HIV試驗(yàn)室SOP文件-新版

HIV實(shí)驗(yàn)室SO咬件■新版3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第0頁(yè)共70頁(yè)目HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況??HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作管理程序 HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作流程圖 目HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況??HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作管理程序 HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作流程圖 HIV篩查實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度 一、 實(shí)驗(yàn)室工作制度 二、 崗位責(zé)任制 三、 標(biāo)本管理制度 四、 試劑管理制度 錄 3 4 6 7 7 7 8 11五、污染區(qū)工作守則 12七、環(huán)境消毒隔離制度 13\o"CurrentDocument"八、實(shí)驗(yàn)臺(tái)消毒措施 14\o"CurrentDocument"九、廢棄物處置和實(shí)驗(yàn)室消毒 15\o"CurrentDocument"十、消毒液的配置及使用措施 16\o"CurrentDocument"十一、消防安全制度 16\o"CurrentDocument"十二、生物安全防護(hù)制度 16十三、職業(yè)暴露的防護(hù)及處理措施 17\o"CurrentDocument"十四、篩查檢驗(yàn)程序 18\o"CurrentDocument"十五、檢測(cè)結(jié)果的判定方法 25\o"CurrentDocument"十六、檢測(cè)結(jié)果報(bào)告規(guī)程 25\o"CurrentDocument"十七、檢測(cè)結(jié)果的判定方法 26\o"CurrentDocument"十八、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋 27\o"CurrentDocument"十九、檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄與保存 28\o"CurrentDocument"二十、呈陽(yáng)性反應(yīng)標(biāo)本的處理程序 28\o"CurrentDocument"二十一、檢測(cè)數(shù)據(jù)季報(bào)方案和程序 29\o"CurrentDocument"二十二、感染追蹤處理方案 30\o"CurrentDocument"二十三、保密程序制度 31\o"CurrentDocument"二十四、質(zhì)量管理制度 323河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第1頁(yè)共70頁(yè)TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"二十五、室內(nèi)質(zhì)控分析管理制 33\o"CurrentDocument"二十六、外部質(zhì)控血清的制備和保存 34\o"CurrentDocument"二十七、儀器的使用維護(hù) 35\o"CurrentDocument"人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 36\o"CurrentDocument"程序HIV-抗體初篩試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作（酶聯(lián)免疫法） 37\o"CurrentDocument"人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 38\o"CurrentDocument"人類免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)（膠體金法） 39科華酶標(biāo)儀的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP） 40科華全自動(dòng)洗板機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 40加樣器的維護(hù)保養(yǎng)程序 41\o"CurrentDocument"加樣槍校準(zhǔn)記錄 41\o"CurrentDocument"生物安全柜的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP） 42\o"CurrentDocument"離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程 47\o"CurrentDocument"室內(nèi)質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)操作程序 48室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（EQA） 55實(shí)驗(yàn)室意外和事故處理 58艾滋病的職業(yè)暴露后預(yù)防 60附表1HIV抗體篩查報(bào)告 61附表2HIV抗體復(fù)檢檢測(cè)單 62附表3HIV抗體檢測(cè)數(shù)季報(bào)表 65附表4艾滋病職業(yè)暴露個(gè)案登記表 66附表5艾滋病防治工作人員職業(yè)暴露事故匯總表 703河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第2頁(yè)共70頁(yè)HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況為了更好發(fā)揮艾滋病檢測(cè)在艾滋病防治工作中的作用，根據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》對(duì)于艾滋病的檢測(cè)要求，我院檢驗(yàn)科設(shè)置了獨(dú)立的HIV篩查實(shí)驗(yàn)室。為了使檢測(cè)工作能夠正常進(jìn)行，保證 HIV檢測(cè)結(jié)果的正確性和準(zhǔn)確性，我們不僅對(duì)工作環(huán)境條件和檢測(cè)設(shè)施加以整改，而且建立了完整的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，以確保 HIV檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確有效。HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和操作區(qū)，配備了專用的的生物安全柜、電腦、冰箱、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、離心機(jī)、高壓消毒鍋等設(shè)備和安全防護(hù)用品等。根據(jù)HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室工作的需要，我科配備從事HIV檢測(cè)工作人員4名，其中專職工作管理人員3名，副高級(jí)技術(shù)人員1名，中級(jí)衛(wèi)生技術(shù)職稱人員3名，所有人員從業(yè)年限均在7年以上。并積極參加省級(jí)、市級(jí)舉辦的HIV檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)，不斷提高質(zhì)量意識(shí)、技術(shù)水平和業(yè)務(wù)能力，保證HIV檢測(cè)工作的質(zhì)量。HIV篩查實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人： 賈向東人員：孟曉虹呂華

郭長(zhǎng)城3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第3頁(yè)共70頁(yè)HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作管理程序一、 目的對(duì)HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作全過(guò)程進(jìn)行控制，保證檢驗(yàn)工作符合規(guī)定要求，提供可靠的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)和有效的檢驗(yàn)報(bào)告。二、 范圍適用于本實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展的各類醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作的各個(gè)環(huán)節(jié)。三、 職責(zé)1、 工作人員負(fù)責(zé)門診檢驗(yàn)樣品的米集。2、 工作人員負(fù)責(zé)住院檢驗(yàn)樣品的接收。3、 負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織協(xié)調(diào)完成檢驗(yàn)任務(wù)，并負(fù)責(zé)對(duì)檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督。4、 工作人員負(fù)責(zé)執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。5、 報(bào)告授權(quán)審核人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)報(bào)告的簽發(fā)、發(fā)放。6實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管（計(jì)算機(jī)）工作。四、 工作程序（一）、檢驗(yàn)工作分類本實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)工作，根據(jù)標(biāo)本的來(lái)源不同分為采樣檢驗(yàn)和送樣檢驗(yàn)，根據(jù)工作性質(zhì)分為常規(guī)標(biāo)本檢驗(yàn)和檢驗(yàn)質(zhì)量抽檢委托復(fù)檢。（二八委托復(fù)檢工作需按下列程序執(zhí)行：1、 當(dāng)面核對(duì)標(biāo)本姓名、性別、年齡及標(biāo)本質(zhì)量等資料；2、 按要求進(jìn)行檢驗(yàn)；3、 必要時(shí)委托方可全程參與檢驗(yàn)過(guò)程；4、 其余程序與常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本相同。（三）、采樣及樣品管理3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第4頁(yè)共70頁(yè)采樣執(zhí)行本科程序文件《標(biāo)本采樣管理程序》。樣品接收、分發(fā)和保管處理，執(zhí)行本科程序文件《標(biāo)本管理程序》和《標(biāo)本采樣管理程序》。樣品一旦受理即給予受理編號(hào)。（四）、標(biāo)本檢驗(yàn)檢驗(yàn)執(zhí)行本科程序文件《標(biāo)本檢驗(yàn)管理程序》和《檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》（五） 檢驗(yàn)依據(jù)1國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法；2、 部頒標(biāo)準(zhǔn)方法和檢驗(yàn)規(guī)范；3、 衛(wèi)生技術(shù)部門推薦使用方法；4、 有關(guān)科技文獻(xiàn)或雜志上發(fā)表的方法；5、 自編規(guī)程的使用執(zhí)行《檢驗(yàn)方法確認(rèn)程序》。（六） 、檢驗(yàn)實(shí)施檢驗(yàn)人員按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)或作業(yè)指導(dǎo)書的要求按時(shí)完成檢驗(yàn)任務(wù)， 并按程序文件《記錄檔案管理程序》做好原始記錄。（七八檢驗(yàn)報(bào)告的編制、復(fù)核和簽發(fā)按本科程序文件《檢驗(yàn)報(bào)告管理程序》執(zhí)行。（八）、檢驗(yàn)方法控制檢驗(yàn)必須按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》規(guī)定的方法或標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行，也可用經(jīng)本科技術(shù)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)的非標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行。其他檢驗(yàn)方法不得采用3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第5頁(yè)共70頁(yè)HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作流程圖3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第6頁(yè)共70頁(yè)HIV篩查實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度一、 實(shí)驗(yàn)室工作制度i?實(shí)驗(yàn)室保持清潔整齊，儀器設(shè)備要擺放整齊，說(shuō)明書手冊(cè)要妥善保管，原始記錄不得擅自修改和銷毀。