2024屆新高考生物熱點(diǎn)沖刺復(fù)習(xí) 基因工程

資料一：資料一：目前，全球的氮肥生產(chǎn)耗費(fèi)世界總電力的3%-4%,且農(nóng)作物只能吸收氮肥的1/10,造成了大面積土壤和水質(zhì)的污染。豆科植物的根瘤能夠固定空氣中的氮禾本科植物卻不能能否讓禾本科的植物也能夠固定空氣中的氮?能否讓微生物產(chǎn)生出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物?且能否讓微生物產(chǎn)生出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物?且微生物繁殖速率快微生物可以有分泌產(chǎn)物,資料二以往，治療糖尿病的胰島素是從動(dòng)物胰腺中提取的，從100千克豬、牛等動(dòng)物的胰腺只能提取3—4克胰島素，治療一個(gè)患者需宰殺40-50頭牛，這種藥物的造價(jià)就可想而知了。從社會(huì)中來轉(zhuǎn)基因抗蟲棉從社會(huì)中來轉(zhuǎn)基因抗蟲棉課本P67資料三：我國是棉花的生產(chǎn)和消費(fèi)大國。棉花在種植過程中，常常會(huì)受到一些害蟲的侵襲，其中以棉鈴蟲最為常見。棉鈴蟲可以使棉花產(chǎn)量減少三分之一，嚴(yán)重時(shí)，甚至能使一片棉田絕收。大量施用農(nóng)藥殺蟲不僅會(huì)提高生產(chǎn)成本,還可能造成農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境的污染。設(shè)想三：能不能培育出自身就能抵抗蟲害的棉花新品種。經(jīng)過多年的努力，科學(xué)家于1973年證明質(zhì)?？梢宰鳛榛蚬こ痰妮d體，構(gòu)建重組DNA,導(dǎo)入受體細(xì)胞，使外源基因在原核細(xì)胞中成功表達(dá)，實(shí)現(xiàn)了物種間的基因交流。創(chuàng)立了可以定向改造生物的新技術(shù)一—基因工程正式問世。我國擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉就是在這樣的背景下產(chǎn)生的。.為什么傳統(tǒng)的雜交育種方法培育不出抗蟲棉，基因工程卻可以呢？優(yōu)點(diǎn).基因工程是如何進(jìn)行操作的？世界上首只轉(zhuǎn)基因猴世界上首只轉(zhuǎn)基因猴Andy于2000年10月2日誕生在美國II2024屆新高考生物熱點(diǎn)沖刺復(fù)習(xí)[I基因工程G板書設(shè)計(jì)板書設(shè)計(jì)1.29基因工程.■4一.概念科學(xué)探究：基因工程的誕生和發(fā)展.■4一.概念科學(xué)探究：基因工程的誕生和發(fā)展〕二.原理：基因重組六.操作程序1.目的基因的篩選與獲取科學(xué)思維：PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增目的I三.理論基礎(chǔ).克服遠(yuǎn)緣雜交障礙.可定向改造生物的性狀五.工具1.限制酶—“分子手術(shù)刀"①來源②特點(diǎn)③作用部位④作用結(jié)果2.DNA連接酶—“分子縫合針”①作用②種類3.載體—“分子運(yùn)輸車"①作用②種類③作為載體的條件科學(xué)探究：DNA的粗提取與鑒定基因概念、原理、目的、優(yōu)點(diǎn)、操作環(huán)境、！條件、過程、結(jié)果2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4.目的基因的檢測(cè)與鑒定探究實(shí)踐：DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定八.第二代基因工程—蛋白質(zhì)工程?原理.應(yīng)用的遺傳特性，的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物制品。從技術(shù)操作層面看，由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫作重組DNA技術(shù)。別名DNA重組技術(shù)操作環(huán)境生物體外操作對(duì)象基因操作水平DNA分子水平基本過程結(jié)果剪切T拼接—導(dǎo)入T表達(dá)人類需要的基因產(chǎn)物DNA模型剪切拼裝▼實(shí)質(zhì)基因重組生命觀念基因工程生命觀念基因工程一.