廣東省普寧市華美實驗中學(xué)2023年第二學(xué)期高三第四次診斷考試生物試題含解析

廣東省普寧市華美實驗中學(xué)2023年第二學(xué)期高三第四次診斷考試生物試題考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi)，不得在試卷上作任何標(biāo)記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi)，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下表中人體不同細(xì)胞的壽命和分裂能力不同，以下說法錯誤的是（）細(xì)胞種類小腸上皮細(xì)胞癌細(xì)胞紅細(xì)胞白細(xì)胞壽命1?2天不死性120天5?7天能否分裂能能不能大多數(shù)不能A．白細(xì)胞的凋亡比紅細(xì)胞快，這與白細(xì)胞吞噬病原體有關(guān)B．癌細(xì)胞的無限增殖是由正?；蛲蛔?yōu)樵┗蛞鸬腃．通常情況下，細(xì)胞的分化程度越高，細(xì)胞分裂能力越弱D．小腸上皮細(xì)胞壽命最短，這與基因控制的凋亡有關(guān)2．研究發(fā)現(xiàn)人體的生物鐘機理如圖所示，下丘腦SCN細(xì)胞中，基因表達(dá)產(chǎn)物PER蛋白的濃度呈周期性變化，振蕩周期為24h，下列分析錯誤的是（）A．核糖體在圖中的移動方向是從右向左B．圖中過程③體現(xiàn)了負(fù)反饋調(diào)節(jié)機制C．per基因只在下丘腦SCN細(xì)胞中復(fù)制與表達(dá)D．一條mRNA上，可同時結(jié)合多個核糖體翻譯出多條相同肽鏈3．下列有關(guān)生物膜及其所含蛋白質(zhì)的敘述，錯誤的是（）A．線粒體中催化丙酮酸分解的酶分布在線粒體內(nèi)膜上B．溶酶體膜蛋白經(jīng)過修飾，不會被溶酶體內(nèi)的水解酶水解C．葉綠體中催化NADPH合成的酶分布在類囊體膜上D．細(xì)胞膜的選擇透過性與膜上載體蛋白種類密切相關(guān)4．根據(jù)下列實驗操作及結(jié)果得出的結(jié)論中，正確的是編號實驗操作及結(jié)果結(jié)論①用光學(xué)顯微鏡直接觀察人口腔上皮細(xì)胞時，未觀察到線粒體人口腔上皮細(xì)胞不含線粒體②一定濃度的過氧化氫溶液在90℃水浴加熱下，產(chǎn)生氣泡的速率大于常溫下加熱可加快過氧化氫的分解③某生物組織樣液中加入斐林試劑后直接觀察，未產(chǎn)生磚紅色沉淀該生物組織不含還原糖④利用PCR技術(shù)擴增某目的基因，擴增產(chǎn)物中加入二苯胺試劑后加熱變藍(lán)擴增產(chǎn)物含有該目的基因A．① B．② C．③ D．④5．下列關(guān)于免疫調(diào)節(jié)的敘述，錯誤的是（）A．溶菌酶不一定都是由免疫細(xì)胞產(chǎn)生的B．吞噬細(xì)胞參與的免疫不一定是特異性免疫C．漿細(xì)胞一定來自B細(xì)胞的增殖和分化D．T淋巴細(xì)胞一定是在胸腺中發(fā)育成熟的6．將植物細(xì)胞去壁后制成原生質(zhì)體，下列說法錯誤的是（）A．細(xì)胞可能更易被克隆 B．更有利于導(dǎo)入外源基因C．細(xì)胞間融合更易發(fā)生 D．更有利于細(xì)胞滲透失水二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）2018年1月中國科學(xué)家宣布，克隆獼猴“中中”和“華華”誕生，并已經(jīng)分別健康生活了數(shù)周。這是世界上第一次采用和克隆羊多利相同技術(shù)手段獲得的靈長類動物，將推動中國發(fā)展出基于非人靈長類疾病動物模型的醫(yī)藥研發(fā)，加速新藥研發(fā)進程。請回答：（1）克隆獼猴“中中”和“華華”采用的核心技術(shù)是______________和胚胎移植。（2）由于獼猴是單胎動物，卵細(xì)胞的數(shù)量也限制了這項技術(shù)的成功。為了獲得代孕獼猴和多個卵母細(xì)胞，需要對雌性獼猴進行的共同處理是______________。（3）克隆獼猴采用的供體細(xì)胞是獼猴胎兒成纖維細(xì)胞，而不是成年個體成纖維細(xì)胞的原因是獼猴胎兒成纖維細(xì)胞分裂次數(shù)少，傳代在10代以內(nèi)，能保持正常的_________。當(dāng)卵母細(xì)胞培養(yǎng)至___________期時，可以用微型吸管同時吸出卵母細(xì)胞中的_____________。（4）為了選擇雌性胚胎進行移植，需要對體外培養(yǎng)的胚胎進行性別鑒定，采用的方法是取囊胚期胚胎的_______________（滋養(yǎng)層細(xì)胞/內(nèi)細(xì)胞團細(xì)胞）做DNA分析性別鑒定。（5）在培養(yǎng)“中中”和“華華”的供體細(xì)胞時，觀察到成纖維細(xì)胞由扁平梭形變成球形時，表明細(xì)胞正在發(fā)生____________。8．（10分）2018年11月，世界首例免疫艾滋病的基因編輯嬰兒誕生。這項研究用到了能夠精確定位并修飾基因的基因編輯技術(shù)，即基因編輯時用約為頭發(fā)二十分之細(xì)的針把Cas9蛋白和特定的引導(dǎo)序列注射到受精卵中，對CCRS基因進行修改，預(yù)期嬰兒出生后能天然抵抗艾滋病病毒。請回答下列問題：（1）基因編輯時，若要去除基因中的部分序列，則可能用到的酶有________________。