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前要摘除首飾修剪指甲，以免揕手套。嚴(yán)禁在艾滋病實(shí)驗(yàn)室進(jìn)食，飲水，吸煙和化妝。不要將與工作無(wú)關(guān)的物品帶入實(shí)驗(yàn)室。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要穿隔離衣，戴手套必要時(shí)戴雙層手套和防護(hù)眼鏡。認(rèn)真對(duì)待樣品，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。采血時(shí)一定要注意安全，使用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作防止刺傷皮膚以免造成污染。8?嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室工作人員年度采血和備案年度，工作人員從事工作必須進(jìn)行HIV抗體和乙肝，丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測(cè)，注射乙肝疫苗，每半年至一年進(jìn)行一次抗體檢測(cè)，并保留笑血清樣品。二、 崗位責(zé)任制崗位責(zé)任制是保證工作質(zhì)量和醫(yī)療安全，提高工作效率的重要環(huán)節(jié)。建立崗位責(zé)任制，做到人人分工職責(zé)明確，事事有人負(fù)責(zé)，立足本職，團(tuán)結(jié)互助，相互協(xié)調(diào)，保證各項(xiàng)任務(wù)的勝利完成。HIV篩查實(shí)驗(yàn)室由有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員負(fù)責(zé)。牢固樹(shù)立把質(zhì)量放在第一位的思想，在工作中必須加強(qiáng)檢查和復(fù)查制度，以保證血液質(zhì)量及醫(yī)療安全。交接工作必須認(rèn)真負(fù)責(zé)，須核對(duì)實(shí)物和記錄，對(duì)工作一般情況、存在問(wèn)題和注意事項(xiàng)應(yīng)進(jìn)行具體交待，否則，發(fā)生問(wèn)題由交班人負(fù)責(zé)。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第7頁(yè)共70頁(yè)職工臨時(shí)因故離開(kāi)工作崗位，必須將工作委托給能勝任該項(xiàng)工作的人員，否則,發(fā)生問(wèn)題由原擔(dān)任該項(xiàng)工作者負(fù)責(zé)。6?新參加工作的職工，在未熟悉和掌握工作前不能獨(dú)立工作不能頂崗位，在確能掌握經(jīng)考核合格后方可。7.建立HIV篩查實(shí)驗(yàn)室專用的精密儀器和重要設(shè)備專責(zé)崗位制，其他人不得任意使用。嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程操作，不可擅自亂改設(shè)置。8?凡是一物多人使用的，除共同負(fù)責(zé)外，應(yīng)指定一人為該崗位責(zé)任制負(fù)責(zé)人，負(fù)責(zé)指導(dǎo)正確操縱，定期安全檢查，經(jīng)常維護(hù)保養(yǎng)，保持正常運(yùn)轉(zhuǎn)，該負(fù)責(zé)人有權(quán)制止任何違章操作和有害設(shè)備安全的行為。9.人員職責(zé)分工：每日值班人員負(fù)責(zé)樣品的采集，接收，執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，簽發(fā)報(bào)告及實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的日常維護(hù)和保養(yǎng)。行政班人員負(fù)責(zé)協(xié)助值班人員做好實(shí)驗(yàn)室的所有日常工作， 并負(fù)責(zé)對(duì)檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督，檢驗(yàn)報(bào)告的復(fù)核、發(fā)放，結(jié)果的解釋，實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)消毒以及每日醫(yī)療廢棄物的消毒處理。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管（計(jì)算機(jī)）工作。三、標(biāo)本管理制度（一）、樣品的采集和處理艾滋病檢測(cè)最常用的樣品是血液，包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時(shí)也可作為測(cè)試樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下：1、血清樣品采集和處理（1） 、用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量靜脈血，室溫下自然放置12h,待血液凝固、血塊收縮后再用3000r/min離心15min，吸出血清備用（2） 、如用濾紙片采樣，則手指或耳垂局部嚴(yán)格按常規(guī)進(jìn)行消毒，在刺破皮膚后，迅速把濾紙片沾上，切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。2、抗凝血樣品采集和處理3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第8頁(yè)共70頁(yè)、用加有抗凝劑的真空采血管(或一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管)，反復(fù)輕搖，分離血漿和血細(xì)胞備用。、應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽鏑D4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定可選用K3EDTA或肝素或枸櫞酸鈉，HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測(cè)可選用K3EDTA或枸櫞酸鈉。、用于核酸定性檢測(cè)時(shí)，采集的抗凝全血應(yīng)在 4?8h內(nèi)分離PBMC和血漿，否則應(yīng)在24?48h內(nèi)分離血漿和血細(xì)胞。3、采集樣品注意事項(xiàng)、采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。、采集樣品時(shí)應(yīng)注意安全，建議采用真空采血管及蝶形針具，以避免直接接觸血液；直接接觸HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/體液的操作，應(yīng)戴雙層手套。、所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。、采血時(shí)一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠。樣品的保存1、 用于抗體檢測(cè)的血清或血漿樣品，應(yīng)存放于-20C以下，短期(1周)內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的樣品可存放于2-8°C。2、 用于抗原和核酸檢測(cè)的血漿和血細(xì)胞樣品應(yīng)凍存于-20C以下，進(jìn)行病毒RNA檢測(cè)的樣品如需保存3個(gè)月以上應(yīng)置于-80Co3、 用于CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品不能長(zhǎng)期保存，樣品采集時(shí)間超過(guò)48h則不可檢測(cè)。樣品的運(yùn)送3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第9頁(yè)共70頁(yè)1、 實(shí)驗(yàn)室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿，除特殊情況外一般不運(yùn)送全血。2、 應(yīng)采用WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)：第一層容器：裝樣品，要求防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品的編號(hào)或受檢者姓名、種類和采集時(shí)間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。隨樣品應(yīng)附有送檢單，送檢單應(yīng)與樣品分開(kāi)放置。第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個(gè)第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。第三層容器：放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi)，應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面要貼標(biāo)簽（數(shù)量，收、發(fā)件人）。3、 血清和血漿樣品應(yīng)在2?8C條件下由專人運(yùn)送。用于CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品應(yīng)在室溫下18?23C運(yùn)送。每一包裝的體積以不超過(guò)50ml為宜。4、 運(yùn)送感染性材料必須有記錄。5、 如分離血漿仍有困難，可直接將抗凝血-20E以下凍存，采用冰壺冷藏運(yùn)輸，避免凍融。6特殊情況下如需對(duì)個(gè)別樣品進(jìn)行復(fù)測(cè)，可以用特快專遞形式投寄，但必須按三級(jí)包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好，避免使用玻璃容器，以保證不會(huì)破碎和溢漏。（四）。樣本接收和拒收標(biāo)準(zhǔn)1、簽收：實(shí)行雙簽制度，送檢者及實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收人員均需簽名。2、 認(rèn)真查對(duì)姓名，性別，年齡，住院號(hào)，病區(qū)/床號(hào)，檢測(cè)目的及項(xiàng)目等。對(duì)不符合要求者記入拒收標(biāo)本記錄表中，并及時(shí)通知采樣單位，正確及時(shí)地補(bǔ)米樣本，以免延誤病人的檢測(cè)報(bào)告。3、 對(duì)符合檢測(cè)要求的標(biāo)本及時(shí)進(jìn)行唯一性編號(hào)（詳見(jiàn)標(biāo)本唯一性編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)操作程序）并記入可接收標(biāo)本記錄表中。4、 含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)、穿戴防護(hù)衣的工作人員打開(kāi)，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。4.1、核對(duì)樣品與送檢單，檢查樣品管有無(wú)破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對(duì)樣品管和盛器進(jìn)行消毒，同時(shí)報(bào)告科主任等3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第10頁(yè)共70頁(yè)有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。4.2、檢查樣品的狀況，記錄有無(wú)溶血、污染、血脂高及黃疸等情況。如果污染過(guò)重認(rèn)為樣品不能接受，則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。4.3、 打開(kāi)標(biāo)本容器時(shí)要小心，以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時(shí)若內(nèi)容物有可能濺出，則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進(jìn)行。同時(shí)應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼睛，以防皮膚或粘膜污染。4.4、 接收樣品時(shí)應(yīng)填寫樣品接收單。（五）標(biāo)本檢測(cè)1、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超 /高速離心時(shí)形成氣溶膠。復(fù)核標(biāo)本接收過(guò)程中的每一步驟，在檢測(cè)過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程。2、 在標(biāo)本足夠的情況下，不能浪費(fèi)、隨意丟棄或損壞標(biāo)本。應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒（六）、標(biāo)本處理檢驗(yàn)標(biāo)本先用含2-3g/L有效氯消毒劑浸泡半小時(shí)，再用高壓鍋高壓消毒。然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一焚化處理。四、試劑管理制度（一）、采購(gòu)與審批科主任根據(jù)需要定期擬定采購(gòu)計(jì)劃，交由院領(lǐng)導(dǎo)審批，批核后由科主任交與器械科，有器械科與經(jīng)銷聯(lián)系（二八驗(yàn)收與登記倉(cāng)管負(fù)責(zé)人根據(jù)供應(yīng)商提供的試劑及清單對(duì)數(shù)量、品種、品牌、包裝等進(jìn)行驗(yàn)收，并將入庫(kù)數(shù)據(jù)登記。