火龍果中抑制抗腫瘤活性成分的研究

火龍果中抑制抗腫瘤活性成分的研究

八角金針（tnb.）是五加科八角金針科植物。它的葉子和根的皮膚可以服藥。它溫暖、辛苦、小毒。它可以去除粘液和緩解咳嗽，消除風雨障礙，消除充血和緩解疼痛。它可以用于治療跌倒、碰撞、咳嗽、粘液、風濕、關節(jié)痛和關節(jié)痛。我國八角金盤分布廣泛,為了開發(fā)利用該資源,筆者選擇八角金盤葉為研究對象,從中共分離得到18個化合物,分別鑒定為為:棕櫚酸(1)、β-hydroxypropiovanillone(2)、腺嘌呤核苷(3)、β-谷甾醇(4)、胡蘿卜苷(5)、齊墩果酸(6)、刺囊酸(7)、樺木酸(8)、常春藤苷元(9)、常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(10)、金合歡素(11)、槲皮素(12)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(13)、異牡荊素(14)、異牡荊素-7-O-葡萄糖(15)、紫云英苷(16)、methylpluviatolide(17)、丁香脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(18)。除化合物1外,其他化合物均為首次從八角金盤葉中分離得到。1儀器、試藥與儀器XT-4A型顯微熔點測定儀(溫度計未校正,北京科儀電光儀器廠);Bruker-DPX-400型超導核磁共振儀(瑞士,TMS內(nèi)標);R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士Bue6c7CHI公司);循環(huán)水真空泵SHB-Ⅲ(北京聯(lián)華高科儀器科技有限公司);ShimadazuLC-6AD制備型高效液相色譜儀(日本島津公司);柱色譜和薄層色譜用硅膠均為青島海洋化工廠產(chǎn)品;所用試劑均為分析純。實驗用八角金盤葉于2012年10月采自安徽省合肥市大蜀山,經(jīng)安徽新華學院劉金旗副教授鑒定為五加科植物八角金盤Fatsiajaponica(Thunb.)Decne.etPlanch.的莖上葉。2采用高效液相色譜質(zhì)譜條件下提取化合物八角金盤葉干燥粉末16kg,以20倍80%乙醇回流提取3次,每次2h,合并濾液,減壓濃縮得浸膏,浸膏加適量水捏溶后依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次,減壓回收溶劑,分別得到石油醚部位(235g)、氯仿部位(249g)、乙酸乙酯部位(662g)和正丁醇部位(512g)。石油醚部位采用硅膠柱色譜,石油醚-乙酸乙酯溶劑系統(tǒng)梯度洗脫,再經(jīng)反復硅膠柱色譜分離純化得到化合物1(18mg)、4(32mg)。氯仿部位經(jīng)硅膠柱層析,以氯仿-丙酮溶劑系統(tǒng)梯度洗脫得到5個流分Fr.1~5。Fr.2經(jīng)硅膠柱色譜,以氯仿-丙酮(98∶2)梯度洗脫得到Fr.2.1,Fr.2.1經(jīng)氯仿-丙酮(32∶1)洗脫純化得到化合物8(70mg)。Fr.2以氯仿-甲醇(95∶5)梯度洗脫得到Fr.2.2,Fr.2.2再以氯仿-甲醇梯度洗脫,經(jīng)Sepha-dexLH-20純化得到化合物6(18mg)、9(20mg)、11(12mg)。乙酸乙酯部位經(jīng)硅膠柱色譜,以氯仿-甲醇梯度洗脫,得10個流分Fr.1~10。Fr.1經(jīng)硅膠柱色譜,石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫,得到化合物2(16mg);Fr.2經(jīng)乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫反復分離純化得到化合物12(26mg)和17(35mg);Fr.4依次經(jīng)Seph-adexLH-20柱和ODS柱色譜分離,甲醇-水梯度洗脫,得到化合物5(28mg)、14(12mg)、15(19mg)和16(20mg);Fr.7經(jīng)過ODS中低壓柱色譜分離,甲醇-水梯度洗脫,30%洗脫部分經(jīng)ToyopearlHW-40柱色譜分離及HPLC純化(40%甲醇),得到化合物18(22mg);Fr.8經(jīng)硅膠柱(氯仿-甲醇)和ODS柱(甲醇-水)色譜反復柱色譜,分別得到化合物3(11mg)、7(14mg)、10(15mg)、13(20mg)。3胡蘿卜苷daucasterol化合物1:白色粉末(石油醚-丙酮),mp60~62℃?；衔?:白色粉末(甲醇),mp113~114℃?；衔?:白色粉末(甲醇),mp236~237℃?；衔?:白色針晶(丙酮)。TLC的Rf值及顯色行為與β-谷甾醇對照品一致。化合物5:白色粉末。Liebermann-Burchard反應、Molish反應均呈陽性。TLC與胡蘿卜苷對照品Rf值及顏色一致,與胡蘿卜苷對照品混合熔點不下降,故確定該化合物為胡蘿卜苷(daucosterol)?；衔?:白色針晶(石油醚),mp258~260℃?；衔?:白色粉末(甲醇)。Liebermann-Bur-chard反應呈陽性。ESI-MSm/z:471[M-H]化合物8白色針晶(氯仿),mp291~293℃?；衔?:無色針晶(甲醇),mp331~333℃。化合物10:白色粉末(甲醇)。Liebermann-Bur-chard和Molish反應均呈陽性。ESI-MSm/z:773[M+Na]化合物11:淡黃色針晶(甲醇),mp259~261℃。鹽酸-鎂粉反應呈陽性?；衔?2:黃綠色粉末(氯仿-甲醇),mp308~310℃。ESI-MSm/z:302.2[M+H]化合物13:黃色粉末(甲醇),mp231~233℃。鹽酸-鎂粉反應呈陽性。化合物14:黃色粉末(甲醇)?；衔?5:黃色粉末(甲醇)。ESI-M