概念[P67]基因工程是指按照人們的愿望，大腸桿菌如何分泌人的胰島素?通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新}-為什么能表達(dá)?⑤}-為什么能表達(dá)?⑤遺傳信息的傳遞都遵循中心法則⑥所有生物共用一套遺傳密碼①遺傳物質(zhì)都是DNA【物質(zhì)基礎(chǔ)】)②DNA的基本組成單位都是四種脫氧核昔酸〉-為什么能拼接?③DNA都是獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu)J④基因是控制生物性狀的獨(dú)立遺傳單位四.優(yōu)點(diǎn)：為什么傳統(tǒng)的雜交育種方法培育不出抗蟲棉,基因工程卻可以呢？?克服遠(yuǎn)緣雜交障礙?可定向改造生物的性狀生命觀念一生命觀念一.概念基因工程大腸桿菌如何分泌人的胰島素?二.原理：【不同物種的】基因重組剪切T拼接-導(dǎo)入-表達(dá)三.理論基礎(chǔ):并可以在細(xì)菌細(xì)胞間轉(zhuǎn)移。并可以在細(xì)菌細(xì)胞間轉(zhuǎn)移?？萍继剿髦稰68基因工程的誕生和發(fā)展>1944年，艾弗里等人通過肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，不僅證明了遺傳物質(zhì)是DNA,還證明了DNA可以在同種生物的不同個(gè)體之間轉(zhuǎn)移。>1950年，埃特曼發(fā)明了一種測(cè)定氨基酸序列的方法。2年后，桑格首次完成了對(duì)胰島素氨基酸序列的測(cè)定。>1953年，沃森和克里克建立了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型并提出了遺傳物質(zhì)自我復(fù)制的假說。>1958年，梅塞爾森和斯塔爾用實(shí)驗(yàn)證明了DNA的半保留復(fù)制。隨后不久，克里克提出中心法則。>1961年，尼倫伯格和馬太破譯了第一個(gè)編碼氨基酸的密碼子。截至1966年，64個(gè)密碼子均被成功破譯。.>1967年，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在細(xì)菌擬核DNA之外的質(zhì)粒有自我復(fù)制能力，,科學(xué)探究科技探索之路科技探索之路P68基因工程的誕生和發(fā)展>1970年，科學(xué)家在細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)了第一個(gè)限制性內(nèi)切核酸酶(簡(jiǎn)稱限制酶)O>20世紀(jì)70年代初，多種限制酶、DNA連接酶和逆轉(zhuǎn)錄酶被相繼發(fā)現(xiàn)。這些發(fā)現(xiàn)為DNA的切割、連接以及功能基因的獲得創(chuàng)造了條件。>1972年，伯格首先在體外進(jìn)行了DNA改造的研究，成功構(gòu)建了第一個(gè)體外重組DNA分子。>1973年，科學(xué)家證明質(zhì)粒可以作為基因工程的載體，|構(gòu)建重組DNA,導(dǎo)入受體細(xì)胞，使外源基因在原核細(xì)胞中成功表達(dá)，并實(shí)現(xiàn)EgEiWI的基因交流。至此，基因工程正式問世。>1977年，桑格等科學(xué)家發(fā)明了DNA序列分析的方法，為基因序列圖的繪制提供了可能。此后DNA合成儀的問世為體外合成DNA提供了方便。％>1982年，第一個(gè)基因工程藥物-重組人胰島素被批準(zhǔn)上市?；蚬こ?藥物成為世界各國研究和投資開發(fā)的熱點(diǎn)。j。>1985。>1985年,穆里斯等人發(fā)明了PCR為獲取目的基因提供了有效手段。>1990年,人類基因組計(jì)劃啟動(dòng)。>2003年，該計(jì)劃的測(cè)序任務(wù)順利完成。21世紀(jì)以來，科學(xué)家發(fā)明了多種高通量測(cè)序技術(shù)，可以實(shí)現(xiàn)低成本測(cè)定大量核酸序列，加速了人們對(duì)基因組序列的了解。>2013年，華人科學(xué)家張鋒及其團(tuán)隊(duì)首次報(bào)道利用最新的基因組編輯技術(shù)—RISPR(成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù))技術(shù)編輯了哺乳動(dòng)物基因組。