小柴胡湯治療lps誘導(dǎo)發(fā)熱的實驗研究

小柴胡湯治療lps誘導(dǎo)發(fā)熱的實驗研究

小柴胡湯是傷寒的一部分。它由柴胡、黃甘草、半夏、生姜和棗七味藥物組成。本方為治療傷寒少陽證的基礎(chǔ)方,又是和解少陽的代表方劑。以和解少陽、扶正祛邪、和胃降逆為其主治。近年人們對該方進(jìn)行了大量的藥效學(xué)實驗研究,為指導(dǎo)臨床拓展運用及傳統(tǒng)古方開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。1小柴胡湯對lps致病性大鼠體溫的影響小柴胡湯具有較好的解熱作用。錢妍制備SD大鼠LPS誘導(dǎo)發(fā)熱模型,用小柴胡湯灌胃治療,并以板藍(lán)根煎劑進(jìn)行對照,顯示小柴胡湯和板藍(lán)根沖劑均能抑制LPS所致大鼠體溫的升高,與對照組比較在不同時間點差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),小柴胡湯組降溫效果略優(yōu)于板藍(lán)根組,但中藥組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。孫明瑜等實驗顯示,小柴胡湯分煎合液與合煎液組在SD大鼠注射LPS后多個觀察點的體溫均較模型組明顯降低(P<0.05,P<0.01),合煎液與分煎合液均有顯著的解熱作用。2直徑、最低抑菌濃度mic的抑菌濃度小柴胡湯體外試驗對多種細(xì)菌具有抑制作用。袁長津等用瓊脂擴(kuò)散法、試管稀釋法測定顯示,小柴胡湯對乙型溶血性鏈球菌、嗜血流感桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、大腸埃希菌的抑菌環(huán)直徑依次為(12.05±0.23)mm、(14.25±0.23)mm、(13.20±0.31)mm、(10.20±0.35)mm、(12.01±0.46)mm,最低抑菌濃度(MIC)依次為200.00mg/mL、100.00mg/mL、100.00mg/mL、100.00mg/mL、250.00mg/mL、200.00mg/mL。顧本清等用體外抑菌試驗和尿道致病性大腸桿菌尿道上皮細(xì)胞黏附實驗證明,小柴胡湯對大腸桿菌的增殖及尿道致病性大腸桿菌對尿道上皮的黏附效應(yīng)均有抑制作用。3對大鼠肺膜炎模型的影響小柴胡湯具有激素樣及非激素樣抗炎作用。錢妍制備小鼠肺炎鏈球菌感染模型,用小柴胡湯治療并同板藍(lán)根煎劑對照,發(fā)現(xiàn)小柴胡湯可明顯降低肺炎鏈球菌感染模型動物死亡的發(fā)生率(93.3%~26.7%,P<0.05)。白晶等用小柴胡湯及其藥物配伍觀察其對大鼠胸膜炎模型的影響,顯示小柴胡湯及其藥群配伍各組大鼠胸腔滲出液體積、滲出液中白細(xì)胞數(shù)量、髓過氧化物酶(MPO)以及血清IL-8、NO含量均顯著降低(P<0.01),胸腔滲出液溶菌酶(LZM)含量顯著升高(P<0.01)。表明小柴胡湯及其藥群配伍均具有顯著的抗炎作用,對胸膜炎有一定的防治功能。4抗感染藥物4.1小柴胡湯對vb3基因表達(dá)的影響小柴胡湯具有抗柯薩奇病毒感染和保護(hù)心肌細(xì)胞的作用。蔣麗敏等用體外培養(yǎng)的新生大鼠心肌細(xì)胞感染柯薩奇病毒B3(CVB3)作為病毒性心肌炎模型,實驗顯示CVB3感染心肌細(xì)胞48h,琥珀酸脫氫酶(SDH)活性明顯下降,經(jīng)小柴胡湯治療后,SDH活性接近正常水平。王雪峰等用柯薩奇病毒B3親心肌株(CVB3m)腹腔注射誘導(dǎo)Balb/c乳鼠心肌炎模型,以小柴胡湯灌胃治療后顯示,小柴胡湯在急性期均能明顯提高NK細(xì)胞活性、調(diào)節(jié)T細(xì)胞亞群功能,與對照組比較有顯著性差異(P<0.05)。