（三八貯存3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第11頁(yè)共70頁(yè)冷臧試劑統(tǒng)一存放在HIV實(shí)驗(yàn)室專用的冰箱內(nèi)，冷箱保管及溫度控制由倉(cāng)管負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)。HIV試劑一般應(yīng)2?8C避光保存，在有效期內(nèi)使用。（四八出庫(kù)管理各室提出試劑申領(lǐng)，倉(cāng)管人填寫出庫(kù)單據(jù)，認(rèn)領(lǐng)人簽名后出庫(kù)。（五八其它1、 試劑的保存應(yīng)嚴(yán)格按照要求存放，以保證有效期內(nèi)能有效地使用，杜絕浪費(fèi)現(xiàn)象。2、 倉(cāng)管人應(yīng)對(duì)試劑庫(kù)存定期檢查，不使用過(guò)期變質(zhì)的試劑。3、 易燃，易爆試劑應(yīng)分開(kāi)存放遠(yuǎn)離火源和電源。4、 劇毒試劑必須由科主任和負(fù)責(zé)科室保衛(wèi)的同志負(fù)責(zé)保存，放保險(xiǎn)箱內(nèi)，使用時(shí)應(yīng)有兩人在場(chǎng)，并做好登記。五：污染區(qū)工作守則做好污染區(qū)實(shí)驗(yàn)室廢棄物的消毒處理，未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室管理人員許可不得進(jìn)入污染區(qū)。1、 凡是被血液、體液污染的物品要先消毒滅菌后清洗。2、嚴(yán)格操作程序，做好各種實(shí)驗(yàn)記錄，實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性標(biāo)本保存至 5年，（經(jīng)過(guò)免疫印記確診的陰性標(biāo)本也要保存），不得擅自處理。3、 禁止用口吸液體，必須使用移液器操作。4、 操作中有標(biāo)本等外濺時(shí)，應(yīng)及時(shí)消毒，對(duì)大量濺出的高濃度污染物在清潔前先用1%次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦洗。5、每次實(shí)驗(yàn)后，要對(duì)工作臺(tái)面消毒，用 0.2%-1%次氯酸鈉溶液噴灑和浸泡。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第12頁(yè)共70頁(yè)6、離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前要脫去手套，隔離衣等防護(hù)物品，放入指定污桶，用肥皂和流水洗手。六：清潔區(qū)工作守則1、 實(shí)驗(yàn)室是檢驗(yàn)工作的場(chǎng)所，要保持清潔、安靜、物品擺放要整齊。2、 清潔的防護(hù)服置于實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)內(nèi)存放處。檢驗(yàn)人員工作時(shí)應(yīng)按要求穿工作服、工作衣、帽、專用鞋等。3、 禁止將與檢驗(yàn)工作無(wú)關(guān)的物品帶入檢驗(yàn)室，禁止在檢驗(yàn)室內(nèi)會(huì)客、抽煙、吃東西。4、 注意安全，下班后、節(jié)假日必須切斷水源、氣源、電源，關(guān)好門窗。5、嚴(yán)禁將污染區(qū)的物品帶入清潔區(qū)。6、 妥善保管儀器、設(shè)備的說(shuō)明書、操作規(guī)程、原始記錄表、零（部）件、常用工具、電源線、連接線要排列整齊。7、 檢驗(yàn)室須配置消防設(shè)備，并經(jīng)常檢查待用狀態(tài)，任何人不得擅自挪用或挪動(dòng)。七、環(huán)境消毒隔離制度1、 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū)，清潔區(qū)要注意保護(hù)不受污染。操作有氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置，如紫外線燈，排氣扇等操作區(qū)的工作臺(tái)及地面每日用消毒液擦拭一次，有污染時(shí)隨時(shí)消毒，每周大掃除一次。2、 采血室每日操作前用清水擦拭操作臺(tái)一次，采血結(jié)束用消毒液擦拭操作臺(tái)、桌子和地面一次，紫外線每日照射消毒二次，每月空氣細(xì)菌培養(yǎng)一次，紫外線強(qiáng)度定期測(cè)定。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第13頁(yè)共70頁(yè)3、 各種檢驗(yàn)標(biāo)本的收集，送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取，不得外溢污染。4、 靜脈及末稍采血，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離措施，靜脈抽血做到一人一針一筒一巾一帶一消毒，所用止血帶及紙墊每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜絕交叉污染。5、 一次性醫(yī)用器具包括采血針，注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管，應(yīng)嚴(yán)格做好領(lǐng)發(fā)登記，注射器先浸泡消毒后由供應(yīng)室一對(duì)一調(diào)換，統(tǒng)一處理，其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。6檢驗(yàn)人員在進(jìn)行靜脈抽血時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù)，操作前必須洗手必須戴好帽子與口罩，操作臺(tái)和手被污染時(shí)應(yīng)用肥皂和流水認(rèn)真洗手，必要時(shí)用消毒液浸泡雙手，酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。7、 溢出試管外的血液，應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈，注意防止玻璃碎片刺傷手，并注意試管有無(wú)破裂。8、 當(dāng)針頭和碎玻璃刺傷手時(shí)，用流水沖洗，擠出血水，應(yīng)立即用碘酒消毒局部。9、 實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)應(yīng)戴上手套。吸取標(biāo)本，離心振蕩等應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程，防止自身和實(shí)驗(yàn)室受污染。10、已檢查標(biāo)本與容器分別浸泡于次氯酸鈉（2000mg/L）中兩小時(shí)后，標(biāo)本傾棄，一次性容器送焚燒，重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用，均要有記錄。有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無(wú)害化處理，防止污染環(huán)境。11、非科室工作人員不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，外來(lái)人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進(jìn)入。八、實(shí)驗(yàn)臺(tái)消毒措施1、 實(shí)驗(yàn)臺(tái)消毒措施必須符合艾滋病實(shí)驗(yàn)室的通用生物安全要求。由專人按特定程序和方法進(jìn)行清潔和消毒。2、臺(tái)面的清潔消毒，保持清潔、濕式打掃。每天開(kāi)始工作前用濕布抹擦 1次，地面用濕拖把擦1次，禁用干抹干掃。抹布和拖把等清潔用具實(shí)驗(yàn)室專用，不得混用，用后洗凈晾干，下班前用含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000mg/L）、0.2?0.5%過(guò)氧乙酸或75%乙醇抹擦1次。也可用便捷式高強(qiáng)度紫外線消毒器近距離照射消毒。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第14頁(yè)共70頁(yè)3、 應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣進(jìn)行消毒與滅菌，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的血液、質(zhì)量控制和參考物質(zhì)，若被上述物品明顯污染，如具傳染性的標(biāo)本或培養(yǎng)物外溢，濺潑或器皿打破，灑落于臺(tái)面，應(yīng)立即用消毒液消毒，用5000mg/L有效氯消毒劑、過(guò)氧乙酸或乙醇灑于污染的臺(tái)面，并使消毒液浸過(guò)污染表面，保持30?60min后再擦，拖把用后浸于上述消毒液內(nèi)1h以上。4、 各類在實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)臺(tái)上操作后的廢棄物品均應(yīng)視作物染物分類處理，所有廢棄物應(yīng)視為HIV污染物品，按照《傳染病防治法》處理。九、廢棄物處置和實(shí)驗(yàn)室消毒1、 廢棄物處置廢棄物處置應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》 （GB19489-2004）和《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》。從艾滋病實(shí)驗(yàn)室出來(lái)的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。2、 HIV常用的物理消毒方法壓力蒸汽消毒，121T，保持15?20min;干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒），140C，保持2?3h。3、 HIV常用的化學(xué)消毒方法HIV最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯 2000?5000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持10?30min。4、 廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉。5、生物安全柜工作臺(tái)面和儀器表面：75%乙醇。6、 溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。7、污染的臺(tái)面和器具：2000mg/L次氯酸鈉，也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸。器械可用2%戊二醛浸泡消毒。十、消毒液的配制及使用措施1、HIV實(shí)驗(yàn)室最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000-5000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持10?30min。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第15頁(yè)共70頁(yè)2、含氯消毒劑的配制：次氯酸鈉原液使用前進(jìn)行 1:20?1:50稀釋(2000-5000mg/L)或聯(lián)昌84使用前進(jìn)行1：10?1：25(2000-5000mg/L)稀釋后，用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的消毒。3、 乙醇，俗稱酒精”能夠殺滅多種細(xì)菌，對(duì)HIV病毒有一定的殺滅作用，70?75%的效果最好。因此，使用前新鮮配置足量70?75%的乙醇，用于生物安全柜、工作臺(tái)面和儀器表面的消毒，可以達(dá)到最佳的消毒效果。4、過(guò)氧乙酸也是目前使用比較廣泛的一種高效消毒劑，新鮮配置 1?3%的過(guò)氧乙酸熏蒸，用于地面、墻壁、實(shí)驗(yàn)器材及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)資料、文件、書本等物品的消毒。0.04%的過(guò)氧乙酸用于實(shí)驗(yàn)室工作人員手浸泡 1?20分鐘，再用肥皂洗手。5、 2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒，醫(yī)療器械等。6HIV實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)消毒劑的配置，本著多用多配，少用少配，現(xiàn)用現(xiàn)配的原則，保證消毒劑使用時(shí)的濃度，保證消毒效果。十^一、消防安全制度1、 根據(jù)誰(shuí)主管、誰(shuí)負(fù)責(zé)”的原則，實(shí)行科室負(fù)責(zé)制。2、 主管領(lǐng)導(dǎo)和保衛(wèi)科對(duì)全體職工經(jīng)常進(jìn)行消防安全教育，提高思想認(rèn)識(shí)，掌握消防知識(shí)和消防器材的使用。3、 嚴(yán)格執(zhí)行《安全防火管理制度》各種火種與易燃易爆物品，必須嚴(yán)格分區(qū)，保持一定的安全距離。實(shí)驗(yàn)室實(shí)施單向流向制度，通道不得亂堆放易燃爆物品和雜物。4、 嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙。5、 電器的安裝與拆除，必須由電工進(jìn)行，嚴(yán)禁亂接電源，亂后電線。6各種機(jī)電設(shè)備、高溫電器設(shè)備、耐高壓容器和設(shè)施，使用時(shí)必須有專人負(fù)責(zé)，隨時(shí)檢查，消除隱患，嚴(yán)防事故發(fā)生。7、 各防火區(qū)域設(shè)置的消防器材和設(shè)備，應(yīng)定期進(jìn)行檢查，維修和更換，隨時(shí)處于完好狀態(tài)，并不得隨便挪動(dòng)。