該技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因的定點(diǎn)插入、敲除或替換?？萍继剿髦稰68>1983年，科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出世界上第一例轉(zhuǎn)基因煙草。此后，基因工程進(jìn)入了迅速發(fā)展的階段?？茖W(xué)探究>1984年，我國科學(xué)家朱作言領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)培育出世界上第一條轉(zhuǎn)基因魚魚分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀一＞限制酶：準(zhǔn)確切割DNA分子分子縫合針一DNA連接酶：將DNA片段連接起來二分子運(yùn)輸車1—載體:將體外重組好的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞從社會(huì)中來課本從社會(huì)中來課本P70番木瓜容易受番木瓜環(huán)斑病毒的侵襲。當(dāng)番木瓜被這種病毒感染后，產(chǎn)量會(huì)大大下降。科學(xué)家通過精心設(shè)計(jì)，用“分子工具"培育出了轉(zhuǎn)基因番木瓜，它可以抵御番木瓜環(huán)斑病毒。DNA雙螺旋的直徑只有2nm,對(duì)如此微小的分子進(jìn)行操作，是一項(xiàng)非常精細(xì)的工作，更需要專門的“分子工具"。那么，科學(xué)家究竟用到了哪些“分子工具"？這些“分子工具"各具有什么特征呢？與轉(zhuǎn)基因番木瓜(右)II基因表達(dá)載體的構(gòu)建【核心】【體外完成】生命觀念一.概念二.原理生命觀念一.概念二.原理三.理論基礎(chǔ)四.優(yōu)點(diǎn)五.工具基因工程剪切T拼接T導(dǎo)入T表達(dá)限制酶：準(zhǔn)確切割DNA分子DNA連接酶:將DNA片段連接起來▼載體:將體外重組好的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞▼五.工具五.工具基因工程1.限制性內(nèi)切核酸酶—“分子手術(shù)刀".簡(jiǎn)稱：限制酶、.來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，所以它在長期的進(jìn)化過程中形成了一套完善的防御機(jī)制。限制酶就是它的一種防御性工具。當(dāng)外源DNA入侵時(shí)，它會(huì)利用限制酶來切割外源DNA,使之失效，以保證自身安全。P71旁欄思考：推測(cè)限制酶存在于原核生物中的主要作用和特點(diǎn)？/作用：切割外源DNA、使之失效，以保證自身安全/特點(diǎn)：只對(duì)外源DNA切割，不會(huì)切割自身的DNA?！驹蚩赡苁窃松镏胁淮嬖谠撁傅淖R(shí)別序列或識(shí)別序列已被修飾】生命觀念生命觀念限制酶.來源:.作生命觀念限制酶.來源:.作用：識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核普酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。.特點(diǎn)：特異性部位(連接2個(gè)核普酸之間的鍵).常用種類：EccRI和SmaI,EcoRI:大腸桿菌{Escherichiacoli)R型菌株中分離出的第一個(gè)限制酶；SmaI:粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratiamarcescens)中分離出的第一個(gè)限制酶。5'磷/酸_/酯鍵\73'個(gè)個(gè)字母的略語，以此來表示這個(gè)酶是從哪種生物中分離出來的。例如，一種限制酶是從大腸桿菌(Escherichiacoli)的R型菌株分離來的，就用字母EcoR表示；如果它是從大腸桿菌R型菌株中分離出來的第一種限制酶，則進(jìn)一步表示成EcoRIo?￡coRI:大腸桿菌(EscherichiacoIi)R型菌株中分離出的第一個(gè)限制酶；?SmaI:粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratiamarcescens)中分離出的第一個(gè)限制酶。