用0.1mol/L鹽酸溶液補足減失重量，離心取上清液，濾過。精密量取續(xù)濾液2ml，精密加入鹽酸2ml，105℃放置24小時。取出冷卻后，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，加入6mol/L氫氧化鈉溶液4ml，加0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度。搖勻，濾過。精密量取對照品溶液和供試品溶液各1ml，分別置10ml量瓶中，加0.5mol/L碳酸鈉緩沖液1.0ml和1%2,4-二硝基氟苯的乙腈溶液1.0ml，搖勻，60℃水浴放置60分鐘。取出冷卻后，加入0.02mol/L醋酸銨溶液至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每1g含纈氨酸(C5H11NO2）不得少于14.0mg。【性味與歸經(jīng)】咸、苦、平；有小毒。歸肝、脾經(jīng)?！竟δ芘c主治】破血通經(jīng)，逐瘀消癥。用于血瘀經(jīng)閉，癥瘕痞塊，中風偏癱，跌撲損傷。也可用于腦血栓、腦