8、 任何人發(fā)現(xiàn)火、水災(zāi)等隱患者，必須及時(shí)向科領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告?？浦魅渭皶r(shí)向院領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告，及時(shí)做好善事處理工作。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第16頁(yè)共70頁(yè)十二、生物安全防護(hù)制度1、 上崗工作人員應(yīng)是經(jīng)過(guò)崗前安全與技術(shù)培訓(xùn)，取得合格證，具有獨(dú)立工作能力的人員。2、 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣、戴手套，必要時(shí)（如對(duì)篩查陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)測(cè)或檢測(cè)高危標(biāo)本）要戴防護(hù)眼鏡，防止污染暴露的皮膚和衣物。3、 嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。操作過(guò)程中，不得用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。4、 操作時(shí)可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中毒、傳染性標(biāo)本的污染，有應(yīng)急處理的方法，有關(guān)工作人員均應(yīng)熟悉。5、 操作中手套破損，應(yīng)立即丟棄，洗手后戴上新手套繼續(xù)操作，不慎發(fā)生瀉漏，應(yīng)立即按照《發(fā)生職業(yè)暴露后的處理措施》，進(jìn)行處理。6防止腐蝕、灼傷、中毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生。7、 實(shí)驗(yàn)操作完畢后，應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室清理與消毒程序，進(jìn)行善后處理。同時(shí)記錄相關(guān)資料與數(shù)據(jù)并存檔。8、 工作結(jié)束后，應(yīng)先洗戴手套的手，然后脫去手套丟棄，再脫去工作衣，用肥皂和流動(dòng)水洗手后離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。9、 注意安全，隨手關(guān)門，做好水，電，門的安全保衛(wèi)工作，防火防盜防水。十三、職業(yè)暴露的防護(hù)及處理措施HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室職業(yè)暴露是指檢驗(yàn)工作人員在從事檢測(cè)工作過(guò)程中意外被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液、體液污染了皮膚或者粘膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其他利器刺破皮膚，有可能被艾滋病病毒感染的情況。（一）、防護(hù)措施：1?醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴手套，操作完畢，脫去手套后立即洗手，必要時(shí)進(jìn)行手消毒。在診療、護(hù)理操作過(guò)程中，有可能發(fā)生血液、體液飛濺到醫(yī)務(wù)人員的面部時(shí)，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)戴手套、具有防滲透性能的口罩、防護(hù)眼鏡；有可能發(fā)生血液、體3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第17頁(yè)共70頁(yè)液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務(wù)人員的身體時(shí)， 還應(yīng)當(dāng)穿戴具有防滲透性能的隔離衣或者圍裙。3?醫(yī)務(wù)人員手部皮膚發(fā)生破損，在進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴雙層手套。4?醫(yī)務(wù)人員在進(jìn)行侵襲性診療，護(hù)理操作過(guò)程中，要保證充足的光線，并特別注意防止被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或者劃傷。5?使用后的銳器應(yīng)當(dāng)直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，也可使用具有安全性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器，以防刺傷。禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器。（二）、處理措施：用肥皂液和流動(dòng)水清洗污染的皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。如有傷口，應(yīng)當(dāng)在傷口旁端輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液，再用肥皂液和流動(dòng)水進(jìn)行沖洗，禁止進(jìn)行傷口的局部擠壓。受傷部位的傷口沖洗后，應(yīng)當(dāng)用消毒液，如75%的酒精或者0.5%的碘伏等進(jìn)行消毒，并包扎傷口；被暴露的粘膜，應(yīng)當(dāng)反復(fù)用生理鹽水沖洗干凈。在暴露后的0周、第四周、第八周、第十二周及六個(gè)月時(shí)抽血進(jìn)行檢測(cè)艾滋病病毒抗體。預(yù)防性用藥應(yīng)當(dāng)在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開(kāi)始，最好在四小時(shí)內(nèi)實(shí)施，最遲不得超過(guò)二十四小時(shí)；即使超過(guò) 24小時(shí)，也應(yīng)當(dāng)實(shí)施預(yù)防性用藥，連續(xù)使用28天。發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后立即通知院感科備案、評(píng)估。十四、篩查檢驗(yàn)程序1、 篩查試劑必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、批批檢合格、在有效期內(nèi)的試劑。推薦使用經(jīng)臨床質(zhì)量評(píng)估敏感性和特異性高的試劑。2、 篩查方法一，膠體金法3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第18頁(yè)共70頁(yè)樣品的米集和保存采集靜脈的血清、血漿樣本必須在無(wú)菌條件下，并避免樣品溶血。如果血清和血漿樣品收集后7天內(nèi)檢測(cè)，樣品須放在2-8C保存，如果大于7天則須冷凍保存。操作步驟在使用此測(cè)試卡前必須仔細(xì)閱讀試劑的說(shuō)明書， 需嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書執(zhí)行有關(guān)操作，否則無(wú)法保證可靠的結(jié)果。將待測(cè)標(biāo)本從儲(chǔ)存條件下取出，平衡至室溫并編號(hào)。將所需數(shù)量的測(cè)試卡從包裝盒中取出平衡至室溫，打開(kāi)鋁箔包裝袋，平置于臺(tái)面上。用微量加樣器取50卩1羊本血清，加到測(cè)試卡的加樣處。加樣后，陽(yáng)性標(biāo)本可在1?30分鐘內(nèi)檢出。經(jīng)過(guò)試驗(yàn)確證，反應(yīng)時(shí)間（從加樣后計(jì)算起）超過(guò)30分鐘將對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察造成影響，因此，建議 30分鐘再最終觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果判斷陽(yáng)性:測(cè)試卡在檢測(cè)區(qū)和對(duì)照區(qū)位置出現(xiàn)兩條紫紅色條帶。如果檢測(cè)區(qū)的紫紅色條帶隱約可見(jiàn)，建議對(duì)該樣本重復(fù)試驗(yàn)，并使用其他方法確認(rèn)。陰性:測(cè)試卡只在對(duì)照區(qū)位置出現(xiàn)一條紫紅色條帶。失效:對(duì)照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色條帶，表明不正確的操作過(guò)程或試劑盒已變質(zhì)損壞或者是樣本中抗體的含量過(guò)高。在此情況下，應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說(shuō)明書，并將待測(cè)樣本稀釋后用新的測(cè)試卡重新測(cè)試。 注意:測(cè)試區(qū)（T）內(nèi)的紫紅色條帶可呈現(xiàn)顏色深淺的現(xiàn)象。但是，在規(guī)定的觀察時(shí)間內(nèi)，不論該色帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應(yīng)判定為陽(yáng)性結(jié)果。二，酶聯(lián)免疫法1珠海麗珠原理及用途：本品系用純化基因工程人類免疫缺陷病毒I型和U型HIV-1/HIV-2琢抗原合成肽或基因重組蛋白，包被的微孔板和酶標(biāo)記的HIV-1/HIV-2抗原及其他試劑組成。應(yīng)用雙抗原夾心法原理檢測(cè)人血清或血漿中3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第19頁(yè)共70頁(yè)的HIV-1/HIV-2抗體。試劑盒成分HIV抗原包被板12孔X8,HIV酶標(biāo)記物7mlX1瓶，陰性對(duì)照1mlX1瓶，陽(yáng)性對(duì)照1mlX1瓶，20倍濃縮洗液50mlX1瓶，底物緩沖液7mlX1瓶，底物液7mlX1瓶，終止液7mlX1瓶，封口袋1個(gè)，說(shuō)明書1份操作方法①將試劑盒平衡至室溫，取出所需的條板，剩余的即時(shí)封存。 ②用去離子水和蒸餾水20倍稀釋濃縮洗滌液。③將所需數(shù)量的條板固定于支架按順序編號(hào)設(shè)置樣品孔、外部對(duì)照孔、陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔 .|每次實(shí)驗(yàn)需設(shè)外部對(duì)照1孔陽(yáng)性對(duì)照2孔陰性對(duì)照3孔。④在樣品孔中加入50ul待測(cè)樣品，陰性、陽(yáng)性對(duì)照及外部對(duì)照每孔加入50ul，輕拍混勻。⑤置37C溫育60分鐘。⑥將孔內(nèi)液體甩干，置洗板機(jī)用洗滌液充分洗滌 5遍，扣干。⑦每孔加入50ul酶標(biāo)記物，輕拍混勻，置37E溫育30分鐘。⑧重復(fù)步驟⑥。⑨每孔加入 50ul底物緩沖液和50ul底物液，輕拍混勻，置37E避光溫育30分鐘。⑩每孔加入50ul終止液終止顯色反應(yīng)，用酶標(biāo)儀（雙波長(zhǎng) 450nm/630nm測(cè)定各孔A值。結(jié)果判定臨界值|Cutoff=0.15+陰性對(duì)照的平均A值（陰性對(duì)照的平均A值小于0.08按0.08計(jì)算，大于0.08按實(shí)際值計(jì)算），樣品的A值》Cutoff值為HIV抗體陽(yáng)性；樣品的A值＜Cutoff值為HIV抗體陰性。2北京萬(wàn)泰試劑廠家：北京萬(wàn)泰生物工程公司試劑類型：雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法儀器：a.洗板機(jī)b.酶標(biāo)儀c.恒溫箱標(biāo)本的采集與要求1病人的準(zhǔn)備：無(wú)特殊要求。2標(biāo)本的類型：無(wú)溶血的血清或血漿。3標(biāo)本準(zhǔn)備： 取無(wú)菌試管采集全血2ml，待血液凝固后離心分離血清，標(biāo)本應(yīng)無(wú)溶血現(xiàn)象。標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)測(cè)定，如不能及時(shí)測(cè)定，將分離后的血清樣本放置于4?6C冰箱保存不超過(guò)4天，-20C以下保存可延長(zhǎng)一個(gè)月，-80C一下可長(zhǎng)期保存。不合要求的樣本按樣本拒收制度執(zhí)行。操作步驟1、配液：將50ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋至1000ml備用。2、編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板設(shè)陰性對(duì)照 3孑L、陽(yáng)性對(duì)照I型2孔，外部對(duì)照1孑L。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第20頁(yè)共70頁(yè)3、加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待檢樣品、陰陽(yáng)對(duì)照、外部對(duì)照各 100J。4、 溫育：封板后37+1T60min5、 洗滌：洗板機(jī)洗5遍。6、 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100d。7、 溫育：37+1T30min8洗滌：洗板機(jī)洗5遍9、 顯色：各孔加入AB顯色液50d，混勻，37+1T30min。10、 測(cè)定：加入終止液50d,450nm/620nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔OD值。結(jié)果判斷：陰性對(duì)照孔ODfiw0.10，陽(yáng)性對(duì)照孔OD值》0.80，試驗(yàn)有效。臨界值(CUTOFF的計(jì)算臨界值二陰性對(duì)照孔OD均值Nc+0.12.陽(yáng)性判定：樣品OD值大于等于臨界值(CUTOFF為HIV抗體陽(yáng)性，樣品小于臨界值為陰性。(注意：初試陽(yáng)性標(biāo)本應(yīng)重新取樣進(jìn)行雙孔復(fù)試，復(fù)試陽(yáng)性者應(yīng)按《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)。廈門英科新創(chuàng)【試劑名稱】人類免疫缺陷病毒HIV(1+2型)抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)【漢語(yǔ)拼音】RENLEIMIANYIQUEXIANBINGDU(HIV1+2XING)KANGTIZHENDUANSHIJIHE(MEILIANMIANYIFA)【英文名】HIV(1+2)AntibodiesELISAKit【檢測(cè)原理】本試劑盒采用雙抗原夾心兩步法檢測(cè)人血清或血漿樣本中的(HIV1/2)型抗體。采用多種HIV-1和HIV-2的特異性抗原制作預(yù)包被板及酶結(jié)合物。當(dāng)待檢樣本中存在HIV抗體時(shí)，在反應(yīng)過(guò)程中形成“固相HIV抗原-HIV抗體-酶標(biāo)記HIV抗原”的免疫復(fù)合物，加入底物后形成顯色反應(yīng)?！具m用范圍】人類免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗體輔助診斷及獻(xiàn)血員篩查。【試劑組成】序號(hào)組分名稱數(shù)量包裝規(guī)格序號(hào)組分名稱數(shù)量包裝規(guī)格1微孔板1包8X12T6顯色劑A1瓶7ml