（2）基因編輯時，將Cas9蛋白和特定的引導(dǎo)序列注射到受精卵的方法是_________，用受精卵作為受體細(xì)胞的原因是__________________________________。（3）“試管嬰兒”技術(shù)采用的是體外受精，采集的精子需要通過________處理才能與卵細(xì)胞受精。受精時防止多精入卵的生理屏障有____________，移植的胚胎能夠存活的生理基礎(chǔ)是受體對移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生______反應(yīng)。（4）為取得同卵雙胞胎：可以采用______技術(shù)，在對囊胚階段的胚胎進行操作時需要注意的問題是________________________。9．（10分）為發(fā)展農(nóng)村農(nóng)業(yè)經(jīng)濟的同時又保護環(huán)境，農(nóng)業(yè)專家設(shè)計了如下生態(tài)農(nóng)業(yè)模式，請分析回答：（1）推動該生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)循環(huán)的能量有____________________，從能量流動的角度分析，建立該生態(tài)系統(tǒng)的目的是____________________。（2）碳在生物群落內(nèi)部以__________的形式流動。食用菌在該生態(tài)系統(tǒng)中的作用是_______________。（3）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中為減少農(nóng)藥對環(huán)境的污染，人們可利用一些特殊的化學(xué)物質(zhì)擾亂某些動物的雌雄交配，降低有害動物種群的__________，從而降低種群密度，這屬于__________防治。10．（10分）利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白，近些年在我國制藥行業(yè)中異軍突起。圖1表示基因工程常用的一種質(zhì)粒?；卮鹩嘘P(guān)問題：（1）SphⅠ和SacⅠ兩種限制酶識別并切割不同的DNA序列，將目的基因和質(zhì)粒都通過SphⅠ和SacⅠ切割，可以避免_______________。拼接成重組質(zhì)粒，需要加入_______________酶才能完成。（2）各限制酶在該質(zhì)粒上分別只有一處識別序列，有關(guān)質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度如下表所示。已知質(zhì)粒被切除的片段長度為0.5kb，則與質(zhì)粒結(jié)合的目的基因長度為_____kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長度為2.4kb（圖1所示），結(jié)合圖2分析目的基因上ClaI、PstⅠ兩種限制酶的切割位點分別為___________（填“a和b”或“b和a”）。質(zhì)粒重組質(zhì)粒BglⅡ6.0kb7.1kbClaⅠ6.0kb2.3kb，4.8kbPstⅠ6.0kb1.5kb，5.6kb（3）在篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體菌時，培養(yǎng)基中加入適量的________________，使導(dǎo)入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都能在該培養(yǎng)基上生長。為了進一步篩選，可以利用抗原-抗體雜交的方法，若出現(xiàn)______________，則該受體菌可以作為工程菌。（4）若要對藥用蛋白的結(jié)構(gòu)進行改造，可利用____________工程對目的基因進行修飾。11．（15分）回答利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因植物的相關(guān)問題：（1）培育轉(zhuǎn)基因植物過程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以通過復(fù)制遺傳給下一代，同時，使目的基因表達(dá)和發(fā)揮作用．（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，可利用DNA連接酶連接被限制酶切開的_____鍵．（3）組成基因表達(dá)載體的單體是_____．基因表達(dá)載體中的啟動子是_____識別和結(jié)合的部位，這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動目的基因通過_____（填過程）合成mRNA．（4）用兩種限制酶XbaI和SacI（兩種酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，獲得含目的基因的片段．若利用該片段構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選用下圖中的何種Ti質(zhì)粒？_____（5）將受體細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要應(yīng)用_____技術(shù)，該技術(shù)的理論依據(jù)是_____．