生命觀念限制酶生命觀念限制酶P72限制酶名字的由來用生物屬名的頭一個(gè)字母與種加詞的頭兩個(gè)字母，組成了3生命觀念生命觀念.來源：.作用：.特點(diǎn):.識(shí)別序列的特點(diǎn)：I:'TT-C十G-A^A.......C-CT+A-G狷I:ITaqI...........T%牛G-A…限制酶常用種類:呈現(xiàn)堿基互補(bǔ)對(duì)稱，無論是6個(gè)堿基還是4個(gè)堿基，都可以找到一條中心軸線，中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反高對(duì)稱重復(fù)排列的，稱為回文序列。缺缺口怎么辦？縫隙要“縫合"第二種工具、分子縫合針一DNA連接酶生命觀念.生命觀念.如果把兩種來源不同的DNA用同種限制酶來切割，會(huì)怎樣?會(huì)產(chǎn)生相同的黏性(平)末端生命觀念注生命觀念注意:用DNA連接酶連接兩個(gè)片段之間的磷酸二酯鍵不是連接氫鍵(氫鍵的形成不需要酶的催化)DNA連接酶.作用：可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來,X1兩DNA片淀要具有互補(bǔ)的黏性'末端才能拼起來/一、1GICGICATATAA!T1L個(gè)核普酸+片段.都是蛋白質(zhì)DNA連接酶和DNA聚合酶是一回事嗎？為什么L個(gè)核普酸+片段.都是蛋白質(zhì)DNA連接酶和DNA聚合酶是一回事嗎？為什么？.都是形成磷酸二酯鍵ATf/G需要樓技形成單鏈課本P77旁欄思考科學(xué)思維ATAATTCDNA連接酶y＞不需要模版DNA<^>＞片段+片段＞形成雙鏈CTTA科學(xué)思維名稱限制酶科學(xué)思維名稱限制酶解旋酶與DNA分子相關(guān)作用部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵氫鍵作用底物脫氧核普酸磷酸二酯鍵核糖核普酸的幾種酶的比較作用結(jié)果形成具有黏性末端或平末端的DNA片段形成重組DNA分子以單鏈DNA為模板，將單個(gè)脫氧核普酸依次連接到單鏈末端，形成子代DNA將DNA片段水解為單個(gè)脫氧核普酸將雙鏈DNA分子局部解旋為單鏈，形成兩條長鏈以單鏈DNA為模板，將單個(gè)核糖核昔酸依次連接到單鏈末端，形成單鏈RNA生命觀念T4DNA生命觀念T4DNA連接酶T4噬菌體只能連接黏性末端.作用:.分類:種類來源功能特性相同點(diǎn)DNA連接酶E.coliDNA連接酶大腸桿菌既可以連接黏性末端，又可以連接平末端(但連接平末端的效率相對(duì)較低)形成的都是磷酸二酯鍵JII__________JII__________學(xué)以致用選出來選用下圖載體將目的基因?qū)爰?xì)菌中并將含有目的基因的細(xì)菌篩1.在培1.在培載體2.在培復(fù)制原點(diǎn)BamHiHindm-]酶③①或②寶素B,則應(yīng)選擇的限制酶為素A,則應(yīng)選擇的限制酶為①魅京識(shí)別的序列，因此不能選擇酶③含有抗氨節(jié)青霉素含有抗氨節(jié)青霉素只有含有重組質(zhì)粒,臂基因的重組大腸桿菌中有的并且重組質(zhì)粒上的Amp'體細(xì)胞養(yǎng)基上姑科學(xué)思維利用標(biāo)記基因進(jìn)行篩選示例:科學(xué)思維利用標(biāo)記基因進(jìn)行篩選示例:質(zhì)權(quán)有重組質(zhì)粒進(jìn)入,有的沒有重組質(zhì)粒進(jìn)入基因表達(dá)的大腸桿菌才能存活并增殖科學(xué)探究DNA的粗提取科學(xué)探究DNA的粗提取與鑒定.提取DNA的基本思路(DNA的粗提取)利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。.實(shí)驗(yàn)原理：1.DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精。2.DNA在不同濃度的NaCI溶液中溶解度不同，能溶于2moI/LNaCI溶液。3.在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑I會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。