3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第21頁(yè)共70頁(yè)2酶標(biāo)抗原1瓶14ml7顯色劑B1瓶7ml3陽(yáng)性對(duì)照1瓶1ml8終止液1瓶7ml4陰性對(duì)照1瓶1ml9說(shuō)明書1份5洗滌液2瓶25ml10自封袋1個(gè)11封板膜3張【樣品的采集和保存】1?采集靜脈的血清、血漿樣本應(yīng)在無(wú)菌條件下保存，并避免樣品溶血及反復(fù)凍溶。血清和血漿樣品收集后如果無(wú)法在當(dāng)天檢測(cè)，樣品須在 2-8°C保存；如果大于7天則須冷凍保存?！静僮鞑襟E】:在使用本檢測(cè)試劑前必須仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書。1?平衡:將試劑盒各組分從盒中取出，平衡至室溫（18C-25C），微孔板開(kāi)封后按需要取用，余者及時(shí)以自封袋封存。配液:濃縮洗滌液配置前充分搖勻（如有晶體應(yīng)充分溶解），濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1:19稀釋后使用。編號(hào):取所需數(shù)量微孔條固定于支架，按序編號(hào)。加樣:按順序分別在相應(yīng)孔加入50卩l(xiāng)待測(cè)樣品及陰、陽(yáng)性對(duì)照血清。溫育:覆上封板膜，置37C溫育30分鐘。洗滌:用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干（每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間）。加酶:分別在每孔中加入酶標(biāo)抗原100卩l(xiāng)。溫育:覆上封板膜，置37C溫育30分鐘。洗滌:用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干（每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間）。10顯色:每孔加底物A、B各50卩l(xiāng)，輕拍混勻，覆上封板膜，37C暗置20分鐘。11終止:每孔加入終止液50卩l(xiāng)，混勻。12測(cè)定:用酶標(biāo)儀單波長(zhǎng)450nm或雙波長(zhǎng)450/630nm測(cè)定各孔OD值（用單波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)，需設(shè)空白對(duì)照一孔，30分鐘內(nèi)完成測(cè)定，并記錄結(jié)果）?！窘Y(jié)果判定】1、陽(yáng)性對(duì)照均值應(yīng)大于陰性對(duì)照均值0.60以上且陰性對(duì)照均值小于0.10方可認(rèn)

3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第22頁(yè)共70頁(yè)為本次實(shí)驗(yàn)有效。2、臨界值計(jì)算：CutoffValue=0.10+陰性對(duì)照均值（若陰性對(duì)照均值小于0.05,以0.05計(jì)）。3、 樣本0D值大于或等于臨界值為初篩陽(yáng)性，小于臨界值為陰性。初篩陽(yáng)性者重新取樣雙孔復(fù)試，復(fù)試陽(yáng)性者應(yīng)按照“全國(guó)HIV檢測(cè)管理規(guī)范”送HIV確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)?！咀⒁馐马?xiàng)】1、 本檢測(cè)試劑僅用于體外診斷試驗(yàn)。僅用于人血清或血漿樣本，其它體液和樣品可能得不到準(zhǔn)確的結(jié)果。2、本試劑的使用單位必須是經(jīng)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門批準(zhǔn)的 HIV初篩實(shí)驗(yàn)室。3、 樣本的加樣建議使用微量加樣器準(zhǔn)確加入。酶標(biāo)抗原需用微量加液器加液，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。加酶標(biāo)記抗原時(shí)，注意勿使微量加液器的加樣頭接觸樣本以避免樣本間相互污染。加試劑前，應(yīng)先將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體混勻。4、 封板膜為一次性使用，每次使用后請(qǐng)丟棄，重復(fù)使用將導(dǎo)致嚴(yán)重污染。5、 HIV檢測(cè)必須符合HIV實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范和生物安全守則的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉感染，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。所有樣品、洗滌液和各種廢棄物應(yīng)按傳染物處理。對(duì)于那些含有感染源和懷疑含有感染源的物質(zhì)應(yīng)有合適的生物安全保證程序， 下列為有關(guān)注意事項(xiàng)但不僅限于此：*帶手套處理樣本和試劑*不要用嘴吸樣*不可在處理這些物品時(shí)吸煙、進(jìn)食、喝飲料、美容和處理隱形眼鏡*用消毒劑對(duì)濺出的樣本或試劑進(jìn)行消毒*按當(dāng)?shù)氐挠嘘P(guān)條例來(lái)消毒和處理所有樣本、試劑和潛在的污染物*試劑各組份在正當(dāng)處理和保存的情況下直至效期都保持穩(wěn)定，不能使用過(guò)效期的試劑盒6、 HIV抗體檢定結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。樣本的酶標(biāo)儀讀值與樣本中抗體的滴度沒(méi)有一定的必然聯(lián)系。

3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第23頁(yè)共70頁(yè)7、任何一種測(cè)試都不能絕對(duì)保證樣本中沒(méi)有低濃度的抗體存在，所以陰性結(jié)果任何時(shí)候不能排除含有HIV暴露和感染的可能。8每板建議設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照血清各兩孔，設(shè)空白對(duì)照時(shí)，不加樣本及酶標(biāo)抗原，其余各步相同。9、 洗滌液應(yīng)先取出預(yù)先稀釋，洗滌時(shí)各孔均須加滿但應(yīng)防止溢流，防止孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈。10、 不同品名、不同批號(hào)的試劑不可混用，以免產(chǎn)生錯(cuò)誤結(jié)果?！举A藏】?jī)?chǔ)存:2-8C避光保存【有效期】十二個(gè)月【批準(zhǔn)文號(hào)】3、復(fù)檢試驗(yàn)：對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告 HIV抗體陰性；如均呈陽(yáng)性反應(yīng)，或一陰一陽(yáng)，需送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)（見(jiàn)圖 1）。

3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第24頁(yè)共70頁(yè) 送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn) ^告圖1HIV抗體篩查檢測(cè)流程4、初篩試驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告對(duì)HIV抗體篩查試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)者可出具“HIV抗體陰性”報(bào)告（可用附表1）；對(duì)初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)者不能出陽(yáng)性報(bào)告，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報(bào)告（附表1）。8、 初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品的轉(zhuǎn)送如需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)測(cè)或確認(rèn)， 需要填寫“HIV抗體復(fù)測(cè)送檢單”（附表2）,經(jīng)1名檢驗(yàn)人員和1名具有中級(jí)以上技術(shù)職稱的人員審核簽字。送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實(shí)驗(yàn)室，再轉(zhuǎn)送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室，或在本實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢后直接送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。9、 對(duì)篩查陰性和陽(yáng)性者，均需做好檢測(cè)后咨詢。十五、檢測(cè)結(jié)果的判定方法1、 HIV測(cè)定（膠體金法）結(jié)果的判定方法（1） 、陽(yáng)性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽(yáng)性反應(yīng)。（2） 、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線，則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。（3） 、無(wú)效：如無(wú)紅線（或只有反應(yīng)線）出現(xiàn)，表明實(shí)驗(yàn)無(wú)效，須重新檢測(cè)。2、 HIV測(cè)定（ELISA法）結(jié)果的判定方法（1） 、計(jì)算臨界值CO（cut-off）值。（2） 、臨界值二陰性對(duì)照A均值+0.12（3）、正常情況下，陰性對(duì)照孔的0D值w0.1（若1孔陰性對(duì)照的0D值〉0.1應(yīng)舍棄，若有2孔或2孔以上陰性對(duì)照的OD值〉0.1，應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。）。樣品OD值V臨界值者為HIV抗體陰性。（4）、正常情況下，陽(yáng)性對(duì)照孔的OD值》0.8（若1孔陽(yáng)性對(duì)照的OD值V3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第25頁(yè)共70頁(yè)0.8應(yīng)舍棄，若有2孔或2孔以上陽(yáng)性對(duì)照的OD值V0.8,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。樣品OD值目臨界值者為HIV抗體陽(yáng)性。十六、檢測(cè)結(jié)果報(bào)告規(guī)程1、 從事HIV檢測(cè)工作的技術(shù)人員必須接受過(guò)上崗前的培訓(xùn)和定期復(fù)訓(xùn)。2、 HIV檢測(cè)工作必須在獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。3、 初篩檢測(cè)試劑必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、中國(guó)藥品生物制品檢定所批批檢合格且在有效期內(nèi)的試劑。4、 按照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》的要求建立健全質(zhì)量管理制度、實(shí)驗(yàn)室安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、安全防護(hù)工作等。5、 檢測(cè)結(jié)果報(bào)告前應(yīng)填寫好原始實(shí)驗(yàn)記錄資料，包括試驗(yàn)日期，試驗(yàn)操作記錄，檢測(cè)樣品及空白、陰、陽(yáng)對(duì)照結(jié)果， S/CO值、臨界值、試劑廠家、批號(hào)、效期，檢測(cè)人、復(fù)核人簽名等。