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解題分析】

細(xì)胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程，實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，最終形成形態(tài)和功能不同的組織和細(xì)胞?！绢}目詳解】A、白細(xì)胞沒有細(xì)胞核，功能主要是吞噬病原體，因此更新速度快，A正確；B、癌細(xì)胞的無限增殖是由于原癌基因突變?yōu)榘┗?，以及抑癌基因突變失去功能?dǎo)致的，B錯誤；C、通常情況下，細(xì)胞的分化程度越高，其全能性就越低，細(xì)胞分裂能力就越弱，C正確；D、人體不同組織的細(xì)胞壽命不同，是由遺傳物質(zhì)決定，與基因控制的衰老和凋亡有關(guān)，D正確。故選B?！绢}目點撥】原癌基因主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，控制細(xì)胞生長和分裂的進程；抑癌基因主要阻止細(xì)胞不正常的增殖。細(xì)胞癌變的內(nèi)因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變，導(dǎo)致正常細(xì)胞的生長和分裂失控，使得正常細(xì)胞變成不受控制、惡性增殖的癌細(xì)胞。2、C【解題分析】

細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。細(xì)胞具有全能性的原因是細(xì)胞包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因。根據(jù)題意和圖示分析可知：圖中①為轉(zhuǎn)錄過程，②為翻譯過程，③過程表示PER蛋白能進入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)per基因的轉(zhuǎn)錄過程?！绢}目詳解】A、根據(jù)多肽鏈的長短，可判斷核糖體在圖中移動的方向是從右向左，A正確；B、過程③體現(xiàn)了負(fù)反饋調(diào)節(jié)機制，B正確；C、per基因只在下丘腦SCN細(xì)胞中表達(dá)，而由于各個細(xì)胞都含有該基因，所以隨著其他細(xì)胞的復(fù)制而復(fù)制，C錯誤；D、一條mRNA鏈上，可同時結(jié)合多個核糖體翻譯出多個相同的肽鏈，D正確。故選C。3、A【解題分析】