【鑒定】(mol/L)注意注意：不能選擇哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞，因?yàn)椴溉閯?dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和線粒體，幾乎不含DNA2.試劑：①研磨液一Tris、HCI、NaCLEDTA、SDS等課本P117②體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精----析出DNA③2moI/L的NaCI溶液—溶解DNA科學(xué)探究DNA的粗提取與鑒定科學(xué)探究DNA的粗提取與鑒定.提取DNA的基本思路(DNA的粗提取).實(shí)驗(yàn)原理：.材料用具：1.選材：DNA含量相對(duì)較高的生物組織，如新鮮洋蔥、香蕉、菠菜、菜花和豬肝等④二苯胺試劑—鑒定DNA,要現(xiàn)配現(xiàn)用⑤蒸餡水:—定容至10OOmLN▼DNA的粗提取與鑒定科DNA的粗提取與鑒定科學(xué)探究.方法步驟：1.取材、研磨：稱取30g洋蔥，切碎，然后放入研缽中，倒入10mL研磨液，充分研磨研磨的目的：破碎細(xì)胞，使骸物質(zhì)|容易溶解在研磨液中2.過濾或離心取上清液：方法一：在漏斗中墊上紗布，將洋蔥研磨液過濾到燒杯中，在4°C冰箱中放置幾分鐘后，再取上清液。方法二：直接將研磨液倒入塑料離心管中，1500r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min,再取上清液放入燒杯中。①上清液中除DNA之外，可能含有哪些雜質(zhì)？可能含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)②4°C低溫放置幾分鐘的作用：,抑制核酸水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA降解；/抑制DNA分子運(yùn)動(dòng)，使DNA易形成沉淀析出；.方法步驟：.方法步驟：DNA的粗提取與鑒定1.取材、研磨：2.過濾或離心取上清液：3.預(yù)冷酒精(95%)析出DNA或離心收集沉淀中的DNA方法一:在上清液中加入體積相等的、預(yù)冷的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%),靜置2-3min，溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸去上面的水分;①攪拌時(shí)應(yīng)輕緩、并沿一個(gè)方向：減少DNA斷裂，以便獲得較完整的DNA分子②酒精預(yù)冷的作用：/低溫可抑制核酸水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA降解；/低溫抑制DNA分子運(yùn)動(dòng)，使DNA易形成沉淀析出；/低溫有利于增加DNA的柔韌性，減少斷裂。方法二：將溶液倒入塑料離心管中，在10000r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min,棄上清液，將管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干?？茖W(xué)探究.方法步驟：DNA.方法步驟：DNA的粗提取與鑒定1.取材、研磨:2.過濾或離心取上清液：3.預(yù)冷酒精(95%)析出DNA或離心收集沉淀中的DNA4.NaCI溶液溶解DNA并鑒定取兩支20mL的試普，各加入2moI/L的NaCI溶液5mLo將絲狀物或沉淀物溶于其中一支試管的NaCI溶液中。向兩支試管中各加入4mL的二苯胺試劑。混合均勻后，將試管置于沸水科學(xué)探究中加熱5mino待試管冷卻后，比較兩支試管中溶液顏色的變化。溶液藍(lán)色的深淺與溶液中DNA的含量的多少有關(guān)?？茖W(xué)探究DNA科學(xué)探究DNA的粗提取與鑒定.提取DNA的基本思路(DNA的粗提取).實(shí)驗(yàn)原理：科學(xué)探究科學(xué)探究.實(shí)驗(yàn)原理：.材料用具DNA的粗提取與鑒定.方法步驟:.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1.你提取出白色絲狀物或沉淀物了嗎？用二苯胺試劑鑒定的結(jié)果如何？觀察提取的DNA的顏色，如果不是白色絲狀物，說明DNA中的雜質(zhì)較多。