6將試驗(yàn)結(jié)果存檔保存，處理試驗(yàn)廢物，擦凈實(shí)驗(yàn)臺(tái)，做好實(shí)驗(yàn)室消毒衛(wèi)生。7、結(jié)果報(bào)告：對(duì)呈陰性反應(yīng)的樣品，可出具 “HIV抗體篩查報(bào)告”(見(jiàn)附表1)陰性報(bào)告；對(duì)呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，須進(jìn)行復(fù)檢，不能出陽(yáng)性報(bào)告。8、 復(fù)檢試驗(yàn)：對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告 “HIV抗體篩查報(bào)告”(見(jiàn)附表1)陰性；如均呈陽(yáng)性反應(yīng)，或一陰一陽(yáng)，貝U應(yīng)按照《全國(guó)HIV檢測(cè)管理規(guī)范》的要求送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn) 。十七、檢測(cè)結(jié)果的判定方法1、 HIV測(cè)定(膠體金法)結(jié)果的判定方法、陽(yáng)性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽(yáng)性反應(yīng)。、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線，則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。、無(wú)效：如無(wú)紅線(或只有反應(yīng)線)出現(xiàn)，表明實(shí)驗(yàn)無(wú)效，須重新檢測(cè)。2、 HIV測(cè)定(ELISA法)結(jié)果的判定方法、計(jì)算臨界值CO(cut-off)值。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第26頁(yè)共70頁(yè)（2） 、臨界值二陰性對(duì)照A均值+0.12（3）、正常情況下，陰性對(duì)照孔的0D值W0.1（若1孔陰性對(duì)照的OD值〉0.1應(yīng)舍棄，若有2孔或2孔以上陰性對(duì)照的OD值〉0.1，應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。）。樣品OD值V臨界值者為HIV抗體陰性。（4）、正常情況下，陽(yáng)性對(duì)照孔的OD值》0.8（若1孔陽(yáng)性對(duì)照的OD值V0.8應(yīng)舍棄，若有2孔或2孔以上陽(yáng)性對(duì)照的OD值V0.8,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。樣品OD值目臨界值者為HIV抗體陽(yáng)性。十八、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋HIV抗體檢測(cè)的結(jié)果有三種，分別是陽(yáng)性、陰性和不確定，絕大多數(shù)情況下都是陽(yáng)性或陰性，出現(xiàn)不確定結(jié)果的情況很少。（一）、陽(yáng)性結(jié)果的解釋1、表明一個(gè)人感染了HIV，具有傳播性當(dāng)一個(gè)人HIV抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，表明這個(gè)人已經(jīng)感染了HIV，具有把HIV傳播給別人的可能。2、不能判斷發(fā)病與否，不能判斷疾病的進(jìn)展。 HIV抗體檢測(cè)結(jié)果只能說(shuō)明一個(gè)人是否感染了HIV，陽(yáng)性結(jié)果并非就意味著一個(gè)人已經(jīng)得了艾滋病，也不能說(shuō)明患者處于疾病發(fā)展的哪個(gè)階段。若要判斷疾病的進(jìn)展，則要做另外的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CD4細(xì)胞記數(shù)和HIV病毒載量檢查。3、對(duì)于剛出生的嬰兒，情況則不一樣剛出生的嬰兒，不能根據(jù)其 HIV抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)而判斷該嬰兒感染了 HIV。因?yàn)槌錾肽暌詢?nèi)的嬰兒，其抗體主要是由該嬰兒從其母體獲得，不管他（她）感染HIV與否，只要其母親感染了HIV,母體內(nèi)存在HIV抗體，嬰兒出生后HIV抗體檢測(cè)-般都是陽(yáng)性。如果要判斷一個(gè)嬰兒是否感染HIV,則應(yīng)該等到一歲半（18個(gè)月）以后再做檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性時(shí)才能說(shuō)明該嬰兒感染了 HIV。（二八陰性結(jié)果的解釋1、檢測(cè)者處于窗口期HIV從感染到能夠檢測(cè)出來(lái)有一段時(shí)期，這段時(shí)期稱為窗口期，窗口期一般是2周到2個(gè)月。拿到一個(gè)陰性結(jié)果，首先要確定窗口期是否已過(guò)，如果確定最后-次危險(xiǎn)行為距抽血作檢測(cè)時(shí)已過(guò)窗口期，這時(shí)基本可以確定檢3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第27頁(yè)共70頁(yè)測(cè)者未感染HIV。如果窗口期末過(guò)或者抽血化驗(yàn)之后又發(fā)生了危險(xiǎn)行為（如又共用針具或未采取保護(hù)措施的性行為），同樣也不能確定抽血者沒(méi)有感染HIV。2、檢測(cè)者未感染HIV如果檢測(cè)結(jié)果陰性，最后-次危險(xiǎn)行為又過(guò)了窗口期，那可以判定檢測(cè)未感染HIV。（三）、不確定結(jié)果結(jié)果不能確定是指住進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)的確認(rèn)試驗(yàn)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果不是陰性，又夠陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，界乎于陽(yáng)性與陰性之間的一種結(jié)果。出現(xiàn)不確定結(jié)果一般建議過(guò)三個(gè)月后再?gòu)?fù)查，出現(xiàn)不確定結(jié)果一般有以下幾種原因：1感染處于窗口期，從HIV進(jìn)人體內(nèi)到檢測(cè)這段時(shí)間還不夠長(zhǎng)，因此血清還沒(méi)有形成典型的抗體反應(yīng)。2、 艾滋病進(jìn)展到終末期，抗體水平下降。3、 有其它原因：如某些惡性疾病，懷孕，輸血或器官移植等情況，身體會(huì)產(chǎn)生一些抗體，其反應(yīng)與HIV的某些蛋白抗體所引起的反應(yīng)相似。十九、檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄與保存1、實(shí)驗(yàn)原始記錄表應(yīng)按實(shí)驗(yàn)要求，設(shè)計(jì)操作的原始記錄表，標(biāo)明空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、外部對(duì)照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員加樣。要注明試劑盒廠家、測(cè)定方法、批號(hào)、效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測(cè)日期。2、 標(biāo)本的登記收到標(biāo)本后，及時(shí)登記有關(guān)參數(shù)，包括受檢者姓名或代號(hào)、試管編號(hào)、性別、年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢驗(yàn)結(jié)果、送檢日期、報(bào)告日期、備注（必要時(shí)記錄通信地址）等。3、 HIV陽(yáng)性標(biāo)本的保存記錄包括HIV陽(yáng)性標(biāo)本的類型、貯存量、貯存溫度、貯存起始時(shí)間以及標(biāo)本保管人姓名。4、文件存檔

3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第28頁(yè)共70頁(yè)實(shí)驗(yàn)原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、檢測(cè)記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及

儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存 15年以上。并同時(shí)使用計(jì)算機(jī)保存各種文件和記錄。二十、呈陽(yáng)性反應(yīng)標(biāo)本的處理程序1、 對(duì)HIV抗體初篩試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)的樣品可出具 “HIV抗體陰性”報(bào)告（可用附表1）;對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告 “HIV抗體篩查報(bào)告”（見(jiàn)附表1）陰性；如均呈陽(yáng)性反應(yīng)，或一陰一陽(yáng)，貝U應(yīng)按照《全國(guó)HIV檢測(cè)管理規(guī)范》的要求送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn) 。對(duì)初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)者不能出陽(yáng)性報(bào)告，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報(bào)告（附表1）。2、 初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品，需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)測(cè)或確認(rèn)，需要填寫“HIV抗體復(fù)測(cè)送檢單”（附表2），經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和1名專業(yè)檢驗(yàn)人員審核簽字。送縣疾病控制中心艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室，或在本實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢后直接送安陽(yáng)市艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。3、 初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品，進(jìn)一步送檢、本室冰凍保存后不在需要的樣品的處置應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》 （GB19489-2004）和《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》。4、 從HIV實(shí)驗(yàn)室出來(lái)的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。5、 所有廢棄物應(yīng)按照HIV污染物品處理。由專人按本實(shí)驗(yàn)室制定的程序和方法進(jìn)行清潔和消毒。6嚴(yán)格HIV實(shí)驗(yàn)室的廢棄物的消毒處理制度，做好登記。7、檢驗(yàn)科主任定期負(fù)責(zé)檢查，操作處理不當(dāng)?shù)陌凑湛剖矣嘘P(guān)規(guī)定處罰。卜一、檢測(cè)數(shù)據(jù)季報(bào)方案和程序

卜一、檢測(cè)數(shù)據(jù)季報(bào)方案和程序3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第29頁(yè)共70頁(yè)1、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室和艾滋病檢測(cè)點(diǎn)應(yīng)于每季度首月 5日前填寫“HIV抗體檢測(cè)數(shù)季報(bào)表”（附表6）,向艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室報(bào)告上季度檢測(cè)情況。沒(méi)有艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室的地區(qū)可直接向艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室報(bào)告。艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室艾滋病每季首月5日前報(bào)季月J￡/J1級(jí)-衛(wèi)生」艾滋病確認(rèn)中心實(shí)牛

每季首月每季首季首［月首