有氧呼吸第一階段為葡萄糖酵解，場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，第二階段為丙酮酸分解形成二氧化碳，場所是線粒體基質(zhì)，第三階段是還原氫和氧結(jié)合形成水，場所是線粒體內(nèi)膜。光反應(yīng)的場所是葉綠體類囊體薄膜，光反應(yīng)的產(chǎn)物是NADPH、ATP和氧氣。【題目詳解】A、線粒體中催化丙酮酸分解的酶分布在線粒體基質(zhì)中，A錯誤；B、溶酶體膜上的蛋白質(zhì)經(jīng)過修飾成為特殊結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，不會被自身水解酶水解，B正確；C、NADPH是光反應(yīng)的產(chǎn)物，形成場所是葉綠體類囊體薄膜，故葉綠體中催化NADPH合成的酶分布在類囊體膜上，C正確；D、生物膜的功能特點是具有選擇透過性，主要與載體蛋白的種類和數(shù)量有關(guān)，也與磷脂雙分子層有關(guān)，D正確。故選A。4、B【解題分析】

1、健那綠染液是專一性染線粒體的活細(xì)胞染料，可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色，而細(xì)胞質(zhì)接近無色。2、檢測還原糖時需要使用斐林試劑，在水浴加熱的條件下進行，顏色由淺藍(lán)色變成棕色，最終變?yōu)榇u紅色沉淀。3、鑒定DNA時可以使用二苯胺，水浴加熱后呈現(xiàn)藍(lán)色?！绢}目詳解】①口腔上皮細(xì)胞用健那綠染料染色后可以在光學(xué)顯微鏡下看見線粒體在細(xì)胞內(nèi)的分布情況（呈藍(lán)綠色），①錯誤；②過氧化氫熱穩(wěn)定性較差，水浴加熱后，可提高其分解的速率，產(chǎn)生氣泡速度明顯大于常溫下，②正確；③斐林試劑在使用時，需要水浴加熱，因此某生物組織樣液中加入斐林試劑后直接觀察，未產(chǎn)生磚紅色沉淀，不能確定其是否含有還原糖，③錯誤；④二苯胺試劑與DNA（基因）在加熱條件下成藍(lán)色，因此PCR產(chǎn)物中加入二苯胺試劑，加熱后變藍(lán)說明有DNA（基因）產(chǎn)生，但不一定是目的基因，④錯誤。故選B。5、C【解題分析】

1、人體免疫系統(tǒng)的三大防線：（1）第一道：皮膚、粘膜的屏障作用及皮膚、黏膜的分泌物（淚液、唾液）的殺滅作用；（2）第二道：吞噬細(xì)胞的吞噬作用及體液中殺菌物質(zhì)的殺滅作用；（3）第三道：免疫器官、免疫細(xì)胞、免疫物質(zhì)共同組成的免疫系統(tǒng)。2、免疫細(xì)胞：①淋巴細(xì)胞：位于淋巴液、血液和淋巴結(jié)中，T細(xì)胞（遷移到胸腺中成熟）、B細(xì)胞（在骨髓中成熟）。②吞噬細(xì)胞等。【題目詳解】A、溶菌酶也可以由其他細(xì)胞產(chǎn)生，如唾液腺細(xì)胞，A正確；B、吞噬細(xì)胞在非特異性免疫中也有作用，直接吞噬外來病原體，B正確；C、在二次免疫過程中，漿細(xì)胞還可以來自記憶細(xì)胞的增殖和分化，C錯誤；D、T淋巴細(xì)胞成熟的場所在胸腺，D正確。故選C?！绢}目點撥】本題主要考查免疫系統(tǒng)的組成，考生需要識記相關(guān)知識。6、D【解題分析】