通過比較小柴胡湯作用細(xì)胞與病毒的不同環(huán)節(jié),提示小柴胡湯具有保護(hù)細(xì)胞減輕病毒感染功能及直接殺傷CVB3m的作用。4.2小柴胡湯制劑組小柴胡湯有一定的抗鴨乙型肝炎病毒的作用。劉中景等通過體內(nèi)抗鴨乙型肝炎病毒(DHBV)的實驗研究顯示,小柴胡湯水煎濃縮劑全方不同劑量對DHBV的復(fù)制均有一定的抑制作用,而以20倍劑量組的抑制作用為最佳;小柴胡湯不同藥味對DHBV均有一定的抑制作用,而全方組作用較半方組及單味柴胡組為優(yōu),其抑制作用弱于西藥無環(huán)鳥苷,但較為持久,停藥后無反跳。陳壓西等以重慶麻鴨乙型肝炎動物模型實驗顯示,用小胡柴湯膠囊治療1個月及大劑量(1000mg/(kg·d))小柴胡湯膠囊治療2周都能使血清乙型肝炎病毒(DHBV-DNA)滴度總體水平降低(P<0.05)或極顯著降低(P<0.01)。表明該藥抗病毒作用與劑量大小、用藥時間長短有關(guān)。5小柴胡湯對大鼠肝纖維化中timp-1mrna小柴胡湯具有明顯的抗氧化能力和免疫調(diào)節(jié)作用,因而對肝損傷可起到一定的保護(hù)作用,能減輕肝纖維化程度,調(diào)節(jié)改善肝臟功能。劉應(yīng)柯等實驗表明,給大鼠順鉑或阿霉素,皆可導(dǎo)致肝腎功能與結(jié)構(gòu)損害,超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-px)活性及GSH含量下降,丙二醛(MDA)含量升高,應(yīng)用加味小柴胡湯則可明顯減輕肝腎功能及組織損害,升高T-AOC、SOD、GSH-PX活性及GSH含量,降低MDA含量。河福金等通過給大鼠灌胃白酒、橄欖油、吡唑的方法建立動物模型,實驗顯示小柴胡湯能促進(jìn)肝內(nèi)糖、蛋白質(zhì)的合成,增強(qiáng)肝細(xì)胞對有害因子的抵抗能力,能很好地保護(hù)肝細(xì)胞膜系統(tǒng),提高其穩(wěn)定性,因而對酒精性肝損傷具有良好的防護(hù)作用。吳麗花等研究發(fā)現(xiàn),小柴胡湯膠囊劑對四氯化碳(CCl4)及D-GalN所致大鼠的肝損傷有一定保護(hù)作用。溫志堅等研究結(jié)果表明,小柴胡湯提取物能明顯降低D-GalN、CCl4、CCl4復(fù)合物等3種因素所導(dǎo)致的肝損傷大鼠的ALT、AST水平,并具有明顯的抗肝纖維化作用。張琪等采用四氯化碳、花生油制備大鼠肝纖維化模型,并用不同劑量的小柴胡湯進(jìn)行干預(yù)。結(jié)果顯示,小柴胡湯通過在肝纖維化早期下調(diào)TIMP-1mRNA的表達(dá)而減輕大鼠肝纖維化的程度。帥峰通過半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR),觀察小柴胡湯對大鼠肝纖維化的影響,顯示小柴胡湯能使纖維化大鼠肝細(xì)胞變性壞死明顯減輕,結(jié)締組織明顯減少,假小葉形成減少,小柴胡湯治療組的TIMP-1mRNA比模型組顯著降低(P<0.01)。表明小柴胡湯可通過抑制TIMP-lmRNA的表達(dá)而發(fā)揮抗肝纖維化作用。6兩組患者治療前后纖維化程度和臟器破環(huán)程度比較小柴胡湯對胰腺功能有調(diào)節(jié)作用,可用于慢性胰腺炎的治療。朱穎等以三硝基苯磺酸(TNBS)誘發(fā)慢性胰腺炎模型大鼠,喂食小柴胡湯后顯示,治療組胰腺纖維化程度和腺體破環(huán)程度均顯著低于非治療組(P<0.001),治療時間越長,作用越明顯;同時胰腺組織內(nèi)SOD、GSH-px活性顯著高于非治療組,MDA含量顯著低于非治療組,α-平滑肌肌動蛋白(SMA)、結(jié)蛋白(desmin)、膠原(Col)Ⅰ、ColⅢ、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)和纖維連接蛋白(FN)的表達(dá)亦較非治療組有不同程度的減少。