省衛(wèi)生彳亍艾滋病中國(guó)CDC生圖2HIV抗體檢測(cè)情況季報(bào)流程3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第30頁(yè)共70頁(yè)2、 艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)于每季度首月10日前將本實(shí)驗(yàn)室和本轄區(qū)內(nèi)各篩查實(shí)驗(yàn)室上季度報(bào)告的檢測(cè)情況（附表6）匯總，報(bào)告艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室。3、 艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)于每季度首月10日前將上季度檢測(cè)情況匯總后（附表6），報(bào)告當(dāng)?shù)匕滩〈_認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室和同級(jí)衛(wèi)生行政部門。4、艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)及時(shí)收集、整理和分析轄區(qū)內(nèi) HIV抗體檢測(cè)情況，于每季首月15日前向省級(jí)衛(wèi)生行政部門和中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心（簡(jiǎn)稱中國(guó)疾控中心性艾中心）參比實(shí)驗(yàn)室報(bào)告。同時(shí)，按艾滋病疫情報(bào)告的有關(guān)規(guī)定上報(bào)疫情。5、 在非送檢樣品中（如專項(xiàng)調(diào)查與研究等）發(fā)現(xiàn)的艾滋病病毒抗體陽(yáng)性者，應(yīng)向所在地的省疾病預(yù)防控制中心報(bào)告，并填寫“HIV抗體確認(rèn)檢測(cè)報(bào)告單”（附表3），報(bào)中國(guó)疾控中心性艾中心參比實(shí)驗(yàn)室。&實(shí)驗(yàn)室上報(bào)檢測(cè)結(jié)果的同時(shí)，應(yīng)隨時(shí)報(bào)同級(jí)監(jiān)測(cè)人員，以便及時(shí)隨訪調(diào)查。二十二、感染追蹤處理方案（一）、追蹤人群1、 有明確受血或血液制品史，并排除性傳播、母嬰傳播、經(jīng)國(guó)家確證實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的艾滋病病毒抗體陽(yáng)性者；2、 無(wú)償獻(xiàn)血工作中發(fā)現(xiàn)的艾滋病病毒抗體陽(yáng)性獻(xiàn)血人員。（二八工作步驟1、 對(duì)供血或受血的追訪，須以健康跟蹤服務(wù)或科研的名義進(jìn)行，系統(tǒng)體檢并采血預(yù)備有關(guān)的檢驗(yàn)。2、 對(duì)發(fā)現(xiàn)的受血艾滋病病毒感染者制定詳細(xì)的個(gè)人追蹤方案，確定追蹤人員，應(yīng)有一名近期參與治療的醫(yī)生參加。3、 對(duì)供血者追蹤，由衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)會(huì)同采供血機(jī)構(gòu)的專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行。（三八善后處理：對(duì)受血的艾滋病病毒感染者由縣衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)制定專人建立健康檔案， 實(shí)施預(yù)防監(jiān)護(hù)、醫(yī)療照顧和管理。并定期進(jìn)行隨訪和醫(yī)療保健咨詢服務(wù)。特別必要時(shí)應(yīng)告知受血感染者有關(guān)真實(shí)情況。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第31頁(yè)共70頁(yè)（四）、對(duì)HIV抗體陰性者，如近期有高危行為如性亂史、吸毒史、受血史、獻(xiàn)血漿史，或有急性流感癥狀等情況，為排除窗口期的可能，建議每3個(gè)月復(fù)查一次，連續(xù)2次。二十三、保密程序制度1、 HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的所有工作人員要具有高度的保密意識(shí)。不得對(duì)無(wú)關(guān)人員透漏任何實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的信息。2、 HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要有專人負(fù)責(zé)妥善保存與HIV/AIDS相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的所有資料（包括送檢單、各種實(shí)驗(yàn)記錄、感染者檔案、報(bào)告單的發(fā)放） ，不得擅自修改和銷毀。未經(jīng)省級(jí)衛(wèi)生行政部門許可，不得向無(wú)關(guān)人員或單位提供任何情況。嚴(yán)格遵守保密制度，杜絕泄密事件的發(fā)生。2、 我院HIV實(shí)驗(yàn)室屬于篩查實(shí)驗(yàn)室，檢測(cè)的結(jié)果也不是最終結(jié)果，檢測(cè)到陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)及時(shí)啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案，根據(jù)WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)送到上級(jí)實(shí)驗(yàn)室作進(jìn)一步確認(rèn)。此時(shí)，不能出具HIV抗體陽(yáng)性的結(jié)果報(bào)告，更不能告知受檢者本人。3、 確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)陽(yáng)性結(jié)果，以機(jī)密級(jí)向送檢單位出具陽(yáng)性報(bào)告；送檢單位接到報(bào)告后，由專人負(fù)責(zé)接收，并應(yīng)及時(shí)會(huì)同醫(yī)院感染科上報(bào)縣衛(wèi)生防疫站和衛(wèi)生局。在對(duì)陽(yáng)性者告知檢測(cè)結(jié)果時(shí)要先做好法律、醫(yī)學(xué)、生活等方面的咨詢。4、經(jīng)確認(rèn)的陽(yáng)性標(biāo)本，包括在實(shí)驗(yàn)室留存的標(biāo)本，應(yīng)送省級(jí) HIV抗體確認(rèn)中心或省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定的單位保存，不得擅自處理。標(biāo)本保存時(shí)間至少5年。5、 當(dāng)發(fā)生職業(yè)暴露事故后，無(wú)論職業(yè)暴露事故級(jí)別的大小，對(duì)涉及的職業(yè)暴露者，均應(yīng)注意做好保密工作。任何一個(gè)得到信息的人都要做好保密工作。保密守則：1、不該說(shuō)的機(jī)密絕對(duì)不說(shuō)；2、 不該問(wèn)的機(jī)密絕對(duì)不問(wèn)；3、 不該看的機(jī)密絕對(duì)不看；4、 不該記錄的機(jī)密絕對(duì)不記錄；3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第32頁(yè)共70頁(yè)5、不在非保密本上記錄機(jī)密；6不在私人通信中涉及機(jī)密；7、 不在公共場(chǎng)所和家屬、子女、親友面前談?wù)摍C(jī)密；8、 不在不利于保密的地方存放機(jī)密文件資料；9、 不在普通電話、明碼電話、普通郵件傳達(dá)機(jī)密事項(xiàng)；10、不攜帶機(jī)密材料游覽、參觀、探親、訪友和出入公共場(chǎng)所。二十四、質(zhì)量管理制度1、根據(jù)省臨檢中心的有關(guān)規(guī)定，開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)的質(zhì)量控制，繪制 HIV實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制圖，包括20次OD值、S靶值、CV%值。對(duì)室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)每日有記錄，有每月的S、靶值、CV%值。對(duì)失控情況有糾正方法，有預(yù)防性措施。2、 積極參加省臨檢中心組織的室間質(zhì)控活動(dòng)，對(duì)每次質(zhì)控評(píng)價(jià)應(yīng)有記錄。3、 計(jì)量?jī)x器應(yīng)定期校正，每年一次。4、 精密分析儀器由專人負(fù)責(zé)，有使用記錄和維修記錄。5、 商品化的試劑盒的申購(gòu)由專業(yè)組長(zhǎng)負(fù)責(zé)申報(bào)，每月一次報(bào)科主任審批，不得使用過(guò)期，無(wú)批準(zhǔn)文號(hào)的劣質(zhì)試劑，進(jìn)貨統(tǒng)一由科室管理，自配試劑須嚴(yán)格校正后方可使用。6建立完整的HIV篩查實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序，并應(yīng)嚴(yán)格按程序執(zhí)行。7、 當(dāng)日發(fā)出的全部檢驗(yàn)報(bào)告單須經(jīng)當(dāng)日科室總值班人員嚴(yán)格審核后方可發(fā)出。8、 科室在完成嚴(yán)格的室內(nèi)、室間質(zhì)量控制體系的同時(shí)，應(yīng)逐步建立全面質(zhì)量控制體系，對(duì)標(biāo)本的采集，運(yùn)送，保存等納入嚴(yán)格的管理之中。二十五、室內(nèi)質(zhì)控失控分析管理制度室內(nèi)質(zhì)控出現(xiàn)失控時(shí)，應(yīng)填寫失控報(bào)告單，并上交專業(yè)主管，由專業(yè)主管做出是否發(fā)出與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批患者標(biāo)本檢驗(yàn)報(bào)告并分析及登記失控原因。失控信號(hào)的出現(xiàn)受多種因素的影響，這些因素包括操作上的失誤、試劑、校3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第33頁(yè)共70頁(yè)準(zhǔn)物、質(zhì)控品的失效，儀器維護(hù)不良以及采用的質(zhì)控規(guī)則、質(zhì)控限范圍、一次測(cè)定的質(zhì)控標(biāo)本數(shù)等等。失控信號(hào)一旦出現(xiàn)就意味著與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批患者標(biāo)本報(bào)告可能作廢。此時(shí)，首先要盡量查明導(dǎo)致的原因，然后再隨機(jī)挑選出一定比例（例如5-10%）的患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定，最后根據(jù)既定標(biāo)準(zhǔn)判斷先前測(cè)定結(jié)果是否可接受，對(duì)失控做出恰當(dāng)?shù)呐袛唷?duì)判斷為真失控的情況，應(yīng)該在重做質(zhì)控結(jié)果在控以后，對(duì)相應(yīng)的所有失控患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定。如失控信號(hào)被判斷為假失控時(shí)，常規(guī)測(cè)定報(bào)告可以按原先測(cè)定結(jié)果發(fā)出，不必重做。當(dāng)?shù)玫绞Э匦盘?hào)時(shí)，可以采用如下步驟去尋找原因：一、 立即重測(cè)定同一質(zhì)控品。此步是主要是用以查明人為誤差，每一步都認(rèn)真仔細(xì)操作，以查明質(zhì)控的原因；另外，這一步還可以查出偶然誤差，如是偶然誤差，則重測(cè)的結(jié)果應(yīng)控。如果重測(cè)結(jié)果仍不在允許范圍，則可以進(jìn)行下一步操作。二、 新開(kāi)一瓶質(zhì)控品，重測(cè)失控項(xiàng)目。如果質(zhì)控品結(jié)果正常，那么原來(lái)那瓶質(zhì)控血清可能過(guò)期或在室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而變質(zhì)或者被污染。 如果結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行下一步。三、 進(jìn)行儀器維護(hù)，重測(cè)失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否需要更換，比色杯是否需要清洗或更換，對(duì)儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可更換試劑以查明原因。如果結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行下一步。四、 重新校準(zhǔn)，重測(cè)失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。五、 請(qǐng)實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)豐富的工作人員或?qū)＜业膸椭?。如果前五步都未能得到在控結(jié)果，那可能是儀器或試劑的原因，只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請(qǐng)求技術(shù)支援。二十六、外部質(zhì)控血清的制備和保存1、質(zhì)控血清的制備和保存（以ELISA試驗(yàn)檢測(cè)HIV抗體為例）在每次實(shí)驗(yàn)中必須包含有內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清和外部對(duì)照質(zhì)控血清。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第34頁(yè)共70頁(yè)（1） 、內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清指試劑盒內(nèi)提供的陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清。內(nèi)部對(duì)照是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)。每一次檢測(cè)必須使用內(nèi)部對(duì)照，而且只能在同批號(hào)的試劑盒中使用。