植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，具有保護和支撐的作用?！绢}目詳解】植物的細(xì)胞壁具有保護和支撐的作用，去掉細(xì)胞壁后細(xì)胞可能更易被克隆、更有利于導(dǎo)入外源基因以及細(xì)胞間融合更易發(fā)生，甚至將去壁的原生質(zhì)體置于低滲溶液中可以吸水漲破，但對細(xì)胞滲透失水沒有影響，綜上分析，D符合題意，ABC不符合題意。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、體細(xì)胞核移植同期發(fā)情處理二倍體核型MⅡ（MⅡ中、減數(shù)第二次分裂中期）細(xì)胞核和第一極體滋養(yǎng)層細(xì)胞癌變【解題分析】

核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個胚胎最終發(fā)育成動物個體?！绢}目詳解】（1）核移植得到的動物又稱為克隆動物，如中中和華華，培育的過程中用到了核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。（2）核移植后經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)獲得的早期胚胎需要經(jīng)過胚胎移植進代孕母體，供體和代孕母體需要經(jīng)過同期發(fā)情處理處于相同的生理狀態(tài)，便于進行胚胎移植。（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)的代數(shù)增多，會導(dǎo)致遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，故常選擇傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，可以保證正常的二倍體核型。核移植時需要選擇處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞，可以用微型吸管同時吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核和第一極體，獲得去核的卵母細(xì)胞。（4）內(nèi)細(xì)胞團將會發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層會發(fā)育成胎膜和胎盤，進行性別鑒定應(yīng)該選擇滋養(yǎng)層的細(xì)胞。（5）若細(xì)胞發(fā)生癌變，其形態(tài)會發(fā)生改變，如成纖維細(xì)胞由扁平梭形變成球形。【題目點撥】中中和華華屬于克隆動物，原理是動物細(xì)胞核的全能性。8、限制酶和DNA連接酶顯微注射法受精卵分化程度低獲能透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)免疫排斥胚胎分割將內(nèi)細(xì)胞團均等分割【解題分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）基因編輯時，若要去除基因中的部分序列，則可能用到的酶有限制酶和DNA連接酶。（2）基因編輯時，將Cas9蛋白和特定的引導(dǎo)序列注射到受精卵的方法是顯微注射法，用受精卵作為受體細(xì)胞的原因是受精卵分化程度低，全能性高，并且含有供發(fā)育的營養(yǎng)物質(zhì)。（3）采集的精子需要通過獲能處理才能與卵細(xì)胞受精。受精時防止多精入卵的生理屏障有透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，移植的胚胎能夠存活的生理基礎(chǔ)是受體對移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。（4）可以采用胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胞胎，在對囊胚階段的胚胎進行分割時需要注意將內(nèi)細(xì)胞團均等分割?！绢}目點撥】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題。9、生產(chǎn)者（農(nóng)作物）光合作用固定的太陽能和投入的飼料所含有機物中的化學(xué)能實現(xiàn)能量的多級利用，提高能量的利用率（含碳的）有機物將植物枯枝敗葉及遺體和沼渣中的有機物分解為無機物（返回?zé)o機環(huán)境）出生率生物【解題分析】