表明早期應(yīng)用小柴胡湯可在一定程度上抑制胰腺纖維化的進(jìn)展,4周后療效顯著。7il-6活性成分小柴胡湯對局部免疫反應(yīng)引起的肺炎有調(diào)節(jié)作用。同心報道日本OhtakeN等在探討小柴胡湯對肺局部免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)作用時發(fā)現(xiàn),經(jīng)口給予小柴胡湯對BALB/c小鼠肺內(nèi)TNF-α和IL-1β濃度無影響,但可使IL-6濃度增加。對小柴胡湯的活性組分進(jìn)行研究結(jié)果顯示,該方中很多成分都與IL-6誘導(dǎo)活性有關(guān)。體外試驗顯示,其主要成分之一甘草、黃芩的代謝產(chǎn)物甘草素對受抗CD3單克隆抗體刺激的肺單核細(xì)胞中IL-6的產(chǎn)生有細(xì)胞種類特異性和濃度依賴性促進(jìn)作用。研究還顯示,小柴胡湯對LPS誘導(dǎo)的肺損害的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)有抑制作用。清風(fēng)報道,小柴胡湯中所含酚類化合物,尤其是黃芩黃素和medicarpin具有直接誘導(dǎo)人肺纖維細(xì)胞和免疫細(xì)胞凋亡的作用,因而對治療間質(zhì)性肺炎有效。8小鼠小鼠胃平滑電快波頻率小柴胡湯組與水解壓的比較見表1小柴胡湯對胃腸動力有促進(jìn)作用。石拓通過對大、小鼠促胃腸動力作用實驗顯示,小鼠胃內(nèi)色素殘留量小柴胡湯組與莫沙比利組比較無顯著性差異(P>0.05),與生理鹽水組比較有顯著性差異(P<0.05);小鼠小腸色素推進(jìn)率小柴胡湯組與莫沙比利組比較無顯著性差異(P>0.05),而與生理鹽水組比較有顯著性差異(P<0.05);大鼠胃平滑肌電快波頻率小柴胡湯組與生理鹽水組比較有顯著性差異(P<0.05)。其機(jī)制可能與小柴胡湯通過升高胃平滑肌電快波的峰電位和頻率、促進(jìn)血和十二指腸組織中胃動素的釋放和分泌而達(dá)到的。史青報道,用小柴胡湯提取物顆粒對雄性SD大鼠進(jìn)行胃排空率(GER)和胃袢實驗,顯示小柴胡湯可顯著升高胃內(nèi)pH值,但不影響甲苯磺丁脲胃內(nèi)溶解與吸收。9小柴胡湯對免疫抑制小鼠的作用小柴胡湯具有增強(qiáng)免疫系統(tǒng)功能的作用。張磊等實驗顯示,小柴胡湯提取物可增強(qiáng)小鼠特異性體液免疫功能,促進(jìn)B淋巴細(xì)胞增殖。周錫順等實驗顯示,灌服小柴胡湯的小鼠在4、8、16h腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)均有不同程度的提高,以16h組提高最為顯著(P<0.01)。表明小柴胡湯有提高體內(nèi)單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能。山輔昌由等研究認(rèn)為,小柴胡湯短時間內(nèi)可使末梢血單核細(xì)胞活性增加,產(chǎn)生L-1β,其結(jié)果激活淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)產(chǎn)生L-6和GM-CSF,從而發(fā)揮免疫作用。王金華等以伯氏瘧原蟲感染小鼠為模型,實驗顯示小柴胡湯或小柴胡湯與青蒿素合并用藥均可顯著提高瘧疾小鼠的體液免疫、非特異性免疫、紅細(xì)胞免疫的能力。孫艷等實驗顯示,小柴胡湯對荷瘤鼠化療所引起的免疫功能低下有明顯的恢復(fù)作用,明顯促進(jìn)化療荷瘤鼠自然殺傷細(xì)胞(NK)活性和IL-2的產(chǎn)生能力。