（2） 、外部對(duì)照質(zhì)控血清是為了監(jiān)控檢測(cè)的重復(fù)性和穩(wěn)定性以及試劑盒批間或孔間差異而由實(shí)驗(yàn)室設(shè)置的一套對(duì)照血清，包括強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清。也可以只設(shè)置一個(gè)弱陽(yáng)性對(duì)照，以該試劑盒臨界值（ Cut-off、的2?3倍為宜。2、 外部對(duì)照質(zhì)控血清的制備HIV抗體陽(yáng)性和陰性血清，56C30min滅活，3000r/min，離心15min。弱陽(yáng)性對(duì)照可以用HIV抗體陰性血清梯度稀釋HIV抗體強(qiáng)陽(yáng)性血清并標(biāo)定后得到。按一年使用量配制（可加入不影響檢測(cè)結(jié)果的防腐劑、用 0.2ym濾膜過(guò)濾除菌。3、 外部對(duì)照質(zhì)控血清的保存（1） 、按一周實(shí)驗(yàn)用量分裝、分類、標(biāo)記、封口、-20C凍存于非自動(dòng)除霜冰箱中。（2）、外部對(duì)照血清不可反復(fù)凍融，一旦融化后應(yīng)該存放 28°C，供一周內(nèi)使用。4、 外部對(duì)照質(zhì)控血清的使用每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部對(duì)照質(zhì)控血清，以便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性。同時(shí)可以了解各批試劑盒的批間或孔間差異，繪制質(zhì)量控制圖。5、 外部對(duì)照質(zhì)控物的質(zhì)量要求質(zhì)控物的管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測(cè)系統(tǒng)預(yù)期的變異（CVV20%二，并且質(zhì)控物的成分應(yīng)在穩(wěn)定狀態(tài)中。質(zhì)控物應(yīng)無(wú)菌，并不含有影響 ELISA反應(yīng)的防腐劑。二十七、儀器的使用維護(hù)（一）、設(shè)立常用儀器的維護(hù)及校準(zhǔn)制度，以保證正常運(yùn)轉(zhuǎn)。1、酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī)每天：核對(duì)濾光片波長(zhǎng)，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象。每周：清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第35頁(yè)共70頁(yè)每月：檢查洗滌時(shí)各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對(duì)位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要求。每年：檢查、清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點(diǎn)則要更換。根據(jù)儀器內(nèi)具有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對(duì)濾光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保留記錄。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行處理，可根據(jù)使用情況更換必要的部件。2、移液器1年至少應(yīng)該標(biāo)定1次，發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行校準(zhǔn)。標(biāo)定方法包括有色溶液光譜分析法、稱量校準(zhǔn)法、同位素計(jì)數(shù)法以及使用配套校準(zhǔn)盒等。校準(zhǔn)多道移液器時(shí)，必須保證每一個(gè)加樣頭都能夠連續(xù)、準(zhǔn)確地加樣。移液器的精密度應(yīng)在廠家說(shuō)明書規(guī)定的范圍內(nèi)。（二八儀器使用環(huán)境良好的工作環(huán)境不僅能確保HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性，還能夠延長(zhǎng)其使用壽命。1、 儀器應(yīng)放置在無(wú)強(qiáng)磁場(chǎng)和干擾電壓的位置。2、 儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。3、 為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽(yáng)光直射。4、 操作環(huán)境溫度應(yīng)在15°C-40°C之間，環(huán)境濕度在15%-85%之間。5、 操作時(shí)電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。6操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽、煙塵。7、保持干燥、干凈、水平的工作臺(tái)面，以及足夠的操作空間。（三）、儀器操作注意事項(xiàng)1、 使用移液器加液，移液槍頭不能混用2、 洗板要干凈，避免交叉污染。3、 嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明書操作，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。4、 請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成注意做好清潔工作。5、 不要在測(cè)量過(guò)程中關(guān)閉電源。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第36頁(yè)共70頁(yè)6對(duì)于因試劑盒問(wèn)題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù)，以達(dá)到最佳效果。7、使用后蓋好防塵罩。出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家聯(lián)系，切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等儀器。人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）試劑廠家：英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司本試劑盒采用抗原夾心兩步法檢測(cè)人血清或血漿中的 HIV1/HIV2型抗體。在微孔板預(yù)包被基因重組HIV（1+2）抗原，當(dāng)加入的待檢測(cè)樣本中存在HIV抗體時(shí)，將反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物，再與加入的酶標(biāo)記基因工程 HIV（1+2）抗原反應(yīng)，最后形成固相HIV抗原-HIV抗體-酶標(biāo)記HIV抗原”的免疫，復(fù)合物，加入底物后形成顯色反應(yīng)。標(biāo)本要求；1采用血清或血漿樣本，血漿樣本可以使用常規(guī)用量的肝素，枸櫞酸鈉或者EDTA抗凝。2樣本不能用疊氮鈉防腐，以免抑制酶的活性。3樣本保存在2-8C。如需長(zhǎng)期保存，需置-15-20C凍存，并避免樣本反復(fù)凍融。4高血脂，高膽紅素及溶血樣本可能會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，建議不使用。檢驗(yàn)方法：1.平衡：將試劑合各組分從盒中取出，平衡至室溫（ 18-25C）,微孔板開(kāi)圭寸后，余者即時(shí)以自圭寸袋圭寸存。2配液：濃縮洗滌液配前充分搖勻（如有晶體應(yīng)充分溶解），濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。編號(hào)：取所需數(shù)量微孔條固定于支架，按序編號(hào)。加樣：按順序分別在相應(yīng)孔中加入50ul待測(cè)樣本及陰.陽(yáng)性對(duì)照。溫育：覆上封板膜，置37T溫育60分鐘。洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌后扣干（每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間）。加酶：分別在每孔中加酶標(biāo)抗原30分鐘。溫育：覆上封板膜，置37T溫育30分鐘。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第37頁(yè)共70頁(yè)洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌后扣干（每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間）。顯色：每孔加底物A，B和50ul,輕拍混勻，37C暗置30分鐘。11終止：每孔加入終止液50ul,混勻。12測(cè)定：用酶標(biāo)儀單波長(zhǎng)450nm或雙波長(zhǎng)450/630nm測(cè)定各孔OD值（用單波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)，需用空白對(duì)照孔調(diào)零），并記錄結(jié)果。結(jié)果判定；1?樣本OD值S/CO三1者為HIV抗體反應(yīng)初篩陽(yáng)性樣本OD值＜1者，為HIV抗體反應(yīng)陰性。2.陰性對(duì)照OD均值＞0.1或陽(yáng)性對(duì)照OD均值w0.6寸，實(shí)驗(yàn)無(wú)效，應(yīng)重新試驗(yàn)。初篩陽(yáng)性者應(yīng)重新取樣進(jìn)行雙孔復(fù)試，復(fù)試陽(yáng)性者應(yīng)按照 全國(guó)HIV檢測(cè)管理規(guī)范”送HIV確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相關(guān)確認(rèn)試驗(yàn)。參考值：臨界值（C.O.）的計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照OD均值+0.10陰性對(duì)照OD均值小于0.05時(shí)以0.05計(jì)算程序HIV-抗體初篩試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作（酶聯(lián)免疫法）試劑廠家：北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司本試劑盒采用雙抗原夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理。在微孔條上預(yù)包被高純度重組HIV（1+2型）抗原，配以酶標(biāo)記抗原及TMB顯色劑等其它試劑，檢測(cè)人血清或血漿中的HIV-1（或）HIV-2型抗體。檢驗(yàn)方法：配液：將濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋。編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔板按序號(hào)編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照3孔，陽(yáng)性對(duì)照1型,2型各1孑L,空白對(duì)照1孔。（用雙波長(zhǎng)檢測(cè)，可不設(shè)空白對(duì)照孔）。加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測(cè)樣品或陰性，陽(yáng)性對(duì)照 100ul.溫育：用封板膜封板后，置37溫育60±分鐘。洗板：小心揭掉圭寸板膜，用洗板機(jī)洗滌5遍，最后一次盡量扣干。3河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV篩查實(shí)驗(yàn)室SOP文件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號(hào)201405版次/頁(yè)碼第1版第3次修改 第38頁(yè)共70頁(yè)加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100ul，空白孔除外。溫育：用封板膜封板后，置37溫育30±分鐘。8洗板：操作同步驟5.9.顯色：每孔加入顯色劑A,B液各50ul,輕輕振蕩混勻，37±C避光顯色30±1分鐘。10?測(cè)定：每孔加終止液50ul,輕輕振蕩混勻，10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。設(shè)定酶標(biāo)儀波長(zhǎng)于450nm處（建議用雙波長(zhǎng)450nm/600-650nm）,用空白孔調(diào)零后測(cè)定各孔A值。檢驗(yàn)結(jié)果的解釋：陰性對(duì)照孔A值w0.10陽(yáng)性對(duì)照孔A值》0.80否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效。若有1孔陰性對(duì)照A值大于0.1應(yīng)舍棄；若兩孔或兩孔以上陰性對(duì)照A值大于0.1，實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陰性判定：樣品A值V臨界值（CUTOFF）者為HIV抗體陰性。陽(yáng)性判定：樣品A值目臨界值（CUTFF）者為HIV抗體陽(yáng)性（注意：初試陽(yáng)性應(yīng)重新取樣雙孔復(fù)試。復(fù)試陽(yáng)性者按《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》送HIV確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行