生物防治：生物防治是利用物種間的相互關(guān)系，以一種或一類生物抑制另一種或另一類生物的方法。它是降低雜草和害蟲等有害生物種群密度的一種方法。它的最大優(yōu)點是不污染環(huán)境。生物防治方法主要包括：1.?利用微生物防治。2.?利用寄生性天敵防治。3.?利用捕食性天敵防治。生物防治優(yōu)點：對環(huán)境污染小，能有效保護天敵，發(fā)揮持續(xù)控災(zāi)作用，成本低、對人畜安全、害蟲不易產(chǎn)生抗性、減少化學(xué)農(nóng)藥用量、節(jié)約能源?！绢}目詳解】（1）生產(chǎn)者（農(nóng)作物）固定的能量是流入生態(tài)系統(tǒng)的總能量，對于人工生態(tài)系統(tǒng)來講還包括人工投入的有機物中的能量，所以推動該生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)循環(huán)能量包括生產(chǎn)者（農(nóng)作物）光合作用固定的太陽能和投入的飼料所含有機物中的化學(xué)能，從能量流動的角度分析，該生態(tài)系統(tǒng)的建立實現(xiàn)了能量的多級利用，進而提高了生態(tài)系統(tǒng)中的能量利用率。（2）碳在生物群落內(nèi)部以（含碳的）有機物的形式流動，而碳循環(huán)是以二氧化碳的形式在無機環(huán)境和生物群落之間不斷往復(fù)循環(huán)的，食用菌是該生態(tài)系統(tǒng)中的分解者，能將植物枯枝敗葉及遺體和沼渣中的有機物分解為無機物（返回?zé)o機環(huán)境），供植物吸收利用。（3）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，人們可利用一些特殊的化學(xué)物質(zhì)擾亂某些動物的雌雄交配，降低了有害動物種群的出生率，從而降低種群密度，進而達(dá)到了防治有害動物的目的，這屬于生物防治。【題目點撥】本題易錯空為第一空和最后一空，錯因是不明白推動物質(zhì)循環(huán)的含義，并且忽略人為提供飼料中的能量，最后一空的錯因是混淆生物防治的概念，導(dǎo)致不能正確作答。10、目的基因和切割后質(zhì)粒的自身環(huán)化DNA連接1.6a和b氨芐青霉素雜交帶（抗原-抗體復(fù)合物）蛋白質(zhì)（第二代基因）【解題分析】

基因工程的工具酶有限制酶和DNA連接酶，一般用同種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，但容易造成自身環(huán)化現(xiàn)象。【題目詳解】（1）目的基因通過SphⅠ和SacⅠ切割產(chǎn)生的末端不同，可避免自身環(huán)化，質(zhì)粒通過SphⅠ和SacⅠ切割，可避免切割后的質(zhì)粒重新結(jié)合而環(huán)化；目的基因和質(zhì)粒結(jié)合，需要DNA連接酶連接磷酸二酯鍵將缺口連接起來。（2）根據(jù)表格信息，質(zhì)粒為6.0kb，減去被切除的長度為0.5kb的片段，則剩余的為5.5kb，而重組質(zhì)粒為7.1kb，說明插入的目的基因長度為7.1-5.5=1.6(kb)；質(zhì)粒上含抗四環(huán)素基因的ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域長度為2.4kb，減去被切取的片段長度為0.5kb后為1.9kb，插入的目的基因長度為1.6kb，所以重組質(zhì)粒上含抗四環(huán)素基因的ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域長度為1.9+1.6=3.5(kb)，又根據(jù)表格信息，通過ClaⅠ切割重組質(zhì)粒，產(chǎn)生了2.3kb片段，通過PstⅠ切割重組質(zhì)粒，產(chǎn)生了1.5kb片段。設(shè)PstⅠ切割位點為a，ClaⅠ切割位點為b，則會出現(xiàn)圖3中所示結(jié)果，而2.3+1.5=3.8，3.8﹥3.6，說明a為ClaI切割位點、b為PstⅠ切割位點，反之則不成立。（3）重組質(zhì)粒的抗四環(huán)素基因已經(jīng)由于目的基因的插入而破壞，但氨芐青霉素基因完整，培養(yǎng)基中若加入適量的氨芐青霉素，含普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的受體菌都能存活，而沒有導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌會死亡而淘汰；若受體菌成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒，并且目的基因正常表達(dá)，則可以產(chǎn)生所需的藥用蛋白，通過抗原-抗體雜交的方法，若出現(xiàn)雜交帶，則該受體菌可以作為工程菌；通過蛋白質(zhì)工程對目的基因進行修飾，從而實現(xiàn)對已有的藥用蛋白進行改造?！绢}目點撥】一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切點進行切割。本題的難點在第2問，要根據(jù)表中各限制酶的切割片段進行計算。11、穩(wěn)定存在磷酸二酯脫氧核苷酸RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄甲植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性【解題分析】

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是用這種方法獲得的）1、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法