二苯胺試劑簽定呈現(xiàn)藍(lán)色說明實(shí)驗(yàn)基本成功；如果不呈現(xiàn)藍(lán)色，可能的原因有所提取的DNA含量低，或者在實(shí)驗(yàn)操作過程中出現(xiàn)了失誤等。2.你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些雜質(zhì)嗎？可能仍然含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)。3.與其他同學(xué)提取的DNA進(jìn)行比較，看看實(shí)驗(yàn)結(jié)果有何不同，分析產(chǎn)生差異的原因。本實(shí)驗(yàn)可以采取分組的方式進(jìn)行?？梢赃x取不同的實(shí)驗(yàn)材料；也可以查閱資料了解其他提取DNA的方法，對(duì)同種材料采用不同的方法。最后從多方面比較實(shí)驗(yàn)結(jié)果,如DNA的純度、DNA的顏色、二苯多試劑顯色工的深淺等.看看哪種實(shí)驗(yàn)材料、哪種提取方法的效果更好。▼.實(shí)驗(yàn)原理：.實(shí)驗(yàn)原理：.材料用具DNA的粗提取與鑒定.方法步驟:.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1.如果選用雞血細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如何快速破碎細(xì)胞？將雞血細(xì)胞置于蒸餡水中，待細(xì)胞漲破后，收集濾液。2.有時(shí)會(huì)在DNA濾液中添加嫩肉粉(木瓜蛋白酶)，這樣有什么好處？利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，不分解DNA,有利于DNA與蛋白質(zhì)分開。3.有時(shí)還會(huì)反復(fù)利用不同濃度的NaCI溶液來溶解、析出DNA,試猜想該操作的目的？進(jìn)一步純化DNA—用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽溶液中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽溶液使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此，通過反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度，不同的多種雜質(zhì)。X科學(xué)探究課本P課本P74—、概念檢測(cè)1.DNA連接酶是重組DNA技術(shù)常用的一種工具酶。下列相關(guān)敘述正確的是(C)A.能連接DNA分子雙鏈堿基對(duì)之間的氫鍵B.能將單個(gè)脫氧核昔酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵C.能連接用同種限制酶切開的兩條DNA片段，重新形成磷酸二酯鍵D.只能連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端，不能連接雙鏈DNA片段的平末端2、在重組DNA技術(shù)中，將外源基因送人受體細(xì)胞的載體可以是(A)A.大腸桿菌的質(zhì)粒B.切割DNA分子的酶C.DNA片段的黏性末D.用來識(shí)別特定基因的DNA探針練習(xí)與應(yīng)用練習(xí)與應(yīng)用課本P練習(xí)與應(yīng)用課本P74二、拓展應(yīng)用1.想一想，為什么限制酶不切割細(xì)菌本身的DNA分子？提示:迄今為止，在基因工程操作中使用的限制酶絕大部分都是從細(xì)菌或霉菌中提取出來的，它們可以識(shí)別DNA上特定的堿基序列并使特定部位的磷酸二酯鍵斷開。微生物在長期的進(jìn)化過程中形成了一套完善的游機(jī)制，可以將外源人侵的DNA降解。細(xì)菌中限制酶之所以不切割自身的DNA,是因?yàn)楹心撤N限制酶的細(xì)胞的DNA分子或者不具備這種限制酶的識(shí)別序列，或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到了限制酶所識(shí)別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。這樣，盡管細(xì)菌中含有某種限制酶，也不會(huì)使自身的dna被切斷，并且可以防q外源DNA人侵