唐小云等研究發(fā)現(xiàn),灌服小柴胡湯的免疫抑制小鼠的TNF-α、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10各項免疫指標(biāo)均明顯提高,幾乎與正常組小鼠的水平相當(dāng)(P>0.05),與免疫抑制小鼠相比較差異顯著(P<0.01)。尤其是TH1型細(xì)胞因子(IL-2和IFN-γ)濃度升高明顯。表明小柴胡湯具有生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的作用,可明顯增強(qiáng)免疫抑制小鼠的免疫功能。10對s180細(xì)胞的生長和形態(tài)的影響小柴胡湯具有良好的抑瘤作用。楊惠玲等采用透射電鏡觀察小柴胡湯對瘤細(xì)胞生長和結(jié)構(gòu)的影響,顯示小柴胡湯以高、中和低濃度(1000g/L、500g/L、250g/L)溶液治療后,對荷瘤鼠S180細(xì)胞均有明顯抑制作用,抑瘤率40.19%~58.73%,其中以高濃度組療效最佳。同時可見治療后各組S180細(xì)胞均出現(xiàn)凋亡的特征,其中以低濃度組為甚,而高濃度組S180細(xì)胞則以壞死為主。張豐華等用小柴胡湯大、中、小劑量(0.9g/mL、0.45g/mL、0.225g/mL)觀察對S180荷瘤小鼠腫瘤血管生成的影響,顯示小柴胡湯中、小劑量有明顯抑瘤作用(P<0.05),且在量效關(guān)系上呈負(fù)相關(guān),在抑制腫瘤血管生成中以小劑量為好(P<0.05);與模型組比較,小柴胡湯3個劑量組對S180荷瘤小鼠腫瘤組織VEGF都具有明顯的療效,且在量效關(guān)系上呈負(fù)相關(guān)趨勢,但各治療組間比較,則以小柴胡湯小劑量組效果最好。李江等實驗表明,小柴胡湯水提組、梯度乙醇組及醇水組對H22小鼠肝癌實體瘤均有明顯抑制作用,抑瘤率分別為32.35%、43.97%和25.77%(P<0.01,P<0.05)。梁靚靚等以Lewis肺癌模型小鼠實驗發(fā)現(xiàn),小柴胡湯對腫瘤細(xì)胞的生長有抑制作用,瘤重均明顯低于模型組,差異顯著(P<0.01);與模型組比較,小柴胡湯組可見瘤細(xì)胞體積縮小,異型細(xì)胞較少,細(xì)胞核致密,染色質(zhì)濃縮邊集,腫瘤細(xì)胞核分裂數(shù)明顯減少。陶祥等研究認(rèn)為,小柴胡湯高、中、低3種不同濃度(1、0.5、0.25g/mL)用藥后可能通過刺激免疫器官,提高免疫功能和增加體重而達(dá)到抑瘤作用。11小柴胡湯對大鼠精子缺陷的調(diào)節(jié)小柴胡湯還有明顯的抗過氧化作用,因而可用于肝癌化療藥物誘致的脂質(zhì)過氧化反應(yīng);以蛔蟲抽出液為抗原,小柴胡湯對肥大細(xì)胞中組胺的游離有明顯的抑制和抗過敏作用;小柴胡湯還可通過下調(diào)異位內(nèi)膜環(huán)氧合酶-2(COX-2)的表達(dá),減少前列腺素的產(chǎn)生,或通過上調(diào)Fas蛋白的表達(dá),促進(jìn)異位內(nèi)膜細(xì)胞的凋亡而抑制大鼠子宮內(nèi)膜異位癥的生長;小柴胡湯可使MDRmRNA轉(zhuǎn)錄量增加,從而使與藥物吸收密切相關(guān)的MDR1的轉(zhuǎn)運活性增強(qiáng);以0.4mg/kg敵敵畏飼喂青紫藍(lán)兔,1.65g/kg小柴胡湯對其損害有拮抗作用。長期毒性試驗(2256、1128、100mg/kg灌胃給藥180d)顯示,小柴胡湯對大鼠生長發(fā)育,血液學(xué)常規(guī),血液生化指標(biāo)均無影響,主要臟器病理形態(tài)未出現(xiàn)毒性病變,表明應(yīng)用小柴胡湯對人體沒有明顯的毒副作用。12柯